天然藥物分離方式

1、概 述中藥有效成分的不斷說(shuō)明中藥現(xiàn)代化的要求當(dāng)前用于中藥純化的主要技術(shù)： 溶劑法： 沉淀法： 色譜法：大孔吸附樹(shù)脂、離子交換樹(shù)脂、 聚酰胺、葡聚糖凝膠等 超臨界流體萃取法： 超濾法： 結(jié)晶法：一、樹(shù)脂簡(jiǎn)介1、常用樹(shù)脂的類型凝膠樹(shù)脂大孔樹(shù)脂離子交換樹(shù)脂2、離子交換樹(shù)脂離子交換樹(shù)脂的種類 種 類 活 性 基 團(tuán)1 強(qiáng)酸性 磺酸基(SO3H)2 弱酸性 磷酸基(PO3H2)、羧酸基(COOH)3 強(qiáng)堿性 型：三甲基胺(-N+(CH3)3) 型：二甲基乙醇胺(N+(CH3)2C2H4OH4 弱堿性 伯氨基(-NH2)、仲氨基(-NHR)、叔氨基(-NR2)5 兩性 強(qiáng)堿弱酸 弱堿弱酸3、大孔吸附樹(shù)脂目

2、前國(guó)產(chǎn)樹(shù)脂的主要類型致孔劑：甲苯、石蠟、溶劑汽油、煤油、碳醇、聚乙烯醇等國(guó)產(chǎn)大孔吸附樹(shù)脂的主要型號(hào)、性能、生產(chǎn)企業(yè) 型號(hào) 性能 生產(chǎn)企業(yè)D-101 非極性 天津晶瑩提取樹(shù)脂有限責(zé)任公司D-201 弱極性 天津晶瑩提取樹(shù)脂有限責(zé)任公司D-301 極性 天津晶瑩提取樹(shù)脂有限責(zé)任公司HPD-100 非極性 河北滄州寶恩化工HPD-300 弱極性 河北滄州寶恩化工HPD-600 極性 河北滄州寶恩化工X-5 非極性 南開(kāi)大學(xué)化工廠AB-8 弱極性 南開(kāi)大學(xué)化工廠NKA-9 極性 南開(kāi)大學(xué)化工廠 三菱化學(xué)的大孔吸附樹(shù)脂聚苯乙烯系列合成樹(shù)脂： Diaion: HP20, HP21 Sepabeads: S

3、P825, SP850 Sepabeads: SP70, SP700修飾的聚苯乙烯系列合成樹(shù)脂: Sepabeads: SP207異丁烯系列合成樹(shù)脂: Diaion: HP2MG大孔吸附樹(shù)脂的主要理化性質(zhì)顏色：白色、乳白色至微黃物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于任何酸、堿及有機(jī)溶劑，加熱不溶，可在150以下使用含水量：6080堆積密度：0.60.9影響樹(shù)脂性能的主要因素及國(guó)產(chǎn)樹(shù)脂存在的主要問(wèn)題交聯(lián)度比外表積吸附容量粒度分布強(qiáng)度二、大孔吸附樹(shù)脂的預(yù)處理1、樹(shù)脂預(yù)處理的方法回流提取法滲漉法水蒸氣蒸餾法2、樹(shù)脂預(yù)處理的溶劑乙醇丙酮異丙醇25鹽酸25氫氧化鈉3、滲漉法純化樹(shù)脂色譜柱：不銹鋼柱；徑高比為1:31:

4、7裝柱：濕法裝柱洗脫溶劑：乙醇25鹽酸25NaOH 水甲醇25鹽酸25NaOH 水混合溶劑25鹽酸25NaOH 水洗脫方法：乙醇法：乙醇浸泡12h 2BV洗脫浸泡35h 2BV洗脫浸泡35h 35BV洗脫浸泡35h 35BV洗脫23BV鹽酸浸泡24h 洗脫水洗脫23BV NaOH浸泡24h 洗脫水洗脫混合溶劑法：混合溶劑浸泡12h 2BV洗脫浸泡35h 2BV洗脫浸泡35h 35BV洗脫23BV鹽酸浸泡24h 洗脫水洗脫23BV NaOH浸泡24h 洗脫水洗脫新方法：乙醇浸泡35h 35BV乙醇洗脫 23BV鹽酸浸泡24h 洗脫水洗脫23BV NaOH浸泡24h 洗脫水洗脫三、大孔吸附樹(shù)脂的再

