天然藥物化學的結構解析-研究生.ppt

1、天然藥物的結構解析,前 言： 天然藥物單體化合物的結構表征(即測定) 從分子水平認識物質的基本手段，是天然藥物化學的重要組成部分。過去，主要依靠化學方法進行各類型有機化合物的結構測定, 其缺點是：費時、費力、費錢，需要的樣品量大。例如：鴉片中嗎啡堿結構的測定，從1805年開始研究，直至1952年才完全闡明，歷時147年。,而現(xiàn)在的結構測定，則采用現(xiàn)代儀器分析法，其優(yōu)點是：省時、省力、省錢、快速、準確，樣品消耗量是微克級的，甚至更少。它不僅可以研究分子的結構，而且還能探索到分子間各種集聚態(tài)的結構構型和構象的狀況，對人類所面臨的生命科學、材料科學的發(fā)展，是極其重要的。,Palytoxin,結構研究

2、的主要程序,U=IV-I/2+III/2+1,初步推斷化合物類型,測定分子式，計算不飽和度,確定官能團或結構片斷或基本骨架,推斷并確定分子平面結構,推斷并確定分子的主體結構,元素定量分析配合分子量測定 同位素豐度比法 HR-MS,UV、IR、MS、NMR,文獻,CD、ORD、NOE、2D-NMR、X-ray,核磁共振儀,核磁共振譜,一、基本原理,1. 原子核的自旋 核象電子一樣，也有自旋現(xiàn)象，從而有自旋角動量。,核的自旋角動量()是量子化的，不能任意取值， 可用自旋量子數(I)來描述。,I0、1/2、1,I = 0， =0， 無自旋，不能產生自旋角動量，不會 產生共振信號。, 只有當I O時，

3、才能發(fā)生共振吸收，產生共振 信號。,I 的取值可用下面關系判斷：,質量數（A） 原子序數（Z） 自旋量子數（I）,奇 數 奇數或偶數 半整數 n + 1/2。n = 0,1,2,奇 數 整 數,偶 數,偶 數 0,例如：,常見的NMR譜有：1H 13C 15N 19F,取向數 = 2 I + 1 （在沒有外電場時，自旋核的取向是任意的）。,1. 化學位移的由來 屏蔽效應 化學位移是由核外電子的屏蔽效應引起的。,二、化學位移 定義：在照射頻率確定時，同種核因在分子中的化學環(huán)境不同而在不同共振磁場強度下顯示吸收峰的現(xiàn)象稱為化學位移。因此一個質子的化學位移是由其周圍的電子環(huán)境決定的。,H核在分子中不

4、是完全裸露的，而是被價電子所包圍的。因此，在外加磁場作用下，由于核外電子在垂直于外加磁場的平面繞核旋轉，從而產生與外加磁場方向相反的感生磁場H。這樣，H核的實際感受到的磁場強度為：,若質子的共振磁場強度只與(磁旋比)、電磁波照射頻率v有關，那么，試樣中符合共振條件的1H都發(fā)生共振，就只產生一個單峰,這對測定化合物的結構是毫無意義的。實驗證明：在相同的頻率照射下，化學環(huán)境不同的質子將在不同的磁場強度處出現(xiàn)吸收峰。,式中：為屏蔽常數,核外電子對H核產生的這種作用，稱為屏蔽效應(又稱抗磁屏蔽效應)。,顯然，核外電子云密度越大，屏蔽效應越強，要發(fā) 生共振吸收就勢必增加外加磁場強度，共振信號將移向高場區(qū)

5、；反之，共振信號將移向低場區(qū)。,因此，H核磁共振的條件是：,2. 化學位移的表示方法,化學位移的差別約為百萬分之十，精確測量十分困難，現(xiàn)采用相對數值。以四甲基硅（TMS）為標準物質，規(guī)定：它的化學位移為零，然后，根據其它吸收峰與零點的相對距離來確定它們的化學位移值。,零點,-1,-2,-3,1,2,3,4,5,6,6,7,8,9,化學位移用表示，以前也用表示， 與的關系為： = 10 - ,TMS,低場,高場,核磁共振氫譜圖示,為什么選用TMS(四甲基硅烷)作為標準物質? (1)屏蔽效應強，共振信號在高場區(qū)(值規(guī)定為0)，絕大多數吸收峰均出現(xiàn)在它的左邊。 (2)結構對稱，是一個單峰。 (3)容

