2025年滬科版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年滬科版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、利用麥冬花藥進行離體培養(yǎng)可為后期基因改良及新品種選育提供材料；操作流程如下圖。下列敘述不正確的是（）

A.圖中X和Y分別表示愈傷組織和單倍體幼苗B.需要對麥冬花藥、培養(yǎng)基及操作工具進行滅菌處理C.圖中①和②過程所用培養(yǎng)基中激素用量的比例不同D.麥冬花藥離體培養(yǎng)的過程體現(xiàn)了生殖細胞具有全能性2、如圖表示培養(yǎng)和純化X細菌的部分操作步驟；下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.步驟①倒平板操作時，倒好后應(yīng)立即將其倒過來放置B.步驟②接種環(huán)在火焰上灼燒后迅速沾取菌液進行平板劃線，以免空氣中的雜菌污染C.步驟③多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋分散，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落D.利用步驟④所示方法培養(yǎng)和純化X細菌的同時可對其進行計數(shù)3、“篩選”是生物工程中常用的技術(shù)手段，下列關(guān)于篩選的敘述錯誤的是（）A.基因工程中利用標記基因篩選出的細胞不一定含重組質(zhì)粒B.在誘變育種中需通過篩選才能得到數(shù)量較少的有利變異C.植物體細胞雜交過程中，原生質(zhì)體融合后獲得的細胞需進行篩選D.單克隆抗體制備過程中，第一次篩選的目的是獲得足夠數(shù)量的能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞4、微生物發(fā)酵已經(jīng)廣泛應(yīng)用于人類生活的各個領(lǐng)域。下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的說法中，正確的是（）A.果酒發(fā)酵過程溫度控制在30℃，果醋發(fā)酵過程溫度控制在20℃B.制作果醋需要醋酸菌，它是一種嚴格厭氧的微生物，可將葡萄中的糖分解為醋酸C.多種微生物參與了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等D.制作泡菜利用的乳酸菌是一種厭氧微生物，可以通過無氧呼吸產(chǎn)生乳酸和二氧化碳5、硝化細菌廣泛存在于通氣性較好的土壤中，其部分代謝反應(yīng)如圖所示，下列關(guān)于硝化細菌的培養(yǎng)條件的描述不正確的是（）

A.碳源為葡萄糖B.培養(yǎng)時需要通入空氣C.氮源是氨氣D.培養(yǎng)時需要適宜的溫度6、下列關(guān)于植物細胞工程應(yīng)用的敘述，錯誤的是（）A.植物微型繁殖具有高效、快速的特點B.在紫草寧的工廠化生產(chǎn)的過程中使用的是固體培養(yǎng)基C.對愈傷組織進行誘變處理，從分化的植株中可篩選出新品種D.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育的脫毒苗具有不含或很少含病毒的特點7、胰島素可用于治療糖尿病；天然胰島素制劑容易形成二聚體或六聚體，皮下注射往往要經(jīng)歷一個逐漸解離為單體的過程，這在一定程度上延緩了療效。科學(xué)家希望對胰島素進行改造，下圖是新的速效胰島素的生產(chǎn)過程，有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.該過程屬于蛋白質(zhì)工程，最終還必須通過改造或合成基因來完成B.構(gòu)建新的胰島素首先要從預(yù)期新的胰島素基因功能開始C.新的胰島素生產(chǎn)過程依然遵循中心法則D.新的胰島素基因的脫氧核苷酸序列可能有多種評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)8、下列有關(guān)哺乳動物精子、卵子的發(fā)生及受精作用的敘述，正確的是（）A.卵細胞膜反應(yīng)是防止多精入卵的一道屏障B.卵子形成的過程需在卵巢和輸卵管內(nèi)完成C.卵子發(fā)生時，MⅠ和MⅡ過程是不連續(xù)的，但細胞質(zhì)均等分配D.精子和卵子結(jié)合的過程中，卵子完成減數(shù)第二次分裂9、有一個嬰兒在出生后保留了臍帶血，在以后他生長發(fā)育過程中如果出現(xiàn)了某種難治療的疾病，就可以通過血液中的干細胞來為其治病。關(guān)于這個實例說法不正確的是（）A.用干細胞培育出人體需要的器官用來移植治病，需要激發(fā)細胞的所有全能性B.用臍帶血中的干細胞能夠治療這個孩子所有的疾病C.如果要移植用他的干細胞培育出的器官，需要用到細胞培養(yǎng)技術(shù)D.如果要移植用他的干細胞培育出的器官，應(yīng)該長期給他使用免疫抑制藥物10、下圖是我國科學(xué)家制備小鼠孤雄單倍體胚胎干細胞的相關(guān)研究流程；其中Oct4基因在維持胚胎干細胞全能性和自我更新中發(fā)揮極其重要的作用。下列敘述正確的是（）

A.受精卵發(fā)育過程中桑椹胚前的細胞都是全能性細胞B.推測Oct4基因的表達有利于延緩衰老C.過程③胚胎干細胞細胞核大、核仁明顯D.從卵巢中獲取的卵母細胞可直接用于過程①11、下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同B.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C.動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株D.煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體，小鼠雜交瘤細胞培養(yǎng)能得到細胞代謝產(chǎn)物12、為保障公共健康；需要定期對公共飲用水進行衛(wèi)生檢測。飲用水的衛(wèi)生標準是100mL不得檢出大腸桿菌或者1000mL不超過3個大腸桿菌。若要確定飲用水是否合格，可采用膜過濾法檢測，過程如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.檢測前一般需要對水樣收集瓶、培養(yǎng)皿、鑷子等進行干熱滅菌B.完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上，在25℃下培養(yǎng)觀察C.為減少實驗誤差，應(yīng)按照上述實驗步驟多次取樣重復(fù)進行檢測D.可用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)法替代膜過濾法檢測飲用水中的大腸桿菌數(shù)量13、桑葚與草莓營養(yǎng)價值極高，口味調(diào)和。草莓中含量較高的維生素C有助于延緩桑葚天然色素的氧化；桑葚獨有的花青素、白藜蘆醇等物質(zhì)能顯著增強復(fù)合果酒的功效。下圖為桑葚草莓復(fù)合果酒的工廠化制備流程，下列說法正確的是（）

