07第七章 芳香胺類藥物的分析1.ppt

1、第七章 芳香胺類藥物的分析 Analytical of Aromatic amines, Page 2,芳香胺 (Aromatic amines),芳胺類 芳烴胺類,（1）,（2）,例：benzocaine, procaine hydrochloride,例：paracetamol, lidocaine hydrochloride,例：adrenaline, dopamine hydrochloride,（1）,（2）,例：oxprenolol, carteolol hydrochloride, Page 3,第一節(jié) 芳胺類藥物的分析,結(jié) 構(gòu) (Structure),1. 芳伯氨基：重氮化偶合

2、反應(yīng)；與芳醛縮合成Schiff堿；易氧化變色等,2. 水解：受光線、熱、堿的影響；鹽酸丁卡因BABA，其余藥物PABA,3. 弱堿性：叔胺氮原子，生物堿沉淀劑反應(yīng)，非水溶劑滴定,4. 溶解性：游離堿，油狀液體或低熔點(diǎn)固體難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；鹽酸鹽白色結(jié)晶粉末，具一點(diǎn)的熔點(diǎn)，易溶于水和乙醇，難溶于有機(jī)溶劑。,化學(xué)性質(zhì) (Feature),苯佐卡因(benzocaine), 鹽酸普魯卡因(procaine hydrochloride), 鹽酸丁卡因(tetracaine hydrochloride).,1. 對(duì)氨基苯甲酸酯類, Page 4,2. 酰胺類,paracetamol acedap

3、sone,lidocaine hydrochloride,1. 水解 2. 醋酸 乙醇/硫酸 醋酸乙酯,3. 對(duì)乙酰氨基酚三氯化鐵,4. 弱堿性：叔胺氮原子生物沉淀劑沉淀,5. 酰胺氮原子與金屬離子絡(luò)合顯色,bupivacaine hydrochloride,結(jié) 構(gòu) (Structure),化學(xué)性質(zhì) (Feature),對(duì)乙酰氨基酚(paracetamol), 醋氨苯砜(acedapsone), 鹽酸利多卡因(lidocaine hydrochloride), 鹽酸布比卡因(bupivacaine hydrochloride).,(共性),(特性), Page 5,芳伯氨基：苯佐卡因、鹽酸普魯

4、卡因、鹽酸普魯卡因胺 NaNO2/HCl 堿性-萘酚 有色偶氮染料（橙黃到猩紅色）,潛在芳伯氨基：對(duì)乙酰氨基酚、醋氯苯砜 鹽酸或硫酸加熱水解 NaNO2/HCl 堿性-萘酚 有色偶氮染料（紅色）,區(qū)別鹽酸丁卡因：,（乳白色）,（一）重氮化偶合反應(yīng),鑒別試驗(yàn) (Identification), Page 6,（二）與三氯化鐵反應(yīng),（藍(lán)紫色）,（三）與金屬離子反應(yīng) 與銅和鈷離子反應(yīng) （具有芳酰胺結(jié)構(gòu)的，如鹽酸利多卡因） 硫酸銅/碳酸鈉試液藍(lán)紫色配合物 氯化鈷/酸性溶液亮綠色細(xì)小鈷鹽沉淀,顯黃色（溶于氯仿）,2. 羥肟酸鐵鹽反應(yīng)（具有芳酰胺結(jié)構(gòu)的，如鹽酸普魯卡因胺） 濃過氧化氫/加熱至沸 羥肟酸 三

5、氯化鐵 羥肟酸鐵（紫紅色）,3. 與汞離子反應(yīng) 芳酰胺類，如鹽酸利多卡因 硝酸汞/硝酸，煮沸 對(duì)氨基苯甲酸酯類，如苯佐卡因 硝酸汞/硝酸，煮沸,黃色,紅色或橙黃色,鑒別試驗(yàn) (Identification), Page 7,（四）水解產(chǎn)物反應(yīng) 1. 鹽酸普魯卡因10氫氧化鈉溶液白色（加熱變?yōu)橛蜖钗铮?繼續(xù)加熱 蒸氣（二乙氨基乙醇）（能使?jié)櫇竦募t色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色） 加熱至油狀物消失 放冷、加鹽酸 白色（能溶于過量的鹽酸） 2. 苯佐卡因氫氧化鈉試液 煮沸 乙醇 加入碘試液/加熱 黃色（碘仿臭氣） （五）制備衍生物測(cè)熔點(diǎn) 1. 鹽酸利多卡因 三硝基苯酚 三硝基苯酚利多卡因（mp. 228232）

6、 鹽酸布比卡因 三硝基苯酚布比卡因（mp. 194） 2. 鹽酸丁卡因 25硫氰酸銨溶液/5醋酸溶液 丁卡因硫氰酸鹽（ mp. 131 ）,鑒別試驗(yàn) (Identification), Page 8,（六）紫外特征吸收光譜,鑒別試驗(yàn) (Identification), Page 9,（七）紅外吸收光譜,鹽酸普魯卡因 鹽酸普魯卡因胺,波數(shù)cm-1 波數(shù)cm-1,鑒別試驗(yàn) (Identification),酯羰基C=O 1692 酯基C-O 1271, 1170, 1115 二乙胺鹽N-H 2585 2645（略向高波數(shù)） 1550（ N-H 酰胺帶） 1280（ N-H酰胺帶 ）, Page 1

