DB33 T 625.3-2007 無公害豆芽 第3部分 6-芐基腺嘌呤殘留量和4-氯苯氧乙酸鈉殘留量的測定

  53 備案號：  浙 江 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)   2007 無公害豆芽  第 3 部分： 6 芐基腺嘌呤殘留量和  4氯苯氧乙酸鈉殘留量的測定  2007布  2007施  浙江省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局  發(fā)布   2007 I 前     言  625 2007無公害豆芽分為三個部分：   第 1部分：生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程；   第 2部分：質(zhì)量安全要求；   第 3部分： 6 本 部分為 625 2007無公害豆芽 第 3部分。  本 部分的附錄 為資料性附錄。  本部分起草單位：浙江省疾病預(yù)防控制中心、寧波市疾病預(yù)防控制中心、杭州市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢測院、浙江省農(nóng)業(yè)廳農(nóng)作物管理局、寧波市衛(wèi)生監(jiān)督所、寧波市五龍?zhí)妒卟耸称酚邢薰尽幉ㄊ匈|(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局。  本部分主要起草人：李小平、韓見龍、蔡增軒、金米聰、趙建陽、芮昶、蔣經(jīng)偉、陶禮明、戴建剛。   2007 1 無公害豆芽  第 3 部分： 6芐基腺嘌呤殘留量和 4氯苯氧乙酸鈉殘留量的測定  第一法  豆芽中 6 S 法  1 范圍  本 方法 規(guī)定了豆芽中 6  本 方法 適用于豆芽中 6 本 方法 檢出限為 1 10-6 mg/ 2 原理  豆芽中殘留的 6相柱分離，電噴霧離子化（ 多離子反應(yīng)監(jiān)測（ 式進(jìn)行定量測定 。 以試樣峰的保留時間 、母離子（ m/z: +H+）與子離子 (性，以子離子 (面積外標(biāo)法定量 。  3 試劑  除非另有規(guī)定，僅使用分析純試劑、蒸餾水或去離子水。  酸 。  腈（ 。  醇 （ 。  0%的甲醇水溶液。  化 甲醇：每 100 醇中加入乙酸 50L ，混勻。  準(zhǔn) 溶液的配置：  準(zhǔn)儲備溶液  精密稱取 6量  00 甲醇溶解并定容至刻度，作為標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。此標(biāo) 準(zhǔn)儲備溶液每毫升相當(dāng)于 1.0 準(zhǔn)使用液用甲醇稀釋至每毫升含 1g 的 6在 4冰箱中儲存，有效期 1個月。  準(zhǔn) 工作 溶液  白豆芽萃取液制備  選擇在生產(chǎn)過程中未添加 6豆芽菜。按 樣處理 方法提取，經(jīng) 濾膜過濾。必要時使用 以確定在 6峰處不存在干擾。  準(zhǔn) 工作 溶液 系列配制  準(zhǔn)確吸取標(biāo)注使用液 1 L、 2 L、 4 L、 6 L、 8 L、 10  空白豆芽萃取液 （  1 制成濃度依次 為 1 ng/2ng/4 ng/6 ng/8 ng/10 ng/  4 儀器  織搗碎機(jī)。   2007 2 平（精 度  。  效液相色譜 串聯(lián)四極桿質(zhì)譜（ S）。  質(zhì)機(jī)（速度范圍：  6,000 24,000   心機(jī) (最高轉(zhuǎn)速 :15,000   5 分析步驟  樣處理  稱取豆芽樣品 500 5確 至  50 入10  均質(zhì)機(jī)勻 質(zhì) 3 0000 0清液轉(zhuǎn)入 50 品再用 10 復(fù) 提取 一次 。合并上清液，用水定容至刻度，搖勻 ，吸取 20容量瓶中， 用 50%甲醇 水 溶液 定容至刻度，搖勻 ， 經(jīng) 膜過濾，供   譜 參考 條件  色譜柱： 18 柱（ 50  5m  顆 徑 ） 。  流動相 A：水（ 酸） 。  流動相 B：甲醇（ 酸） 。  流速： mL/ 進(jìn)樣量：  10  柱溫： 35 。  