6、易回收(b.p低)，與樣品不反應、不締合。,三、影響化學位移的因素 凡影響電子云密度的因素都將影響化學位移。其中,影響最大的是：誘導效應和各向異性效應。,(1)電負性的影響：,元素的電負性，通過誘導效應，使H核的核外電子 云密度，屏蔽效應，共振信號低場。例如：,(2)磁各向異性效應：因化學鍵的鍵型不同，導致與其相連的氫核的化學位移不同。,A.雙鍵碳上的質子,烯烴雙鍵碳上的質子位于鍵環(huán)流電子產生的感生 磁場與外加磁場方向一致的區(qū)域（稱為去屏蔽區(qū)），去 屏蔽效應的結果，使烯烴雙鍵碳上的質子的共振信號移,向稍低的磁場區(qū)，其 = 4.55.7。,同理，羰基碳上的H質子與烯烴雙鍵碳上的H質子相似，也是處

7、于去屏蔽區(qū)，存在去屏蔽效應，但因氧原子電負性的影響較大，所以，羰基碳上的H質子的共振信號出現(xiàn)在更低的磁場區(qū)，其=9.410。,B.三鍵碳上的質子：,碳碳三鍵是直線構型， 電子云圍繞碳碳鍵呈筒型分 布，形成環(huán)電流，它所產生的 感應磁場與外加磁場方向相反， 故三鍵上的H質子處于屏蔽區(qū)， 屏蔽效應較強，使三鍵上H質 子的共振信號移向較高的磁場 區(qū)，其= 23。,3.55 3.75 1.77 2.31,濃度對值的影響,(CH3CH2OH/CCl4: a, 10%; b, 5%; c, 0.5%),Ha = 0.76ppm, Hb = 1.15ppm,共軛效應,小結：,特征質子的化學位移值,1,0,2,

8、3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,C3CH C2CH2 C-CH3 環(huán)烷烴,0.21.5,CH2Ar CH2NR2 CH2S CCH CH2C=O CH2=CH-CH3,1.73,CH2F CH2Cl CH2Br CH2I CH2O CH2NO2,24.7,0.5(1)5.5,68.5,10.512,CHCl3 (7.27),4.65.9,910,OH NH2 NH,CR2=CH-R,RCOOH,RCHO,常用溶劑的質子的化學位移值,D,四、決定質子數目的方法,吸收峰的峰面積，可用自動積分儀對峰面積進行自 動積分，畫出一個階梯式的積分曲線。,峰面積的大小與質子數目成正比。,峰

9、面積高度之比 = 質子個數之比。,五、共振吸收峰（信號）的數目 一個化合物究竟有幾組吸收峰，取決于分子中H核 的化學環(huán)境。,有幾種不同類型的H核，就有幾組吸收峰。,例如：,低分辨率譜圖,化學等價,分子中若有一組核，其化學位移嚴格相等，則這組核稱為彼此化學等價的核。例如CH3CH2Cl中的甲基三個質子，它們的化學位移相等，為化學等價質子，同樣亞甲基的二個質子也是化學等價的質子。,例1：CH3-O-CH3 一組NMR 信號 例2：CH3-CH2-Br 二組NMR信號例3：(CH3)2CHCH(CH3)2 二組NMR 信號 例4：CH3-CH2COO-CH3 三組NMR 信號,處于相同化學環(huán)境的原子

10、 化學等價原子 化學等價的質子其化學位移相同，僅出現(xiàn)一組NMR 信號。 化學不等價的質子在 NMR 譜中出現(xiàn)不同的信號組。,化學等價質子與化學不等價質子的判斷,- 可通過對稱操作(對稱軸Cn，對稱平面，對稱中心)或快速機制（如構象轉換）互換的質子是化學等價的。 - 不可通過對稱操作或快速機制（構象轉換）互換的質子是化學不等價的。 - 與一個手性碳原子相連的 CH2 上的兩個質子是化學不等價的。,化學等價質子與化學不等價質子的判斷,六、自旋偶合與自旋裂分 。,產生的原因：,相鄰的磁不等 性H核自旋相互作 用（即干擾）的結 果。這種原子核之,間的相互作用，叫做自旋偶合。由自旋偶合引起的譜線 增多的