桑葚和草莓原料的挑選和清洗→混合攪拌→添加偏重亞硫酸鉀→榨汁→調(diào)糖和調(diào)酸→滅菌→接種發(fā)酵A.在生產(chǎn)復(fù)合果酒的過程中，要防止桑葚天然色素被氧化B.果酒發(fā)酵初期通入氧氣能促進酵母菌繁殖，有利于加快果酒發(fā)酵C.復(fù)合果酒的制備過程中對發(fā)酵設(shè)備要進行滅菌處理D.變酸的果酒表面會形成一層菌膜，這層菌膜是由乳酸菌形成的14、2020年7月20日，國際醫(yī)學(xué)權(quán)威期刊《柳葉刀》上發(fā)表了新冠病毒疫苗II期臨床試驗的成果。該試驗是由陳薇院士等人領(lǐng)銜的團隊開展的研究，試驗中使用的疫苗是一種腺病毒載體重組新冠病毒疫苗(基因重組疫苗)。試驗結(jié)果表明，單次接種疫苗28天后，99．5%的受試者產(chǎn)生了特異性抗體，95．3%受試者產(chǎn)生了中和抗體，89%的受試者產(chǎn)生了特異性T細胞免疫反應(yīng)。這表明，陳薇團隊研發(fā)的新冠疫苗可為健康人群提供“三重保護”，將新冠病毒“拒之門外”。下列敘述正確的是（）A.該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B.受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后，體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的效應(yīng)T細胞C.主要通過檢測受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來評價試驗的有效性D.新冠肺炎康復(fù)患者可以不注射該疫苗評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)15、人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）16、雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物質(zhì))、_________________(提供氮元素的物質(zhì))和__________________。17、統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目_____________。這是因為______________________。因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用而不是用活菌數(shù)來表示。除了上述的活菌計數(shù)法外，______________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。18、DNA連接酶與DNA聚合酶作用的異同:

DNA聚合酶只能將______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_____的末端，形成磷酸二酯鍵。19、______——“分子縫合針”20、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了______，方法是采用______。評卷人得分四、實驗題(共3題，共15分)21、鼠傷寒沙門氏菌的野生型菌株（his+）可在基本培養(yǎng)基（含微量組氨酸）上生長形成菌落，而突變型的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株（his-）不能合成組氨酸；無法在基本培養(yǎng)基上形成菌落。利用his菌株可檢測環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑（誘發(fā)his-菌株突變）?；卮鹣铝袉栴}：

(1).基本培養(yǎng)基的成分主要包括_____。制備基本固體培養(yǎng)基的操作：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。倒平板時應(yīng)注意：_____。

(2).檢測是否存在化學(xué)致癌劑時，用_____法將his-菌株接種于基本培養(yǎng)基上，使其密集均勻分布在平板上，將浸泡過待測化合物的濾紙片貼于平板中央。若培養(yǎng)基滅菌合格，則可能影響該檢測結(jié)果的兩個重要因素是_____。若圖A為對照組，B為實驗組，則A組濾紙片的處理方法是_____。經(jīng)正確檢驗后，結(jié)果如B所示，則實驗結(jié)果和結(jié)論為_____。

(3).使用過的培養(yǎng)基在丟棄之前應(yīng)做的處理及目的是_____。22、單克隆抗體在防治H7N9型禽流感上具有顯著療效。下圖是科研人員制備H7N9病毒的單克隆抗體X的過程。回答下列問題：

（1）上圖中B淋巴細胞是取自______________的動物或人。融合的M細胞先用選擇培養(yǎng)基進行篩選，再進行克隆化培養(yǎng)和_______________以得到符合要求的N細胞，N細胞的名稱是______________。

（2）為了進一步研究H7N9病毒的單克隆抗體X（以下簡稱抗體X）的效果及作用機制；科學(xué)家開展了如下實驗：

實驗一：在體外將抗體X與HA蛋白（H7N9病毒表面的一種蛋白）混合，檢測抗體X對HA蛋白的親和力。實驗結(jié)果如下表所示。（注：KD值越小，抗體和HA蛋白的親和力越高；機體Y為一種已知的H7N9病毒的抗體。）?？贵w種類KD抗體X5．32×10-9M抗體Y1．95×10-9M

實驗二：以一定濃度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分別注射一定劑量的抗體X；Y；14天后測定小鼠存活情況和體重變化。實驗結(jié)果表明：抗體X的體內(nèi)治療效果優(yōu)于抗體Y。

①實驗一結(jié)果表明：對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是__________。

②分析實驗一和實驗二的結(jié)果差異，研究人員提出假說：抗體除了中和病毒活性之外，還可以通過和巨噬細胞表面的受體相結(jié)合，從而增強巨噬細胞的吞噬作用，進而清除被病毒感染的靶細胞。請以巨噬細胞、感染了H7N9病毒的肺上皮細胞、細胞培養(yǎng)液、抗體X、抗體Y和無關(guān)抗體等為材料，設(shè)計實驗驗證上述假說。寫出實驗思路__________。23、隨著游泳運動的普及；游泳池水質(zhì)安全問題越來越受到人們的重視。在游泳池池水凈化中，常用的方法是用氯或含有效氯化合物進行氯化消毒。氯化消毒后池水中的游離性余氯可保證持續(xù)消毒效果，但游離性余氯含量過高會影響人體健康。國家標準規(guī)定的人工游泳池水質(zhì)指標衛(wèi)生標準包括游離性余氯0.3~1.0mg/L；菌落形成單位不得超過200個/mL等指標。研究人員對某地學(xué)校、酒店、健身會所、社區(qū)等場所游泳池水進行抽樣監(jiān)測，其中，對游泳池水活細菌總數(shù)進行檢測的實驗步驟如下：

