啤酒的質(zhì)量和衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)以及檢驗(yàn)方法匯總

1、啤酒的質(zhì)量和衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法前言: 啤酒的原料主要有大麥、啤酒花等。它們里面含的蛋白質(zhì)、碳水化合物、啤酒花苦味物質(zhì)等在釀造過程中發(fā)生細(xì)微變化后，并作為復(fù)合體存留在啤酒中。這些成分決定著啤酒的香味、醇度和泡沫。也就是說，這些成分能增加啤酒的表面張力和粘度，使啤酒能生出更白、更細(xì)的泡沫。    啤酒里一般含有大約0.5%的碳酸氣體。這些碳酸氣體在發(fā)酵過程中產(chǎn)生、并融入啤酒，但是融進(jìn)啤酒的這些碳酸氣的量約是在正常壓力下的兩倍，也就是說呈超飽和狀態(tài)。所以，當(dāng)打開啤酒拴時(shí)，里面的啤酒恢復(fù)到正常壓力狀態(tài)下，再加上倒酒時(shí)，碳酸氣受到碰撞而恢復(fù)成氣體，這樣許多氣泡浮到啤酒液面上，

2、就形成泡沫。啤酒泡沫之所以呈白色奶油狀，是因?yàn)檫@些泡沫還帶了啤酒成分形成的表面張力和粘度。     下面是啤酒的所有成分：     1.谷物（Grains）      出芽（Malting）就是把大麥浸泡在水中使其發(fā)芽。這個(gè)過程一般持續(xù)3648個(gè)小時(shí)，使麥芽中休眠狀態(tài)下的酶發(fā)育。酶在發(fā)酵過程中是非常關(guān)鍵的，它可以把淀粉轉(zhuǎn)化成糖，而糖在酵母的作用下又分解成二氧化碳和酒精。在出芽過程中，大麥的味道變得有些甜。   

3、60;    大麥在出芽后需要弄干，這個(gè)過程的不同使大麥麥芽的味道也有所不同。自然風(fēng)干的麥芽色澤只有很小的變化，可以用來釀造金黃色澤的啤酒；而經(jīng)過烘烤或煙熏的麥芽顏色變得很深，可以用來釀造色澤較重的啤酒；很多種啤酒都會(huì)使用不同品種的大麥，這樣就可以使最終產(chǎn)品的味道更加復(fù)雜。      有些啤酒廠也使用其它類別的谷物來釀造啤酒或調(diào)味。黑麥可以使啤酒增添一種香辣、雄健的口味；小麥可以使啤酒增添一定的果香，啤酒泡沫更豐富；燕麥可以使啤酒顯得油滑、濃重；水稻：可以使啤酒的色澤比較清淡；玉米大多使用于廉價(jià)啤酒種或作

4、為味道的補(bǔ)充。     2.啤酒花（Hops）      啤酒花又叫蛇麻草，英語是Hops。這是一種與*同一品系的植物，啤酒花實(shí)際上就是植物花蕊的一部分，它的調(diào)味屬性體現(xiàn)在啤酒花中的精      油和果酸上。啤酒花含有的這些物質(zhì)可以使啤酒有一定的苦澀和芳香，平衡大麥麥芽中的糖分。啤酒花被采摘后需要烘干才能使用。釀造，而有些啤酒卻使用多種啤酒花來達(dá)到釀酒大師要求的獨(dú)特味道。   3.酵母（Yeast） 

5、60;    酵母是一種屬于真菌類的非常微小的生物菌， 在自然環(huán)境中幾乎到處都有。啤酒在釀造過程中有三種方法加入酵母菌。 一、 啤酒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 啤酒的檢測標(biāo)準(zhǔn), 按照國家頒布的啤酒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)      本標(biāo)準(zhǔn)適用于以麥芽（包括特種麥芽）為主要原料，加酒花，經(jīng)酵母發(fā)酵釀制而成的、含有二氧化碳的、起泡的、低酒精度的各類熟、鮮啤酒。 1、二氧化碳：指啤酒中溶解的二氧化碳含量，這些二氧化碳是在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的，它有利于啤酒的起泡性，飲后賦予一種舒適的刺激感覺，即所謂的殺口力。特別是在15左右飲用時(shí)，二氧化碳逐步放出