11、現(xiàn)象，叫做自旋裂分。,偶合表示核的相互作用，裂分表示譜線增多的現(xiàn)象。,現(xiàn)以CH3CH2I為例，討論自旋偶合與自旋裂分作用：,自旋偶合與自旋裂分規(guī)律,1H在磁場中有兩種自旋取向 表示氫核與磁場方向一致. 表示氫核與磁場方向相反. 乙基中-CH2的氫可以與磁場方向相同,也可與磁場方向相反.兩個氫自旋組合共有四種(、）,產生三種局部磁場。,亞甲基所產生的三種局部磁場，影響鄰近甲基上的質子所受到的磁場作用。 和兩種狀態(tài)產生的磁場恰好相互抵消，不影響甲基的質子共振峰。 狀態(tài)磁矩與外磁場一致，相當于-CH3上H處于去屏蔽區(qū)，發(fā)生共振時所需磁場比小，出現(xiàn)在較低場。 狀態(tài)磁矩與外磁場相反，相當于-CH3上H處

12、于屏蔽區(qū)，發(fā)生共振時所需磁場比大，出現(xiàn)在較高場。,因此，-CH2的兩個1H產生的三種不同的局部磁場，使鄰近的甲基質子分裂為三重峰。 由于上述四種自旋組合概率相同。因此，三重峰相對面積比為：1:2:1。 同理，甲基上三 個氫產生四種不同的 局部磁場，反過來使 鄰近亞甲基峰分裂為 四重峰，根據概率關 系，可知其面積比近 僅為1:3:3:1。(如圖),峰的數目 = n + 1 n：為相鄰H核的數目,當某組質子有n個相鄰的化學等價質子時，這組質子的吸收峰將裂分成n +1重峰。n數 二項式展開式系數 峰形0 1 單峰 s 1 1 1 二重峰 d2 1 2 1 三重峰 t3 1 3 3 1 四重峰 q4

13、1 4 6 4 1 五重峰 m 5 1 5 10 10 5 1 六重峰 嚴格的一級譜才符合上述公式 vJ,七、偶合常數,每組吸收峰內各峰之間的距離，稱為偶合常數，以Jab表示。下標ab表示相互偶合的磁不等性H核的種類。,偶合常數的單位用Hz表示。偶合常數的大小與外加磁場強度、使用儀器的頻率無關。,值得注意的是：,自旋偶合與相互作用的兩個H核的相對位置有關，,當相隔單鍵數3時，可以發(fā)生自旋偶合，相隔三個以上單鍵，J 值趨于0，即不發(fā)生偶合。,磁等性H核之間不發(fā)生自旋裂分。如CH3CH3只有一個單峰。,氫裂分的表示、耦合常數的計算,單峰（s） CH3Cl CH3OCH3 雙峰 （d） CH3CHC

14、l2 三重峰（t） CH3CH2OH 四重峰（q) CH3CH2OH,dd峰 Cl2CHCH2CH=O dt峰 Cl2CHCH2CH2 其他：dq，ddd，dddd等,d峰：(6.2505-6.2295)*400=8.4 Hz,Cl2CHCH2CH=O,同碳質子的偶合常數（2J，J同） 以2J或J同表示，2J一般值較大 （大于10），但雙鍵耦合常數只有02 Hz。 影響2J的因素主要有：取代基電負性會使2J的絕對值。對于脂環(huán)化合物，環(huán)上同碳質子的2J值會隨鍵角的增加而減小。,鄰碳質子的偶合常數（3J, J鄰）,3J 的大小與二面角、取代基電負性、鍵長、鍵角等因素有關。,3J與二面角的關系,3J

