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文檔簡(jiǎn)介
1、直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性的意義,紅細(xì)胞抗原的自身抗體 近期輸血的受血者血漿中的同種抗體與輸入的供血者紅細(xì)胞抗原反應(yīng) 輸入的供血者血液或血液成分中的抗體與受血者紅細(xì)胞抗原反應(yīng) 孕婦體內(nèi)的同種抗體通過胎盤致敏胎兒紅細(xì)胞上 抗菌藥物(如青霉素)的抗體與藥物致敏的紅細(xì)胞相結(jié)合,1,紅細(xì)胞膜受某些藥物(以頭孢菌素類最多見)療法而改變,導(dǎo)致蛋白質(zhì)(包括免疫球蛋白)非特異性地被紅細(xì)胞膜所吸收 對(duì)給予藥物(如奎尼丁及非那西?。┑姆磻?yīng)形成藥物-抗藥物復(fù)合體,使補(bǔ)體成分、IgG抗體(占少數(shù))與紅細(xì)胞相結(jié)合 為減少器官及骨髓移植患者的T細(xì)胞群體,應(yīng)用有嗜異性抗體存在的馬抗人淋巴細(xì)胞球蛋白時(shí) 非抗體介導(dǎo)的丙球蛋白過高患
2、者,2,直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性的評(píng)價(jià),血液標(biāo)本的收集 初步的血清學(xué)研究 進(jìn)一步的研究,3,自身免疫性溶血性貧血,4,一、概念,免疫性溶血 免疫性溶血是指由于免疫反應(yīng)而使紅細(xì) 胞破壞加速,壽命縮短的過程。 溶血性貧血 溶血性貧血是由于紅細(xì)胞破壞增多、增 速, 超過造血補(bǔ)償能力范圍,所發(fā)生 的一種貧血。 自身免疫性溶血性貧血 是由于機(jī)體免疫功能異常,產(chǎn)生了抗自 身紅細(xì)胞的抗體,使紅細(xì)胞破壞加速造 成的溶血性貧血,在后天性溶血性貧血 中多見。,5,二、分類,免疫性溶血性貧血可分為三類 同種免疫性溶血性貧血 自身免疫性溶血性貧血 藥物引起的免疫性溶血性貧血,6,7,8,9,自身免疫性溶血性貧血可分為四
3、種主要類型: 1、 溫抗體型自身免疫溶血性貧血(WAIHA) 原發(fā)性的 (自發(fā)性) 繼發(fā)性的 (與淋巴瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、 癌癥或藥物處理有關(guān)) 2、冷凝集素綜合征(CAS) 原發(fā)性的 (自發(fā)的) 繼發(fā)性的 (與淋巴瘤支原體肺炎、傳染性 單核細(xì)胞增多癥 有關(guān)),10,11,混合型自身免疫性溶血性貧血(MTA) 原發(fā)性的 (自發(fā)的) 繼發(fā)性的 (與系統(tǒng)性紅斑狼瘡、淋巴瘤有關(guān)) 陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿(PCH) 原發(fā)性的 (自發(fā)性的) 繼發(fā)性的 (與梅毒、病毒感染有關(guān))。,12,三、血清學(xué)特征,13,溫抗體型自身免疫溶血性貧血(WAIHA),常見的自身免疫性溶血性貧血, 約占 所有免疫性溶血性病例
4、的4870%, 與溫反應(yīng)性自身抗體有關(guān),14,WAIHA典型的血清學(xué)特征,1、直接抗球蛋白試驗(yàn) 使用單特異性IgG及抗C3試劑時(shí),可有三種 形式的反應(yīng): 單獨(dú)IgG反應(yīng)、單獨(dú)C3致敏、IgG+C3致敏,,15,2、在血清中的自身抗體 是IgG型的,與所有的紅細(xì)胞在間接抗人球蛋白試驗(yàn)中都呈陽性反應(yīng)。血清中的游離抗體量非常少。 3、放散液中 可檢到IgG抗體。 4、自身抗體特異性 主要是針對(duì)Rh抗原復(fù)合物,但只有在得到稀有表現(xiàn)型紅細(xì)胞,如D陰性,或Rhnull時(shí)才能明確,16,冷凝集素綜合征(CAS),CAS(也稱冷凝集素疾病CHD),是與冷反應(yīng)自身抗體有關(guān)的溶血性貧血中最常見的一種類型,約占所有
5、免疫性溶血性病例的16-32%??捎屑毙院吐詢煞N情況。,17,CAS典型的血清學(xué)特征,1. 直接抗球蛋白試驗(yàn) 補(bǔ)體是紅細(xì)胞上唯一能被檢出的蛋白。多特異性抗球蛋白試劑中抗C3d(C4d)成分是造成DAT陽性的原因。,18,19,2血清 在4溫度測(cè)定與免疫性溶血有關(guān)的IgM冷反應(yīng)性自身凝集素效價(jià)常大于1,000以上;在體外用超過32溫度鹽水懸浮紅細(xì)胞時(shí)則很少有反應(yīng)。若在反應(yīng)介質(zhì)中加入30%牛白蛋白時(shí),70 % 有臨床意義的樣本將在37反應(yīng),20,3、放散液 若紅細(xì)胞在37收集和洗滌,細(xì)胞上沒有 免疫球蛋白,放散液中不會(huì)有反應(yīng)發(fā)生。,21,4、自身抗體的特異性 最常見與CAS有關(guān)的特異性為抗I。