6、，給人以清新、爽快的感覺，還能聞出啤酒特有的酒花香味。 2、泡持性：通常，啤酒倒入干凈的杯中即有泡沫升起，泡沫持久的程度即為泡持性。質(zhì)量的啤酒泡沫潔白細(xì)膩，持泡時(shí)間長、掛杯性好，給人賞心悅目的感覺。 3、濁度：是以EBC濁度單位表示啤酒透明度的外觀指標(biāo)，好啤酒的濁度很低，在05EBC單位以下。差的啤酒可產(chǎn)生失光，甚至混濁，濁度數(shù)值就高。引起酒液混濁的原因有兩方面，一是細(xì)菌總數(shù)超標(biāo)引起的生物性混濁，這種酒已不能飲用，另一種是由于啤酒在貯存過程中，酒的蛋白質(zhì)、多酚等物質(zhì)遇冷或氧化產(chǎn)生的混濁，冷混濁在啤酒恢復(fù)到室溫后可自行消失，這種混濁并不影響飲用，因此，建議消費(fèi)者不要將酒冷藏的溫度過低，一般在10

7、15即可。    4、酒精度及原麥汁濃度：酒精度指酒液中酒精的百分含量，可用體積百分?jǐn)?shù)或質(zhì)量百分?jǐn)?shù)表示。原麥汁濃度是依據(jù)酒精度及啤酒中的真正濃度按經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算出的數(shù)值，用其來表述原料麥汁的多少。我們見到的標(biāo)簽標(biāo)注的10°或11°等均是指酒的原麥汁濃度，它可讀為10度或11度，今年頒布的新國標(biāo)則標(biāo)記為10°P或11°P。原麥汁濃度與酒精度不是一回事，通常情況下，原麥汁濃度高則酒中含酒精也越多，我們常飲用的11°啤酒其酒精度在45（VV）左右。雖然啤酒中酒精含量較低，但是由于二氧化碳能促進(jìn)酒精在人體內(nèi)吸收，因

8、此一次大量飲用也會(huì)醉酒傷身。    5、總酸：指啤酒發(fā)酵過程中產(chǎn)生的脂肪酸及其他有機(jī)酸的總量。啤酒中的酸包括揮發(fā)性及不揮發(fā)性的各種酸，如乙酸、低碳脂肪酸及乳酸等。適宜的總酸能賦予啤酒以柔和清爽的口感。如果總酸過高或酸味明顯，則是污染了雜菌的標(biāo)志，這樣的酒不宜飲用。    6、雙乙酰：是在啤酒主發(fā)酵期間酵母代謝的產(chǎn)物，是啤酒口味不成熟的標(biāo)志。如其含量超過風(fēng)味閾值，會(huì)給啤酒帶來不愉快的餿飯味，酵母菌種、原料和麥汁組成、發(fā)酵條件等均影響啤酒中雙乙酰的含量。由于其風(fēng)味閾值比較低，對于優(yōu)質(zhì)淡色啤酒而言，雙乙酰含量在0.10m

9、感官指標(biāo)和理化指標(biāo)二、啤酒的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)按照：中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) GB 27582012 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)酵酒及其配制酒1.1 原料要求 應(yīng)符合相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)和有關(guān)規(guī)定。 1.2 感官要求 應(yīng)符合相應(yīng)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)規(guī)定。 1.3 理化指標(biāo) 理化指標(biāo)應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1:項(xiàng) 目 指 標(biāo) 檢驗(yàn)方法 甲醛 / (mg/L) 2.0 GB/T 5009.49 1.4 污染物和真菌毒素限量 1.4.1 污染物限量應(yīng)符合GB 2762的規(guī)定。 表2:項(xiàng) 目 指 標(biāo) 檢驗(yàn)方法 鉛mg/Kg0.2 GB 5009.121.4.2 真菌毒素限量應(yīng)符合GB 2761的規(guī)定。查閱后發(fā)現(xiàn)在啤酒中無真菌毒素限量1.5

10、微生物限量微生物限量應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2:項(xiàng)目采樣方案及限量檢驗(yàn)方法ncm沙門氏菌500/25mLGB/T 4789.25金黃色葡萄球菌500/25mLa 樣品的分析及處理按GB 4789.1執(zhí)行。 1.6 食品添加劑 食品添加劑的使用應(yīng)符合GB 2760的規(guī)定。項(xiàng) 目 指 標(biāo) 焦糖色 按生產(chǎn)需要適量使用納他霉素g/L0.01三氯蔗糖g/Kg0.65海藻酸丙二醇酯g/Kg0.3 二、 啤酒質(zhì)量指標(biāo)檢測方法1、啤酒 原麥汁濃度的測定比重瓶法GB 4928-91 啤酒試驗(yàn)方法中第9 條啤酒原麥汁濃度的試驗(yàn)方法11 范圍本方法采用比重瓶法測定啤酒的真正濃度 結(jié)合采用其它方法所測得的啤酒酒精度通過計(jì)