15、與二面角的關系： JaaJaeJee 若鄰碳二氫皆處于直立鍵位置，則其對應的二面角約為180，JaaJ180；若鄰碳二氫分別處于直立鍵和平伏鍵位置，則其對應的二面角約為60，若鄰碳二氫皆處于平伏鍵位置，則其對應的二面角約為60，JaeJeeJ60,飽和型鄰位偶合常數,在飽和化合物中，通過三個單鍵（H-C-C-H）的偶合叫飽和型鄰位偶合。開鏈脂肪族化合物由于鍵自由旋轉的平均化，使3J數值約為7Hz。,烯型鄰位偶合常數,烯氫的鄰位偶合是通過二個單鍵和一個雙鍵（H-C=C-H）發(fā)生作用的。由于雙鍵的存在，反式結構的雙面夾角約為180o，順式結構的雙面夾角為0o，因此J反大于J順.,反式烯鍵氫原子J=

16、1220(16) 順式烯鍵氫原子J=812(10),芳氫的偶合常數,芳環(huán)氫的偶合可分為鄰(3J, J鄰)、間(4J, J間) 、對(5J, J對)位三種偶合，偶合常數都為正值， 鄰位偶合常數比較大，一般為6.09.4 Hz(三鍵)， 間位為0.83.1Hz（四鍵）， 對位小于0.59Hz（五鍵）。 一般情況下，對位偶合不易表現(xiàn)出來。苯環(huán)氫被取代后，特別是強拉電子或強推電子基團的取代，使苯環(huán)電子云分布發(fā)生變化，表現(xiàn)出J鄰、J間和J對的偶合，使苯環(huán)質子吸收峰變成復雜的多重峰。,遠程偶合,超過三個鍵的偶合稱為遠程偶合(long-range coupling)，如芳烴的間位偶合和對位偶合都屬于遠程偶合

17、。遠程偶合的偶合常數都比較小，一般在03Hz之間。常見的遠程偶合有下列幾種情況： (1)丙烯型偶合 (2)高丙烯偶合 (3)累積不飽和體系,(4) W（M）型偶合,6 自旋系統(tǒng)及圖譜分類,6.1 核的等價性質 6.2 自旋系統(tǒng)的分類 6.3 圖譜的分類 6.4 幾種常見的自旋系統(tǒng),6.1 核的等價性質 化學等價：化學位移嚴格相等的核稱為化學等價核， 化學位移相同的原子核。 磁等價：一組核對組外任何核表現(xiàn)出相同大小的偶合 作用，即只表現(xiàn)出一個偶合常數，這組核稱為磁等價核。 磁全同：既化學等價又磁等價的原子核，稱為磁全同核 。,磁不等價的情況,1. 單鍵帶有雙鍵性時會產生磁不等價質子， R-CO-

18、N(CH2CH3)2, 2個CH2 會出現(xiàn)2組四重峰， 2個CH3會出現(xiàn)復雜的多重峰（ 2組三重峰的重疊） 2. 雙鍵同碳質子具有磁不等價性 H2C=CHR 3. 單鍵不能自由旋轉時，也會產生磁不等價質子，BrCH2CH(CH3)2 有三種構象，室溫下C-C快速旋轉，CH2上2個質子是等價的，但在低溫下C-C不能快速旋轉， CH2上2個質子所處的環(huán)境有差別而成為不等價質子。,4. 與不對稱碳相連的CH2, 2個質子是磁不等價的 5. 固定在環(huán)上的CH2, 2個質子是磁不等價，甾體環(huán)，三萜環(huán)等。 6. 苯環(huán)上化學環(huán)境相同的質子可能磁不等價,6.2自旋系統(tǒng)的分類,自旋系統(tǒng)的定義 通過自旋-自旋偶合

