獐芽菜化學(xué)成分研究v

1、獐牙菜化學(xué)成分研究獐牙菜化學(xué)成分研究編纂：牟林云編纂：牟林云一、獐牙菜基本信息簡介一、獐牙菜基本信息簡介中文學(xué)名 獐牙菜 拉丁學(xué)名 Swertia bimaculata (Sieb. et Zucc.)Hook. Thoms.ex Clarke 科 龍膽科Gentianaceae 屬 獐牙菜屬 Swertia L. 獐牙菜屬植物全球約有 170 種，中國有 80 種，主要分布于云南、四川等地，云南有 38 種。 種類命名:根據(jù)其分布的地域或外形特征進(jìn)行命名。 例如：印度獐牙菜、川西獐牙菜、斜莖獐牙菜、 大籽獐牙菜。 在我國該屬植物入藥歷史悠久，藥用有 35 種，具有清熱利膽、除濕解毒等功效，常

2、用于治療急性黃疸型肝炎、骨髓炎等疾病。二、課題組的研究發(fā)現(xiàn)二、課題組的研究發(fā)現(xiàn)1 1、工作簡介、工作簡介在前期工作中，對(duì)獐牙菜屬植物開展了化學(xué)成分及生物活性研究，從該屬植物中發(fā)現(xiàn)了 酮及其苷類、環(huán)烯醚萜及其苷類等化合物，并對(duì)這些成分進(jìn)行了生物活性鑒定，發(fā)現(xiàn)其具有抗菌消炎、抗煙草花葉病毒（TMV）、降血糖和抗腫瘤等功效。近期研究發(fā)現(xiàn)獐牙菜屬植物提取物在抑制由性傳播的病毒（包括 HIV）、抗皮膚癌、抗HBV、神經(jīng)保護(hù)作用等方面也具有較好的活性。2 2、具體分離化合物列舉、具體分離化合物列舉（1 1）環(huán)烯醚萜及其苷類，如龍膽苦苷、獐牙菜苦苷。）環(huán)烯醚萜及其苷類，如龍膽苦苷、獐牙菜苦苷。 中文名稱：獐

3、牙菜苦苷 CAS NO: 17388-39-5 英文名稱：Swertiamarin 分子式: C16H22O10 分 子 量：374.34 來源: 本品為從龍膽科植物斜莖獐牙菜(Swertiapatens)中分離而得的一種環(huán)烯醚萜類化合物。 （2 2）三萜及其苷類，如齊墩果酸、熊果酸。）三萜及其苷類，如齊墩果酸、熊果酸。 中文名稱：齊墩果酸 CAS NO:508-02-1 英文名稱：Oleanolic acid 分子式:C30H48O3 分子量:456.71 來 源:本品為從龍膽科植物川西獐牙菜(s. mussotii franch.)中分離而得的一種五環(huán)三萜類化合物。（3 3）木脂素類，如丁

4、香脂素、禿毛冬青甲素、蛇菰）木脂素類，如丁香脂素、禿毛冬青甲素、蛇菰寧。寧。 中文名稱：禿毛冬青甲素 CAS NO:77790-52-4 英文名稱：Glaberide 分子式: C14H16O6 分 子 量：280.28 來源：本品為從龍膽科植物印度獐牙菜（Swertia bimaculata(Sieb. et Zucc.)Hook. f. et Thoms. ex C. B. Clarke)中分離而得的一種木脂素類化合物。 （4 4） 酮及其苷類，如芒果苷、當(dāng)藥醇苷。酮及其苷類，如芒果苷、當(dāng)藥醇苷。 中文名稱:芒果苷 CAS NO:4773-96-0 英文名稱:mangiferin from

