槐米中蘆丁的提取分離與鑒定(1)

1、天然藥物化學(xué)實(shí)訓(xùn)天然藥物化學(xué)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目一項(xiàng)目一槐米中蘆丁的提取分離槐米中蘆丁的提取分離與鑒定與鑒定實(shí)訓(xùn)目的實(shí)訓(xùn)目的v能夠運(yùn)用堿溶酸沉法和結(jié)晶法的操作技術(shù)對能夠運(yùn)用堿溶酸沉法和結(jié)晶法的操作技術(shù)對槐米中的蘆丁進(jìn)行提取分離槐米中的蘆丁進(jìn)行提取分離v能夠運(yùn)用酸水解的操作技術(shù)對槐米中蘆丁進(jìn)能夠運(yùn)用酸水解的操作技術(shù)對槐米中蘆丁進(jìn)行水解行水解v能夠運(yùn)用紙色譜、薄層色譜法和化學(xué)法鑒別能夠運(yùn)用紙色譜、薄層色譜法和化學(xué)法鑒別蘆丁、槲皮素和糖類化合物蘆丁、槲皮素和糖類化合物得到兩個單體化合物得到兩個單體化合物OHOOHOOHOHOH57334實(shí)訓(xùn)結(jié)果實(shí)訓(xùn)結(jié)果蘆丁蘆丁槲皮素槲皮素OHOOHOOOHOHOOHOHOHCH

2、2OOOHOHOH項(xiàng)目一項(xiàng)目一 蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定v子項(xiàng)目一子項(xiàng)目一 槐米中蘆丁的提取槐米中蘆丁的提取v子項(xiàng)目二子項(xiàng)目二 槐米中蘆丁的精制槐米中蘆丁的精制v子項(xiàng)目三子項(xiàng)目三 水解蘆丁得到槲皮素水解蘆丁得到槲皮素v子項(xiàng)目四子項(xiàng)目四 蘆丁和槲皮素的鑒別蘆丁和槲皮素的鑒別相關(guān)內(nèi)容介紹相關(guān)內(nèi)容介紹蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定槐花槐花槐米槐米槐花為豆科植物槐槐花為豆科植物槐Sophora japonicaSophora japonica L L的干的干燥花及花蕾燥花及花蕾相關(guān)內(nèi)容介紹相關(guān)內(nèi)容介紹蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定v性能：苦，性微寒。性能：苦，性微寒

3、。 v功效：涼血止血、清肝瀉火功效：涼血止血、清肝瀉火 v應(yīng)用：用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、應(yīng)用：用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、衄血、肝熱目赤、頭痛眩暈等。衄血、肝熱目赤、頭痛眩暈等。 主要含有主要含有蘆丁、槲皮素蘆丁、槲皮素，還含少量皂苷類及，還含少量皂苷類及多多糖、粘液質(zhì)糖、粘液質(zhì)等。近代研究表明槐米含蘆丁可高等。近代研究表明槐米含蘆丁可高達(dá)達(dá)23.5%，槐花開放后降至，槐花開放后降至13.0%。相關(guān)內(nèi)容介紹相關(guān)內(nèi)容介紹蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁蘆丁OHOOHOOOHOHOOHOHOHCH2OOOHOHOH性狀：性狀：淺黃色粉末或極細(xì)微淡黃色針淺黃色粉末或極細(xì)微

4、淡黃色針狀結(jié)晶。狀結(jié)晶。 溶解度：溶解度：在冷水中在冷水中1:100001:10000，沸水中，沸水中1:2001:200；冷乙醇中；冷乙醇中1:2001:200，沸乙醇中，沸乙醇中1:601:60。沸甲醇中。沸甲醇中1:71:7。 酸堿性：酸堿性：蘆丁分子中具有較多酚羥基，蘆丁分子中具有較多酚羥基，顯弱酸性，易溶于堿液中，酸化后又顯弱酸性，易溶于堿液中，酸化后又可析出?？晌龀觥Ｏ嚓P(guān)內(nèi)容介紹相關(guān)內(nèi)容介紹蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁蘆丁OHOOHOOOHOHOOHOHOHCH2OOOHOHOH用于治療毛細(xì)管脆弱引用于治療毛細(xì)管脆弱引起的出血病，并用作高起的出血病，并用作高血壓的輔