5、生再生溶劑的選擇乙醇：5095甲醇：50100異丙醇：丙酮：50100堿性乙醇溶液：25鹽酸：25NaOH：洗脫方法正洗脫：逆流洗脫：四、大孔吸附樹(shù)脂在新藥研究中的應(yīng)用1、適用的新藥類型中藥有效成分的粗分和精制單味中藥有效部位的制備中藥復(fù)方有效部位的制備注意：性質(zhì)相似成分可混煎后一起制備各味藥所含成分性質(zhì)差異較大的復(fù)方應(yīng)單獨(dú)提取后，再制備單味藥有效成分性質(zhì)差異較大的應(yīng)分別制備2、成分的類型與樹(shù)脂的選擇脂溶性成分包括甾體類、二萜、三萜、黃酮、木脂素、香豆素、生物堿等：應(yīng)選擇非極性或弱極性的樹(shù)脂，如D101、AB-8、HPD100等皂苷和生物堿苷類成分：應(yīng)選擇弱極性或極性樹(shù)脂，如D201、D301

6、、HPD300、HPD600、AB-8、NKA-9等黃酮苷、蒽醌苷、木脂素苷、香豆素苷等：應(yīng)選擇合成原料中加有甲基丙烯酸甲酯或丙烯氰的樹(shù)脂，如D201、D301、HPD600、NKA-9等環(huán)烯醚萜苷類成分：應(yīng)選擇極性樹(shù)脂，如D301、HPD600、NKA-9等3、樹(shù)脂用于新藥研究應(yīng)考察的內(nèi)容(1)樹(shù)脂型號(hào)的選擇 比吸附值考察 別離性能考察(2)藥材樹(shù)脂比例的考察(3)色譜柱的徑高比考察(4)洗脫溶劑的考察(5)吸附流速和洗脫流速考察(6)收集洗脫液量考察(7)樹(shù)脂的使用壽命考察(8)工藝放大試驗(yàn)4、樹(shù)脂別離條件的正交試驗(yàn)表頭的設(shè)計(jì) 因素 藥材樹(shù)脂 色譜柱 洗脫流速 收集洗脫水平 比例 徑高比

7、BV/h 液量 1 1:1 1:3 1 3 2 1:2 1:5 2 5 3 1:3 1:7 3 7實(shí)例一：某中藥中苯乙醇苷類成分的別離、精制該中藥所含的成分：苯乙醇苷類、環(huán)烯醚萜及其苷類、木脂素及其苷類、多元醇、水溶性生物堿、單糖、雙糖、氨基酸等1、樹(shù)脂型號(hào)的考察2、樹(shù)脂用量和吸附次數(shù)的考察3、洗脫液乙醇濃度的考察 乙醇濃度 20 40 60 80洗脫量 9倍 5倍 4倍 3倍 檢出雜質(zhì) 脂溶性 脂溶性 成分 成分4、收集洗脫液量的考察第一次洗脫第二次洗脫洗脫溶劑 水洗脫 40乙醇洗脫收集量 4 5TLC檢測(cè) 未檢出糖 難檢出苯乙醇苷洗脫溶劑 水洗脫 40乙醇洗脫收集量 3 4TLC檢測(cè) 未檢出糖 難檢出苯乙醇苷實(shí)例二、某中藥中黃酮苷類成分的別離、精制1、樹(shù)脂型號(hào)的考察3、洗脫條件的正交試驗(yàn)5、成品中有機(jī)殘留物的限量檢查檢查方法：氣相色譜法檢查成分：應(yīng)根據(jù)樹(shù)脂合成中所接觸的有機(jī)成分確定檢查成分測(cè)定方法：頂空進(jìn)樣或溶劑法含量限度：苯：2ppm；其它：20ppm方法學(xué)考察：溶劑的氣相色譜檢測(cè)基線噪音和最低檢測(cè)限的測(cè)定對(duì)照品的測(cè)定供試品的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)的書寫格式色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)對(duì)照品溶液的制備供試品溶液的制備測(cè)定法起草說(shuō)明五、大孔吸附樹(shù)脂在中藥及植物提取物生產(chǎn)中的應(yīng)用1、槐花米中黃酮苷類成分的別離、純化槐花花穗9.9kgMeOH提取36LHP20吸附MeOH溶解50-10L+10