①采樣瓶的預(yù)處理：在采樣瓶中加入適量的Na2S2O3溶液后對采樣瓶進行滅菌處理。

②采樣：在客流高峰時段進行采樣。采集位置在水下30cm左右；取水500mL。

③接種：用滅菌吸管吸取水樣1mL；注入滅菌培養(yǎng)皿中。將熔化并冷卻至45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿15mL。立即旋搖培養(yǎng)皿，使水樣和培養(yǎng)基充分混勻。平行重復(fù)若干實驗組。

④計數(shù)：待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿；置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌落數(shù)，并求平均值。

回答下列問題：

(1)檢測游泳池活細菌總數(shù)時，不宜用細菌計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)，原因是_____________

(2)Na2S2O3具有還原性，可消除水樣中的殘余氯。據(jù)此分析步驟①中在采樣瓶中添加Na2S2O3溶液，對檢測的意義是_____________。

(3)步驟③中，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿時，應(yīng)在____________附近進行。為使實驗數(shù)據(jù)更準確，應(yīng)至少設(shè)置____________個實驗組。步驟③中還應(yīng)增加對照組，下列不宜作為對照組的是______________。

a．15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

b．1m無菌水+15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

c．1mL蒸餾水+15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

(4)步驟④中，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，這是因為_____________。若觀察到培養(yǎng)后的培養(yǎng)皿中的菌落連成一片，則該培養(yǎng)皿不宜計數(shù)。出現(xiàn)成片的菌落的原因可能步驟③中_____________操作不妥當造成的。

(5)不同季度微生物檢測結(jié)果如下表所示，第三季度合格率下降的可能原因包括____________。

a．氣溫升高b．客流量增加。

c．檢測的場館數(shù)多d．泳池氯化時間過長。季度檢測場館數(shù)合格場館數(shù)合格率（%）一3434100.0二403895.0三39932982.5四3636100.0

根據(jù)檢測結(jié)果，要進一步加強第三季度的場館管理。下列屬于提升游泳池水質(zhì)安全性的合理建議有____________。

a．強制要求個人淋浴后入池b．增加游泳池水質(zhì)監(jiān)測的頻次。

c．游泳池裝設(shè)水循環(huán)過濾裝置d．每日在臨近開館前氯化消毒評卷人得分五、綜合題(共4題，共36分)24、微生物修復(fù)目前已成為去除農(nóng)藥殘留污染的一種重要方法；而篩選高效農(nóng)藥降解菌是開展農(nóng)藥污染生物修復(fù)工作的重要前提。回答篩選降解溴氰菊酯（一種具有高效殺蟲性的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥）的有關(guān)問題：

（1）分離純化溴氰菊酯降解菌株：培養(yǎng)基中加入溴氰菊酯作為唯一碳源，這樣的培養(yǎng)基從功能上看稱為__________培養(yǎng)基。

（2）對獲取的菌株進一步純化時；用稀釋涂布平板法接種后培養(yǎng)的兩個平板中菌落長出后分別如下平板甲和平板乙：

出現(xiàn)平板甲的原因是______，出現(xiàn)平板乙的原因是___________。

（3）菌株降解溴氰菊酯的能力可以用________________來表示。

（4）請補充完成“探究溴氰菊酯濃度對菌株降解溴氰菊酯能力的影響”的探究實驗思路：取相等且適量的菌懸液分別接種到__________液體培養(yǎng)基中；恒溫搖床振蕩培養(yǎng)一定時間，檢測各組菌株降解溴氰菊酯的能力。

（5）上述降解菌能否運用于生產(chǎn)實際，在外界環(huán)境中保持穩(wěn)定的數(shù)量和較高的降解活性是生物修復(fù)技術(shù)亟待解決的問題。除上述（4）提到的因素外，還應(yīng)該研究______（寫出1點，合理即可）等外環(huán)境因素對該菌株的影響。25、科技的進步催生了基因工程；細胞工程和胚胎工程等；為人類的生產(chǎn)生活帶來了便利。請回答下列問題：

（1）基因工程：①在水稻基因組中定位了一個目的基因a，其堿基序列未知，但已知臨近區(qū)域的一段DNA序列，若將含有目的基因的DNA片段克隆出來，可以利用_______________設(shè)計引物。

②將含有目的基因的表達載體導(dǎo)入到受體細胞，最好選擇水稻幼苗的分生區(qū)，原因是_____________________。

③目的基因能否在受體細胞（水稻）穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是要_________________________。

④獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因水稻自交系A(chǔ)的技術(shù)路線如下圖。

為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達載體需用2種限制酶，選擇的原則是____________。

A．G基因編碼蛋白質(zhì)的序列中；每種限制酶只有一個切割位點。

B．Ti質(zhì)粒內(nèi)；每種限制酶只有一個切割位點。

C．酶切后；Ti質(zhì)粒形成的兩個黏性末端序列相同。

D．酶切后；G基因形成的兩個黏性末端序列不相同。

（2）下列屬于植物克隆和動物克隆共有的培養(yǎng)方法是（_________）

A．原生質(zhì)體培養(yǎng)傳代培養(yǎng)B．器官培養(yǎng)愈傷組織培養(yǎng)。

C．貼壁培養(yǎng)傳代培養(yǎng)D．懸浮培養(yǎng)器官培養(yǎng)。

（3）滅活的疫苗安全性高、應(yīng)用廣泛。滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細菌失去感染能力，但不破壞病原體的_____________________________。

