血培養(yǎng)的意義及操作流程

1、闡明了血培養(yǎng)的意義和操作規(guī)范，明確了血培養(yǎng)的臨床意義，血培養(yǎng)檢測病原菌在菌血癥感染性心內(nèi)膜炎的臨床原因不明感染假體移植后感染到人工關(guān)節(jié)上，是診斷人工瓣膜脈管導(dǎo)管相關(guān)菌血癥化膿性關(guān)節(jié)炎肺炎的血培養(yǎng)的最佳工具，包括SIRS炎癥性反應(yīng)、BACTEREMIA菌血癥， TRAUMA外傷、PANCREATITIS胰腺炎、BURNS燒傷、OTHER及其他，F(xiàn)UNGEMIA真菌血癥、PARASITEMIA寄生蟲血癥、VIREMIA病毒血癥、OTHER及其他敗血癥(SEPSIS ) 全世界： 1800萬美國：確診病例130萬的歐洲和日本：確診病例190萬人的年治療費用： 167億美元的美國67億美元的歐洲死亡病

2、種排名第10位每年會引起約40萬人的死亡敗血癥， 10年間139萬非心內(nèi)ICU病區(qū)最常見的死亡病因增加到130萬人，78萬人發(fā)生在ICU病區(qū)1.dmach 2003 report3. medtapinternational2. critcaremed 2001； 2933601303-10.societyforcriticalcaremedicine (press release 2004 )、敗血癥(SEPSIS )、血培養(yǎng)是檢測菌血癥和真菌血癥最簡單、最準(zhǔn)確、最常用的方法，是確認(rèn)活體血流感染的病原學(xué)基礎(chǔ)盡快進(jìn)行血培養(yǎng)檢查和早期正確的抗菌治療是抑制敗血癥最重要的措施。Vincent J-L、

3、Sakr Y、Sprung CL、et al.sepsisineuropeanintensivecareunits 3360 resultsofthesoapstudy.critcaremed 2006； 34:344-355、敗血癥檢測、血培養(yǎng)作用、感染性病原體進(jìn)一步鑒定和藥敏試驗，指導(dǎo)正確使用抗菌藥、血培養(yǎng)操作規(guī)范、 什么時候血培養(yǎng)血液培養(yǎng)標(biāo)本采集的時機(jī)需要血培養(yǎng)采集的量和套數(shù)規(guī)范的皮膚消毒和培養(yǎng)瓶的準(zhǔn)備血培養(yǎng)標(biāo)本的儲存和運輸?shù)膱蟾鏁r間和陽性標(biāo)本的處理？CLSI血液培養(yǎng)的原則和操作步驟推薦(Approved )指南， Proposed Guideline 2006年10月出版： M47-P

4、 Approved Guideline 2007年5月出版： M47-A 2005-09-08出版： BSOP 37第5版.uk/pdf_sops.asp編輯單位：醫(yī)學(xué)微生物協(xié)會、臨床微生物協(xié)會、蘇格蘭微生物協(xié)會、IBMS Welsh微生物協(xié)會由衛(wèi)生保護(hù)廳(Health Protection Agency )指導(dǎo)，包括英國HPA血液培養(yǎng)的研究和操作程序、血液培養(yǎng)操作規(guī)范、 患者懷疑有血流感染的癥狀和情況：原因不明的發(fā)熱(38 )和體溫過低(36 )嚴(yán)重的局部感染如腦膜炎、心內(nèi)膜炎、肺炎、腎盂腎炎、腹部術(shù)后感染等侵入性處理，如靜脈導(dǎo)管放置、導(dǎo)

5、管放置、機(jī)械通氣等白血球增加、粒細(xì)胞減少、血小板減少休克、震顫僵硬多臟器衰竭的心率異常會加快低血壓和高血壓呼吸頻率，何時需要血培養(yǎng)，在使用抗菌藥物前采血，出現(xiàn)可疑臨床癥狀后，應(yīng)盡快采血培養(yǎng)。 使用抗菌藥前采血培養(yǎng)是理想的。 患者使用抗菌藥開始治療的情況下，在使用下一種藥之前應(yīng)該采血培養(yǎng)。 在患者顫抖發(fā)燒1小時前，必須同時(或以30-60 min間隔)提取23套血液培養(yǎng)，只有在患者懷疑為感染性心內(nèi)膜炎或其他血管內(nèi)感染(例如導(dǎo)管相關(guān)感染)的情況下，才需要長期多次提取血液培養(yǎng)。 血液培養(yǎng)標(biāo)本采集的時機(jī)、血液培養(yǎng)采集套裝數(shù)，對成人，通常在短時間(一般在1小時以內(nèi))連續(xù)采血，進(jìn)行2套到3套(需要1條氧的