表 1   梯度洗脫條件  時間（  流動相 A 流動相 B 變化曲線  0% 50%  4% 56% 6 % 0% 6 % 0% 1 0% 50% 6 0% 50% 1 注： 變化曲線： 1為立即變化， 6為線性變化  譜 參考 條件  離子化 方式    毛細(xì)管電壓  ( 錐孔電壓  (V)  57。    V)    源溫度  ( ) 120。  脫溶劑溫度  ()  350。  錐孔反吹氣流  (L/50。  脫溶劑氣流  (L/454。      離子能量  1      離子能量  2   2007 3 光電倍增管  (V) 650。  碰撞池氣壓 ( 定  準(zhǔn)確吸取 準(zhǔn)系列溶液和試樣溶液注入液相色譜 照本標(biāo)準(zhǔn) 保留時間及子離子 >子離子 參見附錄 A。  果計算  按外標(biāo)法計算試樣中 6  見下式：  10001000 m  X 試樣中 6mg/ A 試樣 中定量子離子 面積對應(yīng)的 6g ；  f 試樣的稀釋倍數(shù)；  m 試樣的取樣量， g。  計算 結(jié)果 表示到三位有效數(shù)字。  6 精密度  在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果絕對差值不得超過算術(shù)平均值的 20%。   2007 4 附  錄  A （資料性附錄）  >離子流圖  > 圖 >離子流圖   2007 5 第二法   41 范圍  本方法規(guī)定了豆芽中 4 本方法適用于豆芽中 4 本方法 檢出限為 mg/ 2 原理  豆芽中的 4乙酸鈉用稀堿提取，酸化后用乙醚萃取，高效液相色譜紫外檢測器測定，保留時間定性，外標(biāo)法定量。  3 試劑  除非另有規(guī)定，僅使用分析純試劑、蒸餾水或去離子水。  氫氧化鈉。  鹽酸。  乙醚。  甲醇 （   冰醋酸。  氫氧化鈉溶液（ ）：  稱取 氧化鈉，溶于水并稀釋至 1000  鹽酸溶液（ 1： 1）：取 100水稀釋至 200 氯化鈉 酸性溶液（ 40 g/L）：于 10040 g/L）中加 酸酸化。  磷酸鹽 緩沖液（ ）：稱取 加水溶解，并定容至 1000 50%的  4密稱取 4含量 中國醫(yī)藥集團(tuán)上海化學(xué)試劑公司 )甲醇溶解并移入 100釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于  4冰箱中儲存，有效期 1個月。臨用時用甲醇稀釋至每毫升相當(dāng)于  4 儀器  組織搗碎機(jī)。  天平 （精度 。  超聲波 儀。  均 質(zhì)機(jī)（ 速度范圍：  6,500  24,000   旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。  酸度計。  高效液相色譜儀（帶紫外檢測器）。  5 分析方法  樣品處理  稱取經(jīng)組織搗碎機(jī)搗碎的豆芽試樣 10g（精確至  50 入 30用 均質(zhì)機(jī)均質(zhì) （ 10,000 勻 38000r/0清 液轉(zhuǎn)入 50品再用少量 氫氧化鈉（ 復(fù) 提取 1次，離心后。合并上清液，并用 氫氧化鈉（ 定容至刻度，搖勻。 取此液 50 鹽酸溶液（  50取 3次，每次振搖 1并乙醚層，用 滌，棄去水層，乙醚層用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸至近干，用甲醇溶解并定容至  高效液相色譜分析。   2007 6 標(biāo)準(zhǔn)曲線  準(zhǔn)確吸取每毫升相當(dāng)于 400 甲醇稀釋至刻度。制成濃度依次為 、 、 、 、 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，供高效液相色譜分析。  色譜參考條件  色譜柱： B  250 5 m）。  檢測波長： 228 流動相：甲醇 + 磷酸鹽緩沖液（ 40+60）。  流速：  柱溫： 30 。  測定  吸取 試樣液注入高效液相色譜儀，按照 保留時間定性，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。  結(jié)果計算  按外標(biāo)法計算試樣中 4 見下式：  010 00 m 式中：  X 試樣中 4mg/ A 從標(biāo)準(zhǔn)