第1章+組織學(xué)緒論(1).ppt

1、組胚教研室 高福蓮教授 電話-mail:,組織學(xué)與胚胎學(xué) Histology and Embryology,開設(shè)方式,理論課54學(xué)時(shí)，周24學(xué)時(shí)。 實(shí)驗(yàn)課18學(xué)時(shí)，第45教學(xué)周開始。 請(qǐng)關(guān)注教學(xué)進(jìn)度,第16教學(xué)周結(jié)束。,Introduction of Histology,組織學(xué)與胚胎學(xué),組織學(xué)緒論,內(nèi)容簡(jiǎn)介,課本 組織學(xué)的內(nèi)容和意義 組織學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史和當(dāng)代組織學(xué) 組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法 組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介,本節(jié) 組織學(xué)的內(nèi)容 組織學(xué)的意義 組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介 組織學(xué)的學(xué)習(xí) 方法,組織學(xué)的內(nèi)容,組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介,一、組織學(xué)的內(nèi)容,組織學(xué)（histology）是研究機(jī)體微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功

2、能的科學(xué)。,借助顯微鏡,顯微解剖學(xué),結(jié)構(gòu),功能,二、組織學(xué)意義,結(jié)構(gòu)是功能的基礎(chǔ)，組織學(xué)的發(fā)展促進(jìn)生理學(xué)的進(jìn)步，為生理學(xué)的學(xué)習(xí)打下良好基礎(chǔ)。 疾病的判斷必須以正常為參照，良好的組織學(xué)知識(shí)為病理學(xué)的學(xué)習(xí)打下基礎(chǔ)。,三、組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介,光鏡技術(shù) 電鏡技術(shù) 組織化學(xué)術(shù) 一般組織化學(xué)術(shù) 免疫組織化學(xué)術(shù) 原位雜交術(shù) 放射性自顯影術(shù) 圖像分析術(shù) 體視學(xué) 組織培養(yǎng)術(shù)和組織工程,（一）離體標(biāo)本制備 1.光電鏡技術(shù),離體標(biāo)本缺陷 變腐 柔軟 大塊 無(wú)色,涂 鋪 磨 切,染色,冷凍蝕刻復(fù)型,冷凍斷裂,適應(yīng)觀察對(duì)策,2.組織化學(xué)術(shù)（histochemistry） 顯示化學(xué)成分,（1）一般組織化學(xué) 在組織切片上加某種

3、試劑，和組織中的待檢物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，借助觀察最終產(chǎn)物，對(duì)待檢物定位的方法。 有色沉淀 光鏡觀察 最終產(chǎn)物 重金屬鹽 電鏡觀察,（2）免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry） 利用抗原和抗體結(jié)合的原理，用標(biāo)記的 抗體檢測(cè)組織中肽和蛋白質(zhì)的技術(shù)。,抗體的標(biāo)記物 熒光素 辣根過氧化物酶 膠體金,光鏡或電鏡,熒光顯微鏡,電鏡,免疫組織化學(xué)（熒光素標(biāo)記）,免疫組織化學(xué)（辣根過氧化物酶標(biāo)記）,免疫組織化學(xué)電鏡像,（A 膠體金標(biāo)記 B 辣根過氧化物酶標(biāo)記）,（3）原位雜交術(shù)（in situ hybridization) 用帶有標(biāo)記物的已知堿基順序的核酸探針,與細(xì)胞內(nèi)待檢的核酸按堿基配對(duì)的原則

4、進(jìn)行特異性結(jié)合,即雜交,然后通過對(duì)標(biāo)記物的顯示和檢測(cè),而獲知待測(cè)核酸的有無(wú)及相對(duì)量的方法。 堿基的標(biāo)記物 放射性核素 放射自顯影 （涂感光乳膠、暗處曝光 、顯影、定影） 地高辛 免疫組織化學(xué)術(shù),銀粒所在,原位雜交,3.組織定量技術(shù),顯微分光光度術(shù) 通過測(cè)定組織化學(xué)術(shù)中最終顯示物的強(qiáng)度，獲得定量信息的技術(shù)。 圖像分析術(shù)（image analysis） 又稱形態(tài)計(jì)量術(shù)，是應(yīng)用數(shù)學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)原理對(duì)組織切片提供的平面圖像進(jìn)行分析，從而獲得立體狀態(tài)組織和細(xì)胞內(nèi)各有形成分的數(shù)量、體積和表面積等參數(shù)的技術(shù)。 體視學(xué)（stereology） 從組織平面圖像，研究三維立體結(jié)構(gòu)的學(xué)科。,圖像分析儀,計(jì)算機(jī)三維重建,

5、（二）活體組織的研究,1.放射自顯影術(shù)（autoradiography） 利用放射性核素的可觀察和顯示性，研究放射性物質(zhì)在組織或細(xì)胞內(nèi)消長(zhǎng)分布的變化來(lái)顯示細(xì)胞的功能狀態(tài)或該物質(zhì)在組織和細(xì)胞內(nèi)的代謝過程的方法。 將放射性核素或放射性核素標(biāo)記的物質(zhì)注入體內(nèi)，有規(guī)律地間斷取材、制片，放射性自顯影，光鏡或電鏡觀察。,放射自顯影像(3H-TdR摻入),2.細(xì)胞培養(yǎng)術(shù)（cell culture） 把機(jī)體細(xì)胞在體外模擬體內(nèi)的條件下進(jìn)行培養(yǎng)的技術(shù)。不僅可用于研究其代謝、增殖、分化、形態(tài)和功能變化，還可研究各種理化因子對(duì)活細(xì)胞的直接影響。 組織培養(yǎng)術(shù)、器官培養(yǎng)術(shù) in vitro 原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng) 細(xì)胞系（c