（4）胚胎工程大大提高了優(yōu)良母畜的繁殖潛力，促進了畜牧業(yè)的發(fā)展，增大了人類的收益。胚胎工程的理論基礎(chǔ)是哺乳動物在自然條件下，配子的發(fā)生、___________和____________的發(fā)育規(guī)律。26、胚胎工程技術(shù)包含的內(nèi)容很豐富；如圖是胚胎工程技術(shù)研究及應(yīng)用的相關(guān)情況，其中供體1是良種荷斯坦高產(chǎn)奶牛，供體2是黃牛，請據(jù)圖回答下列問題。

（1）應(yīng)用1中獲得的小牛，其遺傳物質(zhì)來源于______，細胞B的名稱是______，重組細胞的細胞核來自_____（）在“細胞A；細胞B、細胞C、細胞D”中選擇）。

（2）應(yīng)用2中，為了獲得較多的優(yōu)良早期胚胎，需要對供體1做_____處理，胚胎移植的受體在接受胚胎之前應(yīng)該做______處理。

（3）應(yīng)用4二分囊胚時應(yīng)將_____均等分割，此項技術(shù)可看做動物_____的方法之一。

（4）上圖中包含胚胎工程技術(shù)有______、______等。27、木質(zhì)部難養(yǎng)菌（X菌）可引起嚴重的植物疾病。噬菌體能抑制X菌；但在高溫環(huán)境中易失去侵染能力。擬利用X菌的弱毒株（投送菌）攜帶噬菌體DNA，在X菌密度較大的環(huán)境中釋放噬菌體，侵染并裂解附近的X菌。

(1)為實現(xiàn)投送菌對噬菌體DNA的自動釋放；設(shè)計了開關(guān)質(zhì)粒（圖1），用于在投送菌中抑制或激活噬菌體對細菌的裂解。

①在含有噬菌體DNA的投送菌中，Cas蛋白能與噬菌體早期基因啟動子PL結(jié)合，抑制該基因_______；從而抑制噬菌體增殖。

②X菌在種群密度較大時釋放DSF信號，所有X菌都能接受該信號。環(huán)境中存在DSF時，Acr開始表達，Acr蛋白與Cas蛋白結(jié)合，從而_______；噬菌體開始增殖。

(2)利用從質(zhì)粒庫獲取的質(zhì)粒和四種限制酶（圖2）構(gòu)建了上述開關(guān)質(zhì)粒（圖3）。

①構(gòu)建重組質(zhì)粒1時，“？”處的處理是_______。

②利用相似技術(shù)獲得重組質(zhì)粒2。研究者利用重組質(zhì)粒1、重組質(zhì)粒2和X菌專用質(zhì)粒，用一次連接構(gòu)建了開關(guān)質(zhì)粒。請補充完善構(gòu)建過程圖___。

(3)導(dǎo)入開關(guān)質(zhì)粒的投送菌未達到預(yù)期效果，為探究原因，利用藍色熒光蛋白基因（BFP）和紅色熒光蛋白基因（RFP）構(gòu)建了檢測質(zhì)粒（圖4）。

在理想條件下，環(huán)境中無DSF時，BFP和RFP都不表達，投送菌無色；環(huán)境中存在DSF時，BFP和RFP同時表達，投送菌呈紫色。若環(huán)境中存在DSF時投送菌呈藍色，則表明_______。若_______；則表明Cas蛋白無法抑制噬菌體增殖。

(4)研究者在投送菌中還加入了“自殺基因”，該基因?qū)е录毦谕端?天后死亡，這種操作的意義是_______。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

圖示表示麥冬花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的途徑；其原理是植物細胞具有全能性。其中①階段表示脫分化，該階段能形成X愈傷組織，其細胞分化程度低，全能性高；②階段表示再分化過程，該階段能形成胚狀體，進一步發(fā)育形成植株，Y是單倍體植株。

【詳解】

A；由分析可知：圖中X和Y分別表示愈傷組織和單倍體幼苗；A正確；

B；植物組織培養(yǎng)的過程要求無菌無毒的環(huán)境；其中麥冬花藥要進行消毒處理，而培養(yǎng)基及操作工具需滅菌處理，B錯誤；

C；在植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)過程中；使用不同的植物激素能夠人為地控制細胞的脫分化和再分化，故脫分化與再分化二者使用的培養(yǎng)基主要是生長素以及細胞分裂素兩種激素用量及比例的不同，C正確；

D；麥冬花藥離體培養(yǎng)的過程體現(xiàn)了生殖細胞具有全能性；D正確。

故選B。2、C【分析】【分析】

由圖可知；①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進行平板劃線，④是培養(yǎng)。

【詳解】

A；倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿；冷卻后將平板倒過來放置，A錯誤；

B；步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后；待冷卻后才可以沾取菌液后平板劃線，B錯誤；

C；步驟③多個方向劃線；使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落，C正確；

D；利用步驟④平板劃線法不能對X細菌進行計數(shù)；D錯誤。

故選C。3、D【分析】【分析】

1；標記基因的作用：鑒定受體細胞中是否含有目的基因；從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

2；基因突變的特點：基因突變具有普遍性、低頻性（個體的基因突變率低；但種群中個體數(shù)，其突變率較高）、隨機性、不定向性、多害少利性。

3；單克隆抗體制備的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。

【詳解】

A；標記基因位于質(zhì)粒上；基因工程中利用標記基因篩選出的細胞不一定都含有重組質(zhì)粒，也可能只含有普通質(zhì)粒，A正確；

B；誘變育種的原理是基因突變；而基因突變具有不定向性和多害少利性，因此在誘變育種中需要通過篩選才能得到數(shù)量較少的有利變異，B正確；

C；植物體細胞雜交過程中；誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合后，可獲得多種融合細胞，因此需要對獲得的細胞進行篩選，C正確；

