血液檢測(cè)誤差分析課件

1、,1,PPT學(xué)習(xí)交流,誤差的來源：,1.患者本身：飲食、情緒、運(yùn)動(dòng) 2.樣本采集：樣本是否需特殊處理、抗凝劑的使用等 3.樣本的運(yùn)送是否及時(shí)等。,1.小紅細(xì)胞干擾 2.巨大血小板綜合癥 3.某些血液病患者 4.細(xì)胞碎片 5.冷球蛋白干擾 6.新生兒,1.檢驗(yàn)結(jié)果的審核與發(fā)出 2.檢驗(yàn)樣本的保存與標(biāo)本的處理 3.咨詢服務(wù)：加強(qiáng)與臨床的溝通,2,PPT學(xué)習(xí)交流,4,白細(xì)胞假性增高,1,2,3,5,紅細(xì)胞凝集,細(xì)胞碎片,常見誤差因素：,血小板聚集,巨大血小板,3,PPT學(xué)習(xí)交流,Q1:DMC含義是什么？,4,PPT學(xué)習(xí)交流,報(bào)警原理 提高了異常標(biāo)本的篩選效率 完善實(shí)驗(yàn)室的鏡檢規(guī)則,數(shù)值數(shù)據(jù),散點(diǎn)圖,

2、直方圖,儀器狀態(tài),IPU綜合分析,Suspect,Abnormal,ERROR,NEGATIVE,POSITIVE,IP信息,5,PPT學(xué)習(xí)交流,Q2：儀器的懷疑類報(bào)警含義分別是什么？,6,PPT學(xué)習(xí)交流,WBC,7,PPT學(xué)習(xí)交流,Q3：思考白細(xì)胞計(jì)數(shù)受哪些影響？,8,PPT學(xué)習(xí)交流,9,PPT學(xué)習(xí)交流,10,PPT學(xué)習(xí)交流,Q4:什么情況下外周血會(huì)出現(xiàn)有核紅？,11,PPT學(xué)習(xí)交流,血常規(guī)特點(diǎn)：,1.WBC顯示低可信度 2.顯示NRBC？可疑報(bào)警（XN儀器除外）,對(duì)策：,1.手工計(jì)數(shù)100個(gè)WBC并記錄見到的NRBC 2.對(duì)于XE機(jī)型，加做NRBC 3.選用XN機(jī)型，NRBC自動(dòng)修正,病例

3、-外周血出現(xiàn)有核紅,12,PPT學(xué)習(xí)交流,鏡檢圖片：,13,PPT學(xué)習(xí)交流,Q5：思考為何兩個(gè)通道WBC總數(shù)相差較大？該如何處理？,14,PPT學(xué)習(xí)交流,Menu,RBC溶血不良,15,PPT學(xué)習(xí)交流,RBC溶血不良的原因：,肝功能低下(肝硬化、肝癌晚期、膽道堵塞) 異常血紅蛋白癥(Hgb-S癥、Hgb-C癥) 高脂血癥 高膽固醇制劑輸液治療過程中,16,PPT學(xué)習(xí)交流,難溶紅細(xì)胞 電鏡下 正常RBC,電鏡下 難溶RBC,滴加溶血 素后,17,PPT學(xué)習(xí)交流,血常規(guī)特點(diǎn)：,1.DIFF通道與BASO通道WBC差值較大 2.存在“難溶紅細(xì)胞”報(bào)警,對(duì)策：,1.手工計(jì)數(shù) 2.參考DIFF通道WBC

4、總數(shù),病例-紅細(xì)胞溶血不良,18,PPT學(xué)習(xí)交流,WBC聚集時(shí)新增WBC的切換功能,Target In the case that the blood including Hyaluronic acid (metastatic tumor)is measured - because of WBC aggregation in WNRch WBC become falsely low.(WBC in WDFch has not been affected.) Modification 1.Flagging of “WBC Abnormal Scattergram”, 2.masking of W

