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1、放射化學在生物技術(shù)中的應(yīng)用2013放射化學張龍飛 王渝目錄放射性簡介A放射性示蹤技術(shù)B放射性免疫分析法C放射性簡介原子核衰變不穩(wěn)定的原子核不斷地自發(fā)地產(chǎn)生原子核結(jié)構(gòu)的改變,使自己轉(zhuǎn)變成另一種核素,這種過程稱核衰變。不穩(wěn)定核自發(fā)放射各種射線的現(xiàn)象,稱為放射性。核衰變類型是根據(jù)其發(fā)射核射線種類進行命名的。如最常見的有:衰變、衰變和衰變。反應(yīng)能力較弱,但有較強的穿透能力。因此比較適用于生物檢測。EYYm放射性示蹤法放射性示蹤法(radioactive tracer method) 由于放射性核素不斷發(fā)出輻射,無論它運動到哪里,都很容易用探測器探知它的下落,因此可以用作示蹤物來辨別其他物質(zhì)的運動情況和
2、變化規(guī)律。這種放射性示蹤物稱為示蹤原子或標記原子。14C、3H、32P、35S和125I等作示蹤原子,并且要把它們做成與體內(nèi)物質(zhì)相應(yīng)的有機化合物而開展示蹤研究。 凡是分子(例如基因分子)中某一原子或某些原子被放射性核素或穩(wěn)定核素所取代,而成為一類易被識別的化合物,則稱之為標記化合物。 例如:P是通過S的中子撞擊而得:S + n P + p它的衰變是經(jīng)由衰變而成。它通常用于生物化學上,研究蛋白質(zhì)磷酸化激酶。P在P之間的中子撞擊中相對產(chǎn)率較低。這其實也是一種發(fā)射,其半衰期為25.4天。其所發(fā)射的電子能量較低,因而可以擁有更高的辨識率,例如DNA定序。DNA探針是利用同位素、生物素等標記的特定DNA
3、片斷,該片斷可大至寄生蟲基因組DNA,小至20個堿基。原理:當DNA探針與待測的非標記單鏈DNA(或RNA)按堿基順序互補結(jié)合時,以氫健將2條單鏈連接而形成標記DNA-DNA(或標記DNA-RNA)的雙鏈雜交分子。將未配對結(jié)合的核苷酸溶解后用檢測系統(tǒng)(放射自顯影或酶檢測等)檢測雜交反應(yīng)結(jié)果。DNA分子探針ZFY基因PCR產(chǎn)物純化后直接核酸序列分析的放射自顯影圖這類探針多克隆在質(zhì)粒載體中,可以無限繁殖,取之不盡,制備方法簡便。DNA探針不易降解(相對RNA而言),一般能有效抑制DNA酶活性。DNA探針的標記方法較成熟,有多種方法可供選擇,如缺口平移法、隨機引物法、PCR標記法等,能用于同位素和非同位素標記。DNA分子探針放射性免疫分析法放射性免疫分析法是利用同位素標記的與未標記的抗原同抗體發(fā)生競爭性抑制反應(yīng)的放射性同位素體外微量分析方法。1960年美國化學家R.S.耶洛和S.A.貝爾森提出此法,耶洛因此于1977年獲得諾貝爾生理學或醫(yī)學獎。基本原理:是根據(jù)被測定的抗原物質(zhì)和其標記物(標記抗原)同特異性抗體之間存在著競爭性的結(jié)合。主要特點:標記的是抗原。其原理:未知抗原Ag+標記抗原Ag +已知定量抗體Ab標記抗原與抗體復合物AgAb+未知抗原與抗體
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