D；單克隆抗體制備過程中；第一次篩選出的是雜交瘤細胞，第二次篩選出的是既能迅速大量增殖又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞，D錯誤。

故選D。4、C【分析】【分析】

參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多種；其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌，常見于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有發(fā)達的白色菌絲。毛酶等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；果酒發(fā)酵過程溫度控制在18-25℃；果醋發(fā)酵過程溫度控制在30℃，A錯誤；

B；制作果醋需要醋酸菌；它是一種好氧的微生物，可將葡萄中的糖（或乙醇）分解為醋酸，B錯誤；

C；多種微生物參與了腐乳的制作；如酵母菌、毛霉、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，C正確；

D；制作泡菜利用的乳酸菌是一種厭氧微生物；可以通過無氧呼吸產(chǎn)生乳酸，乳酸菌的無氧呼吸不會產(chǎn)生二氧化碳，D錯誤。

故選C。5、A【分析】【分析】

分析題圖：生活在土壤中的硝化細菌，能將土壤中的氨（NH3)氧化成亞硝酸(HNO2)，進而將亞硝酸氧化成硝酸（HNO3)。這兩個化學(xué)反應(yīng)中釋放出的化學(xué)能，就被硝化細菌用來將CO2和H2O合成糖類。這些糖類就可以供硝化細菌維持自身的生命活動。

【詳解】

A、土壤中的硝化細菌能將CO2和H2O合成糖類；為自養(yǎng)生物，培養(yǎng)基中的碳源為二氧化碳，A錯誤；

BC、硝化細菌能利用將NH3氧化釋放的能量把CO2和H2O合成糖類；所以培養(yǎng)時需要通入空氣，氮源是氨氣，BC正確；

D、硝化細菌在將NH3氧化并把CO2和H2O合成糖類的過程中；離不開酶的催化作用，而酶的活性受溫度影響，因此培養(yǎng)時需要適宜的溫度，D正確。

故選A。6、B【分析】【分析】

微型繁殖技術(shù)是指利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖優(yōu)良品種方法；也被稱為植物的快速繁殖技術(shù)。

細胞產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)使用的是液體培養(yǎng)基。

對植物的愈傷組織進行化學(xué)或物理的誘變處理；促使其發(fā)生突變，再通過誘導(dǎo)分化形成植株，從這些植株中篩選出高抗；高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的突變體，從而培育成新品種。

進行組織培養(yǎng)時；一般選取植物莖尖作材料，其依據(jù)是莖尖不含病毒（或含病毒極少）。

【詳解】

A；植物微型繁殖技術(shù)的優(yōu)點是可以高效、快速地實現(xiàn)種苗的大量繁殖；還可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性，A正確；

B；細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)是從人工培養(yǎng)的愈傷組織細胞中提取某種成分；如紫草素等，使用的液體培養(yǎng)基，B錯誤；

C；在育種中；可以對植物的愈傷組織進行化學(xué)或物理的誘變處理，促使其發(fā)生突變，再通過誘導(dǎo)分化形成植株，從這些植株中篩選出高抗、高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的突變體，從而培育成新品種，C正確；

D；利用組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒草莓幼苗的原理是細胞的全能性；培育時，一般選取植物莖尖作材料，其依據(jù)是莖尖分生區(qū)不含病毒（或含病毒極少），D正確。

故選B。7、B【分析】【分析】

題圖分析：圖示是利用蛋白質(zhì)工程設(shè)計速效胰島素的生產(chǎn)過程。蛋白質(zhì)工程的過程：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）。蛋白質(zhì)工程得到的蛋白質(zhì)一般不是天然存在的蛋白質(zhì)。

【詳解】

A；生產(chǎn)新的胰島素屬于蛋白質(zhì)過程；終還必須通過改造或合成基因來完成，因此蛋白質(zhì)工程被稱為第二代基因工程，A正確；

B；構(gòu)建新的胰島素首先要從預(yù)期新的胰島素功能開始；進而推測相應(yīng)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，分析所需的基因結(jié)構(gòu)，然后合成相應(yīng)的基因，B錯誤；

C；蛋白質(zhì)的合成受基因的調(diào)控；因此，新的胰島素生產(chǎn)過程中涉及中心法則，C正確；

D；由于密碼子的簡并性；據(jù)此推測出的新的胰島素基因的脫氧核苷酸序列可能有多種，D正確。

故選B。

【點睛】二、多選題(共7題，共14分)8、B:D【分析】【分析】

1；受精階段主要包括：精子穿越放射冠和透明帶；進入卵細胞膜，原核形成和配子結(jié)合。

2；阻止多精入卵的兩道屏障：透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)。

3；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的；場所在卵巢。MⅡ是在受精過程中完成的，場所在輸卵管中。

【詳解】

A；透明帶反應(yīng)是防止多精入卵的第一道屏障；A錯誤；

B；卵子形成時的減數(shù)第一次分裂過程在卵巢內(nèi)完成；減數(shù)第二次分裂過程在輸卵管完成，B正確；

C；卵子發(fā)生時；MⅠ和MⅡ過程是不連續(xù)的，初級卵母細胞和次級卵母細胞的細胞質(zhì)不均等分配，C錯誤；

D；精子和卵子結(jié)合的過程中；卵子完成減數(shù)第二次分裂，形成雌原核，并排出第二極體，D正確。

故選BD。9、A:B:D【分析】【分析】

臍帶血中的干細胞分化程度低；全能性較高，能分裂分化形成多種組織，因此可以用干細胞培育出人體需要的器官用來移植治病，如果是自體器官移植不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，所以自體移植后不需要用免疫抑制藥物，但用臍帶血中的干細胞不能治療所有疾病。

