癌細胞轉移與浸潤

1、癌細胞的轉移、癌細胞的轉移、 浸潤及實驗技術浸潤及實驗技術 腫瘤細胞與癌細胞的腫瘤細胞與癌細胞的區(qū)別區(qū)別 腫瘤分為良性腫瘤和惡性腫瘤，在惡性腫腫瘤分為良性腫瘤和惡性腫瘤，在惡性腫 瘤中，有瘤中，有上皮上皮分化而來的稱為分化而來的稱為癌癌，由，由間葉間葉 組織分化而來稱為組織分化而來稱為肉瘤肉瘤。 癌是起源于上皮細胞的分化程度低癌是起源于上皮細胞的分化程度低 惡性程惡性程 度高的惡性腫瘤細胞。度高的惡性腫瘤細胞。 癌細胞是惡性腫瘤的一種。癌細胞是惡性腫瘤的一種。 腫瘤腫瘤 上皮組織良性腫瘤上皮組織良性腫瘤- -腺瘤腺瘤 上皮組織良性腫瘤上皮組織良性腫瘤- -腺瘤腺瘤 上皮組織惡性腫瘤上皮組織惡性

2、腫瘤- -鱗狀細胞癌鱗狀細胞癌 上皮組織惡性腫瘤上皮組織惡性腫瘤腺癌腺癌 癌細胞癌細胞 上皮組織惡性腫瘤上皮組織惡性腫瘤- -基底細胞癌基底細胞癌 間葉組織良性腫瘤間葉組織良性腫瘤- -脂肪瘤脂肪瘤 間葉組織良性腫瘤間葉組織良性腫瘤- -血管瘤血管瘤 浸潤與轉移浸潤與轉移 具有局部浸潤和遠程轉移能力是惡性腫瘤具有局部浸潤和遠程轉移能力是惡性腫瘤 特有的性質它是引起患者死亡的的主要原特有的性質它是引起患者死亡的的主要原 因，研究腫瘤浸潤和轉移機制對臨床治療因，研究腫瘤浸潤和轉移機制對臨床治療 有十分重要的意義。有十分重要的意義。 癌細胞轉移和癌細胞浸潤是二個不同的病癌細胞轉移和癌細胞浸潤是二個不

3、同的病 理過程，浸潤是轉移的前提，但不等于理過程，浸潤是轉移的前提，但不等于 定發(fā)生轉移，而轉移則必定包含一個浸潤定發(fā)生轉移，而轉移則必定包含一個浸潤 的過程。的過程。 癌細胞浸潤癌細胞浸潤 人體浸潤人體浸潤-人體組織內(nèi)侵入了異常細胞或人體組織內(nèi)侵入了異常細胞或 出現(xiàn)了正常情況下不應出現(xiàn)的機體細胞，出現(xiàn)了正常情況下不應出現(xiàn)的機體細胞， 以及某些病變以及某些病變 癌細胞浸潤癌細胞浸潤-細胞可以轉移到其他組織中細胞可以轉移到其他組織中 ，并在其他組織中繼續(xù)分裂繁殖，也就是，并在其他組織中繼續(xù)分裂繁殖，也就是 癌細胞轉移癌細胞轉移。 癌細胞浸潤癌細胞浸潤 過程機理過程機理 (1)(1)癌細胞的增生和

4、運動：癌細胞的不斷增癌細胞的增生和運動：癌細胞的不斷增 生是癌細胞浸潤的前提。增生導致腫瘤組生是癌細胞浸潤的前提。增生導致腫瘤組 織內(nèi)部壓力增高，細胞趨向于向周圍擴展織內(nèi)部壓力增高，細胞趨向于向周圍擴展 。癌細胞同時能夠移動，并具有與細胞漿。癌細胞同時能夠移動，并具有與細胞漿 內(nèi)微管系統(tǒng)有關的阿米巴運功。移動的潛內(nèi)微管系統(tǒng)有關的阿米巴運功。移動的潛 力與癌基因的表達有關。力與癌基因的表達有關。 癌細胞浸潤癌細胞浸潤 過程機理過程機理 (2)(2)癌細胞的分離：其分離傾向與細胞結構癌細胞的分離：其分離傾向與細胞結構 的變化和粘附力的下降有密切關系的變化和粘附力的下降有密切關系 癌細胞表面負電荷高

5、、與鈣離子結合能力癌細胞表面負電荷高、與鈣離子結合能力 差、部分上皮性腫瘸的細胞橋粒體發(fā)育不差、部分上皮性腫瘸的細胞橋粒體發(fā)育不 全等，均促使細胞的彼此排斥和分離。全等，均促使細胞的彼此排斥和分離。 癌細胞浸潤癌細胞浸潤 過程機理過程機理 (3)(3)間質對浸潤的作用：間質中除含有癌細間質對浸潤的作用：間質中除含有癌細 胞自身產(chǎn)物外，基質的各種成分對癌細胞胞自身產(chǎn)物外，基質的各種成分對癌細胞 的浸潤有一定的作用。層連蛋白與惡性程的浸潤有一定的作用。層連蛋白與惡性程 度高的腫瘤細胞有親和性，有介導癌細胞度高的腫瘤細胞有親和性，有介導癌細胞 與基底膜與基底膜型膠原粘連的作用，同時能促型膠原粘連的作