5、 mangifera indica leaves 分子式:C19H18O11 分子量:422.34 來源：本品為從龍膽科植物大籽獐牙菜 （Swertia macrosperma）中分離而得的一種 酮類化合物。例：芒果苷的提取及其運(yùn)用。例：芒果苷的提取及其運(yùn)用。1 1 儀器與材料儀器與材料 儀器：儀器：Synapt G2 HDMS（ Waters 公司） Bruker AVII400 MHz 超導(dǎo)核磁共振儀（ Bruker 公司） Agilent1260 分 析 型 高 效 液 相 色 譜 儀 (AgilentTechnologies)，Shimaduz 制備型高效液相色譜儀 （日本島津，配備

6、PE-Pack Prep 高速流體硅膠充填色譜柱） ZF20D 暗箱式紫外分析儀(鄭州南北儀器設(shè)備有限公司) GF254 高效薄層色譜板，柱色譜硅膠均為青島海洋化工廠 生產(chǎn) 試劑：試劑：石油醚、醋酸乙酯、氯仿、丙酮、甲醇等試劑均為國藥化 學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)的分析純?cè)噭?枯斑寄主心葉煙 Nicotiana glutinosa L.、 接種用TMV- U1 株系均由云南省農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。 三、化學(xué)成分分離及其運(yùn)用三、化學(xué)成分分離及其運(yùn)用 樣本來源：樣本來源：植物樣品于 2010 年 10 月采于云南省玉溪市新 平哀牢山，由云南中醫(yī)學(xué)院楊禮攀 博士鑒定為大 籽獐牙菜 Swertia m

7、acrosperma (C. B. Clarke) C. B.Clarke 的全草。 植物標(biāo)本（ YNNi 10-10-05）已存入云南民族大學(xué) 民族藥資源化學(xué)國家民委-教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn) 室標(biāo)本 室。2 2 提取與分離提取與分離 提?。禾崛。捍笞砚啦巳莞稍锓勰?9.7 kg， 甲醇（ 40 L）超 聲（ 500 W）提取 7 次，每次 1 h，提取液減壓濃縮 得浸膏 900 g，混懸于水中，使用氯仿-水體系萃取， 減壓回收溶劑得到浸膏 470 g。分離：分離：浸膏采用MCI 柱色譜脫色劃段，使用甲醇-水（ 73） 作流動(dòng)相，共得到 4 個(gè)組分 Fr. 14。 Fr. 1（ 80 g）經(jīng)制備高

8、效液相色譜反復(fù)分離純化得化 合物 1 （ 9.2 mg）、2（ 30 mg）； Fr. 2（ 120 g）經(jīng)制備高效液 相色譜及重結(jié)晶（氯仿） 結(jié)合重復(fù)分離純化得到化合物 4（ 10 mg）、 5 （ 11 mg）、 6（ 8 mg）、 7（ 15 mg）、 8 （ 17 mg）； Fr. 4（ 43 g）經(jīng)半制備高效 液相色譜和硅膠柱色譜 （氯仿-甲醇 201）反復(fù)分離 純化得化合物 3 （ 8 mg）。3 3 結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)構(gòu)鑒定化合物 3：黃色粉末，分子式為 C19H18O11。ESI-MS m/z: 421 MH。 1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6) : 13.76 (1H,

9、 s, 5-OH), 10.60 (2H, brs, 6,7-OH), 9.80 (1H, brs, 3-OH), 7.37 (1H, s, H-8), 6.86(1H, s, H-5), 6.37 (1H, s, H-4), 4.58 (1H, d, J = 9.6Hz, H-1)； 13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) : 161.8(C-1), 102.6 (C-2), 163.9 (C-3), 93.4 (C-4), 156.3(C-4a), 102.7 (C-5), 154.1 (C-6), 143.8 (C-7), 108.1(C-8), 111.8 (C-8a),

