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湖南生物機(jī)電職業(yè)技術(shù)學(xué)院 畢 業(yè) 設(shè) 計(jì) 報(bào) 告 書(shū) 題目: 獼猴桃組培莖尖培育 方案設(shè)計(jì) 專(zhuān) 業(yè) 都 市 園 藝 班 級(jí) 園 藝 13327 班 姓 名 宋 和 美 指導(dǎo)教 師 蔡 冬 元 2016 年 6 月 1 日 目 錄 第一部分 設(shè)計(jì)任務(wù)與調(diào)研 第二部分 設(shè)計(jì)說(shuō)明 第三部分 設(shè)計(jì)試驗(yàn) 第四部分 參考文獻(xiàn) 第五部分 致謝 第一部分 設(shè)計(jì)任務(wù)與調(diào)研 一、主要任務(wù) 獲得 獼猴桃長(zhǎng)勢(shì)良好莖尖 殖培養(yǎng)基配方以及最佳的生根培養(yǎng)基配方。 二、設(shè)計(jì)的思路、方法 設(shè)計(jì)不同的植物生長(zhǎng)激素梯度組合,設(shè)計(jì)平行重復(fù)實(shí)驗(yàn),按照不同的配比設(shè)計(jì)愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基。 三、 相關(guān)資料 獼猴桃的功效與作用有哪些 ?營(yíng)養(yǎng)學(xué)家介紹獼猴桃是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富的水果,具有多重功效和作用,被人們稱(chēng)為果中之王。獼猴頭含有亮氨酸、苯丙氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、丙氨酸等 10 多種氨基酸,以及豐富的礦物質(zhì),包括豐富的鈣、磷、鐵,還含有胡蘿卜素和多種維生素,對(duì)保持人體健康具有重要的作用。 可以作為一種飲料治療壞血病。每天一杯獼猴桃飲料可以在一個(gè)月以?xún)?nèi)很好的改善膚色和質(zhì)地。它含有的維生素 C 有助于降低血液中的膽固醇水平,起到擴(kuò)張血管和降低血壓的作用。它還加強(qiáng)心臟肌肉。獼猴桃的功效還包括提升免疫功能,治 療肝臟疾病,消化不良,貧血,泌尿系統(tǒng)問(wèn)題,呼吸系統(tǒng)疾病,腦疾病等。它還增加紅血球生產(chǎn),加強(qiáng)牙齒和指甲。應(yīng)該記住的是,健康均衡的飲食,每日攝入大量的水,在加上使用獼猴桃可以治愈很多健康問(wèn)題。 第二部分 設(shè)計(jì)說(shuō)明 一、理論分析 猴桃的莖尖 為外植體 ,在 養(yǎng)基上 ,研究不同培養(yǎng)條件下植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)及離體快繁的影響。結(jié)果表明 :養(yǎng)基附加 ,2, 都可使根、莖、葉誘導(dǎo)形成愈傷組織 ,其誘導(dǎo)效果根 莖 葉 ,且暗培養(yǎng)條件下的誘導(dǎo)率優(yōu)于自然條件下的培養(yǎng) ,并選出最佳培養(yǎng)基 1/2以 獼猴桃莖尖 的外植體 ,在自然光和暗培養(yǎng)條件下可一步成苗 ,其出芽率自然光下優(yōu)于暗培養(yǎng)條件下 ,最佳培養(yǎng)基為 1/2 猴桃的莖尖 為外植體 ,誘導(dǎo)出叢生芽 ,叢生芽經(jīng)切割后接種到繼代增殖培養(yǎng)基上 ,每月可增殖 5 8 倍 ,在含 1/2養(yǎng)上 ,試管苗生根率達(dá)到100%,試管苗移栽成活率達(dá)到 90%以上。 7 二、設(shè)計(jì)方案 選擇 獼猴桃莖尖 為實(shí)驗(yàn)材料 ,以 養(yǎng)基為 基本 的 培養(yǎng)基 ;選擇組織培養(yǎng)常用的細(xì)胞分裂素 6生長(zhǎng)素 行研究。設(shè)置植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)濃度梯度組合,并設(shè)置 平行重復(fù)實(shí)驗(yàn)。 培養(yǎng)基的制作: 1/2代 ) 三、預(yù)期目標(biāo) 從培養(yǎng)材料的優(yōu)選,培養(yǎng)條件的優(yōu)化,培養(yǎng)基的篩選等方面著手研究,利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得 無(wú)菌培養(yǎng)物,再進(jìn)行繼代培養(yǎng)獲得 獼猴桃 最佳的 莖尖 增殖培養(yǎng)基配方以及最佳的生根培養(yǎng)基配方,最終獲得快速繁殖的流程 。 