5、助治療劑。血壓的輔助治療劑。相關(guān)內(nèi)容介紹相關(guān)內(nèi)容介紹蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定槲皮素槲皮素性狀：性狀：黃色針狀結(jié)晶（稀乙醇）。黃色針狀結(jié)晶（稀乙醇）。 溶解度：溶解度：冷乙醇中冷乙醇中1:3001:300，熱乙醇中，熱乙醇中1:231:23?？扇苡诩状肌⒈?、乙酸乙酯、可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、冰乙酸、吡啶，不溶于水、氯仿、乙冰乙酸、吡啶，不溶于水、氯仿、乙醚、苯和石油醚等。醚、苯和石油醚等。 OHOOHOOHOHOH57334思考問題思考問題1 1、加入硼砂目的是什么？、加入硼砂目的是什么？2 2、為什么要加入石灰水，在蘆丁的提取中能、為什么要加入石灰水，在蘆丁的提取中能起到

6、什么作用？起到什么作用？3 3、酸沉、酸沉pHpH值為什么不宜過低？值為什么不宜過低？子項(xiàng)目一子項(xiàng)目一 槐米中蘆丁的提取槐米中蘆丁的提取v那個天然產(chǎn)物的實(shí)驗(yàn)，要算下得率那個天然產(chǎn)物的實(shí)驗(yàn)，要算下得率,粗蘆丁重粗蘆丁重量量/槐米的重量；槐米的重量； 精制蘆丁的重量精制蘆丁的重量/粗蘆丁的粗蘆丁的重量；并且計(jì)算下，每克蘆丁分子中槲皮素重量；并且計(jì)算下，每克蘆丁分子中槲皮素和糖所占的百分比。和糖所占的百分比。所需的試劑和設(shè)備v1、樣品：槐花米槐花米v試劑：硼砂、硼砂、CaOCaO、濃鹽酸、濃鹽酸v儀器：每一組需要：儀器：每一組需要： 電爐、電爐、1000ml1000ml燒杯、燒杯、小燒杯、小燒杯、

7、500ml500ml燒杯、玻璃棒、燒杯、玻璃棒、pHpH試紙、玻試紙、玻璃漏斗、滴管璃漏斗、滴管 v公共需要：棉花、天平公共需要：棉花、天平子項(xiàng)目一子項(xiàng)目一 槐米中蘆丁的提取槐米中蘆丁的提取攪拌下加攪拌下加入石灰乳入石灰乳加加0.4%0.4%硼砂沸硼砂沸水水200ml200ml槐花米槐花米（25g25g）調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)pH8-9pH8-9加熱加熱保持微保持微沸沸20min20min趁熱用棉花趁熱用棉花濾過濾過濾液濾液殘?jiān)鼩堅(jiān)谠?0-7060-70度下，用度下，用濃鹽酸調(diào)濃鹽酸調(diào)pH3-4pH3-4靜置靜置提提取取蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定補(bǔ)充水分，補(bǔ)充水分，保證保證pHpH值值v20

8、10.11月，實(shí)驗(yàn)結(jié)果：食品091班30克槐米制得的粗蘆丁大約58克不等。思考問題思考問題先進(jìn)行項(xiàng)目二，冷卻后等沉沉析出時(shí)候，再討論項(xiàng)目先進(jìn)行項(xiàng)目二，冷卻后等沉沉析出時(shí)候，再討論項(xiàng)目3 31 1、以熱水重結(jié)晶法精制蘆丁的依據(jù)是什么？、以熱水重結(jié)晶法精制蘆丁的依據(jù)是什么？2 2、重結(jié)晶的操作要點(diǎn)有哪些？、重結(jié)晶的操作要點(diǎn)有哪些？子項(xiàng)目二子項(xiàng)目二 槐米中蘆丁的精制和水解槐米中蘆丁的精制和水解需要的儀器設(shè)備需要的儀器設(shè)備v每組需要抽濾設(shè)備（需要每組需要抽濾設(shè)備（需要1000ml的抽濾瓶）、的抽濾瓶）、濾紙、濾紙、 玻璃棒、玻璃棒、1000ml燒杯、加熱回流設(shè)燒杯、加熱回流設(shè)備（電熱套、冷凝管、燒瓶）