【詳解】

A；用干細胞培育出人體需要的器官用來移植治??；不需要激發(fā)細胞的所有全能性，因為培養(yǎng)的目標是特定的器官，A錯誤；

B；用臍帶血中的干細胞不能治療這個孩子所有的疾病；如傳染性疾病等，B錯誤；

C；如果要移植用他的干細胞培育出的器官；需要用細胞培養(yǎng)技術(shù)，然后發(fā)育成器官用于移植，C正確；

D；自體器官移植不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此，如果要移植用他的干細胞培育出的器官，不需要給他使用免疫抑制藥物，D錯誤。

故選ABD。

【點睛】10、A:B:C【分析】【分析】

分析圖示可知；將卵子去核，然后注入Oct4轉(zhuǎn)基因小鼠的精子，用氧化鍶激活，可使該換核的細胞形成雄原核，并分裂分化形成單倍體囊，最終形成孤雄單倍體胚胎干細胞。

【詳解】

A；由于桑椹胚期的細胞沒有出現(xiàn)分化；桑椹胚前的細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，是全能性細胞，A正確；

B；從題干可知；Oct4基因在維持胚胎干細胞全能性和自我更新中發(fā)揮極其重要的作用，可推測Oct4基因的表達有利于延緩衰老，B正確；

C；過程③胚胎干細胞具有胚胎細胞的特性；體積較小，細胞核大，核仁明顯，C正確；

D；卵巢中取出來的是未成熟的卵細胞；要進行培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂的中期才能受精，不能直接用于過程①，D錯誤。

故選ABC。

【點睛】11、A:C:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較。比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理細胞的全能性細胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分營養(yǎng)物質(zhì)（蔗糖）、植物激素等營養(yǎng)物質(zhì)（葡萄糖）、動物血清等培養(yǎng)結(jié)果植物體細胞株、細胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無毒苗等獲得細胞或細胞產(chǎn)物分散處理無有脫分化有無

【詳解】

A；動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同；如動物細胞培養(yǎng)需要加血清，植物細胞培養(yǎng)不需要添加血清，A正確；

B；植物組織培養(yǎng)不需要胰蛋白酶；B錯誤；

C；動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)；莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株，C正確；

D；煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體；小鼠雜交瘤細胞培養(yǎng)能得到細胞代謝產(chǎn)物，D正確。

故選ACD。12、B:D【分析】【分析】

細菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定。將已知體積的水過濾后；將濾膜放在伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈黑色，根據(jù)黑色菌落的數(shù)目，計算水樣中大腸桿菌的數(shù)量。微生物接種時，為了避免其它雜菌的污染，接種過程要進行無菌操作。灼燒滅菌常適用于接種環(huán)；接種針；干熱滅菌常適用于玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具；高壓蒸汽滅菌常適用于無菌水、培養(yǎng)基。

【詳解】

A；檢測前需要對水樣收集瓶、濾膜、培養(yǎng)基、鑷子滅菌；防止雜菌干擾，A正確；

B；完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上；在37℃下培養(yǎng)觀察，B錯誤；

C；為減少實驗誤差；按照上述實驗步驟多次取樣重復(fù)進行檢測，取平均值作為實驗數(shù)據(jù)，C正確；

D；大腸桿菌較小；不能用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)法替代膜過濾法檢測，D錯誤。

故選BD。13、A:B:C【分析】【分析】

在利用酵母菌發(fā)酵時最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時間使其繁殖；再隔絕氧氣進行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～30℃，pH最好是弱酸性。

【詳解】

A；桑葚獨有的花青素等能顯著增強復(fù)合果酒的功效；所以在生產(chǎn)復(fù)合果酒的過程中，要防止桑葚天然色素被氧化，增強功效，A正確；

B；酵母菌在有氧條件下進行快速的增殖；所以果酒發(fā)酵初期通入氧氣能促進酵母菌繁殖，有利于加快果酒發(fā)酵，B正確；

C；為了防止雜菌污染；復(fù)合果酒的制備過程中對發(fā)酵設(shè)備要進行滅菌處理，C正確；

D；變酸的果酒表面會形成一層菌膜；這層菌膜是由醋酸菌形成的，D錯誤。

故選ABC。14、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已經(jīng)發(fā)展了三代：

第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗；通過體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產(chǎn)生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；

第二代疫苗又稱為亞單位疫苗；是通過基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結(jié)構(gòu)蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體；

第三代疫苗是核酸疫苗；又稱基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過正常的人體生理活動產(chǎn)生抗原蛋白，誘導(dǎo)機體持續(xù)作出免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體。

【詳解】

A；該疫苗是基因重組疫苗；需要將腺病毒載體和新冠病毒的基因進行連接，所以該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，A正確；

B；受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后；體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的漿細胞，B錯誤；

C；主要通過檢測受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來評價試驗的有效性；C正確；

D；新冠肺炎康復(fù)患者體內(nèi)產(chǎn)生了新冠病毒抗體和和相應(yīng)的記憶細胞；可以不注射該疫苗，D正確。

故選ACD。三、填空題(共6題，共12分)15、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖16、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.無機鹽17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落菌落數(shù)18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】單個核苷酸兩個DNA片段19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA連接酶20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因DNA分子雜交技術(shù)。四、實驗題(共3題，共15分)21、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基的制作流程一般為：計算→稱量→溶化（包括瓊脂）→調(diào)節(jié)pH→分裝→滅菌→倒平板→（冷卻后）倒置平板。微生物接種是微生物學(xué)研究中最常用的基本操作；主要用于微生物的分離純化。具體來說，就是在無菌條件下，用接種環(huán)或接種針等專用工具，從一個培養(yǎng)皿（上面可能存在各種雜菌落）挑取所需的微生物，轉(zhuǎn)接到另一個培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)的方法。【小問1】

