腫瘤標志ppt課件

1、。1，腫瘤標志物及其檢測方法，李世榮，2，腫瘤標記物是由Herberman在1978年國家癌癥研究所(NCI)關(guān)于“人類免疫學(xué)和腫瘤免疫診斷”的會議上提出的。第二年，它們在英國舉行的第七屆“腫瘤生物學(xué)和醫(yī)學(xué)”會議上被每個人所證實，并開始被引用。腫瘤標志物是指與腫瘤組織和細胞中的腫瘤細胞產(chǎn)生的腫瘤的形成和發(fā)生有關(guān)的物質(zhì)。這些物質(zhì)存在于腫瘤細胞的細胞核、細胞質(zhì)、膜或體液中，進入血液或其他體液或組織，或由宿主響應(yīng)體內(nèi)新生物而產(chǎn)生，并進入血液、體液或組織，其含量明顯高于正常參考值。它不存在于正常成人組織中，但在胚胎組織中發(fā)現(xiàn)，或其在腫瘤組織中的含量超過正常含量。腫瘤標志物的分類目前，對腫瘤標志物沒有統(tǒng)

2、一的分類和命名。臨床上最常用的腫瘤標志物可分為：(1)腫瘤抗原：腫瘤胚胎抗原：甲胎蛋白、癌胚抗原。白血病系列分化抗原：CD系列。腫瘤增殖抗原：增殖細胞核抗原/細胞周期蛋白(PCNA/細胞周期蛋白)，DNA聚合酶(DNA-pol)，Ki-67核抗原，Ki-S1核抗原。4、(2)碳水化合物抗原CA19-9、CA125、CA50、CA724、CA15-3、CA242、SCC。(3)酶和同工酶乳酸脫氫酶、神經(jīng)元特異性烯醇化酶、前列腺酸性磷酸酶、胃蛋白酶原和。(4)激素和異位激素雌激素受體、孕激素受體、絨毛膜促性腺激素、促腎上腺皮質(zhì)激素、降鈣素。(5)蛋白質(zhì)角蛋白(角蛋白上皮腫瘤)角蛋白19片段(Cyf

3、ra21-1)，組織多肽抗原(TPA)，組織多肽特異性抗原()，膀胱癌抗原()。核基質(zhì)蛋白22(22)和70(它們是具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)的大分子蛋白)。A9 R 2-微球蛋白。本斯-瓊斯蛋白。腫瘤相關(guān)病毒EBV與鼻咽癌相關(guān)，人乳頭瘤病毒與宮頸癌相關(guān)，HBV病毒與肝癌相關(guān)，細胞白血病-淋巴瘤病毒(HTLV-1)與成人白血病相關(guān)。(7)癌基因、抑癌基因及其產(chǎn)物在某些腫瘤中有異常表達，是較好的廣譜腫瘤分子標志物。1)癌基因和相關(guān)腫瘤ras家族(P21)乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、肝癌、腎癌、膀胱癌、肺癌、白血病和其他C-erbB2(HER-2/neu)乳腺癌、卵巢癌、肺癌、胃癌和其他C-myc肺癌、胃癌、肝癌、乳

4、腺癌、睪丸癌和其他C-met肝癌、胃腸癌和甲狀腺癌Mdm-2軟組織肉瘤如腦腫瘤bcr-abl融合基因慢性粒細胞白血病(CML) Ph1 t(9，22)、6、2)腫瘤抑制基因和相關(guān)腫瘤Rb成視網(wǎng)膜細胞瘤、骨肉瘤、乳腺癌、小細胞肺癌和其他P53肺癌、消化道癌、乳腺癌、骨肉瘤、淋巴瘤、白血病和其他APC家族性腺瘤病、結(jié)腸直腸癌、胃癌、肺癌和其他FAP家族性腺瘤病、結(jié)腸直腸癌、結(jié)腸直腸癌、胃癌NF1神經(jīng)纖維瘤、嗜鉻細胞瘤、神經(jīng)母細胞瘤、腎母細胞瘤MTS1(16食管癌、胃癌、結(jié)腸癌、肺癌、肝癌、頭頸癌、乳腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因nm23轉(zhuǎn)移抑制基因，與腫瘤轉(zhuǎn)移和預(yù)后負相關(guān)。CD44表達增加，促進轉(zhuǎn)移。組織蛋白酶