6、1條厭氧/套裝)的血液培養(yǎng)。 孩子在短時間內(nèi)，在不同的地方，吸著兩個瓶(需要氧氣)。 懷疑感染性心內(nèi)膜炎或其他血管內(nèi)感染(導(dǎo)管相關(guān))菌血癥或真菌血癥的情況下，間隔采血(例如每隔12小時采血)，進(jìn)行2到3組(2根/組)的血液培養(yǎng)。不同臨床癥狀時的采血方法的推薦，Baron、EJ .M.P. Weinstein、W.M. Dunne、Jr .P. Yagupsky、D.F. Welch、and.m.Wilson.cum itech 1c blood cultures E.J. Baron. ASN Press、Washington、D.C 2005、血液培養(yǎng)采血量、成人的情況下，每條血液培養(yǎng)需要5

7、-10ml的血液。 孩子的話，一根需要2-4毫升的血液。 對于嬰幼兒，采血量不得超過患兒總血量的1%。 CLSI要求每次采集23套標(biāo)本，每套應(yīng)含有需氧培養(yǎng)瓶，厭氧培養(yǎng)瓶的成年患者只能采集一個血液培養(yǎng)標(biāo)本。 采血量不足，只能說明一套血液培養(yǎng)的結(jié)果很難正確說明的Cockrill2004年報告的：163名患者、血液培養(yǎng)器、血液培養(yǎng)采集套數(shù)和血液量，在很多病例中細(xì)菌和真菌均勻存在于血液中，因此一次血液培養(yǎng)檢查的敏感性需要兩組以上的血液培養(yǎng)的污染通常， 只出現(xiàn)在一個血液培養(yǎng)瓶中，多個血液培養(yǎng)瓶對真正的血流感染呈陽性，血液培養(yǎng)組合的累積檢出率隨著采樣次數(shù)的增加而增加，Weinstein MP .Lee A

8、 .Mirrett S .barthalrellerl.detection j clin微軟2007； 45:3546-3548、血液培養(yǎng)成套數(shù)量和血液量、很多血液培養(yǎng)采血方式、從不同部位開始的2對到3對、韋恩、p.a.principlesandproceduresforbloodculs； Approved Guideline，clsidocumentm 47-a.clinicalandlaboratorystandardsinstitute (clsi ) 2007年，報告時間早，出現(xiàn)陽性時間：9%的厭氧瓶比厭氧瓶早一天報告厭氧瓶中5%比厭氧瓶早一天報告的結(jié)果顯示，如果不僅僅用厭氧菌進(jìn)行厭

9、氧菌培養(yǎng)，就不能發(fā)現(xiàn)19%的菌株，其他5%的血液培養(yǎng)延遲一天為陽性結(jié)果，血液培養(yǎng)采集組數(shù)和血液量， 肯nap Collin ONP.anaerobicbottlearestillimportantinbloodculturesets.eurjclinmicrobiolinfectdis，2001， 20:217-219，總結(jié)：如果血液培養(yǎng)只是氧氣瓶培養(yǎng)，漏檢不僅影響了嚴(yán)格的厭氧菌，而且影響了性厭氧菌的分離率和報告陽性結(jié)果的時間，血液培養(yǎng)采集組數(shù)和血液量是血液培養(yǎng)過程中標(biāo)本采集的決定性步驟。 操作全過程必須采取標(biāo)準(zhǔn)的嚴(yán)格無菌措施。 不被污染而正確采集的標(biāo)本是提供正確可靠結(jié)果的關(guān)鍵。 血液培養(yǎng)標(biāo)本

10、應(yīng)由醫(yī)務(wù)人員采集，他們經(jīng)過訓(xùn)練取得采血資格。規(guī)范的皮膚消毒和培養(yǎng)瓶的準(zhǔn)備、規(guī)范的皮膚消毒和培養(yǎng)瓶的準(zhǔn)備、培養(yǎng)瓶的選擇、成人通常的血液培養(yǎng)應(yīng)用一對瓶氧氣瓶，用含活性炭的抗菌藥對用FA FN抗菌藥治療的患者吸附瓶，用SA SN抗菌藥治療的患者應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)血液培養(yǎng)瓶， Riley j.a.heiter porteofrecoveryofbloodcultureisolatesfromtwobact/alertfanaeroobicbloodculturebottle和re 41:213-217、應(yīng)用厭氧瓶的原因，保證足夠的采血量，說明血液培養(yǎng)結(jié)果是污染還是真正感染，保

11、證厭氧菌的培養(yǎng)，血液培養(yǎng)瓶的接種順序，用注射器和針采血時，先接種厭氧瓶，使空氣不進(jìn)入。 用蝶泳針采血的時候，為了不把裝置內(nèi)的空氣送到厭氧瓶里，請接種氧氣瓶。 如果提取的血液量少于推薦量，血液就要充分接種氧氣瓶，多馀的血液就要接種厭氧瓶。 優(yōu)質(zhì)標(biāo)本采集的要點是，每瓶血培養(yǎng)應(yīng)從身體不同部位采集的血液應(yīng)該是靜脈血，而不是動脈血，必須避免從靜脈和動脈導(dǎo)管采血。 由于通常這些裝置的污染率很高，標(biāo)本采集前的皮膚消毒應(yīng)盡快(優(yōu)選2小時內(nèi))送到臨床微生物實驗室進(jìn)行樣品培養(yǎng)。如果有延遲，暫時保存在室溫下的血液培養(yǎng)瓶中的患者情況(包括日期、時間、采樣位置和診斷)、weinsteinm.p.currrentbloo