6、較不常見的抗i特異性則與感染性單核 球癥有關(guān)。 在及稀有的情況下,血清中冷反應(yīng)性 自身凝集素具有Pr特異性或其他特異性。,22,陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿(PCH),是DAT陽性的自身免疫性溶血性貧血癥最少見的類型,成人中很少見,兒童中占32%。 較為常見PCH是急性暫時(shí)的情況,繼發(fā)于病毒感染癥,尤其在幼童當(dāng)中。它也能出現(xiàn)在老年人中,為一特發(fā)性的慢性病。,23,PCH典型的血清學(xué)特征 1、直接抗球蛋白試驗(yàn) PCH中的自身抗體是IgG,它和IgM冷自身凝集素一樣,在身體較冷的部位,PCH的IgG自身抗體與紅細(xì)胞起反應(yīng),使補(bǔ)體成分(C3及C4)與紅細(xì)胞發(fā)生不可逆的結(jié)合,然后在較溫暖的部位IgG分離。所
7、以直抗陽性是補(bǔ)體造成的。,24,2、血清免疫球蛋白類型 在PCH中IgG自身抗體,習(xí)慣上稱為雙相性溶血素,因?yàn)樗诘蜏嘏c紅細(xì)胞相結(jié)合,在37時(shí)使致敏紅細(xì)胞溶血。DonathLandsteiner(DL)試驗(yàn)是診斷這種疾病的基礎(chǔ)。,25,3、釋放液免疫球蛋白類型 由于補(bǔ)體成分是循環(huán)紅細(xì)胞上唯一存在的球蛋白,因此從PCH病人紅細(xì)胞上得到的洗脫液一般是沒有活性的。,26,4、自身抗體的特異性 PCH的自身抗體大部分呈現(xiàn)抗-P特異性,與所有的紅細(xì)胞(包括病人自己的紅細(xì)胞)起反應(yīng),與罕見p或Pk表現(xiàn)型不反應(yīng)。亦有例子報(bào)告具有抗-I、抗-i和抗-Pr等特異性。,27,28,29,病人的紅細(xì)胞是抗體還是補(bǔ)體
8、致敏? 血清中有抗體嗎? 如果有,這些抗體是凝集 還是非凝集性抗體?體外溶血嗎? 最適反應(yīng)溫度是暖(37 )還是冷(4 )?是自身抗體還是同種抗體? 洗脫液中有抗體活性嗎?,30,四、具有自身抗體的患者的血清學(xué)檢查,(一)、輸血前試驗(yàn)中可能存在的問題 1、 冷型反應(yīng)性自身抗體能引起自身凝集 反應(yīng),致使ABO及Rh分型試驗(yàn)結(jié)果發(fā) 生矛盾。自身抗體亦凝集血清分型試 驗(yàn)所用的A型和B型試劑紅細(xì)胞。,31,2、 被球蛋白致敏的紅細(xì)胞在接觸到高蛋白含 量的商品化的抗-Rh 血清試劑時(shí),可發(fā)生 自發(fā)性的凝集反應(yīng),致使 Rh 定型試驗(yàn)的 結(jié)果發(fā)生矛盾。,32,3、 血清里存在游離的自身抗體時(shí),不可能獲 得在
9、血清學(xué)上完全相配合的血液。這種情 況下要考慮自身抗體可能掩蓋有臨床意義 的同種抗體的存在。倘若時(shí)間允許,在輸 血前應(yīng)測(cè)定是否存在同種抗體,33,解決ABO定型中的問題,1 、采集標(biāo)本后,立即將標(biāo)本放入37 并在試驗(yàn)前用溫鹽水(3745 )洗滌紅細(xì)胞。 2、用硫醇類試劑(2-Me、DTT等)處理紅細(xì)胞。 3、反定型中,可將血清和A、B紅細(xì)胞在37 預(yù)熱進(jìn)行試驗(yàn)。 4、用吸收后血清進(jìn)行試驗(yàn)(自身吸收的或用純合子O型紅細(xì)胞吸收的,34,解決Rh定型中的問題,1、由冷自身抗體造成可用解決ABO定型問題的方法來避免。 2、由IgG致敏的紅細(xì)胞,試驗(yàn)必須要進(jìn)行適當(dāng)?shù)膶?duì)照試驗(yàn)。 或使用使用有鹽水反應(yīng)活性的試劑。,35,(二)在有自身抗體存在時(shí)檢測(cè)同種抗體 1、有溫型反應(yīng)性抗體存在時(shí)檢測(cè)同種抗體 自身吸收 異體吸收法 稀釋技術(shù),36,37,2、有冷型反應(yīng)性抗體存在時(shí)檢測(cè)同種抗體 用病人本身紅
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