5、在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中起著關(guān)鍵作用。4)凋亡相關(guān)基因bcl-2抑制凋亡?？勺鳛榭拱┧幬锩舾行院皖A(yù)后的指標。Fas屬于腫瘤壞死因子家族，轉(zhuǎn)染后促進腫瘤細胞凋亡。多藥耐藥基因糖蛋白、多藥耐藥相關(guān)蛋白、肺耐藥蛋白、LRP谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶。8、幾種重要的腫瘤標志物及其應(yīng)用。9、影響因素：1 .腫瘤標志物具有特異性和非特異性。2.不同的腫瘤特征，如腫瘤的分期、大小、部位、組織來源和轉(zhuǎn)移趨勢。3.不同的抗體，如多克隆抗體、單克隆抗體、抗體決定簇和抗體親和力。4.不同的檢測系統(tǒng)，如檢測原理、標記、實驗條件、檢測技術(shù)、檢測儀器和檢測靈敏度。5.檢查員的專業(yè)水平和技術(shù)經(jīng)驗、實驗室條件和實驗可靠性的差異。甲胎蛋白(A

6、FP)，一種分子量約為70，000的糖蛋白，由590個氨基酸組成，存在于胎兒肝臟和卵黃囊中。主要用于原發(fā)性肝癌的診斷和分類，以及非生精睪丸癌和畸胎瘤的診斷，是唯一與癌癥有明確特征性關(guān)系的腫瘤標志物。在孕婦和一些肝炎和肝硬化患者中略有增加。根據(jù)親和電泳和非游泳固定，甲胎蛋白可分為L1型、L2型和L3型。其中，L3型是肝細胞癌的早期特異性標志物，對檢測小肝癌和區(qū)分肝細胞癌與良性肝病有重要價值。某些病理類型的肝癌(如假腺管型)細胞可能不分泌甲胎蛋白。11，(2)癌胚抗原(CEA)，一種分子量約為180萬的多糖-蛋白質(zhì)復(fù)合物，位于胚胎和胎兒的腸粘膜中。分泌癌胚抗原的腫瘤大多位于中空器官。首先選擇的是結(jié)

7、直腸癌的標志物，尤其是結(jié)直腸癌，其次是胃癌、肝癌、肺癌、胰腺癌和乳腺癌的標志物。腺癌通常高于上皮癌。無癌癥人群中吸煙者略有增加。胰液和膽汁中的癌胚抗原可用于診斷胰腺癌或膽管癌，尿液中的癌胚抗原可作為判斷膀胱癌預(yù)后的參考。血清癌胚抗原聯(lián)合甲狀腺素的測定有助于甲狀腺髓樣疾病的診斷和復(fù)發(fā)估計。血清2微球蛋白(2 -MG)是一種分子量為11500的低分子量蛋白質(zhì)，由淋巴細胞和巨噬細胞分泌。臨床用于診斷多發(fā)性骨髓瘤。當腎功能不佳時，它也會升高。(4)血清鐵蛋白是一種分子量為430，000-450，000的大分子蛋白質(zhì)，作為儲存鐵存在于肝臟、脾臟和骨髓中。臨床診斷是隱性貧血的敏感指標。癌細胞具有很強的合成

8、SF的能力，這有助于腫瘤的診斷和預(yù)后。前列腺酸性磷酸酶和前列腺特異性抗原是分子量約為100，000的糖蛋白，酸性磷酸酶同工酶之一是細胞裂解物和分泌物的正常成分。它具有組織特異性，主要用于診斷前列腺癌。前列腺特異性抗原是前列腺上皮細胞分泌的激肽釋放酶樣蛋白酶，是分子量為33000的單鏈糖蛋白。前列腺特異性抗原在前列腺癌中的檢出率為70%，在良性前列腺增生和女性乳腺癌中的檢出率也有所提高。前列腺特異性抗原占前列腺特異性抗原的10%，前列腺癌中結(jié)合型前列腺特異性抗原顯著增加，因此其比值下降。人絨毛膜促性腺激素(HCG)是一種由胎盤滋養(yǎng)層分泌的糖蛋白激素，分子量為45 000，含有145個氨基酸，由兩