12、dculrancesmethodsandsystems : clinical概念、technology 23:40-46，Everts R.J .Vinson E.N. Adholla P.O .relllerl.b.contaminationofcatheter-drawnbloodculures.j.clin microbiol . 39:3393-3394、血液培養(yǎng)標(biāo)本的儲藏和輸送、血液培養(yǎng)瓶必須在短時間內(nèi)送到實驗室，延遲的機(jī)會會延遲或阻礙病原菌的生長，變成假陰性。 如果不馬上裝在瓶子里，培養(yǎng)瓶可以在室溫下保存，但只能保存幾個小時。 請將培養(yǎng)瓶冷藏或冷凍，避免冷藏或冷凍時病原菌的一部分死

13、亡。 也不推薦把培養(yǎng)瓶放在培養(yǎng)箱里。血液培養(yǎng)報告日期和時間，現(xiàn)在推薦的連續(xù)血液培養(yǎng)檢測系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)時間為5天，臨床上有意義的病原菌在培養(yǎng)前一天的3天前被檢出，檢出率為94%，bour beau PP . foltzerm.routeineincubationofbact/alertfa和fnbloodculturebottleformorethan3daysmaynotbenecessry.jclin microbiol.2005； 43:2506-2509、污染菌和感染菌的確認(rèn)，主要是檢測出的細(xì)菌的種類和陽性瓶的數(shù)量、Richter S.S .Beekman S.E .Croco D.J

14、.Koontz R.P .Pfaller M.A . dorng.v.minimizingtheworkupofbloodculturecontamintos :基于實施andarrecorty -的algorithm.jclin microbiol.2002； 40:2437-2444，明確了血液培養(yǎng)的臨床意義BSOP 3715，病原菌在患者血液以外的臨床采血時被污染實驗室操作的消毒液被菌污染，爆炸器具問題白細(xì)胞過剩的血液量另有污染瓶：約2%這些菌(陽性桿菌、桿菌、丙酸桿菌、 凝固酶葡萄球菌、微球菌)也會引起全身感染的污染瓶，瓶中只有1-2瓶在第二組放置這個瓶幾天，等待第二組結(jié)果的JCM 2

15、002:40:24372444如何減少污染瓶，血液培養(yǎng)瓶的可疑污染菌、病原菌，和有可能污染細(xì)菌，不產(chǎn)生藥物敏感性，醫(yī)生要求，除非用菌光譜評價，增殖菌？ 草綠鏈球菌，評價內(nèi)容：陽性瓶數(shù)第2組的結(jié)果病史白細(xì)胞數(shù)體溫圖像學(xué)病理和醫(yī)生的探討：細(xì)菌室如何分析研究污染瓶，沒有接收，是病原菌，是同一菌，沒有生長，收到了，Richer JCM，2002； 40:2437-2444、草綠色鏈球菌、明確了血液培養(yǎng)的臨床意義的成人菌血癥分類BSOP 3715、社區(qū)獲得性菌血癥大腸菌科菌腦膜炎奈瑟菌b鏈傷寒菌芽孢桿菌淋菌醫(yī)院獲得的性菌血癥凝固酶陰性葡萄球菌、金葡萄、腸桿菌科菌、綠關(guān)于腸球菌厭氧菌酵母菌肺鏈、方法和操作

16、程序相關(guān)血流感染(CRBSI )的血培養(yǎng)，CRBSI是血流感染最常見的原因，在美國，每年有25萬患者的死亡率為12-35%，醫(yī)務(wù)人員和患者的菌源進(jìn)入皮膚時，導(dǎo)管前端被污染，血流播種、皮膚固定、滴液污染、入口污染導(dǎo)管相關(guān)菌血癥BSOP 3715(CRBSI) (IVCBSI )，導(dǎo)管的種類：非隧道式長期留置導(dǎo)管，隧道式短期留置導(dǎo)管是很難確定診斷的皮膚正常菌和假菌血癥常見菌診斷依據(jù)：外周血、導(dǎo)管留置部位，IVCJ尖是同菌Sepsis 拔管后定量培養(yǎng)數(shù)(外周血：導(dǎo)管血1:10 )不同的平盤法有陽性警報時間(2h )，是方法和操作步驟的與導(dǎo)管相關(guān)的血流感染診斷方法之一的非隧道式、隧道式的中心靜脈導(dǎo)管、靜脈留置口(VAP ) 推薦給被懷疑為CRBSI的患者的培養(yǎng)方法：至少兩組血液培養(yǎng)應(yīng)在外周靜脈穿刺采集的一組導(dǎo)管中心或從靜脈留置口的隔膜采集的一組采血時間近(建議5分鐘)，方法和操作程序?qū)Ч芟嚓P(guān)的血流感染診斷的第一方法中， 培養(yǎng)結(jié)果顯示：1:2組陽性血液培養(yǎng)為同菌(通過