培養(yǎng)基的組成成分包括碳源；氮源、水、無機鹽、生長因子等。倒平板時；應(yīng)待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板，平板冷凝后要將平板倒置，倒平板過程中應(yīng)在酒精燈火焰附近進行，以防止雜菌污染。【小問2】

題干中表明菌體密集均勻分布在平板上；所以是稀釋涂布平板法接種。培養(yǎng)基滅菌合格，影響因素應(yīng)為除培養(yǎng)基滅菌以外可能的影響因素，因此，可能操作過程中是否無菌操作，以及使用的濾紙條是否滅菌合格等。A為對照組，應(yīng)除自變量以外，其他條件都相同，因此，處理方法為浸泡在無菌水中處理后貼于平板中央；實驗中能觀察到出現(xiàn)野生型菌株菌落，說明環(huán)境中存在化學(xué)致癌劑導(dǎo)致突變型菌株突變成野生型菌株。【小問3】

使用過的培養(yǎng)基應(yīng)滅菌后再丟棄；以防止培養(yǎng)基中的有害物質(zhì)污染環(huán)境或感染實驗操作者。

【點睛】

本題考查培養(yǎng)基的成分、制備過程以及微生物的接種方法等相關(guān)知識，意在考查考生對所學(xué)知識的識記和理解能力?！窘馕觥俊拘☆}1】①.碳源；氮源、水和無機鹽②.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時；在酒精燈火焰旁附近倒平板。

【小題2】①.稀釋涂布平板②.濾紙片是否滅菌徹底和待測化合物是否含有雜菌③.（濾紙片）用無菌水浸泡④.his-菌株在培養(yǎng)基上突變?yōu)閔is+菌株；說明待測化合物中存在致癌劑（或待測化合物中存在化學(xué)誘變劑，這些化學(xué)物質(zhì)具有致癌性，敘述合理即可）

【小題3】滅菌，避免對環(huán)境造成污染22、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：小鼠骨體瘤細胞和取自感染病毒的人體內(nèi)的漿細胞進行細胞融合；M表示融合細胞，N表示篩選出的雜交瘤細胞。

【詳解】

（1）分析題圖：小鼠骨體瘤細胞和取自感染病毒的人體內(nèi)的漿細胞進行細胞融合，M表示融合細胞，N表示篩選出的雜交瘤細胞；B淋巴細胞是取自感染H7N9病毒的動物或人；隨后將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合，對融合后的細胞用選擇培養(yǎng)基進行篩選，挑選出B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的細胞，然后再進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，以得到符合要求的N細胞，N細胞的名稱是雜交瘤細胞；

（2）①據(jù)題中圖表分析，KD值越小，抗體和HA蛋白的親和力越高；抗體Y的KD值小于抗體X的KD值，故對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是抗體Y；

②抗體X的體內(nèi)治療效果優(yōu)于抗體Y，但對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是抗體Y，驗證抗體除了中和病毒活性之外，還可以通過和巨噬細胞表面的受體相結(jié)合，從而增強巨噬細胞的吞噬作用，進而清除被病毒感染的靶細胞，需要進行抗體X和抗體Y的對照實驗，并與無關(guān)抗體進行比較，可以將巨噬細胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細胞分別加入A；B、C三組細胞培養(yǎng)液中；并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關(guān)抗體、抗體X和抗體Y，一段時間后檢測并比較肺上皮細胞的裂解百分比。

【點睛】

對單克隆抗體制備流程、抗體效果檢測原理和實驗?zāi)康募坝闷返姆治?，是解決本題的關(guān)鍵?！窘馕觥竣?感染過H7N9病毒②.抗體檢測③.雜交瘤細胞④.Y⑤.將巨噬細胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細胞分別加入A、B、C三組細胞培養(yǎng)液中，并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關(guān)抗體、抗體X和抗體Y，一段時間后檢測并比較肺上皮細胞的裂解百分比。23、略

【分析】【分析】

統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法：（1）顯微鏡直接計數(shù)法①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板；在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計數(shù)板計數(shù)；③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。（2）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法）①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

（1）

測定培養(yǎng)液中游泳池活細菌總數(shù)可以使用稀釋涂布平板法進行計數(shù)；而顯微鏡直接計數(shù)獲得的結(jié)果包含活菌和死菌的總數(shù)。

（2）

氯化消毒后池水中的游離性余氯可保證持續(xù)消毒效果，Na2S2O3具有還原性，可消除水樣中的殘余氯，對游泳池水活細菌總數(shù)進行檢測，步驟①中在采樣瓶中添加Na2S2O3溶液；可以避免殘留氯殺菌。

（3）

微生物培養(yǎng)時應(yīng)注意無菌操作；故步驟③中，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿時，應(yīng)在酒精燈火焰附近進行；為使實驗數(shù)據(jù)更準確，應(yīng)至少設(shè)置3個實驗組；微生物培養(yǎng)時應(yīng)注意避免雜菌污染，由于蒸餾水中含有較多的雜質(zhì)和微生物，故不宜用作對照組，故選c。

（4）

步驟④中；用稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落；出現(xiàn)成片的菌落的原因可能是水樣與培養(yǎng)基沒有混勻，是步驟③中旋搖操作不充分造成的。