19、聯(lián)系起來的若干組磁性等同核，構成一個自旋系統(tǒng)。系統(tǒng)內部的核互相偶合，但不和系統(tǒng)外的任何核相互作用。系統(tǒng)與系統(tǒng)之間是隔離的.,自旋系統(tǒng)的命名,分子中兩組相互干擾的核，它們之間的共振頻率差小于或近似于偶合常數 J 時，則這些共振頻率近似的核分別以A、B、C字母表示。若其中某種類的磁全同的核有幾個，則在核字母的右下方用阿拉伯字母寫上標記，如Cl-CH2-CH2-COOH中間二個CH2構成A2B2系統(tǒng)。 分子中兩組互相干擾的核，它們的共振頻率差遠大于它們之間的偶合常數（ J），則其中一組用A、B、C表示，另一組用X、Y、Z表示。 共振頻率差不很大時，用A、M字母表示。 若核組內的核為磁不等價時，則用A

20、、A、B、B加以區(qū)別。,圖譜的分類,核磁共振圖譜可分為一級譜圖和二級圖譜，或稱為初級圖譜和高級圖譜。,一級圖譜： 條件： / J 10 特點： 1。磁全同質子之間，雖然 J0，但對圖譜不發(fā)生影響 Cl-CH2CH2Cl 只表現(xiàn)出一個峰 2。裂分后峰的數目,符合n+1規(guī)律（對于I=1/2的核) 3。 多重峰的中心即為化學位移值 4。 峰型大體左右對稱，各峰間距離等于偶合常數J 5。 各裂分峰 的強度比符合(a+b)n展開式各項系數比,一級自旋-自旋裂分規(guī)則,當I=1/2時，自旋裂分峰數目服從n+1規(guī)則。 1. n+1規(guī)則：當某基團上的氫有n個相鄰的氫時，它將顯示n+1個峰，各峰的高度比基本為二項

21、式的各項系數比,若這些相鄰的氫處在不同的環(huán)境中時，（如一種環(huán)境中氫n個，另一種環(huán)境中氫n個），則裂分峰將顯示（n+1）（n+1）個峰。則應考慮偶合常數的大小。 對如下結構：,以Hd為觀察核： 1） Jad=Jbd=Jcd，則Nd=（na+nb+nc）+1。 2） JadJbdJcd 則Hd核共振峰的數目為：Nd=（na+1）(nb+1) (nc+1) 3） JadJbdJcd，從外表上看：Nd=（na+nb+nc）+1。,二級圖譜,不符合一級圖譜條件的圖譜極為二級譜 一級圖譜的所有特征，二級譜都不具備 二級譜的譜圖復雜，難以解析 由于與測定條件有關，而J值與測定條件無關，在不同條件下得到的譜圖

22、往往成不同的裂分系統(tǒng)： CH2=CHCN 中的三個質子： 在 60Hz 的儀器測定時 表現(xiàn)為ABC系統(tǒng) 100Hz的儀器測定時 表現(xiàn)為ABX系統(tǒng) 220Hz的儀器測定時 表現(xiàn)為AMX系統(tǒng),高級譜，采用一些實驗手段簡化成一級圖譜。 1、加大磁場強度 J不隨外磁場變化而改變的，但差值卻隨B0改變而改變。 因此，加大外磁場強度，增大,/J增大,直到/J10可獲得一級圖譜。,CH3CH2OH B0 = 1.4TG, =（CH2） （CH3） = 148 73.2 = 74.7Hz B0 = 2.3TG, =(CH2) (CH3） = 247 122 = 125Hz,2、雙照射去偶法（稱共振法） （1）

23、雙照射去偶法（具有雙照射去偶器）,去偶原因： 輔助振蕩器對Hb強烈照射時,使高能態(tài)Hb核飽和,不再產生凈吸收,Hb峰消失,Ha只剩下一個單峰。 該法不僅可簡化圖譜,且可確立哪些核與去偶質子有偶合關系。,照射 Hb,核奧佛好塞效應（簡稱NOE）分子內存在空間位置上相互靠近的兩個質子 Ha和 Hb 時，用雙照射法照射其中一個質子Hb 使之飽和，則另一個靠近的質子Ha 共振信號就會上升，這種現(xiàn)象NOE.,產生原因：兩個質子空間位置十分靠近，相互弛豫較強，當 Hb 受到照射達到飽和時，它把能量轉移給 Ha ，于是Ha 能量吸收增加，共振吸收峰面積增大。 NOE效應大小與質子間距離的六次方成反比，當質子

