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1、,藥敏試驗(yàn),2016.6.14,1,目 錄,一、什么是藥敏試驗(yàn),二、藥敏試驗(yàn)怎么做,三、藥敏試驗(yàn)的結(jié)果代表什么,四、常見(jiàn)致病菌的藥敏結(jié)果,2,一、什么是藥敏試驗(yàn),藥敏試驗(yàn)的概念,通過(guò)模擬體內(nèi)環(huán)境條件,測(cè)試分離自病人體內(nèi)感染部位的病原菌對(duì)常用抗生素的敏感性,即抗生素對(duì)目標(biāo)細(xì)菌的抑制能力,從而預(yù)測(cè)抗生素治療效果的一種體外試驗(yàn)方法。,3,藥敏試驗(yàn)的目的,01,02,03,04,查出耐藥,減少治療錯(cuò)誤,便于醫(yī)生選擇個(gè)體化療方案、節(jié)省費(fèi)用,進(jìn)行耐藥監(jiān)測(cè),為醫(yī)院感染控制部門(mén)提供防治依據(jù),為經(jīng)驗(yàn)用藥提供可靠依據(jù)。,利用耐藥監(jiān)測(cè)結(jié)果控制抗菌藥物應(yīng)用,減少耐藥菌株的出現(xiàn),延長(zhǎng)新藥使用壽命。,為新藥的研究和評(píng)估提
2、供有價(jià)值的信息。,4,藥敏試驗(yàn)什么時(shí)候做,01,分離菌是感染菌而不是定植菌或污染菌,02,常規(guī)經(jīng)驗(yàn)治療效果不佳或又較高失敗風(fēng)險(xiǎn)時(shí),03,對(duì)感染菌的耐藥性無(wú)法估計(jì)時(shí),04,需要了解微生物耐藥性變遷時(shí),5,二、藥敏試驗(yàn)怎么做,紙片擴(kuò)散法,原理: 一定藥物含量的碟形抗生素紙片貼在涂布一定濃度菌液的瓊脂上,過(guò)夜培養(yǎng)后抗生素?cái)U(kuò)散到紙片周?chē)沫傊?,形成一定濃度區(qū)域,越靠近紙片的濃度越高,反之越低。 當(dāng)?shù)偷揭欢ǔ潭龋∕IC最低抑菌濃度以下)時(shí)藥物無(wú)法抑制細(xì)菌生長(zhǎng),從而形成界限分明的抑菌環(huán) 通過(guò)抑菌環(huán)大小與MIC值高低之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)分布關(guān)系,經(jīng)過(guò)回歸處理可以求出細(xì)菌對(duì)某種抗生素的MIC折點(diǎn)范圍對(duì)應(yīng)的抑菌環(huán)大小
3、值。,6,藥敏試驗(yàn)怎么做,稀釋法,參考方法常量法:將標(biāo)準(zhǔn)接種物加入含對(duì)倍稀釋抗生素的MH肉湯管中,過(guò)夜培養(yǎng)。MIC即是能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的含最低抗生素的濃度的那一管所表示的濃度值。,7,藥敏試驗(yàn)怎么做,點(diǎn)擊添加標(biāo)題,E試驗(yàn),E試條是一條5mm*50mm的無(wú)孔試劑載體,一面固定有預(yù)先制備的,濃度呈連續(xù)指數(shù)增長(zhǎng)稀釋抗生素,另一面有讀數(shù)和判別的刻度。將E試條放在細(xì)菌接種過(guò)的瓊脂平板上,經(jīng)孵育過(guò)夜,圍繞試條明顯可見(jiàn)橢圓形抑菌圈,圈的邊緣與試條交點(diǎn)的刻度濃度即為抗生素抑制細(xì)菌的最低濃度。,8,藥敏試驗(yàn)的方法對(duì)比,紙片擴(kuò)散法,稀釋法,E-Test,優(yōu)點(diǎn): 操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好; 成本低,無(wú)需特殊設(shè)備;靈活選擇抗