（5）

a；氣溫升高會導(dǎo)致微生物繁殖加快；導(dǎo)致合格率降低，a正確；

b、客流量增加，攜帶的微生物增多，導(dǎo)致合格率降低，b正確；

c；由于不同場館分別計數(shù)；故檢測的場館數(shù)多不是導(dǎo)致合格率降低的原因，c錯誤；

d；泳池氯化時間過長會殺滅更多的微生物；不是導(dǎo)致合格率降低的原因，d錯誤。

故選ab。

根據(jù)檢測結(jié)果，要進一步加強第三季度的場館管理，可增加游泳池水質(zhì)監(jiān)測的頻次、游泳池裝設(shè)水循環(huán)過濾裝置，強制要求個人淋浴后入池不現(xiàn)實，每日在臨近開館前氯化消毒，余氯含量過高會影響人體健康，故選bc。【解析】(1)顯微鏡直接計數(shù)獲得的結(jié)果包含活菌和死菌的總數(shù)。

(2)避免余氯殺菌。

(3)酒精燈火焰3c

(4)當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落旋搖

(5)abbc

五、綜合題(共4題，共36分)24、略

【分析】【分析】

1；微生物的培養(yǎng)需要提供的基本營養(yǎng)物質(zhì)：碳源（提供所需碳元素的營養(yǎng)物質(zhì)）、氮源（提供所需氮元素所需的營養(yǎng)物質(zhì)）、水、無機鹽、特殊營養(yǎng)物質(zhì)--生長因子（維生素、氨基酸、堿基等）；微生物培養(yǎng)所需的條件：pH、氧氣條件、特殊營養(yǎng)等。

2；微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

（1）在培養(yǎng)基中加入溴氰菊酯作為唯一碳源；則能利用的溴氰菊酯的微生物能生長繁殖，不能利用溴氰菊酯的微生物不能生長繁殖，這樣的培養(yǎng)基在功能上屬于選擇培養(yǎng)基，能將溴氰菊酯降解菌選擇出來。

（2）從平板甲菌落的分布可以看出大部分的菌落分布在平板的左側(cè)；這是由于接種時涂布不均勻?qū)е碌?，平板乙菌落分布均勻，但部分的菌落已?jīng)被沖爛，可能的原因是培養(yǎng)時未將平板倒置，水滴滴落培養(yǎng)基。

（3）菌株降解溴氰菊酯的能力可以在底物和產(chǎn)物的角度進行評估；具體為單位時間內(nèi)底物的消耗量或者產(chǎn)物的生成量。

（4）欲研究溴氰菊酯濃度對菌株降解溴氰菊酯能力的影響；實驗的自變量是溴氰菊酯的濃度，因變量是溴氰菊酯降解菌的降解能力，其他溫度和接種量等都屬于無關(guān)變量，實驗思路為取相等且適量的菌懸液分別接種到含有不同質(zhì)量濃度的溴氰菊酯液體培養(yǎng)基中，恒溫搖床振蕩培養(yǎng)一定時間，檢測各組菌株降解溴氰菊酯的能力。

（5）影響溴氰菊酯降解菌的降解能力除了溴氰菊酯濃度外；還與外界環(huán)境因素有關(guān)，如溫度，pH；接種量等，故還可繼續(xù)研究溫度、pH、接種量等外在因素對該菌株的影響。

【點睛】

本題主要考查微生物的培養(yǎng)相關(guān)實驗，以及純化分離菌種的方法，屬于實驗?zāi)芰疾斓膶用?，題目難度不大，考察基本的原理和內(nèi)容及應(yīng)用?！窘馕觥窟x擇接種時涂布不均勻培養(yǎng)時未將平板倒置水滴滴落培養(yǎng)基單位時間內(nèi)底物的消耗量或者產(chǎn)物的生成量含有不同質(zhì)量濃度的溴氰菊酯溫度、pH、接種量等25、略

【分析】【分析】

1；構(gòu)建基因表達載體時需要同一種限制酶切割目的基因和運載體；用DNA連接酶連接。為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，切割目的基因兩端常用兩種酶分別切割。

2；植物組織培養(yǎng)技術(shù)：外植體經(jīng)過脫分化形成愈傷組織；再經(jīng)過再分化形成胚狀體，最后形成新植物體。

3；動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞；制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

【詳解】

（1）①克隆DNA片段可以采用PCR技術(shù)；利用已知的DNA片段設(shè)計引物。

②將含有目的基因的表達載體導(dǎo)入到受體細胞；需要將受體細胞培育成植株，由于分生區(qū)的細胞分化程度低，全能性高，所以可以作為受體細胞。

③由于花粉不含有細胞質(zhì)基因；所以目的基因否在受體細胞穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是要檢測轉(zhuǎn)基因生物的細胞核DNA是否插入了目的基因。

④如果用一種限制酶來切割目的基因兩端和質(zhì)粒時；目的基因兩端會出現(xiàn)相同的末端。這樣在構(gòu)建基因表達載體時，會出現(xiàn)3種情況：目的基因-目的基因；目的基因-運載體、運載體-運載體，這樣會出現(xiàn)自身環(huán)化現(xiàn)象，因此為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達載體需用2種限制酶，用2種酶切割目的基因，同時用其中一種酶切割質(zhì)粒。

A；限制酶是識別并切割DNA的；而不是蛋白質(zhì)序列，A錯誤；

B；為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化；構(gòu)建表達載體需用2種限制酶，選擇的原則是在Ti質(zhì)粒內(nèi)，每種限制酶只有一個切割位點，B正確；

C；由于質(zhì)粒采用一種酶切；所以形成的兩個黏性末端相同，C錯誤；

D；酶切后；G基因形成的兩個黏性末端序列不相同，可以防止自身環(huán)化，D正確。

故選BD。

（2）A；原生質(zhì)體培養(yǎng)是植物細胞培養(yǎng)的方法；傳代培養(yǎng)是動物細胞培養(yǎng)的方法，A錯誤；

B；愈傷組織培養(yǎng)是植物細胞培養(yǎng)的方法；B錯誤；

C；貼壁生長是動物細胞培養(yǎng)的方法；C錯誤；

D；動物和植物細胞都有懸浮培養(yǎng)和器官培養(yǎng)；D正確。