5、BC- will be executed when such phenomena are detected.,WNRch,WDFch,Ref (eye),復(fù)習(xí)：Ver.00-15（WBC Abn Scg報(bào)警和WBC結(jié)果不顯示- ）,Detection Area of WBC aggregation,19,PPT學(xué)習(xí)交流,新分析演算軟件：Ver.00-16,有WDF通道測(cè)定時(shí)，從WBC-N（WNR通道）的結(jié)果切換為WBC-D（WDF通道）,Ver.00-15推薦的規(guī)則設(shè)定 Ver.00-16推薦的規(guī)則設(shè)定,相關(guān)資料XN flagging algorithm有更新。,WBC聚集時(shí)WBC的切換功能,

6、20,PPT學(xué)習(xí)交流,總結(jié)WBC誤差：,白細(xì)胞聚集導(dǎo)致白細(xì)胞減少 紅細(xì)胞溶血不良導(dǎo)致白細(xì)胞假性增高 有核紅存在導(dǎo)致白細(xì)胞假性增高,21,PPT學(xué)習(xí)交流,RBC,22,PPT學(xué)習(xí)交流,Q6:血象有何特點(diǎn)？下一步如何處理？,23,PPT學(xué)習(xí)交流,24,PPT學(xué)習(xí)交流,血常規(guī)特點(diǎn)：,1.RBC數(shù)減少；HCT假性減低 2.MCH、MCHC增高；,對(duì)策：,1.37C水浴15min后 2.對(duì)于嚴(yán)重凝集，采用血漿置換,病例-紅細(xì)胞凝集,25,PPT學(xué)習(xí)交流,該標(biāo)本鏡檢圖像,該標(biāo)本鏡檢：高倍視野下可見大量RBC聚集,26,PPT學(xué)習(xí)交流,討論： 對(duì)于冷凝集素效價(jià)較的標(biāo)本，可以采用熱水浴，的方法進(jìn)行糾正；對(duì)于冷

7、凝集素效價(jià)較高的標(biāo)本，可先進(jìn)行熱水浴，然后上機(jī)測(cè)定標(biāo)本，可獲得 和值；再進(jìn)行置換血漿，可獲得、紅細(xì)胞比容、血紅蛋白、和各值,27,PPT學(xué)習(xí)交流,總結(jié)RBC干擾：,1.紅細(xì)胞凝集導(dǎo)致紅細(xì)胞假性減少 2.巨大血小板導(dǎo)致紅細(xì)胞假性增多,28,PPT學(xué)習(xí)交流,PLT,29,PPT學(xué)習(xí)交流,Q7:為什么血小板計(jì)數(shù)差異這么大？,某病人，男性，藥物過敏，體表有出血點(diǎn)查血常規(guī)：嗜酸細(xì)胞30%， PLT 263109/L（阻抗法）。鏡下核查嗜酸細(xì)胞時(shí)發(fā)現(xiàn)：有大量細(xì)胞碎片，血小板不多見 重新用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)血小板為：35109/L,30,PPT學(xué)習(xí)交流,細(xì)胞碎片干擾,細(xì)胞碎片或大量小紅細(xì)胞 (MCV 60 fl)

8、與血小板體積接近 PLT 假性增高，與臨床不符 影響 RBC 結(jié)果，與臨床不符 異常 RBC 直方圖和異常 PLT 直方圖,31,PPT學(xué)習(xí)交流,細(xì)胞碎片和大量小紅細(xì)胞,“異常 PLT 直方圖” 和 “異常 RBC 直方圖” PLT 計(jì)數(shù)通過以下方式糾正! 計(jì)數(shù)池計(jì)數(shù) 顯微鏡瀏覽評(píng)估 光學(xué)法測(cè)定PLT計(jì)數(shù),注: 當(dāng)PLT 和 RBC 不能被清晰分離時(shí)就會(huì)發(fā)生! PLT 計(jì)數(shù)可能有偏差 (高或低),32,PPT學(xué)習(xí)交流,紅細(xì)胞碎片對(duì)血小板計(jì)數(shù)的干擾結(jié)果報(bào)告,XN 以PLT-F結(jié)果為最終報(bào)告結(jié)果,33,PPT學(xué)習(xí)交流,Q8：某血小板減少癥患者，藥物治療后復(fù)查血小板為19109/L（阻抗法），臨床醫(yī)