6、用，同時能促 進癌細胞的移動。進癌細胞的移動。 轉移轉移 概念及過程：癌細胞轉移指癌細胞脫離其概念及過程：癌細胞轉移指癌細胞脫離其 原發(fā)部位，通過各種途徑到不連續(xù)的靶組原發(fā)部位，通過各種途徑到不連續(xù)的靶組 織繼續(xù)增殖生長，形成同樣性質腫瘤的過織繼續(xù)增殖生長，形成同樣性質腫瘤的過 程。程。 轉移轉移 轉移包括轉移包括脫離脫離、轉運轉運、生長生長三個主要環(huán)節(jié)三個主要環(huán)節(jié) ，是一個非常復雜的過程：癌細胞脫離原，是一個非常復雜的過程：癌細胞脫離原 發(fā)癌群體，粘連侵襲基底膜并在周圍間質發(fā)癌群體，粘連侵襲基底膜并在周圍間質 中浸潤生長中浸潤生長; ;與局部毛細血管或毛細淋巴管與局部毛細血管或毛細淋巴管 內(nèi)

7、皮細胞密切接觸并穿透其管壁，或突入內(nèi)皮細胞密切接觸并穿透其管壁，或突入 腔道腔道( (漿膜腔漿膜腔) )，在血管、淋巴管內(nèi)繼續(xù)存，在血管、淋巴管內(nèi)繼續(xù)存 活并被轉運，癌細胞與血管或淋巴管內(nèi)皮活并被轉運，癌細胞與血管或淋巴管內(nèi)皮 細胞和基底膜粘連，穿透毛細血管或毛細細胞和基底膜粘連，穿透毛細血管或毛細 淋巴管壁，向周圍間質浸潤，在基底膜不淋巴管壁，向周圍間質浸潤，在基底膜不 斷增生。斷增生。 轉移轉移 類型類型 淋巴管轉移淋巴管轉移：癌細胞侵襲基底膜，并在周圍間質中浸潤：癌細胞侵襲基底膜，并在周圍間質中浸潤 生長，與毛細淋巴管內(nèi)皮細胞粘連，穿過內(nèi)皮細胞間的生長，與毛細淋巴管內(nèi)皮細胞粘連，穿過內(nèi)皮

8、細胞間的 暫時裂隙，在淋巴管內(nèi)存活并被轉運，進而粘連并穿過暫時裂隙，在淋巴管內(nèi)存活并被轉運，進而粘連并穿過 竇內(nèi)皮細胞和基底膜進入淋巴結實質內(nèi)生長。竇內(nèi)皮細胞和基底膜進入淋巴結實質內(nèi)生長。 血行轉移血行轉移：癌細胞侵襲基底膜、在周周間質中浸潤，然：癌細胞侵襲基底膜、在周周間質中浸潤，然 后通過血管內(nèi)皮細胞間隙，在血管內(nèi)形成瘤栓，隨血液后通過血管內(nèi)皮細胞間隙，在血管內(nèi)形成瘤栓，隨血液 循環(huán)轉移到全身各處。循環(huán)轉移到全身各處。 種植性轉移種植性轉移：胸腔或腹腔腫瘤累及漿膜時，瘤細胞可以：胸腔或腹腔腫瘤累及漿膜時，瘤細胞可以 脫落入漿膜腔，種植于鄰近或遠處漿膜面繼續(xù)生長，并脫落入漿膜腔，種植于鄰近或

9、遠處漿膜面繼續(xù)生長，并 可引起血性積液及粘連可引起血性積液及粘連. . 細胞浸潤實驗細胞浸潤實驗 TranswellTranswell實驗實驗 RTCARTCA技術技術 細胞浸潤實驗細胞浸潤實驗 TranswellTranswell細胞遷移及浸潤實驗細胞遷移及浸潤實驗 1 1、TranswellTranswell小室制備小室制備（細胞浸潤實驗所（細胞浸潤實驗所 需，遷移實驗無此步驟）需，遷移實驗無此步驟） （1 1）包被基底膜）包被基底膜 （2 2）水化基底膜）水化基底膜 細胞浸潤實驗細胞浸潤實驗 2、制備細胞懸液，具體細胞密度需要通過多次實驗自己摸索。 3、細胞接種到transwell小室中

10、，含趨化因子的培養(yǎng)基加入細胞培養(yǎng)板中。 4、細胞培養(yǎng)12-48小時（主要依癌細胞遷移及侵襲能力而定）。 5、結果統(tǒng)計： （1）直接計數(shù)法： A用棉簽擦去基質膠和上室內(nèi)的細胞 B染色：常用染色方法有結晶紫染色、臺盼蘭染色、Giemsa染色、蘇木精染色、伊紅染色。 C細胞計數(shù)：選取5-10個視野計數(shù)。 （2）間接計數(shù)法： A用棉簽擦去基質膠和上室內(nèi)的細胞 B細胞培養(yǎng)板中加入含0.5mg/ml MTT的培養(yǎng)基，將小室置于其中，膜浸沒在培養(yǎng)基中，37 4小時后取出。 C 加入DMSO，將小室置于其中，使膜浸沒在DMSO中，振蕩10分鐘，使甲臜充分溶解。取出 小室，酶標儀上測OD值。 細胞浸潤實驗細胞浸潤實驗 Transwell Transwell 細胞遷移實驗結果圖片（很難細胞遷移實驗結果圖片（很難 做到對細胞準確計數(shù)）做到對細胞準確