9、、小燒杯、濃備（電熱套、冷凝管、燒瓶）、小燒杯、濃硫酸、濃鹽酸硫酸、濃鹽酸第一次實(shí)驗(yàn)所得濾液第一次實(shí)驗(yàn)所得濾液濾液濾液沉淀（粗品蘆?。┏恋恚ù制诽J丁）重結(jié)晶重結(jié)晶抽濾，抽濾，少量水洗滌沉淀至中性少量水洗滌沉淀至中性取粗制蘆丁取粗制蘆丁3g,3g,加蒸餾水加蒸餾水400ml,400ml,煮沸煮沸1010分鐘后，趁分鐘后，趁熱抽濾熱抽濾殘?jiān)鼩堅(jiān)鼮V液濾液冷卻（可以用流動水快速冷卻）靜置冷卻（可以用流動水快速冷卻）靜置精制蘆?。▊溆茫┚铺J?。▊溆茫┨J丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定提提取取與與精精制制抽濾，抽濾， 干燥、稱重干燥、稱重v食品食品091班得到的精制蘆丁大約（粗蘆丁班得到的精制蘆丁

10、大約（粗蘆丁4克克精制后大約？）精制后大約？）減壓抽濾裝置減壓抽濾裝置v減壓過濾操作減壓過濾操作v 減壓過濾減壓過濾也就是抽濾也就是抽濾,利用抽氣泵使抽濾瓶中的利用抽氣泵使抽濾瓶中的壓強(qiáng)降低壓強(qiáng)降低,達(dá)到固液分離的目的達(dá)到固液分離的目的. v裝置裝置:布式漏斗布式漏斗,抽濾瓶抽濾瓶,膠管膠管,抽氣泵抽氣泵,濾紙濾紙 v過程過程: v1、安裝儀器、安裝儀器,檢查布式漏斗與抽濾瓶之間連接是否檢查布式漏斗與抽濾瓶之間連接是否緊密，抽氣泵連接口緊密，抽氣泵連接口是否漏氣是否漏氣； v2、修剪濾紙，使其略小于布式漏斗，但、修剪濾紙，使其略小于布式漏斗，但要把所有要把所有的孔都覆蓋住，并滴加蒸餾水使濾紙與

11、漏斗連接緊密；的孔都覆蓋住，并滴加蒸餾水使濾紙與漏斗連接緊密； v3、將固液混合物轉(zhuǎn)移到濾紙上；、將固液混合物轉(zhuǎn)移到濾紙上； v4、打開抽氣泵開關(guān)，開始抽濾。、打開抽氣泵開關(guān)，開始抽濾。 v5、過濾完之后，、過濾完之后，先抽掉抽濾瓶接管，后關(guān)抽氣泵。先抽掉抽濾瓶接管，后關(guān)抽氣泵。（防止倒吸）（防止倒吸） 思考問題思考問題1 1、蘆丁是？苷（、蘆丁是？苷（ N- N- 苷苷 、O-O-苷、苷、S-S-苷苷or C-or C-苷苷? ?2 2、苷鍵的裂解可以用什么方法、苷鍵的裂解可以用什么方法 ？最常用的方？最常用的方法是？法是？ 影響酸水解速度的因素有哪些？影響酸水解速度的因素有哪些？2 2、蘆