11、算獲得啤酒的原麥汁濃度本方法適用于各種類型啤酒中原麥汁濃度的測定 以原麥汁含量的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)即%m/m 表示測定值保留一位小數(shù)1.2 原理啤酒經(jīng)加熱蒸發(fā) 蒸去酒精后的殘液用水恢復(fù)至原重然后用比重瓶測定20 時(shí)殘液的比重2020 D 經(jīng)查比重與浸出物含量對照表即可得出試樣中浸出物含量的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)即為真正濃度啤酒的酒精度可用比重瓶測定法或其它儀器分析方法測得 原麥汁濃度則通過計(jì)算獲得1.3 儀器3.1 瓷蒸發(fā)皿3.2 高精度恒溫水浴20 時(shí)精度為0.13.3 附溫度計(jì)比重瓶25mL3.4 感量為0.1mg 的分析天平1.4 試樣制備稱取 100.0g 酒樣于已知質(zhì)量的瓷蒸發(fā)皿中于沸水浴上蒸發(fā)至原體積

12、的1/3 取下冷卻加水恢復(fù)至殘液原重100.0g 混勻備用1.5 操作步驟5.1 比重瓶空重的測定將比重瓶洗凈 干燥稱量反復(fù)操作直至恒量記錄比重瓶空重 (m)5.2 比重瓶水重的測定將煮沸并冷卻至 15 左右的蒸餾水注滿已恒量的比重瓶插上帶溫度計(jì)的瓶塞瓶中應(yīng)無氣泡立即浸于20 0.1 的高精度恒溫水浴中,待內(nèi)容物溫度達(dá)到20 ,并保持15 20min不變后,用濾紙吸去溢出支管的水,立即蓋好小帽取出比重瓶迅速擦干后稱量記錄比重瓶和水的質(zhì)量 (m1)5.3 酒樣殘液比重的測定用酒樣殘液沖洗比重瓶2 3 次然后裝滿此樣品按5.2 同樣操作記錄比重瓶和酒樣殘液的質(zhì)量并計(jì)算酒樣殘液的比重2020 D 經(jīng)

13、查比重與浸出物含量對照表即可得出試樣中浸出物含量的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)即真正濃度n1.6 結(jié)果計(jì)算式中 X 原麥汁濃度 % m/mA 酒精含量 % m/mn 真正濃度 % m/m7 精密度同一樣品的兩次測定值之差 不得超過0.1% m/m2、啤酒酒精度的測定2.1實(shí)驗(yàn)原理：用小火將啤酒中的酒精蒸餾出來，收集餾出液。用密度瓶測定餾出液的密度，密度以相同溫度下，同體積的溶液和純水之間的質(zhì)量比來表示。根據(jù)密度-酒精度對照表，可查得酒精含量。2.2實(shí)驗(yàn)儀器：電爐，調(diào)壓變壓器，鐵架臺，500mL園底燒瓶（錐形瓶），冷凝管，100mL容量瓶，規(guī)格為25mL附有溫度計(jì)并具有磨口帽小支管的密度瓶（見圖）。2.3實(shí)驗(yàn)步驟

14、：1.樣品處理（1） 在已精確稱重至0.05g的500mL三角燒瓶中，稱取l00.0g除氣啤酒，再加50mL水，（2） 按上冷凝器，冷凝器下端用一已知重量的100mL容量瓶或量筒接收餾出液。若室溫較高，為了防止酒精蒸發(fā)，可將容量瓶浸于冷水或冰水中。（3） 開始蒸餾時(shí)用文火加熱，沸騰后可加強(qiáng)火力，蒸餾至餾出液接近100mL時(shí)停止加熱。（4） 取下容量瓶，于普通天平上加蒸餾水至餾出液重100.0g，混勻。2.餾出液密度的測定 (1)空瓶稱重：將密度瓶洗干凈后，吹干或低溫烘干（可用少量酒精或乙醚洗滌），冷卻至室溫，精確稱重至0.1mg。 (2)稱水重：將煮沸30分鐘并冷卻至1518的蒸餾水裝滿密度瓶

15、 (注意瓶內(nèi)不要有氣飽)。裝上溫度計(jì)。立即浸入20±0.1的恒溫水浴中，讓瓶內(nèi)溫度計(jì)在20下保持20分鐘，取出密度瓶用濾紙吸去溢出支管外的水，立即蓋上小帽，室溫下平衡溫度后，擦干瓶壁上的水，精確稱重。 （3）餾出液稱重：倒出蒸餾水，用少量餾出液洗滌后，加入冷卻至1519的餾出液，按（2）測得餾出液重量。（4）密度計(jì)算： 密度瓶和餾出液重 空瓶重 餾出液密度 = 密度瓶和蒸餾水重 空瓶重3. 查密度和酒精對照表，求得酒精含量。3、啤酒濁度的檢測3.1原理：EBC濁度計(jì)是利用光學(xué)原理測定啤酒，由于老化或受冷而引起的混濁，可直接測定出樣品的濁度以EBC濁度單位表示。3.2 檢驗(yàn)方法儀器 濁

