最終滅菌注射劑的質(zhì)量控制.ppt

1、最終滅菌注射劑質(zhì)量控制,污染微生物的來(lái)源,內(nèi)源性的影響因素 空氣凈化系統(tǒng) 水 工藝過(guò)程 物料 外源性的影響因素 人員,芽孢是關(guān)鍵控制點(diǎn),G+,G-,微生物無(wú)處不在 氣源性微生物革蘭氏陽(yáng)性菌較多它們可形成芽孢，難以殺滅 因此，藥品生產(chǎn)需要HVAC 水源性則革蘭氏陰性菌居多 不會(huì)生成孢子 但會(huì)形成細(xì)菌內(nèi)毒素,一、什么是芽孢？,當(dāng)某些細(xì)菌遇到不良生存環(huán)境條件時(shí)，為保護(hù)自身，在細(xì)胞內(nèi)形成一外壁厚而堅(jiān)硬的體眠體，該體眠體即稱芽孢（Spore）或孢子。 由于其對(duì)不良環(huán)境的耐受性遠(yuǎn)高于生長(zhǎng)態(tài)細(xì)胞，常被用于挑戰(zhàn)滅菌工藝，以確認(rèn)被滅菌物品無(wú)菌的可靠性。,芽孢的特性,主要產(chǎn)生于Gram+ 細(xì)菌的兩個(gè)屬 芽孢桿菌屬

2、 Bacillus 梭菌屬 Clostridium 能抵御各種惡劣環(huán)境，可存活上百萬(wàn)年，因?yàn)樗?有厚的皮層結(jié)構(gòu) 僅含核酸及少量萌發(fā)必需物 含水量極低 休眠體，內(nèi)生孢子，不可再生（每個(gè)細(xì)胞只產(chǎn)生一個(gè)芽孢）；真菌孢子屬于分生孢子，不具上述特性。,細(xì)菌芽胞（孢）的形成及其特性,熱對(duì)活細(xì)胞的作用,有一種可引發(fā)克雅氏綜合癥 (Creutzfekldt- Jakob）的普里昴 ( prion）病原體，在132下加 一小時(shí)才可完全殺滅（克雅氏綜合癥：俗稱人體瘋牛病） 需氧菌中的芽孢桿菌屬(Bacillus)和厭氧菌中的梭狀芽孢桿菌屬(Clostridium)，耐熱性較強(qiáng) 它們能產(chǎn)生內(nèi)源性孢子/芽孢，或胞間休

3、眠體，對(duì)熱、干燥及化學(xué)消毒劑的耐受性大大增強(qiáng) 這類芽孢的干熱滅菌溫度一般在100 170，濕熱滅菌的溫度則在80 129之間。,從“欣弗”事件談滅菌工藝,欣弗事件的發(fā)生 2006年7月 安徽華源 克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液 不良事件報(bào)告81例，涉及10個(gè)省份,欣弗到底怎么了？,克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查,克林霉素磷酸酯氯化鈉注射（100ml:0.6g） 采用半無(wú)菌工藝生產(chǎn) 滅菌條件100、7分鐘 貯存條件陰涼 有效期1年 有些企業(yè)的處方中含有苯甲醇 穩(wěn)定性考察有一批留樣的有關(guān)物質(zhì)為7.9 有關(guān)物質(zhì)總雜不得過(guò)8.0 單雜不得過(guò)5.0,克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查,克林霉素磷酸酯注射液（2m

4、l:0.3g） 滅菌條件100、310分鐘 貯存條件遮光、密閉保存 有效期2年 處方中含有苯甲醇 有關(guān)物質(zhì)總雜不得過(guò)6.0（2004年底改為8.0） 單雜不得過(guò)4.0,從上述調(diào)查看國(guó)內(nèi)滅菌注射劑生產(chǎn)的缺陷,對(duì)滅菌的認(rèn)識(shí)不正確 產(chǎn)品研發(fā)未考慮滅菌工藝的可行性 忽視工藝的可行性，盲目跟風(fēng)報(bào)批 注射劑用原料藥的雜質(zhì)控制不嚴(yán) 忽視產(chǎn)品的安全性,中國(guó)醫(yī)藥報(bào) 2007年1月4日 A6版,無(wú)菌藥品常用滅菌工藝的比較,影響濕熱滅菌效果的因素,待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量 待滅菌產(chǎn)品的包裝形式 待滅菌產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量 濕熱滅菌工藝條件 濕熱滅菌設(shè)備,無(wú)菌保證水平SAL,無(wú)菌保證水平（Sterili

5、ty Assurance Level） 表示物品被滅菌后的無(wú)菌狀態(tài) 按國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，濕熱滅菌法的無(wú)菌保證值不得低于10-6，即滅菌后微生物存活的概率不得大于百萬(wàn)分之一。,滅菌工藝驗(yàn)證的必要性,滅菌產(chǎn)品的無(wú)菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品的無(wú)菌檢驗(yàn)，而是取決于生產(chǎn)過(guò)程中采用合格的滅菌工藝、嚴(yán)格的GMP管理和良好的無(wú)菌保證體系 滅菌工藝的驗(yàn)證是無(wú)菌保證的必要條件 滅菌工藝經(jīng)過(guò)驗(yàn)證后，方可正式用于生產(chǎn),國(guó)內(nèi)企業(yè)滅菌工藝驗(yàn)證常見(jiàn)缺陷,無(wú)包裝規(guī)格 無(wú)裝載方式 未對(duì)每一種產(chǎn)品每一種包裝規(guī)格的每一種裝載方式進(jìn)行驗(yàn)證 采用留點(diǎn)溫度計(jì)監(jiān)測(cè)溫度 無(wú)溫度探頭校準(zhǔn)記錄 驗(yàn)證的滅菌工藝與實(shí)際工藝不一致 未驗(yàn)證最差滅菌條件 設(shè)定的驗(yàn)

