過(guò)氧化物酶的顯示和觀察ppt課件

1、細(xì)胞中過(guò)氧化物酶的顯示與察看細(xì)胞中過(guò)氧化物酶的顯示與察看( peroxisome)微體微體micro-bodies電電鏡鏡下下的的過(guò)過(guò)氧氧化化物物酶酶體體電子致密的中心是尿酸氧化酶的結(jié)晶，即類核體peroxisomePeroxisomes are simple, membrane-Peroxisomes are simple, membrane-bound vesicles (or microbodies, as bound vesicles (or microbodies, as they are also called) they are also called) A diameter o

2、f 0.1 to 1.0 m that A diameter of 0.1 to 1.0 m that often contain a dense, crystalline often contain a dense, crystalline core of oxidative enzymescore of oxidative enzymesPeroxisomes are multifunctional Peroxisomes are multifunctional organelles, containing more than 50 organelles, containing more

3、than 50 enzymes involved in such diverse enzymes involved in such diverse activitiesactivitiesglyoxysomeglyoxysome乙醛酸循環(huán)體乙醛酸循環(huán)體: specialized : specialized type of peroxisome, present in plants. type of peroxisome, present in plants. 過(guò)氧化物酶體包括過(guò)氧化物酶體包括2 2種酶類：種酶類：氧化酶氧化酶(oxidases) (oxidases) 約占過(guò)氧化物酶體酶總量的一

4、半約占過(guò)氧化物酶體酶總量的一半各種氧化酶作用于不同的底物各種氧化酶作用于不同的底物將氧復(fù)原成過(guò)氧化氫。將氧復(fù)原成過(guò)氧化氫。 RH2 + O2 R + RH2 + O2 R + H2O2H2O2過(guò)氧化氫酶過(guò)氧化氫酶(catalase)(catalase)是過(guò)氧化物酶體的標(biāo)志酶是過(guò)氧化物酶體的標(biāo)志酶約占過(guò)氧化物酶體酶總量的約占過(guò)氧化物酶體酶總量的40%40%作用是將過(guò)氧化氫復(fù)原成水作用是將過(guò)氧化氫復(fù)原成水 RH2 +H2O2 R + 2H2O RH2 +H2O2 R + 2H2O過(guò)氧過(guò)氧化物化物酶體酶體的增的增殖殖實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 氧化復(fù)原酶類的原位顯示：根據(jù)氧化復(fù)原的原理，使氧化復(fù)原酶類的原位顯

5、示：根據(jù)氧化復(fù)原的原理，使無(wú)色的化合物氧化成有色的物質(zhì)得以定位。無(wú)色的化合物氧化成有色的物質(zhì)得以定位。 過(guò)氧化物酶體系能把許多胺類氧化成有色化合物。本過(guò)氧化物酶體系能把許多胺類氧化成有色化合物。本實(shí)驗(yàn)用聯(lián)苯胺混合液處置標(biāo)本，過(guò)氧化物酶可將其氧實(shí)驗(yàn)用聯(lián)苯胺混合液處置標(biāo)本，過(guò)氧化物酶可將其氧化為藍(lán)色或棕色產(chǎn)物?；癁樗{(lán)色或棕色產(chǎn)物。 根據(jù)顏色反響，可斷定過(guò)氧化物酶的有無(wú)或多少。根據(jù)顏色反響，可斷定過(guò)氧化物酶的有無(wú)或多少。RH2+ O2 R + H2O2H2O2 + RH2 R + H2O實(shí)驗(yàn)步驟 實(shí)驗(yàn)一：實(shí)驗(yàn)一： 取洋蔥鱗片表皮一薄片；取洋蔥鱗片表皮一薄片； 置于置于0.85NaCl溶液中溶液中35

6、分鐘。培育皿分鐘。培育皿1 浸在溶有浸在溶有0.1%鉬酸胺的鉬酸胺的0.85NaCl溶液中溶液中5分鐘。培育皿分鐘。培育皿2 在運(yùn)用聯(lián)苯胺溶液前，每在運(yùn)用聯(lián)苯胺溶液前，每2ml加加10%的過(guò)氧化氫的過(guò)氧化氫2滴。培育皿滴。培育皿3 浸在聯(lián)苯胺溶液中浸在聯(lián)苯胺溶液中2分鐘，至切片出現(xiàn)藍(lán)色為止。培育皿分鐘，至切片出現(xiàn)藍(lán)色為止。培育皿3 在在0.85%NaCl溶液中洗溶液中洗1min。培育皿。培育皿4 將薄片置于載玻片上展開，蓋上蓋玻片，顯微鏡檢查。將薄片置于載玻片上展開，蓋上蓋玻片，顯微鏡檢查。 實(shí)驗(yàn)二：實(shí)驗(yàn)二： 取馬鈴薯塊莖一個(gè)，用徒手切片法切取一小薄片置取馬鈴薯塊莖一個(gè)，用徒手切片法切取一小薄片置于載玻片上，于載玻片上， 滴加滴加3的過(guò)氧化氫溶液。的過(guò)氧化氫溶液。 用煮熟的馬鈴薯反復(fù)上述過(guò)程，結(jié)果如何？用煮熟的馬鈴薯反復(fù)上述過(guò)程，結(jié)果如何？實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1、在顯微鏡下可見(jiàn)到細(xì)胞中有一些染成藍(lán)色、在顯微鏡下可見(jiàn)到細(xì)胞中有一些染成藍(lán)色或棕色的顆粒。即為過(guò)氧化物酶存在的部位?；蜃厣念w粒。即為過(guò)氧化物酶存在的部位。 2、 滴加了過(guò)氧化氫溶液的馬鈴薯組織周圍出現(xiàn)氣滴加了過(guò)氧化氫溶液的馬鈴薯組織周圍出現(xiàn)氣泡，提示植物中過(guò)氧化氫酶的存在。泡，提示植物中過(guò)氧化氫酶的存在。過(guò)氧化氫酶能使過(guò)氧化氫酶能使H2O2H2O2分解，生成分解，生成H2OH2O