6、ell line） 細(xì)胞株（cell strain）,培養(yǎng)細(xì)胞的倒置顯微鏡圖像,培養(yǎng)細(xì)胞的倒置相差顯微鏡圖像,3.組織工程（tissue engineering） 用細(xì)胞培養(yǎng)術(shù)在體外模擬構(gòu)建機(jī)體組織或器官的技術(shù)。,實(shí)驗(yàn)中的組織工程耳,四、組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法,基本知識(shí)相互聯(lián)系、相互對(duì)比、分析記憶 用已有的知識(shí)去理解記憶新知識(shí) 結(jié)構(gòu)和功能的聯(lián)系 結(jié)構(gòu)的直觀化充分發(fā)揮觀察能力 借助插圖、照片和圖譜等，理解記憶結(jié)構(gòu) 立體和切面的關(guān)系,立體與切面的關(guān)系,典型結(jié)構(gòu)：能反映立體結(jié)構(gòu)特征的切面。,教學(xué)參考資料,圖譜 彩色、 黑白、電鏡結(jié)構(gòu) 教科書 1-5版本、?？平滩牡?專著 組織學(xué)1-2版 練習(xí)題,授課教師e

7、-mail 教研室網(wǎng)址 網(wǎng)上學(xué)習(xí),實(shí)驗(yàn)講授課件網(wǎng)上瀏覽方法,網(wǎng)址: 本科實(shí)驗(yàn) 組織學(xué)與胚胎學(xué)課件 所需學(xué)習(xí)課件 在線瀏覽或下載,理論講授課件網(wǎng)上瀏覽方法,新醫(yī)校園網(wǎng)主頁(yè) 網(wǎng)上教學(xué) 登陸 用戶名和密碼均為您的學(xué)號(hào) 首次登陸后應(yīng)修改您的密碼 組織學(xué)與胚胎學(xué) 課堂講授課件項(xiàng) 所需學(xué)習(xí)課件 在線瀏覽 范圍：本人所教授的各班同學(xué),一、研究?jī)?nèi)容 二、學(xué)習(xí)組織學(xué)的意義 三、組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介 四、組織學(xué)學(xué)習(xí)方法,小結(jié),離體組織的制備 光電鏡技術(shù) 顯示化學(xué)成分的方法 組織定量技術(shù) 顯微分光光度術(shù) 圖像分析術(shù) 體視學(xué) 活體組織的研究 放射性自顯影術(shù) 細(xì)胞培養(yǎng)術(shù) 組織工程,光鏡技術(shù) 電鏡技術(shù) 組織化學(xué)術(shù) 一般組織化學(xué)

8、術(shù) 免疫組織化學(xué)術(shù) 原位雜交術(shù) 圖像分析術(shù) 放射性自顯影術(shù) 細(xì)胞培養(yǎng)術(shù)和組織工程,思考題,組織標(biāo)本制備中，離體組織的缺陷和克服對(duì)策是什么？ 顯示組織結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分的染色方法的異同？ 用什么技術(shù)可以在掃描電鏡下看組織內(nèi)部結(jié)構(gòu)？ 用什么技術(shù)可以在透射電鏡下看組織內(nèi)部的立體狀態(tài)？,下次課程內(nèi)容,上皮組織,See you later,See you later,組織學(xué)與胚胎學(xué),組織學(xué)緒論,（一）顯微鏡,光學(xué)顯微鏡 （light microscope，LM） 電子顯微鏡 （electron microscope，EM）,普通光學(xué)顯微鏡,熒光顯微鏡,相差顯微鏡,透射電鏡,掃描電鏡,光學(xué)顯微鏡（light

9、microscope） 普通顯微鏡 熒光顯微鏡 相差顯微鏡 電子顯微鏡（electron microscope） 透射電子顯微鏡（transmission EM） 掃描電子顯微鏡 （scanning EM）,（一）顯微鏡,1mm=103m=106nm 光鏡所見放大數(shù)以千計(jì) 電鏡所見放大數(shù)以萬(wàn)計(jì),顯微鏡不同，所見結(jié)構(gòu)大小不一 種類 結(jié)構(gòu) 分辨率 度量單位 光學(xué) 光鏡結(jié)構(gòu) 0.2m m （light structure） 電子 超微結(jié)構(gòu) 0.2nm nm （ ultrastructure）,（二）結(jié)構(gòu),分子 亞細(xì)胞 細(xì)胞 組織 器官 系統(tǒng),生物大分子包括核酸、蛋白質(zhì)、多糖和脂,細(xì)胞器等超微結(jié)構(gòu),細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核等,上皮、結(jié)締、肌組織和神經(jīng)組織,肝、胃等,消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)等,光鏡標(biāo)本制作程序 石蠟包埋切片技術(shù),透射電鏡標(biāo)本制作,顯示光鏡結(jié)構(gòu)的常用染色法,蘇木精-伊紅染色 (hematoxylin-eosin staining),簡(jiǎn)稱HE染色 染料 組織 名稱 化學(xué)性質(zhì) 色彩 化學(xué)性質(zhì) 嗜好 著色部位 蘇木精 堿 藍(lán) 酸 嗜堿性 細(xì)胞核 大量核糖體 伊紅 酸 紅 堿 嗜酸性 大部分成分 特殊染色 如硝酸銀、甲苯胺藍(lán)、醛復(fù)紅等 活體染色 臺(tái)盼藍(lán)活體注射,電子顯微鏡染色用重金屬鹽 重金屬鹽 醋酸鈾和檸檬酸鉛,電子顯微鏡染色結(jié)果,黑