9、個獨立的氨基酸肽鏈和亞單位組成。腫瘤細胞的特征是分泌亞單位。它是絨毛膜癌和惡性葡萄胎的腫瘤標志物。胚胎癌也可在性腺器官如卵巢和睪丸中檢測到，這可用于監(jiān)測療效和判斷這些疾病的預(yù)后。少數(shù)惡性腫瘤，如肺癌、子宮內(nèi)膜癌、宮頸癌和白血病，也可發(fā)現(xiàn)HCG升高，但陽性率不高。神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)是一種分子量約為87000的烯醇化酶同工酶，參與神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細胞的糖酵解。在腫瘤組織中，糖酵解增強，細胞增殖周期加快，細胞中的神經(jīng)元特異性烯醇化酶釋放到血液中，導(dǎo)致血清含量增加。它是小細胞肺癌的首選化療藥物(敏感性70%)。神經(jīng)母細胞瘤發(fā)病率升高。腦脊液神經(jīng)元特異性烯醇化酶可作為腦損傷和腦梗死的診斷指標

10、。16，(8)細胞角蛋白相關(guān)的TM細胞角蛋白(CK)參與上皮細胞骨架的形成。根據(jù)它們的氨基酸序列，有20種CK1CK20。Cyfra21-1是角蛋白19的片段，適用于(9)鱗狀細胞癌相關(guān)抗原(SCCA)是一種組織抗原，可由女性生殖道上皮和不同器官的鱗狀細胞癌分泌。TM是宮頸鱗狀細胞癌的首選，也用于肺、食管、口腔、頜面部鱗狀細胞癌，其敏感性低于Cyfra21-1。胃蛋白酶原存在于胃底粘膜的主要細胞、宮頸粘液細胞和主要宮頸粘液移行細胞中。胃底腺、幽門腺和十二指腸腺的主要細胞中有PG。胃幾乎是胃泌素的唯一來源，胃泌素的變化可以反映胃粘膜功能的變化。胃癌患者血清胃泌素和胃泌素比值明顯下降。日本學(xué)者以血

11、清PG70ng/ml和PG/PG比值3為臨界值，對胃癌的敏感性和特異性分別為84.6%和73。5%。當對10，000多人進行體檢時，發(fā)現(xiàn)其中約20%的人前列腺素指數(shù)較低。進一步胃鏡檢查證實胃癌21例，其中早期胃癌19例。糖抗原(CA) CA19-9屬于糖脂，其中粘蛋白分子量為106，抗原為3.6104，由多種癌細胞、胎兒胃腸道、上皮和一些粘液細胞產(chǎn)生。從內(nèi)胚層細胞分化而來的各種上皮惡性腫瘤的血清中濃度升高。它主要用于診斷消化道腫瘤，其中胰腺癌的特異性最高，其次是結(jié)直腸癌。生長激素(HGH) HGH是一種由腦垂體分泌的蛋白激素，通過血液傳遞到全身。垂體腺瘤、腎、肺等器官腫瘤等惡性腫瘤分泌的異位激

12、素會引起HGH含量的增加，因此HGH的檢測有利于腎癌、肺癌和垂體腫瘤的聯(lián)合診斷。(n2(13)其他組織多肽抗原(TPA)是一種組織相關(guān)抗原，主要用于消化道腫瘤、肺癌和乳腺癌的診斷。組織多肽特異性抗原可以提供更多的腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和進展的信號。膀胱癌抗原(UBC)主要用于膀胱癌的診斷。20，腫瘤標志物及其檢測方法，21，相同的標記可通過不同的方法檢測，如癌胚抗原或磷-糖蛋白可從血清學(xué)水平和免疫組織化學(xué)檢測，也可通過流式細胞術(shù)或逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測。除了傳統(tǒng)的放射免疫分析和酶聯(lián)免疫分析外，還有三種全活性免疫化學(xué)分析系統(tǒng)(化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)；熒光免疫分析系統(tǒng)和電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于臨床，