6、證合格標(biāo)準(zhǔn)達(dá)不到無(wú)菌保證水平（SAL）10-6 生物指示劑使用不規(guī)范,滅菌工藝檢查要點(diǎn),生產(chǎn)環(huán)境和待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量研究和監(jiān)控 待滅菌產(chǎn)品的包裝形式、裝載方式和裝載數(shù)量 滅菌工藝條件 滅菌設(shè)備 關(guān)鍵控制參數(shù)的控制和記錄儀表的校準(zhǔn) 設(shè)備維護(hù)和維修 滅菌的記錄 滅菌工藝的驗(yàn)證 選用的生物指示劑 熱分布試驗(yàn)，找出最冷點(diǎn)位置 無(wú)菌檢驗(yàn)樣品的取樣,無(wú)菌檢查,無(wú)菌檢查的局限性,無(wú)菌的定義 理論上：無(wú)菌沒(méi)有任何活的微生物 實(shí)際上：我們無(wú)法證明產(chǎn)品中沒(méi)有活微生物存在 無(wú)法對(duì)整批產(chǎn)品進(jìn)行100%檢驗(yàn) 無(wú)菌檢驗(yàn)的結(jié)果只是一個(gè)基于“可能性”的判斷 無(wú)菌檢驗(yàn)用培養(yǎng)基有其局限性 只進(jìn)行細(xì)菌和真菌的檢驗(yàn)

7、對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定是基于“是否在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)” 培養(yǎng)條件（如溫度和時(shí)間）是有限的 我們的工作環(huán)境及操作是在相對(duì)無(wú)菌的狀態(tài),美國(guó)非腸道藥物學(xué)會(huì)注射劑無(wú)菌測(cè)試結(jié)果,試驗(yàn)?zāi)康模翰缓细竦目赡苄?%) 試驗(yàn)批量：60,000支 試驗(yàn)方法：按美國(guó)藥典無(wú)菌測(cè)試方法,上述無(wú)菌測(cè)試結(jié)果的啟示,含有少量微生物污染產(chǎn)品的批次也有可能“通過(guò)”無(wú)菌檢驗(yàn) 一批產(chǎn)品的染菌率越低，根據(jù)無(wú)菌檢驗(yàn)的結(jié)果來(lái)判定整批產(chǎn)品的無(wú)菌，其風(fēng)險(xiǎn)就越大,如何用無(wú)菌檢驗(yàn)來(lái)證明整批產(chǎn)品無(wú)菌,要求有一個(gè)取樣計(jì)劃來(lái)涵蓋整個(gè)批號(hào) 有足夠的取樣量和檢驗(yàn)量 選擇適用的培養(yǎng)基 采用經(jīng)驗(yàn)證的無(wú)菌檢驗(yàn)方法 良好的環(huán)境監(jiān)控,檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)制定依據(jù),2003驗(yàn)證指南 QC-7

8、51E注射劑藥液過(guò)濾前含菌量測(cè)定 M-00 061A 注射劑滅菌前藥液污染水平及耐熱性檢查,大容量注射劑舉例,滅菌前藥液的含微生物的計(jì)算過(guò)程： 根據(jù)2003版藥品上產(chǎn)驗(yàn)證指南 lgP=lgN-F0/D121 P:滅菌后產(chǎn)品內(nèi)微生物存活概率 N:滅菌前藥液的含耐熱孢子的量 D121:微生物耐熱參數(shù)，系指一定溫度下將微生物殺滅90%或使之下降一個(gè)對(duì)數(shù)單位所需的時(shí)間（分） lgN = lgP+F0/D121= lgP+FT/DT(N值與FT成正比，與DT成反比) 該產(chǎn)品（葡萄糖）采用115滅菌32min,產(chǎn)品滅菌的F08,為更嚴(yán)格的控制滅菌前產(chǎn)品的生物負(fù)載，F(xiàn)0取8計(jì)算。,大容量注射劑舉例,DT與生

9、產(chǎn)環(huán)境，以及過(guò)濾截留得到的微生物有關(guān)，需要確認(rèn)污染微生物的耐熱性，在未檢測(cè)到耐熱微生物時(shí)，DT通常按1計(jì)算。為更嚴(yán)格的控制滅菌前產(chǎn)品的生物負(fù)載， 取DT 為1計(jì)算。 lgN =lg10-6 +8/1 N=100CFU/袋（產(chǎn)品規(guī)格為250ml） N=40CFU/100ml,檢測(cè)重點(diǎn),污染水平 微生物耐熱性,取樣,滅菌前藥液直接取樣，每個(gè)樣品取樣大容量注射劑（兩個(gè)最小包裝，最少各 100mL）。小容量注射劑兩份，最少各100mL。 滅菌后取樣大容量注射劑各約50mL。,檢測(cè)方法,污染水平檢查 先用滅菌的含5吐溫80的pH7.0氯化鈉蛋白胨潤(rùn)濕0.45m濾膜，然后過(guò)濾100mL滅菌前藥液，有抑菌性的藥液需用已驗(yàn)證量的緩沖液沖洗濾膜，以消除藥液的抑菌性），再以無(wú)菌方式將濾膜菌面朝上貼于準(zhǔn)備好的胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基（TSA）上，同時(shí)做1個(gè)陰性對(duì)照。胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)