最終滅菌注射劑的質量控制.ppt

1、最終滅菌注射劑質量控制,污染微生物的來源,內源性的影響因素 空氣凈化系統(tǒng) 水 工藝過程 物料 外源性的影響因素 人員,芽孢是關鍵控制點,G+,G-,微生物無處不在 氣源性微生物革蘭氏陽性菌較多它們可形成芽孢，難以殺滅 因此，藥品生產(chǎn)需要HVAC 水源性則革蘭氏陰性菌居多 不會生成孢子 但會形成細菌內毒素,一、什么是芽孢？,當某些細菌遇到不良生存環(huán)境條件時，為保護自身，在細胞內形成一外壁厚而堅硬的體眠體，該體眠體即稱芽孢（Spore）或孢子。 由于其對不良環(huán)境的耐受性遠高于生長態(tài)細胞，常被用于挑戰(zhàn)滅菌工藝，以確認被滅菌物品無菌的可靠性。,芽孢的特性,主要產(chǎn)生于Gram+ 細菌的兩個屬 芽孢桿菌屬

2、 Bacillus 梭菌屬 Clostridium 能抵御各種惡劣環(huán)境，可存活上百萬年，因為它 有厚的皮層結構 僅含核酸及少量萌發(fā)必需物 含水量極低 休眠體，內生孢子，不可再生（每個細胞只產(chǎn)生一個芽孢）；真菌孢子屬于分生孢子，不具上述特性。,細菌芽胞（孢）的形成及其特性,熱對活細胞的作用,有一種可引發(fā)克雅氏綜合癥 (Creutzfekldt- Jakob）的普里昴 ( prion）病原體，在132下加 一小時才可完全殺滅（克雅氏綜合癥：俗稱人體瘋牛?。?需氧菌中的芽孢桿菌屬(Bacillus)和厭氧菌中的梭狀芽孢桿菌屬(Clostridium)，耐熱性較強 它們能產(chǎn)生內源性孢子/芽孢，或胞間休

3、眠體，對熱、干燥及化學消毒劑的耐受性大大增強 這類芽孢的干熱滅菌溫度一般在100 170，濕熱滅菌的溫度則在80 129之間。,從“欣弗”事件談滅菌工藝,欣弗事件的發(fā)生 2006年7月 安徽華源 克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液 不良事件報告81例，涉及10個省份,欣弗到底怎么了？,克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調查,克林霉素磷酸酯氯化鈉注射（100ml:0.6g） 采用半無菌工藝生產(chǎn) 滅菌條件100、7分鐘 貯存條件陰涼 有效期1年 有些企業(yè)的處方中含有苯甲醇 穩(wěn)定性考察有一批留樣的有關物質為7.9 有關物質總雜不得過8.0 單雜不得過5.0,克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調查,克林霉素磷酸酯注射液（2m

4、l:0.3g） 滅菌條件100、310分鐘 貯存條件遮光、密閉保存 有效期2年 處方中含有苯甲醇 有關物質總雜不得過6.0（2004年底改為8.0） 單雜不得過4.0,從上述調查看國內滅菌注射劑生產(chǎn)的缺陷,對滅菌的認識不正確 產(chǎn)品研發(fā)未考慮滅菌工藝的可行性 忽視工藝的可行性，盲目跟風報批 注射劑用原料藥的雜質控制不嚴 忽視產(chǎn)品的安全性,中國醫(yī)藥報 2007年1月4日 A6版,無菌藥品常用滅菌工藝的比較,影響濕熱滅菌效果的因素,待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量 待滅菌產(chǎn)品的包裝形式 待滅菌產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量 濕熱滅菌工藝條件 濕熱滅菌設備,無菌保證水平SAL,無菌保證水平（Sterili

5、ty Assurance Level） 表示物品被滅菌后的無菌狀態(tài) 按國際標準，濕熱滅菌法的無菌保證值不得低于10-6，即滅菌后微生物存活的概率不得大于百萬分之一。,滅菌工藝驗證的必要性,滅菌產(chǎn)品的無菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品的無菌檢驗，而是取決于生產(chǎn)過程中采用合格的滅菌工藝、嚴格的GMP管理和良好的無菌保證體系 滅菌工藝的驗證是無菌保證的必要條件 滅菌工藝經(jīng)過驗證后，方可正式用于生產(chǎn),國內企業(yè)滅菌工藝驗證常見缺陷,無包裝規(guī)格 無裝載方式 未對每一種產(chǎn)品每一種包裝規(guī)格的每一種裝載方式進行驗證 采用留點溫度計監(jiān)測溫度 無溫度探頭校準記錄 驗證的滅菌工藝與實際工藝不一致 未驗證最差滅菌條件 設定的驗