12、丁水解后的產(chǎn)物是什么？、蘆丁水解后的產(chǎn)物是什么？3 3、如何進(jìn)行苷類酸水解操作，如何分離得到、如何進(jìn)行苷類酸水解操作，如何分離得到苷元成分？苷元成分？子項(xiàng)目三子項(xiàng)目三 水解蘆丁得到槲皮素水解蘆丁得到槲皮素子項(xiàng)目三子項(xiàng)目三 水解蘆丁得到槲皮素水解蘆丁得到槲皮素蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定精制蘆丁精制蘆丁1.5g1.5g加入加入2%2%硫酸或者硫酸或者(1mol/lHCL)(1mol/lHCL)100ml100ml，加熱回，加熱回流流30min(30min(從有液滴滴下開始從有液滴滴下開始計(jì)時(shí)）計(jì)時(shí)），放冷靜置，抽濾，放冷靜置，抽濾沉淀沉淀濾液濾液粗品槲皮素粗品槲皮素作糖的檢識用作糖的

13、檢識用注意觀察整個過程的現(xiàn)注意觀察整個過程的現(xiàn)象！象！( 溶液澄明度和顏色溶液澄明度和顏色的變化的變化)為什么出現(xiàn)這種為什么出現(xiàn)這種情況？情況？水解水解 抽濾抽濾 洗滌沉淀洗滌沉淀 干燥干燥 稱重稱重v具體做法：蘆丁水解方法：具體做法：蘆丁水解方法： 取精制蘆丁取精制蘆丁1.5g，研細(xì)后，研細(xì)后置于置于250ml圓底燒瓶中，加入圓底燒瓶中，加入2硫酸或硫酸或（1mol/lHCL)100m1，加熱回流，加熱回流 30min，瓶中渾濁，瓶中渾濁液逐漸變?yōu)槌吻宓淖攸S色液體，最后生成鮮黃色沉淀。液逐漸變?yōu)槌吻宓淖攸S色液體，最后生成鮮黃色沉淀。放冷沉淀，抽濾，保存濾液（放冷沉淀，抽濾，保存濾液（應(yīng)為澄清

14、無色液體應(yīng)為澄清無色液體），），作為糖的檢查，沉淀物為蕓香苷苷元（槲皮素），作為糖的檢查，沉淀物為蕓香苷苷元（槲皮素），用用蒸餾水洗至中性，抽干水分，晾干，稱量。蒸餾水洗至中性，抽干水分，晾干，稱量。得粗制槲得粗制槲皮素，再用乙醇重結(jié)晶得精制槲皮素。皮素，再用乙醇重結(jié)晶得精制槲皮素。v1mol/lHCL配法配法:取約取約90毫升濃鹽酸定容至毫升濃鹽酸定容至1000毫升毫升v注意觀察現(xiàn)象：注意觀察現(xiàn)象：未加熱時(shí)，瓶內(nèi)為混懸未加熱時(shí)，瓶內(nèi)為混懸液（液（蘆丁不溶于冷水），蘆丁不溶于冷水），加熱后，混懸加熱后，混懸液逐漸變?yōu)槌吻逡阂褐饾u變?yōu)槌吻逡海ㄌJ丁易溶于熱水），（蘆丁易溶于熱水），繼續(xù)加熱，有繼續(xù)

15、加熱，有鮮黃色沉淀析出鮮黃色沉淀析出（槲皮素不（槲皮素不溶于水）溶于水）v濾液處理濾液處理： v取蘆丁水解后的濾液取蘆丁水解后的濾液15m1，加，加 氫氧化鋇粉氫氧化鋇粉中和至中性（攪拌下進(jìn)行）濾去白色的硫酸中和至中性（攪拌下進(jìn)行）濾去白色的硫酸鋇沉淀鋇沉淀(漏斗濾紙），漏斗濾紙），濾液在沸水浴上濾液在沸水浴上蒸干后，蒸干后，加加12 ml乙醇溶解，作為糖的供試液。乙醇溶解，作為糖的供試液。 （如果加（如果加 氫氧化鋇加過量后可以加少量的硫氫氧化鋇加過量后可以加少量的硫酸回調(diào)酸回調(diào)pH)v硫酸可以同時(shí)沉淀硫酸可以同時(shí)沉淀Ba2+ Ba2+ + SO4 2-=BaSO4 使蘆丁水解后的濾液更使蘆