7、0,（一）對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì),工藝：,對(duì)乙酰氨基酚,的有色氧化產(chǎn)物,乙醇溶液的澄清度與顏色：中間體對(duì)氨基酚的有色氧化產(chǎn)物在乙醇中顯橙紅色或棕色。（比濁，比色）,有關(guān)物質(zhì)：中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物（例：對(duì)氨基酚、對(duì)氯乙酰苯胺、O-乙?；鶎?duì)乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亞胺等） 藥典規(guī)定：以對(duì)氯乙酰苯胺為對(duì)照品，TLC限度檢查。,對(duì)氨基酚的檢查,特殊雜質(zhì)檢查 (Detection of specific impurities), Page 11,對(duì)氨基酚 乙?；煌耆蛸A藏不當(dāng)引起水解毒性較大并有色澤,檢查方法： 取本品1.0g，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氰化

8、鈉試液1ml，搖勻，放置30min；如顯色，與對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品1.0g加對(duì)氨基酚50g用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深（0.005%）。 注：對(duì)氨基酚對(duì)照溶液不穩(wěn)定，應(yīng)臨用前新鮮配制。,特殊雜質(zhì)檢查 (Detection of specific impurities), Page 12,（二）鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查,限度：水解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸，不得超過1.2%。 檢查方法：TLC法，對(duì)氨基苯甲酸對(duì)照品對(duì)照，對(duì)二甲氨基苯甲醛溶液顯色。,黃色,特殊雜質(zhì)檢查 (Detection of specific impurities), Page 13,容量分析方法,色譜法,分光光度法

9、,亞硝酸鈉滴定法,非水溶液滴定法,含量測(cè)定 (Assay),spectrometry,sodium nitrite method,non-aqueous titrimetry,volumetric analysis,chrometography, Page 14,亞硝酸鈉滴定法sodium nitrite method,原理：,條件： 1、加入適量溴化鉀加快反應(yīng) 2、加入過量鹽酸1:2.56 3、室溫10 30 4、滴定管尖端插入液面下滴定,終點(diǎn)指示方法： 1、永停法 2、外指示劑法（碘化鉀淀粉）, Page 15,非水溶液滴定法 non-aqueous titrimetry,鹽酸丁卡因 鹽酸

10、利多卡因,側(cè)鏈烴胺的叔胺氮,側(cè)鏈哌啶環(huán)的叔胺氮,弱堿性,高氯酸非水滴定,注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氫鹵酸的干擾,鹽酸丁卡因加醋酐以突出終點(diǎn)； 例：鹽酸利多卡因的非水滴定反應(yīng)過程：,指示劑：結(jié)晶紫,指示劑：萘酚苯甲醇,鹽酸布比卡因, Page 16,分光光度法 ( spectrometry ),對(duì)乙酰氨基酚在257nm波長(zhǎng)處有最大吸收，中國(guó)藥典2005版采用百分吸收系數(shù)（ ）法，測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚的含量。,【含量測(cè)定】 取本品約40mg，精密稱定，置250ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5ml，至100ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液10ml，加

11、水至刻度，搖勻，照紫外可見分光廣度法（藥典Chp2005版附錄A），在257nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按C8H9NO2的吸收系數(shù)（ ）為715計(jì)算，即得。,例：對(duì)乙酰氨基酚、片劑、咀嚼片、注射液、栓劑、膠囊、顆粒劑, Page 17,比色法,芳伯氨基的重氮化偶合反應(yīng)生成有色偶氮染料 專屬性差 鹽酸普魯卡因與1,2-萘醌-4-磺酸鈉溶液反應(yīng)生成棕紅色化合物 適用于鹽酸普魯卡因及其制劑的常規(guī)分析,快速熒光測(cè)定,鹽酸普魯卡因胺結(jié)構(gòu)中的芳伯氨基與熒胺反應(yīng)，生成熒光物， 可在400nm、485nm波長(zhǎng)處測(cè)定熒光強(qiáng)度 較重氮化法靈敏、簡(jiǎn)便，適用于普魯卡因胺制劑的測(cè)定。, Page 18,以苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，可以

12、同時(shí)測(cè)定鹽酸普魯卡因注射液中的普魯卡因及其降解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸（PABA），不需分離提取，準(zhǔn)確簡(jiǎn)便。 色譜條件（色譜柱、流動(dòng)相、檢測(cè)器） 測(cè)定方法（供試品溶液、對(duì)照品溶液的制備，進(jìn)樣量，計(jì)算方法）,高效液相色譜法 ( HPLC ), Page 19,體內(nèi)藥物分析,應(yīng)用示例：對(duì)乙酰氨基酚急性中毒的血藥濃度測(cè)定,色譜條件：Nova-PackC18柱（4m, 150mm3.9mm），Nova-PackC18預(yù)柱 柱溫：25，流動(dòng)相為甲醇水（50:50）流速：0.8ml/min 二極管陣列檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm 血漿樣品制備：取靜脈血34ml，置含肝素抗凝劑的離心管中，離心分離5min (3000rpm)，上清液為待測(cè)血漿。吸取上述血漿1ml，加飽和硫酸鋅溶液1m