9、生疑惑為什么一直治療無效果？,34,PPT學(xué)習(xí)交流,巨大血小板,血小板板齡越小，體積越大 巨大血小板與紅細(xì)胞體積接近 單純的體積測(cè)定 (阻抗法) 使PLT 計(jì)數(shù)偏低,35,PPT學(xué)習(xí)交流,巨大血小板,分析： 1、在WNR和WDF通道上，由于大血小板形成出現(xiàn)的異常散點(diǎn)圖（）。 2、PLT-I 比PLT-F低，同時(shí)報(bào)警出現(xiàn)血小板直方圖異常。 3、在IPF散點(diǎn)圖綠色區(qū)域出現(xiàn)大量散點(diǎn)，同時(shí)IPF升高到22.2%，推測(cè)有大血小板。,鏡下見到多個(gè)體積大小為 2個(gè)紅細(xì)胞的巨大血小板。,門診病例，血小板減少,IPF,36,PPT學(xué)習(xí)交流,巨大血小板解決方法：,RET 通道: 光學(xué)法檢測(cè)血小板就可避免干擾（ P

10、LT-O） PLT-F通道： 針對(duì)血小板線粒體DNA染色，特異性更高,網(wǎng)織血小板）,SFL,FSC,FSC,37,PPT學(xué)習(xí)交流,Q9：思考為何會(huì)出現(xiàn)此現(xiàn)象？,某醫(yī)院做血常規(guī)時(shí)發(fā)現(xiàn)一例PLT僅47109/L，半小時(shí)后儀器再次復(fù)查PLT，為180109/L 因使用流水線，前一份樣本符合推片規(guī)則已推片，鏡下觀察該血片，可見較多成簇的血小板。,38,PPT學(xué)習(xí)交流,血小板聚集解離現(xiàn)象,39,PPT學(xué)習(xí)交流,Q10：某標(biāo)本，XNA1機(jī)型檢測(cè)，首次結(jié)果，PLT 23*109/L，思考下一步如何處理？,40,PPT學(xué)習(xí)交流,41,PPT學(xué)習(xí)交流,42,PPT學(xué)習(xí)交流,EDTA-K2依賴血小板聚集,分析：

11、1、PLT減低；報(bào)警信息提示PLT Clumps?(血小板聚集)，報(bào)警更靈敏； 2、在WNR, WDF 、PLT直方圖有聚集報(bào)警（）； 3、PLT-F通道，散點(diǎn)圖增加了FSCW（前向散色光分布寬度），F(xiàn)SCW()擴(kuò)展是血小板聚集的明顯特征。,43,PPT學(xué)習(xí)交流,EDTA-K2依賴血小板聚集,對(duì)策： 用其他的抗凝劑（枸掾酸鈉）采血來鑒別是否由于抗凝不良造成的。 同時(shí)比較EDTA抗凝和枸掾酸鹽抗凝結(jié)果是證明EDTA依賴性假性血小板減少癥病例的重要方法，可以排除采血錯(cuò)誤的原因。放置30min后，檢測(cè),推薦抗凝方法： 用10倍濃度的EDTA(10mg/ml以上)采血 EDTA+桔櫞酸(10:1) 桔

12、櫞酸鈉(3.13%、3.8%) 肝素(65IU) MgSO4(14%) 預(yù)稀釋模式進(jìn)行檢測(cè),44,PPT學(xué)習(xí)交流,血常規(guī)特點(diǎn)：,1.PLT計(jì)數(shù)假性偏低 2.有懷疑類報(bào)警血小板聚集,對(duì)策：,1.更換枸緣酸鹽抗凝劑，若凝集現(xiàn)象消除，證明原抗凝不良。 2.用干試管采血并且推片,病例-EDTA-K2依賴血小板聚集,45,PPT學(xué)習(xí)交流,更換枸緣酸鹽抗凝劑后結(jié)果為220*109/L,46,PPT學(xué)習(xí)交流,討論： 在EDTA 依賴性假性血小板減少患者抽取后 1 h 的抗 凝血樣本中加入 6 . 5 m g / m l 丁胺卡那霉素能有效地 解離凝集的血小板, 并可進(jìn)行準(zhǔn)確計(jì)數(shù), 同時(shí)不影響其他主要血常規(guī)參