13、能夠快速、準確、半定量地檢測血清腫瘤標志物。可檢測甲胎蛋白、癌胚抗原、CA19-9、CA72-4、CA125、CA15-3、神經(jīng)元特異性烯醇化酶、Cyfra21-1、前列腺特異性抗原、f-前列腺特異性抗原等。組織水平免疫組織化學(xué)和原位分子雜交組織化學(xué)是近年來發(fā)展起來的一門新的邊緣學(xué)科。它巧妙地將免疫學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)與組織病理學(xué)相結(jié)合，在組織和細胞中原位展示某些化學(xué)成分和特定的基因片段。常規(guī)標本中約5%的疑難病例或惡性腫瘤需要通過免疫組織化學(xué)進行鑒別和分析。波特利用基因原位雜交技術(shù)檢測細胞水平的基因表達，利用組織芯片免疫組化技術(shù)檢測乳腺導(dǎo)管原位癌和浸潤性癌的病理特征和臨床意義。圖像分析技術(shù)可以

14、定量測定組織切片上腫瘤細胞的脫氧核糖核酸含量和形態(tài)分析，對判斷腫瘤的惡性程度和預(yù)后具有重要的臨床價值。細胞學(xué)水平流式細胞術(shù)。流式細胞儀定量檢測細胞和細胞器的結(jié)構(gòu)和某些功能，利用細胞表面特異性標記對特定細胞亞群進行分析和分類是一種先進的技術(shù)方法。白血病和淋巴瘤標志物(CD系列)的檢測有利于診斷和鑒別診斷；流式細胞儀檢測惡性腫瘤細胞中P-gp可為臨床選擇化療藥物提供依據(jù)；我們用流式細胞儀檢測消化道腫瘤外周血CD44水平。24，電子顯微鏡：酶細胞化學(xué)，免疫電子顯微鏡和原位雜交電子顯微鏡。分子水平：聚合酶鏈反應(yīng)是一種極其簡單、靈敏、高效、特異和快速的體外擴增技術(shù)。目前，國內(nèi)外采用間接法檢測外周血腫瘤細

15、胞的主要標志基因是細胞角蛋白19和上皮性惡性腫瘤的CK 20。癌胚抗原用于分泌癌胚抗原的腫瘤，如結(jié)腸直腸癌、胃癌、胰腺癌和乳腺癌。甲胎蛋白(AFPmRNA)用于檢測肝細胞癌的微轉(zhuǎn)移。25、生物芯片分析系統(tǒng)：利用顯微切割和芯片技術(shù)分析乳腺癌不同部位腫瘤細胞間基因表達的差異。組織微陣列組織微陣列有助于節(jié)省試劑、人力和成本。過去，我們可以在同一切片上同時分析數(shù)百個甚至1000個腫瘤。蛋白質(zhì)芯片為多種標志物的聯(lián)合檢測提供了理想的工具。英國朗道公司在世界范圍內(nèi)同時推出了含有8種腫瘤標志物的蛋白質(zhì)芯片。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的數(shù)據(jù)，惡性腫瘤是世界范圍內(nèi)僅次于心腦血管疾病的第二大死亡原因，占死亡總數(shù)的22%，并且呈逐年上升趨勢。十種常見腫瘤：胃癌、肝癌、食道癌、結(jié)腸直腸癌、白血病、宮頸癌、鼻咽癌、乳腺癌和膀胱癌。腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷和早期治療是患者獲得長期生存的最重要途徑。以肝癌為例，腫瘤直徑為2厘米，5年生存率接近100%；直徑每增加1厘米，5年生存率下降20%。腫瘤診斷的三大支柱是影像診斷(包括b超、CT和MRI)、化學(xué)診斷(血清學(xué)和免疫學(xué))、細胞學(xué)和組織學(xué)診斷，后兩者以腫瘤標志物為主要或輔助觀察指標。目前，腫