DNA瓊脂糖凝膠電泳制備全過程圖解ppt課件_第1頁
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文檔簡介

DNA瓊脂糖凝膠電泳,1,實驗原理,瓊脂糖為鏈狀多糖 繩狀瓊脂糖束大網(wǎng)孔型 凝膠 分離、鑒定、純化DNA 影響DNA遷移率的因素：DNA分子的大小、構(gòu) 象，凝膠濃度，電壓，電泳緩沖液的組成 緩沖液pHDNA Pi，DNA帶負(fù)電荷，遷移率與 分子量對數(shù)成反比 DNA分子構(gòu)象影響遷移率：共價閉環(huán)DNA線 狀DNA開環(huán)DNA,2,不同濃度瓊脂糖分離DNA分子的范圍,瓊脂糖濃度（%） 分離范圍（kb） 0.3 5-60 0.6 1-20 0.7 0.8-10 0.9 0.5-7 1.2 0.4-6 1.5 0.2-4 2.0 0.1-3,3,瓊脂糖凝膠中DNA的觀察,溴化乙錠（EB）DNA：紫外光下 紅色熒光,4,主要實驗器材,5,電泳槽結(jié)構(gòu),6,操作步驟,瓊脂糖凝膠的制備：溶化，冷卻，EB 凝膠板的制備：加梳子，倒膠 樣品的制備：樣品+1/5體積溴酚藍(lán) 加樣：加樣端為負(fù)極（黑） 電泳：5V/cm 觀察：紫外燈下觀察，照相,7,溶 膠,8,準(zhǔn)備膠槽,9,凝膠冷卻至50C，加EB至終濃度0.5g/ml,10,鋪 膠,11,凝膠凝固后取出梳子,12,加緩沖液,13,準(zhǔn)備樣品,14,點 樣,15,電 泳,16,注意觀察溴酚藍(lán)染液的

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