6、證合格標準達不到無菌保證水平（SAL）10-6 生物指示劑使用不規(guī)范,滅菌工藝檢查要點,生產(chǎn)環(huán)境和待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量研究和監(jiān)控 待滅菌產(chǎn)品的包裝形式、裝載方式和裝載數(shù)量 滅菌工藝條件 滅菌設備 關鍵控制參數(shù)的控制和記錄儀表的校準 設備維護和維修 滅菌的記錄 滅菌工藝的驗證 選用的生物指示劑 熱分布試驗，找出最冷點位置 無菌檢驗樣品的取樣,無菌檢查,無菌檢查的局限性,無菌的定義 理論上：無菌沒有任何活的微生物 實際上：我們無法證明產(chǎn)品中沒有活微生物存在 無法對整批產(chǎn)品進行100%檢驗 無菌檢驗的結果只是一個基于“可能性”的判斷 無菌檢驗用培養(yǎng)基有其局限性 只進行細菌和真菌的檢驗

7、對實驗結果的判定是基于“是否在培養(yǎng)基中生長” 培養(yǎng)條件（如溫度和時間）是有限的 我們的工作環(huán)境及操作是在相對無菌的狀態(tài),美國非腸道藥物學會注射劑無菌測試結果,試驗目的：不合格的可能性(%) 試驗批量：60,000支 試驗方法：按美國藥典無菌測試方法,上述無菌測試結果的啟示,含有少量微生物污染產(chǎn)品的批次也有可能“通過”無菌檢驗 一批產(chǎn)品的染菌率越低，根據(jù)無菌檢驗的結果來判定整批產(chǎn)品的無菌，其風險就越大,如何用無菌檢驗來證明整批產(chǎn)品無菌,要求有一個取樣計劃來涵蓋整個批號 有足夠的取樣量和檢驗量 選擇適用的培養(yǎng)基 采用經(jīng)驗證的無菌檢驗方法 良好的環(huán)境監(jiān)控,檢驗標準制定依據(jù),2003驗證指南 QC-7

8、51E注射劑藥液過濾前含菌量測定 M-00 061A 注射劑滅菌前藥液污染水平及耐熱性檢查,大容量注射劑舉例,滅菌前藥液的含微生物的計算過程： 根據(jù)2003版藥品上產(chǎn)驗證指南 lgP=lgN-F0/D121 P:滅菌后產(chǎn)品內微生物存活概率 N:滅菌前藥液的含耐熱孢子的量 D121:微生物耐熱參數(shù)，系指一定溫度下將微生物殺滅90%或使之下降一個對數(shù)單位所需的時間（分） lgN = lgP+F0/D121= lgP+FT/DT(N值與FT成正比，與DT成反比) 該產(chǎn)品（葡萄糖）采用115滅菌32min,產(chǎn)品滅菌的F08,為更嚴格的控制滅菌前產(chǎn)品的生物負載，F(xiàn)0取8計算。,大容量注射劑舉例,DT與生

9、產(chǎn)環(huán)境，以及過濾截留得到的微生物有關，需要確認污染微生物的耐熱性，在未檢測到耐熱微生物時，DT通常按1計算。為更嚴格的控制滅菌前產(chǎn)品的生物負載， 取DT 為1計算。 lgN =lg10-6 +8/1 N=100CFU/袋（產(chǎn)品規(guī)格為250ml） N=40CFU/100ml,檢測重點,污染水平 微生物耐熱性,取樣,滅菌前藥液直接取樣，每個樣品取樣大容量注射劑（兩個最小包裝，最少各 100mL）。小容量注射劑兩份，最少各100mL。 滅菌后取樣大容量注射劑各約50mL。,檢測方法,污染水平檢查 先用滅菌的含5吐溫80的pH7.0氯化鈉蛋白胨潤濕0.45m濾膜，然后過濾100mL滅菌前藥液，有抑菌性的藥液需用已驗證量的緩沖液沖洗濾膜，以消除藥液的抑菌性），再以無菌方式將濾膜菌面朝上貼于準備好的胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基（TSA）上，同時做1個陰性對照。胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)