16、度計(jì) 濁度管3.3操作按濁度計(jì)的儀器說明書，取除氣但未經(jīng)過過濾的酒樣（發(fā)酵液和冷麥汁須要過濾）倒入玻璃管中，用EBC濁度計(jì)進(jìn)行測定。直接讀取結(jié)果。所得結(jié)果應(yīng)表示至一位小數(shù)4、啤酒總酸的測定4.1實(shí)驗(yàn)原理: 根據(jù)酸堿中和原理。用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液直接滴定啤酒中的總酸，以pH=8.2為電位滴定終點(diǎn)，根據(jù)消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積計(jì)算出啤酒中總酸的含量。4.2實(shí)驗(yàn)試劑 0.1mol/L NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液4.3實(shí)驗(yàn)儀器 酸度計(jì)、恒溫水浴鍋4.4實(shí)驗(yàn)步驟4.4.1.校正儀器：用標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液校正儀器，用水清洗儀器，并用濾紙吸干附著在電極上的液珠。4.4.2.測量樣品：吸取除氣的樣品溶液50.0ml，于燒杯

17、中。插入電極，開啟電磁攪拌器，用0.1 mol/L NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至pH=8.2為其終點(diǎn)，記錄消耗NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。消耗的 NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積記為VOH。5、實(shí)驗(yàn)計(jì)算 樣品中的總酸量=2·C·VOH 上式中：2換算成100.0ml樣品的系數(shù) C標(biāo)準(zhǔn)NaOH 溶液的濃度 VOH消耗標(biāo)準(zhǔn)NaOH 溶液的體積5、啤酒中雙乙酰的測定5.1實(shí)驗(yàn)原理雙乙酰(丁二酮)是賦予啤酒風(fēng)味的重要物質(zhì)。但含量過大，能使啤酒有一種餿飯味。輕工部部頒標(biāo)推規(guī)定成品啤酒中雙乙酰含量02ppm。雙乙酰的測定方法有氣相色譜法、極譜法和比色法等等。鄰苯二胺比色法是連二酮類都能發(fā)生顯色反應(yīng)的方

18、法，所以，此法測得之值為雙乙酰與戊二酮的總量，結(jié)果偏高。但此法快速簡便，是輕工部部頒標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法。用蒸汽將雙乙酰從樣品中蒸餾出來，加鄰苯二胺，形成2，3二甲基喹喔琳，其鹽酸鹽在335nm波長下有一最大吸收峰，可進(jìn)行定量測定。5.2實(shí)驗(yàn)儀器與試劑 (1)紫外分光光度計(jì)。(2)雙乙酰蒸餾裝置雙乙酰蒸餾裝置示意圖 1、夾套蒸餾器 2、蒸汽發(fā)生器 3、冷凝器 4、25mL容量瓶（或量筒） 5、加樣口 6、電爐(1)4N鹽酸 (2)1鄰苯二胺 精密稱取分析純鄰苯二胺250.0mg，溶于4N鹽酸中，并定容至25mL，貯于棕色瓶中，限當(dāng)日使用。（3）消泡劑 有機(jī)硅消泡劑或甘油聚醚。5.3實(shí)驗(yàn)步驟(1) 按

19、上圖把雙乙酰蒸餾器安裝好，把夾套蒸餾器下端的排氣夾子打開。(2) 將內(nèi)裝2.5mL蒸餾水的容量瓶(或量筒)放于冷凝器下，使出口尖端浸沒在水面下，外加冰水冷卻。(3) 加熱蒸汽發(fā)生器至沸，通汽加熱夾套，備用。(4) 于100mL量筒中加入24滴消泡劑，再注入5左右未除氣啤酒100mL。(5) 待夾套蒸餾器下端冒大汽時(shí)，打開進(jìn)樣口瓶塞，將啤酒迅速注入蒸餾器內(nèi)，再用約10mL蒸餾水沖洗量筒，同時(shí)倒入，迅速蓋好進(jìn)樣口塞子，用水封口。(6) 待夾套蒸餾器下端再次冒大汽時(shí)，將排氣夾子夾住，開始蒸餾，到餾出液接近25mL時(shí)取下容量瓶，用水定容至25mL，搖勻(蒸餾應(yīng)在3分鐘內(nèi)完成)。(7) 分別吸取餾出液1