16、丁水解后的濾液更純凈純凈 v學(xué)生做的結(jié)果：蘆丁的得率大約是：20-25%v 精制蘆丁的得率是大約87%v 槲皮素占蘆丁分子是：13%到20思考問題思考問題1 1、紙色譜的原理及操作要點(diǎn)？、紙色譜的原理及操作要點(diǎn)？2 2、黃酮類化合物有哪些顯色方法，各針對哪類黃酮？、黃酮類化合物有哪些顯色方法，各針對哪類黃酮？3 3、黃酮類薄層色譜中，經(jīng)常用到的吸附劑有哪幾類？、黃酮類薄層色譜中，經(jīng)常用到的吸附劑有哪幾類？各自的原理有什么不同？各自的原理有什么不同？4 4、黃酮類薄層色譜中常用到、黃酮類薄層色譜中常用到AlClAlCl3 3乙醇溶液顯色？顯色乙醇溶液顯色？顯色后一般呈什么顏色？后一般呈什么顏色？

17、5 5、薄層色譜的操作要點(diǎn)有哪些？、薄層色譜的操作要點(diǎn)有哪些？子項(xiàng)目四子項(xiàng)目四 蘆丁和槲皮素的鑒別蘆丁和槲皮素的鑒別v所需要的藥品和設(shè)備：氫氧化鋇、葡萄糖、鼠李糖、所需要的藥品和設(shè)備：氫氧化鋇、葡萄糖、鼠李糖、正丁醇、乙酸、正丁醇、乙酸、苯胺、鄰苯二甲酸鹽、無水乙醇、甲苯胺、鄰苯二甲酸鹽、無水乙醇、甲醇醇、乙酸乙酯、甲酸、乙酸乙酯、甲酸、AlCl3、鎂粉、濃鹽酸、鎂粉、濃鹽酸、 -萘酚溶液、濃硫酸、三氯化鐵、萘酚溶液、濃硫酸、三氯化鐵、紫外燈、紫外燈、新新華華1號濾紙、點(diǎn)樣毛細(xì)管、水浴鍋、號濾紙、點(diǎn)樣毛細(xì)管、水浴鍋、硅膠硅膠G預(yù)制板預(yù)制板11塊、分液漏斗塊、分液漏斗 噴霧器幾個噴霧器幾個v每組

18、需要：每組需要：1個蒸發(fā)皿、玻璃漏斗、玻璃棒、個蒸發(fā)皿、玻璃漏斗、玻璃棒、10ml試試管管8支、支、2個小燒杯、個小燒杯、膠頭滴管膠頭滴管v需要配制的試劑需要配制的試劑:v1 苯胺苯胺鄰苯二甲酸試劑配法：鄰苯二甲酸試劑配法：苯胺苯胺0.93g和鄰苯二甲酸和鄰苯二甲酸1.66g溶于溶于100ml水飽和的正丁醇中。水飽和的正丁醇中。 （我們實(shí)驗(yàn)需要配（我們實(shí)驗(yàn)需要配100ml）(用分液漏斗中加入用分液漏斗中加入50ml水和水和 100ml正丁醇震搖后正丁醇震搖后靜置取上層即為水飽和的正丁醇）靜置取上層即為水飽和的正丁醇）v2 10%-萘酚乙醇溶液萘酚乙醇溶液 25mlv3 2%三氯化鐵乙醇三氯化鐵

19、乙醇溶液溶液 20mlv4、展開劑：醋酸乙酯、展開劑：醋酸乙酯-甲酸甲酸-水（水（8：1：1）（我們實(shí)驗(yàn)需要）（我們實(shí)驗(yàn)需要配配300mlv5、5組配一瓶配組配一瓶配200ml正丁醇正丁醇-乙酸乙酸-水（水（4：1：5）放到分液）放到分液漏斗中，平衡后取上層備用漏斗中，平衡后取上層備用v配兩瓶配兩瓶v6、 2%AlCl3乙醇溶液乙醇溶液 100mlv7、硅膠預(yù)制板，用之前、硅膠預(yù)制板，用之前105度烘半個小時(shí)。度烘半個小時(shí)。子項(xiàng)目三子項(xiàng)目三 蘆丁蘆丁和槲皮素的鑒別和槲皮素的鑒別蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定水解所得濾液水解所得濾液20ml20ml用飽和用飽和Ba(OH)Ba(OH)2