10、 179.2 (C-9), 101.4 (C-9a), 150.8(C-10a), 73.1 (C-1), 70.3 (C-2), 79.0 (C-3), 70.7(C-4), 81.7 (C-5), 61.6 (C-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致6，故鑒定化合物 3 為芒果苷。藥理作用：1、中樞神經(jīng) 芒果苷具有明顯的中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮作用*,50-100mg/kg劑量的芒果苷腹腔注射（i.p.）可使所有受試動(dòng)物出現(xiàn)動(dòng)作震顫、豎毛、強(qiáng)迫性撕打和自主活動(dòng)增加等癥狀。這些行為改變的高峰是在給藥后30min并維持至60min,120min后逐漸下降。若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物預(yù)先給予氯丙嗪5mg/kg，i.p.則可

11、阻斷芒果苷這些作用,說明芒果苷可能是中腦邊緣系統(tǒng)D2受體的激動(dòng)劑。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在給戊巴比妥30mg/kg，i.p.之前30min若先給予芒果苷50mg/kg，i.p.可明顯延長戊巴比妥睡眠時(shí)間,先給予芒果苷的大鼠睡眠時(shí)間為(56.27.8)min,而空白對(duì)照組為(36.25.3)min,該劑量的芒果苷能明顯加強(qiáng)輕度麻醉劑量的乙醚的麻醉作用.在該劑量范圍里60%的小鼠失去正常的神經(jīng)反射,而空白對(duì)照組則無此現(xiàn)象.2、呼吸系統(tǒng) 芒果苷對(duì)豚鼠組胺、乙酰膽堿混合引喘有明顯延長引喘潛伏期作用；對(duì)小鼠濃氨水引咳可明顯延長引咳潛伏期，并明顯減少小鼠咳嗽次數(shù)；對(duì)小鼠醋酸所致腹腔毛細(xì)血管通透性增高有明顯抑制作用；對(duì)

12、小鼠氣管酚紅排泌有明顯促進(jìn)作用。3、心血管 1-2mg劑量的芒果苷對(duì)正?；蚬δ艿拖碌碾x體Ringcrs液灌注蛙心均有短暫、確切的增強(qiáng)心肌收縮力的作用,且該作用不被普萘洛爾所阻斷, 因此,它可能是一種心臟直接刺激劑。4、抗病毒 芒果苷具有體外抗型單純皰疹病毒（HSV-）作用,空斑減少率為56.8%,其抗病毒作用歸因于它抑制細(xì)胞內(nèi)病毒復(fù)制的能力.5、抗輻射 芒果苷是一種天然的清除自由基的抗氧化劑，也是一種天然的輻射保護(hù)劑，其分子結(jié)構(gòu)中的4個(gè)酚羥基具有親電子能力，且苯環(huán)是良好的能量陷阱，所以可使生物分子受輻照引發(fā)的自由基進(jìn)行一定的轉(zhuǎn)移，從而保護(hù)生物分子.6、抗腫瘤 在正常和生有腫瘤的小鼠體內(nèi)或體外治

13、療中，芒果苷均能提高脾臟細(xì)胞和腹膜巨噬細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。芒果苷可有效地減輕阿霉素（Dox）對(duì)線粒體細(xì)胞色素C氧化酶的抑制,且對(duì)Dox的抗腫瘤活性沒有影響.7、抗糖尿病 口服芒果苷及其葡糖苷后，正常小鼠血糖水平無變化，但能降低自發(fā)性糖尿病動(dòng)物模型KK-Ay小鼠的血糖濃度,且血清中胰島素水平亦有降低趨勢(shì). 腹腔注射芒果苷,可明顯降低糖尿病大鼠由于氧化性損傷引起的糖基化血紅蛋白和血清肌酸磷酸激酶(CPK)的量.實(shí)際研究運(yùn)用實(shí)際研究運(yùn)用項(xiàng)目名稱 芒果苷小檗堿鹽2型糖尿病并非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD)所屬領(lǐng)域 化藥1.1類項(xiàng)目簡介 【藥理作用】降肝酶、改善肝脂肪變、降糖、降胰島素、增加胰島素敏感性、調(diào)脂。 【作用靶點(diǎn)】AMPK激動(dòng)劑。 【擬適應(yīng)癥】2型糖尿病并非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD)。 【用法用量】口服。每次75-15