20、0mL于兩支比色管中。一管作為樣品管加入0.5mL鄰苯二胺溶液，另一管不加作空白，充分搖勻后，同時(shí)置于暗處放置2030分鐘，然后于樣品管中加2mL4N鹽酸溶液，于空白管中加2.5mL4N鹽酸溶掖，混勻。(8) 在335nm波長處，用2cm比色皿以空白作對照測定樣品吸光度。(9) 計(jì)算：雙乙酰(mgL)A335×1.25.4注意事項(xiàng)(1) 蒸餾時(shí)加入試樣要迅速，勿使雙乙酰損失。蒸餾要求在3分鐘內(nèi)完成。(2) 嚴(yán)格控制蒸汽量，勿使泡沫過高，被蒸汽帶走而導(dǎo)致蒸餾失敗。(3) 顯色反應(yīng)在暗處進(jìn)行，否則導(dǎo)致結(jié)果偏高。三、食品的衛(wèi)生指標(biāo)檢測方法GB/T 5009.49 甲醛的測定1、甲醛的測定方

21、法2、鉛的測定方法GB 5009.122010 食品中鉛的測定：石墨爐原子吸收光譜法.1 原理 試樣經(jīng)灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度計(jì)石墨爐中，電熱原子化后吸收283.3nm 共振線，在一定濃度范圍，其吸收值與鉛含量成正比，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。2 試劑和材料 除非另有規(guī)定，本方法所使用試劑均為分析純，水為GB/T 6682 規(guī)定的一級水。 硝酸：優(yōu)級純。 過硫酸銨。 過氧化氫（30%）。 高氯酸：優(yōu)級純。 硝酸（11）：取50 mL 硝酸慢慢加入50 mL 水中。 硝酸（0.5 mol/L）：取3.2 mL 硝酸加入50 mL 水中，稀釋至100 mL。 硝酸（l mo1/L）：取6.4

22、 mL 硝酸加入50 mL 水中，稀釋至100 mL。 磷酸二氫銨溶液（20 g/L）：稱取2.0 g 磷酸二氫銨，以水溶解稀釋至100 mL。 混合酸：硝酸十高氯酸（91）。取9 份硝酸與1 份高氯酸混合。 鉛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取1.000 g 金屬鉛（99.99%），分次加少量硝酸（4.5），加熱溶解，總量不超過37 mL，移入1000 mL 容量瓶，加水至刻度?；靹?。此溶液每毫升含1.0 mg 鉛。 鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液：每次吸取鉛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.0 mL 于100 mL 容量瓶中，加硝酸（4.6）至刻度。如此經(jīng)多次稀釋成每毫升含10.0 ng，20.0 ng，40.0 ng，60.0 ng，80

23、.0 ng 鉛的標(biāo)準(zhǔn)使用液。3 儀器和設(shè)備 原子吸收光譜儀，附石墨爐及鉛空心陰極燈。 馬弗爐。 天平：感量為 1 mg。 干燥恒溫箱。 瓷坩堝。 壓力消解器、壓力消解罐或壓力溶彈。 可調(diào)式電熱板、可調(diào)式電爐。.4 分析步驟 A 試樣預(yù)處理 在采樣和制備過程中，應(yīng)注意不使試樣污染。糧食、豆類去雜物后，磨碎，過 20 目篩，儲(chǔ)于塑料瓶中，保存?zhèn)溆?。蔬菜、水果、魚類、肉類及蛋類等水分含量高的鮮樣，用食品加工機(jī)或勻漿機(jī)打成勻漿，儲(chǔ)于塑料瓶中，保存?zhèn)溆谩?B 試樣消解（可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件選用以下任何一種方法消解） 壓力消解罐消解法：稱取 1 g2 g 試樣（精確到0.001 g，干樣、含脂肪高的試樣1 g

24、, 鮮樣2 g 或按壓力消解罐使用說明書稱取試樣）于聚四氟乙烯內(nèi)罐，加硝酸2 mL4 mL 浸泡過夜。再加過氧化氫2 mL3 mL（總量不能超過罐容積的1/3）。蓋好內(nèi)蓋，旋緊不銹鋼外套，放入恒溫干燥箱，120 140 保持3 h4 h，在箱內(nèi)自然冷卻至室溫，用滴管將消化液洗入或過濾入（視消化后試樣的鹽分而定）10 mL25 mL 容量瓶中，用水少量多次洗滌罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混勻備用；同時(shí)作試劑空白。 干法灰化：稱取 1 g5 g 試樣（精確到0.001 g，根據(jù)鉛含量而定）于瓷坩堝中，先小火在可調(diào)式電熱板上炭化至無煙，移入馬弗爐500±25灰化6 h8 h，冷卻。