24、間距0.3nm以上時，觀察不到。 確定化合物構型的基礎,3、位移試劑 位移試劑：指在不增加外磁場強度的情況下，使試樣質子的信號發(fā)生位移的試劑。,常用：Eu（DPM）3 三（2,2,6,6四甲基）庚二酮3,5銪 加入試樣中，絡合物中心Eu3+可能再與含有孤對電子的原子(-NH2、-OH等)配位。Eu3+有強烈的吸電子性，與孤對電子配位后使相鄰近的質子去屏蔽，因而使之向低場移動。 離配位鍵越近的質子改變越大，這樣，原來重疊共振信號，便可能展開，利于解析,6.4 幾種常見的自旋系統(tǒng),AB系統(tǒng)： ABX系統(tǒng)： AMX系統(tǒng) AB2系統(tǒng)： A2B2系統(tǒng)： AABB系統(tǒng)：,AB系統(tǒng)：環(huán)上孤立的CH2, 二取

25、代乙烯,四取代苯等.,ABX系統(tǒng)：,AMX系統(tǒng),AB2系統(tǒng):苯環(huán)對稱三取代,吡啶環(huán)對稱二取代等,AABB系統(tǒng)：苯環(huán)的對稱二取代(不同基團的對位取代,相同基團的鄰位取代),一張譜圖可以向我們提供關于有機分子結構的如下信息 1. 由吸收峰的組數，可以判斷有幾種不同類型的H核； 2. 由峰的強度（峰面積或積分曲線高度），可以判斷各類H的相對數目； 3.由峰的裂分數目，可以判斷相鄰H核的數目； 4. 由峰的化學位移（值），可以判斷各類型H所處的化學環(huán)境； 5. 由裂分峰的外形或偶合常數，可以判斷哪種類型H是相鄰的。,4.2 氫譜 1H化學位移 170 耦合常數 Karplus-Conroy方程： 3J

26、HHacos2-0.28 （90，a=8.5；90，a=9.5） 重氫（氘）交換 RXHD2ORXDHDO 重氫（氘）交換是確定XH（XH，其中X為O，N，S）官能團存在的有力證據,2.分子式為C3H60的某化合物的核磁共振譜如下，試 確定其結構。,譜圖上只有一個單峰，說明分子中所有氫核的化學 環(huán)境完全相同。,3. 某化合物的分子式為C3H7Cl，其NMR譜圖如下圖所示：,試推斷該化合物的結構。,解：,由分子式可知，該化合物是一個飽和化合物；,由譜圖可知：,(1) 有三組吸收峰，說明有三種不同類型的 H 核；,(2) 該化合物有七個氫，有積分曲線的階高可知a、b c各組吸收峰的質子數分別為3、

27、2、2；,(3) 由化學位移值可知：Ha 的共振信號在高場區(qū)，其 屏蔽效應最大，該氫核離Cl原子最遠；而 Hc 的屏蔽效應 最小，該氫核離Cl原子最近。,結論：該化合物的結構應為：,4,C3H6O2 IR 3000cm-1 1700cm-1 =1 NMR 11.3 (單峰 1H) 2.3 (四重峰 2H) 1.2 (三重峰 3H) CH3CH2COOH,5,C7H8O IR 3300，3010，1500，1600，730，690cm-1 =4 NMR 7.2 (多重峰 5H) 4.5 (單峰 2H) 3.7 (寬峰 1H) C6H5-CH2-OH,13C NMR,化學位移 0300 酮羰基C出

28、現(xiàn)在190220，氰基：110120，異氰基：135150，氰酸酯：105120，異氰酸酯：120135，硫氰酸酯：110120，異硫氰酸酯：125140。醚類甲氧基一般出現(xiàn)在5562，酯類甲氧基出現(xiàn)在52附近，N-甲基出現(xiàn)在3045，S-甲基一般出現(xiàn)在25，,優(yōu)點：由于化學位移信號出現(xiàn)的值域寬，使圖譜顯的比較清晰，這樣對結構解析有幫助。 缺點：由于13C天然豐度很低（1）使測定需要比較多的量，一般需要10mg以上，對于分子量比較大如三萜皂苷，需要30mg。,DEPT：用以判斷碳的類型，可以指導化合物中季碳、伯碳、仲碳、叔碳的數目。 1350: 季碳不出現(xiàn)，CH2出倒峰；CH和 CH3出正峰。