13、數(shù)的測(cè)定。,47,PPT學(xué)習(xí)交流,影響PLT檢測(cè)的常見因素,1.小紅細(xì)胞及紅細(xì)胞碎片對(duì)PLT檢測(cè)的干擾：儀器在35-2 50fl的范圍內(nèi)分析紅細(xì)胞,正常紅細(xì)胞主要分布在50150fl范圍內(nèi)，當(dāng)RBC體積小于35fL 會(huì)干擾PLT計(jì)數(shù)；RBC碎片會(huì)使計(jì)數(shù)假性增高。 2.EDTA誘導(dǎo)假性血小板減少：由標(biāo)本內(nèi)特殊蛋白質(zhì)與EDTA抗凝劑發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生血小板聚 3.大血小板增多至計(jì)數(shù)減少：PLT正常直徑約24m，在病理情況下，特別是巨核系統(tǒng)病態(tài)造血(如MDS)，會(huì)出現(xiàn)大量的大血小板、甚至巨大血小板。,48,PPT學(xué)習(xí)交流,影響PLT檢測(cè)的常見因素,4.采樣技術(shù)的影響 5.PLT衛(wèi)星現(xiàn)象所致假性血小板減少

14、：PLT在體外黏附與成熟中性分葉核粒細(xì)胞周圍的現(xiàn)象?？赡芘c自身免疫、血小板反應(yīng)素等有關(guān)。 6.冷球蛋白血癥:冷球蛋白是免疫球蛋白，在溫度低于37C時(shí)會(huì)產(chǎn)生沉淀,49,PPT學(xué)習(xí)交流,解決方案,血小板特殊顆粒 (顆粒-特異性蛋白質(zhì)),線粒體(DNA),PLT,RBC,利用PLT-F專用試劑明顯染色的細(xì)胞與血小板特異抗原（CD41）陽性細(xì)胞一致,下層的紅細(xì)胞碎片只有細(xì)胞膜被輕度染色.同時(shí)再根據(jù)前向散射光所代表的細(xì)胞大小信息，能夠清晰地區(qū)別血小板和紅細(xì)胞碎片,50,PPT學(xué)習(xí)交流,異常值-最容易出臨床差錯(cuò)的臨檢項(xiàng)目之一,低值PLT,PLT （低值PLT通道PLT-F）,51,PPT學(xué)習(xí)交流,Keio

15、 University Hospital,All sample （n=100),Low PLT samples (50 x 109/L),52,PPT學(xué)習(xí)交流,53,PPT學(xué)習(xí)交流,WBC （WPC、低值WBC模式）,異常值-最容易出臨床差錯(cuò)的臨檢項(xiàng)目之二,低值WBC,54,PPT學(xué)習(xí)交流,重現(xiàn)性,新鮮血液 CBC + DIFF + WPC + RET + PLT-F LW mode and WB mode,低值白細(xì)胞模式檢測(cè)精度較全血模式高,田中雄三(東海大學(xué)醫(yī)院)：Sysmex Journal Vol.34 Suppl.2 2011,3倍計(jì)數(shù)，令LW模式結(jié)果更準(zhǔn)確,55,PPT學(xué)習(xí)交流,Q:如何減少試驗(yàn)誤差？,56,PPT學(xué)習(xí)交流,儀器的自動(dòng)復(fù)檢功能-3R,3R是指XN系列的三個(gè)復(fù)檢方式 儀器可以根據(jù)規(guī)則判定結(jié)果，執(zhí)行Repeat分析、Rerun