25、若個(gè)別試樣灰化不徹底，則加1 mL 混合酸在可調(diào)式電爐上小火加熱，反復(fù)多次直到消化完全，放冷，用硝酸將灰分溶解，用滴管將試樣消化液洗入或過濾入（視消化后試樣的鹽分而定）10 mL25 mL 容量瓶中，用水少量多次洗滌瓷坩堝，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混勻備用；同時(shí)作試劑空白。 過硫酸銨灰化法：稱取1 g5 g 試樣（精確到0.001 g）于瓷坩堝中，加2 mL4 mL 硝酸浸泡1 h 以上，先小火炭化，冷卻后加2.00 g3.00 g 過硫酸銨蓋于上面，繼續(xù)炭化至不冒煙，轉(zhuǎn)入馬弗爐，500 ±25 恒溫2 h, 再升至800 ，保持20 min，冷卻，加2 mL3 mL 硝酸，

26、用滴管將試樣消化液洗入或過濾入（視消化后試樣的鹽分而定）10 mL25 mL 容量瓶中，用水少量多次洗滌瓷坩堝，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混勻備用；同時(shí)作試劑空白。 濕式消解法：稱取試樣1 g5 g（精確到0.001 g）于錐形瓶或高腳燒杯中，放數(shù)粒玻璃珠，加10 mL 混合酸，加蓋浸泡過夜，加一小漏斗于電爐上消解，若變棕黑色，再加混合酸，直至冒白煙，消化液呈無色透明或略帶黃色，放冷，用滴管將試樣消化液洗入或過濾入（視消化后試樣的鹽分而定）10 mL25 mL 容量瓶中，用水少量多次洗滌錐形瓶或高腳燒杯，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混勻備用；同時(shí)作試劑空白。5 測定 A 儀器條件 根

27、據(jù)各自儀器性能調(diào)至最佳狀態(tài)。參考條件為波長283.3 nm，狹縫0.2 nm1.0 nm，燈電流5 mA7 mA，干燥溫度120 ，20 s；灰化溫度450 ，持續(xù)15 s20 s，原子化溫度：1700 2300 ，持續(xù)4 s5 s，背景校正為氘燈或塞曼效應(yīng)。 B 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 吸取上面配制的鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液10.0 ng/mL（或g/L），20.0 ng/mL（或g/L），40.0 ng/mL（或g/L），60.0 ng/mL（或g/L），80.0 ng/mL（或g/L）各10 L，注入石墨爐，測得其吸光值并求得吸光值與濃度關(guān)系的一元線性回歸方程。 C 試樣測定 分別吸取樣液和試劑空白液各10

28、L，注入石墨爐，測得其吸光值，代入標(biāo)準(zhǔn)系列的一元線性回歸方程中求得樣液中鉛含量。 D 基體改進(jìn)劑的使用 對有干擾試樣，則注入適量的基體改進(jìn)劑磷酸二氫銨溶液（一般為5 L 或與試樣同量）消除干擾。繪制鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)也要加入與試樣測定時(shí)等量的基體改進(jìn)劑磷酸二氫銨溶液。6 分析結(jié)果的表述 試樣中鉛含量按式進(jìn)行計(jì)算:X= 式中： X試樣中鉛含量, 單位為毫克每千克或毫克每升（mg/kg 或mg/L）； c1測定樣液中鉛含量，單位為納克每毫升（ng/mL）； c0空白液中鉛含量，單位為納克每毫升（ng/mL）； V試樣消化液定量總體積，單位為毫升（mL）； m試樣質(zhì)量或體積，單位為克或毫升（g 或mL）。

29、 以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。3、沙門氏菌的檢驗(yàn)GB/T 4789.25 沙門氏菌檢驗(yàn)。 A 前增菌 稱取25 g（mL）樣品放入盛有225 mL BPW 的無菌均質(zhì)杯中，以8 000 r/min10 000 r/min 均質(zhì)1 min2 min，或置于盛有225 mL BPW 的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1 min2 min。若樣品為液態(tài)，不需要均質(zhì)，振蕩混勻。如需測定pH 值，用1 mol/mL 無菌NaOH 或HCl 調(diào)pH 至6.8±0.2。無菌操作將樣品轉(zhuǎn)至500 mL 錐形瓶中，如使用均質(zhì)袋，可直接進(jìn)行培養(yǎng)，于36 &

30、#177;1 培養(yǎng)8 h18h。 如為冷凍產(chǎn)品,應(yīng)在45 以下不超過15 min,或2 5 不超過18 h 解凍。 B 增菌 輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)過的樣品混合物，移取1 mL，轉(zhuǎn)種于10 mL TTB 內(nèi)，于42 ±1 培養(yǎng)18 h24h。同時(shí)，另取1 mL，轉(zhuǎn)種于10 mL SC 內(nèi)，于36 ±1 培養(yǎng)18 h24 h。 C 分離 分別用接種環(huán)取增菌液1 環(huán)，劃線接種于一個(gè)BS 瓊脂平板和一個(gè)XLD 瓊脂平板（或HE 瓊脂平板或沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板）。于36 ±1 分別培養(yǎng)18 h24 h （XLD 瓊脂平板、HE 瓊脂平板、沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板） 或40 h4