20、 2調(diào)調(diào)PHPH值至中值至中性，折疊濾紙過濾性，折疊濾紙過濾殘?jiān)鼩堅(jiān)鼮V液濾液蒸干，放冷蒸干，放冷加加2-3ml2-3ml乙醇溶解乙醇溶解供試品溶液供試品溶液紙色譜紙色譜糖糖的的鑒鑒定定糖糖的的紙紙色色譜譜鑒鑒定定標(biāo)準(zhǔn)品：葡萄糖、鼠李糖標(biāo)準(zhǔn)品：葡萄糖、鼠李糖展開劑：正丁醇展開劑：正丁醇- -乙酸乙酸- -水（水（4 4：1 1：5 5）上層液）上層液顯色劑：苯胺顯色劑：苯胺鄰苯二甲酸試劑。鄰苯二甲酸試劑。 105105烘烘10min10min顯色顯色( (顯棕色或棕紅色斑點(diǎn)顯棕色或棕紅色斑點(diǎn)) ) 蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定新華一號濾紙新華一號濾紙標(biāo)本缸標(biāo)本缸倒入缸內(nèi)約倒入缸內(nèi)約3

21、030毫升的展開劑毫升的展開劑糖糖的的紙紙色色譜譜鑒鑒定定標(biāo)準(zhǔn)品：葡萄糖、鼠李糖標(biāo)準(zhǔn)品：葡萄糖、鼠李糖展開劑：正丁醇展開劑：正丁醇- -乙酸乙酸- -水（水（4 4：1 1：5 5）放到分液）放到分液漏斗中，平衡后取上層備用。漏斗中，平衡后取上層備用。 顯色劑：苯胺顯色劑：苯胺鄰苯二甲酸試劑。鄰苯二甲酸試劑。 105105烘烘10min10min顯色顯色( (顯棕色或棕紅色斑點(diǎn)顯棕色或棕紅色斑點(diǎn)) ) 蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定試驗(yàn)記錄：試驗(yàn)記錄： 當(dāng)溶劑走到溶劑前沿當(dāng)溶劑走到溶劑前沿68cm即可，約需即可，約需40分鐘分鐘粘附紙色譜，并計(jì)算斑點(diǎn)的f值蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提

22、取分離與鑒定定定性性反反應(yīng)應(yīng)蘆丁供試品溶液：蘆丁供試品溶液：取精制蘆丁約取精制蘆丁約5mg，用，用5ml甲甲醇（無水乙醇）使溶液，備用。醇（無水乙醇）使溶液，備用。槲皮素供試品溶液：槲皮素供試品溶液：取粗槲皮素約取粗槲皮素約5mg，用，用5ml甲醇甲醇（無水乙醇）（無水乙醇）使溶液，備用。使溶液，備用。其余試劑：其余試劑：鎂粉、濃鹽酸、鎂粉、濃鹽酸、10%-10%-萘酚溶液、濃硫酸、萘酚溶液、濃硫酸、2%2% 三氯化鐵乙醇溶液三氯化鐵乙醇溶液 準(zhǔn)備準(zhǔn)備3 3支試管（一個空白管，支試管（一個空白管，樣品用蒸餾水代替，一個是樣品用蒸餾水代替，一個是蘆丁、一個是槲皮素蘆丁、一個是槲皮素）試劑試劑試驗(yàn)