29、 900：只出現(xiàn)CH 450：出現(xiàn)CH和CH3,青蒿素,1H NMR,13C NMR,Dept,二維核磁： H,H-COSY是一種最簡單的二維NMR實驗，它關聯(lián)分子中偶合質子的化學位移。在此二維譜中，二個頻率軸都以質子的化學位移作圖，因此譜圖是方形對稱的。其一維1H NMR譜的投影出現(xiàn)于對角線上（稱對角峰或對角信號）。對角線以外信號稱交叉峰或相關信號，它們處于1H-1D-NMR信號的水平和垂直連線的交叉點上，表明對應的二個質子間相互自旋耦合。因此，H,H-COSY譜圖揭示的是質子與質子間的自旋偶合關系?？焖俅_定分子中質子與質子間通過化學鍵的偶合關系，包括質子間孿生（2JHH）、鄰位（3JHH）

30、或遠程如烯丙位和W型（4JHH）的偶合。,1H-1H COSY,HMQC 在二維C,H相關譜圖中13C化學位移出現(xiàn)在X軸，1H化學位移出現(xiàn)在Y軸，交叉峰出現(xiàn)在相應的13C和1H信號的垂直和水平連線的交叉點上。提示相應的1H和13C核是通過1JCH相互關聯(lián)的。它能夠提供C，H之間通過鍵的直接連接（1JCH），清楚地告說你在一個C原子上連接幾個H原子，提供了C共振信號的多重度的信息。同時揭示出哪個H原子連接在哪個C原子上，為把質子與質子間的偶合相關信息轉變成為C原子與C原子的連接提供了基礎。,HMQC,HMBC 對應于季碳原子化學位移的交叉峰提示出與該季碳原子相連接的分子部分構造的信息，如下式所示

31、： C1HC2*C3H 其中C*為季碳原子，如果H1顯示與C2*和C3的交叉峰或H3顯示與C1和C2*的交叉峰，可以藉此把C1，C2*和C3三個C原子依次連接起來。不僅如此， HMBC實驗還為把雜原子X（XO，S，N等）接入分子骨架提供了依據，如下式所示： C1HXC2H,H M B C,絕對構型：可以確定每個手性中心的構型如R或S。 相對構型：通常用和表示，平面上方用 ，下方用。 NOESY只能確定化合物的相對構型，要確定決定構型可用CD法、X單晶衍射，或化學法。,NOESY,在環(huán)A中，H3與H7之間有NOE，表明它們是順式取代。H3與4-CH3之間和H7與6-CH3之間的NOE相關提示H3

32、，H7，4-CH3和6-CH3都是順式取代。同樣在環(huán)B中，14-CH3與15-OH之間的NOE相關提示它們是順式取代,其中1和2磁等價，5a和5b是不等價,質譜(MS),1 定義 質譜（Mass Spectroscopy）是記錄分析樣品在質譜儀中經高溫（300）氣化，在離子源受一定能量沖擊產生陽離子，而后在穩(wěn)定磁場中按質量和電荷之比（m/z）順序進行分離并通過檢測器表達的圖譜。圖中的每一個峰代表一個質量數。 2 作用 根據分子離子峰（通常在最高處）與碎片峰的質荷比推導化合物的結構。高分辨質譜則直接給出分子量的精確數字和分子式。這是解析化合物結構的重要基礎。 ，然后運用各類化合物的碎片規(guī)律進行分析，為確定化合物化學結構提供極其重要的數據。 .,進樣系統(tǒng),離子源,質量分析器,檢測器,控制和數據處理系統(tǒng),真空系統(tǒng),*質譜中不能用平均原子量（如氯=35.45）計算，而要35Cl=34.96885359。一般以12C=12.00000000為標準。有機化合物中各元素與其同位素的精確質量如下：,1H=1.00782522 2H=2.01410222 14N=14.00307440 15N=15.0001