31、8 h （BS 瓊脂平板），觀察各個(gè)平板上生長的菌落,各個(gè)平板上的菌落特征見表5。表5 沙門氏菌屬在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征選擇性瓊脂平板沙門氏菌BS 瓊脂菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色，菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色；有些菌株形成灰綠色的菌落，周圍培養(yǎng)基不變。HE 瓊脂藍(lán)綠色或藍(lán)色，多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色；有些菌株為黃色，中心黑色或幾乎全黑色.XLD 瓊脂菌落呈粉紅色，帶或不帶黑色中心，有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心，或呈現(xiàn)全部黑色的菌落；有些菌株為黃色菌落，帶或不帶黑色中心。沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基按照顯色培養(yǎng)基的說明進(jìn)行判定 D 生化試驗(yàn) 自選擇性瓊脂平板上分別挑取2 個(gè)以

32、上典型或可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂，先在斜面劃線，再于底層穿刺；接種針不要滅菌,直接接種賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基和營養(yǎng)瓊脂平板，于36 ±1 培養(yǎng)18 h24 h，必要時(shí)可延長至48 h。在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基內(nèi)，沙門氏菌屬的反應(yīng)結(jié)果見表6。表6 沙門氏菌屬在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基內(nèi)的反應(yīng)結(jié)果三糖鐵瓊脂 賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基 初步判斷斜面底層產(chǎn)氣 硫化氫K A（）（）可疑沙門氏菌屬K A（）（） 可疑沙門氏菌屬A A（）（）可疑沙門氏菌屬A A/ / 非沙門氏菌K K/非沙門氏菌注：K：產(chǎn)堿，A：產(chǎn)酸；：陽性，：陰性；（）：多數(shù)陽性，少數(shù)陰性；/：陽性或陰性。

33、 接種三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基的同時(shí),可直接接種蛋白胨水 （供做靛基質(zhì)試驗(yàn)）、尿素瓊脂 （pH7.2）、氰化鉀 （KCN） 培養(yǎng)基，也可在初步判斷結(jié)果后從營養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落接種。于36 ±1 培養(yǎng)18 h24 h，必要時(shí)可延長至48 h，按表7判定結(jié)果。將已挑菌落的平板儲(chǔ)存于2 5 或室溫至少保留24 h，以備必要時(shí)復(fù)查。表7 沙門氏菌屬生化反應(yīng)初步鑒別表反應(yīng)序號 硫化氫（H2S）靛基質(zhì)pH 7.2尿素 氰化鉀賴氨酸脫羧酶A1 A2A3/注：陽性；陰性；/陽性或陰性。 反應(yīng)序號A1：典型反應(yīng)判定為沙門氏菌屬。如尿素、KCN 和賴氨酸脫羧酶3 項(xiàng)中有1項(xiàng)異常，按表8可

34、判定為沙門氏菌。 如有2 項(xiàng)異常為非沙門氏菌。表8 沙門氏菌屬生化反應(yīng)初步鑒別表 pH 7.2尿素 氰化鉀（KCN） 賴氨酸脫羧酶判 定 結(jié) 果甲型副傷寒沙門氏菌（要求血清學(xué)鑒定結(jié)果）沙門氏菌或（要求符合本群生化特性）沙門氏菌個(gè)別變體（要求血清學(xué)鑒定結(jié)果）注：表示陽性；表示陰性。 反應(yīng)序號A2：補(bǔ)做甘露醇和山梨醇試驗(yàn)，沙門氏菌靛基質(zhì)陽性變體兩項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果均為陽性，但需要結(jié)合血清學(xué)鑒定結(jié)果進(jìn)行判定。 反應(yīng)序號A3：補(bǔ)做ONPG。ONPG 陰性為沙門氏菌，同時(shí)賴氨酸脫羧酶陽性,甲型副傷寒沙門氏菌為賴氨酸脫羧酶陰性。 如選擇生化鑒定試劑盒或全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)，可根據(jù)初步判斷結(jié)果，從營養(yǎng)瓊脂平板上