23、現(xiàn)象試驗(yàn)現(xiàn)象結(jié)論及解釋結(jié)論及解釋蘆丁蘆丁槲皮素槲皮素鹽酸鹽酸- -鎂粉反鎂粉反應(yīng)應(yīng)MolishMolish反應(yīng)反應(yīng)FeClFeCl3 3反應(yīng)反應(yīng)試驗(yàn)記錄試驗(yàn)記錄定定性性反反應(yīng)應(yīng)鹽酸鹽酸- -鎂粉反應(yīng)鎂粉反應(yīng) 將樣品溶液將樣品溶液1ml1ml，先滴加，先滴加1 12 2滴濃鹽酸再加入少許滴濃鹽酸再加入少許鎂粉振搖，鎂粉振搖，1-2min1-2min內(nèi)，觀察顏色變化。（注意順序）內(nèi)，觀察顏色變化。（注意順序）MolishMolish反應(yīng)反應(yīng) 將樣品溶液將樣品溶液1ml1ml，加入與樣品等體積加入與樣品等體積10%-10%-萘萘酚溶液，傾斜試管，搖勻，酚溶液，傾斜試管，搖勻，沿管壁滴加適量濃硫沿管壁

24、滴加適量濃硫酸（約酸（約2 2ml），至分層，至分層注意觀察兩界面產(chǎn)生的變注意觀察兩界面產(chǎn)生的變化。（不要搖動）化。（不要搖動）黃酮母核黃酮母核苷類苷類蘆丁的提取分離與鑒定蘆丁的提取分離與鑒定FeClFeCl3 3反應(yīng)反應(yīng)酚羥基酚羥基 將樣品溶液將樣品溶液1ml1ml，加入，加入1 12 2滴滴2%Fecl2%Fecl3 3溶液，溶液，觀察現(xiàn)象。觀察現(xiàn)象。薄薄層層色色譜譜鑒鑒別別樣品：分別取精制的蘆丁、槲皮素適量，加樣品：分別取精制的蘆丁、槲皮素適量，加95%95%乙乙醇溶解成每醇溶解成每1ml1ml含含1mg1mg的溶液，備用。的溶液，備用。展開劑：醋酸乙酯展開劑：醋酸乙酯- -甲酸甲酸-

25、-水（水（8 8：1 1：1 1）顯色劑：顯色劑：2%AlCl2%AlCl3 3乙醇溶液，乙醇溶液，105105加熱至斑點(diǎn)加熱至斑點(diǎn)清晰，置紫外燈清晰，置紫外燈(365nm)(365nm)下觀察。下觀察。 顏色顏色直接觀察直接觀察AlClAlCl3 3 噴霧噴霧R Rf f值值日光日光UVUV日光日光UVUV樣品樣品蘆丁蘆丁槲皮素槲皮素蘆丁的提取與定性反應(yīng)蘆丁的提取與定性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)記錄實(shí)驗(yàn)記錄v注意：硅膠預(yù)制板，用之前注意：硅膠預(yù)制板，用之前105度烘半個小度烘半個小時(shí)。時(shí)。實(shí)驗(yàn)規(guī)則實(shí)驗(yàn)規(guī)則要明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求。對處方要明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求。對處方中藥物性質(zhì)、配制原理、操作步驟、操作關(guān)鍵等，中藥物性質(zhì)、配制原理、操作步驟、操作關(guān)鍵等，做到做到“心中有數(shù)心中有數(shù)”，并合理安排實(shí)驗(yàn)時(shí)間。，并合理安排實(shí)驗(yàn)時(shí)間。 應(yīng)保持實(shí)驗(yàn)室內(nèi)肅靜，不得無故應(yīng)保持實(shí)驗(yàn)室內(nèi)肅靜，不得無故遲到或早退，不得擅離實(shí)驗(yàn)操作崗位，甚至高聲遲到或早退，不得擅離實(shí)驗(yàn)操作崗位，甚至高聲談笑。如發(fā)生差錯事故或異?，F(xiàn)象，應(yīng)隨時(shí)報(bào)告談笑。如發(fā)生差錯事故或異?，F(xiàn)象，應(yīng)隨時(shí)報(bào)告指導(dǎo)教師，查明原因，及時(shí)解釋。注意安