四、 資金使用情況 序號(hào) 開(kāi)支科目 預(yù)算經(jīng)費(fèi)(元) 主要用途 1 試劑費(fèi) 1500 實(shí)驗(yàn)研究所需的各種試劑 2 打印費(fèi) 200 打印上交資料、研究資料 3 材料費(fèi) 300 用來(lái)購(gòu)置培養(yǎng)瓶 4 總額 2000 第三部分 設(shè)計(jì)試驗(yàn) 一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?通過(guò)實(shí)驗(yàn),初步掌握獼猴桃材料消毒、接種的無(wú)菌操作技術(shù)以及獼猴桃 初代培養(yǎng)的方法。 二、 實(shí)驗(yàn)器材: 1、實(shí)驗(yàn)材料:獼猴桃的莖尖 2、實(shí)驗(yàn)試劑: 汞、吐溫 80、酒精 3、實(shí)驗(yàn)設(shè)備 :初代培養(yǎng)基 47瓶、無(wú)菌水,滅菌工具、超凈工作臺(tái),高壓滅菌鍋等 。 三、 實(shí)驗(yàn)方法和步驟: 1、 培養(yǎng)基的制作: 1/2代 ) 2、 滅菌:配制好的培養(yǎng)基放入到滅菌高壓鍋中,大概在 121度滅菌 15分鐘到 30分鐘, 3、接種:在接種前,打開(kāi)超凈工作臺(tái)紫外燈,照射約 15分鐘;然后關(guān)閉紫外燈,打開(kāi)超凈工作臺(tái)的風(fēng)機(jī),并微啟超凈工作臺(tái)的玻璃擋板,通風(fēng) 20,即可進(jìn)行無(wú)菌操作。用 75%的酒精紗布擦拭 3、接種:在接種前,打開(kāi)超凈工作臺(tái)紫外燈,照射約 15分超凈工作臺(tái)面,再將接種工具放進(jìn)超凈工作臺(tái)中。 4、猴桃莖尖的處理: 到基地取一些長(zhǎng)勢(shì)良好的獼猴桃莖尖 獼猴桃表面處理: 修剪 刷去表面的絨毛 用飽和洗衣粉浸泡 10分鐘 流水沖洗 60秒 瀝干水帶進(jìn)接種室 用 70%精浸 30分鐘,倒出 用 汞 +吐溫 80浸泡 3秒鐘 用無(wú)菌水沖洗 5 5、 無(wú)菌操作:在超凈工作臺(tái)中,將滅好菌的獼猴桃莖尖放在接種工具上,清除沒(méi)有用的部位,將切好的的獼猴桃放進(jìn)獼猴桃初代培養(yǎng)基上。 6、培養(yǎng):將接種好的獼猴桃外植體控制在溫度 252 ,光照周期 12h/d,光照強(qiáng)度 2000養(yǎng) 20天。 員 分工 本組組員共 8 人,分工合理明確。 2 人清洗培養(yǎng)瓶, 2 人進(jìn)行獼猴桃莖尖處理, 1 人準(zhǔn)備所需材料, 2 人配制培養(yǎng)基, 1 人進(jìn)行無(wú)菌操作接種。 四、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析方法 試驗(yàn)結(jié)束時(shí),目測(cè)生長(zhǎng)情況并用 5 級(jí)表示,分別記為“ +”表示長(zhǎng)勢(shì)緩慢,沒(méi)有明顯變化;“ +”表示生長(zhǎng)緩慢,新根少,葉片較黃 ,愈傷組織少;“ +”表示長(zhǎng)勢(shì)一般,新根少,葉片較綠,狹窄,莖細(xì),愈傷組織較少;“ +”表示長(zhǎng)勢(shì) 較好,新根較多,根較短,葉片濃綠較寬,莖粗大,愈傷組織較多;“ +”表示長(zhǎng)勢(shì)優(yōu)良,新根多且長(zhǎng),葉片濃綠較寬,莖粗節(jié)多,愈傷組織多。第 四 部分 參考文獻(xiàn) 1、 朱鴻云 猴桃 中國(guó)林業(yè)出版社 2、 張指南、候志潔 北京 3、 梁疇芬 ,福格遜 ;中華獼猴桃硬毛變種學(xué)名訂正 J;廣西植物 ;1984年 03期 4、 李思光 ,羅玉萍 ,陳萬(wàn)秋 ,黃衛(wèi) ;獼猴桃基因組 J;南昌大學(xué)學(xué)報(bào) (理科版 );2001年 03 第 五 部分 致謝 畢業(yè)設(shè)計(jì)已經(jīng)接近了尾聲,這也意味著我的大學(xué)生活就要結(jié)束了,學(xué) 習(xí) 生活一 晃而過(guò) 。首先,我要特別感謝我的指導(dǎo)老師 蔡冬元 老師。做設(shè)計(jì)的過(guò)程是艱辛的,但是在我的努力之下還是完成了。在這個(gè)過(guò)程中 蔡 老師給了我很大的的幫助, 沒(méi)有 她 的盡心指導(dǎo)和嚴(yán)格的要求,我也不會(huì)順利完成這次設(shè)計(jì)。每次遇到難題,我最先做的就是向 蔡 老師尋求幫助,而 蔡 老師每次不管忙或閑,總會(huì)抽空來(lái)找我面談,然后一起商量解決的辦法。 蔡 老師平日里工作繁多,但我做畢業(yè)設(shè)計(jì)的每個(gè)階段,從選題到查閱資料, 到之后設(shè)計(jì)報(bào)告 的修改,后期 畢業(yè)設(shè)計(jì) 格式調(diào)整等各個(gè)環(huán)節(jié)中都給予了我悉心的指導(dǎo)。這幾個(gè)月以來(lái), 蔡 老師不僅在學(xué)業(yè)上給我以

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