35、挑取可疑菌落，用生理鹽水制備成濁度適當(dāng)?shù)木鷳乙?，使用生化鑒定試劑盒或全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。 E 血清學(xué)鑒定 抗原的準(zhǔn)備：一般采用1.21.5瓊脂培養(yǎng)物作為玻片凝集試驗(yàn)用的抗原。O 血清不凝集時(shí)，將菌株接種在瓊脂量較高的 （如23） 培養(yǎng)基上再檢查；如果是由于Vi 抗原的存在而阻止了O 凝集反應(yīng)時(shí)，可挑取菌苔于1 mL 生理鹽水中做成濃菌液，于酒精燈火焰上煮沸后再檢查。H 抗原發(fā)育不良時(shí)，將菌株接種在0.550.65半固體瓊脂平板的中央，俟菌落蔓延生長時(shí)，在其邊緣部分取菌檢查；或?qū)⒕晖ㄟ^裝有0.30.4半固體瓊脂的小玻管1 次2次，自遠(yuǎn)端取菌培養(yǎng)后再檢查。 多價(jià)菌體抗原（O）鑒定：

36、在玻片上劃出2 個(gè)約1 cm×2 cm 的區(qū)域，挑取1 環(huán)待測菌，各放1/2 環(huán)于玻片上的每一區(qū)域上部，在其中一個(gè)區(qū)域下部加1 滴多價(jià)菌體（O）抗血清，在另一區(qū)域下部加入1 滴生理鹽水，作為對照。再用無菌的接種環(huán)或針分別將兩個(gè)區(qū)域內(nèi)的菌落研成乳狀液。將玻片傾斜搖動(dòng)混合1 min，并對著黑暗背景進(jìn)行觀察，任何程度的凝集現(xiàn)象皆為陽性反應(yīng)。 多價(jià)鞭毛抗原（H）鑒定：同多價(jià)菌體抗原（O）鑒定。 F 結(jié)果與報(bào)告 綜合以上生化試驗(yàn)和血清學(xué)鑒定的結(jié)果，報(bào)告25 g（mL）樣品中檢出或未檢出沙門氏菌4、金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn) GB/T 4789.10 金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)。 A 樣品的處理 稱取25 g

37、 樣品至盛有225 mL 7.5 %氯化鈉肉湯或10 %氯化鈉胰酪胨大豆肉湯的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000 r/min10000 r/min 均質(zhì)1 min2 min，或放入盛有225 mL 7.5 %氯化鈉肉湯或10 %氯化鈉胰酪胨大豆肉湯的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1 min2 min。若樣品為液態(tài)，吸取25 mL 樣品至盛有225 mL 7.5 %氯化鈉肉湯或10 %氯化鈉胰酪胨大豆肉湯的無菌錐形瓶(瓶內(nèi)可預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠)中，振蕩混勻。 B 增菌和分離培養(yǎng) 將上述樣品勻液于36 ±1 培養(yǎng)18 h24 h。金黃色葡萄球菌在7.5%氯化鈉肉湯中呈混濁生長，污染嚴(yán)重時(shí)在1

38、0%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯內(nèi)呈混濁生長。將上述培養(yǎng)物，分別劃線接種到Baird-Parker 平板和血平板，血平板36 ±1 培養(yǎng)18 h24 h。Baird-Parker 平板36 ±1 培養(yǎng)18 h24 h 或45 h48 h。金黃色葡萄球菌在Baird-Parker 平板上，菌落直徑為2 mm3 mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明圈。用接種針接觸菌落有似奶油至樹膠樣的硬度，偶然會(huì)遇到非脂肪溶解的類似菌落；但無混濁帶及透明圈。長期保存的冷凍或干燥食品中所分離的菌落比典型菌落所產(chǎn)生的黑色較淡些，外觀可能粗糙并干燥。在血平板上，形成菌落較大，

39、圓形、光滑凸起、濕潤、金黃色（有時(shí)為白色），菌落周圍可見完全透明溶血圈。挑取上述菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢及血漿凝固酶試驗(yàn)。 C 鑒定 染色鏡檢：金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性球菌，排列呈葡萄球狀，無芽胞，無莢膜，直徑約為0.5 m1 m。 血漿凝固酶試驗(yàn)：挑取、Baird-Parker 平板或血平板上可疑菌落1 個(gè)或以上，分別接種到5 mL BHI和營養(yǎng)瓊脂小斜面，36 ±1 培養(yǎng)18 h24 h。取新鮮配置兔血漿0.5 mL，放入小試管中，再加入BHI 培養(yǎng)物0.2 mL0.3 mL，振蕩搖勻，置36±1 溫箱或水浴箱內(nèi)，每半小時(shí)觀察一次，觀察 6 h，如呈現(xiàn)凝固（即將試管傾斜或倒置時(shí)，呈現(xiàn)凝塊）或凝固體積大于原體積的一半，被判定為陽性結(jié)果。同時(shí)以血漿凝固酶試驗(yàn)陽性和陰性葡萄球菌菌株的肉湯培養(yǎng)物作為對照。也可用商品化的