4、菌藥物;結(jié)果容易理解 缺點(diǎn): 不適合生長(zhǎng)緩慢或者生長(zhǎng)速率不同的菌株以及某些苛養(yǎng)菌,優(yōu)點(diǎn): 標(biāo)準(zhǔn)化方法,結(jié)果可靠;檢測(cè)菌的范圍更廣;定量檢測(cè);更好的反應(yīng)菌株耐藥情況 缺點(diǎn): 操作費(fèi)事費(fèi)力,優(yōu)點(diǎn): 操作簡(jiǎn)單 定量檢測(cè) 缺點(diǎn): 成本太高,常規(guī)試驗(yàn)很難應(yīng)用;局限性,主要用于苛養(yǎng)菌和厭氧菌,9,三、藥敏試驗(yàn)結(jié)果怎么看,表示該菌對(duì)特定抗菌藥物的最小抑菌濃度接近通常血液或組織液可達(dá)到的濃度,細(xì)菌對(duì)這類(lèi)抗菌藥敏的反應(yīng)率通常低于敏感菌。但該藥物在生理濃集部位或高于常規(guī)劑量也可有臨床療效。,中度敏感(MS),表示由該菌引起的感染可以用常規(guī)劑量的該抗菌藥物治療,禁忌癥除外。,為緩沖區(qū)域,如沒(méi)有其他可以替代的藥物需做
5、重復(fù)試驗(yàn)和其它方法的藥敏試驗(yàn)。,中介度(I),該細(xì)菌不能被常規(guī)劑量的該抗菌藥物所抑制,不能用于治療。,耐藥(R),10,四、常見(jiàn)致病菌的藥敏結(jié)果,11,常見(jiàn)致病菌的藥敏結(jié)果,腸球菌屬,藥敏結(jié)果:青霉素(S);青霉素(R)萬(wàn)古霉素(S);青霉素(R)萬(wàn)古霉素(R);高濃度氨基糖苷類(lèi)(S) ;高濃度氨基糖苷類(lèi)(R) 抗生素選擇: 青霉素(S)/氨芐青霉素(S):輕癥感染可選擇青霉素、氨芐青霉素;重癥感染可選擇高劑量青霉素或氨芐青霉素聯(lián)合,氨基糖苷類(lèi),亞胺培南。 青霉素(R)萬(wàn)古霉素(S):其嚴(yán)重感染可以選擇萬(wàn)古霉素聯(lián)合氨基糖苷類(lèi)抗生素。 青霉素(R)萬(wàn)古霉素(R):可以選擇新生霉素聯(lián)合慶大霉素、氟
6、喹諾酮類(lèi)治療;或利福平、四環(huán)素、氯霉素也可作為聯(lián)合用藥;或可選擇泰利霉素等。 高濃度氨基糖苷類(lèi)(S):可用青霉素、氨芐青霉素或萬(wàn)古霉素與氨基糖苷類(lèi)聯(lián)合用藥。 高濃度氨基糖苷類(lèi)(R):表示青霉素、氨芐青霉素或萬(wàn)古霉素與氨基糖苷類(lèi)聯(lián)合用藥無(wú)效。,12,常見(jiàn)致病菌的藥敏結(jié)果,腸桿菌科 藥敏結(jié)果:一代頭孢菌素類(lèi)(S),氨基糖苷類(lèi)(S);一代(二代)頭孢(R),氨基糖苷類(lèi)(R),三代頭孢(S);三代頭孢(R),頭孢西?。⊿);三代頭孢(R),頭孢西?。≧),亞胺培南(S) 抗生素選擇: 一代頭孢菌素類(lèi)(S),氨基糖苷類(lèi)(S):輕癥感染可選擇慶大霉素、氨芐青霉素、一代頭孢;重癥感染可選擇三代頭孢。 一代(二代)頭孢(R),氨基糖苷類(lèi)(R),三代頭孢(S):可以選用三代頭孢。 三代頭孢(R),頭孢西?。⊿):提示可能是ESBLs(超廣譜-內(nèi)酰胺酶),對(duì)所有青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)和氨曲南均耐藥。可以選擇碳青霉烯類(lèi)(如亞胺培南、美洛培南),頭霉素類(lèi)(如頭孢西?。?,-內(nèi)酰胺酶抑制劑組成的復(fù)方制劑(如舒巴坦)。易產(chǎn)生ESBLs的菌株主要是:大腸埃希菌、克雷伯菌和奇異變形桿菌。 三代頭孢(R),頭孢西?。≧),亞胺培南(S):提示可能為高產(chǎn)AmpC酶(AmpC內(nèi)酰胺酶),對(duì)所有青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)和氨曲南及頭霉素均耐藥??蛇x用碳青
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