動物細(xì)胞工程(共16頁)

1、溧陽市戴埠高級中學(xué)高二生物選修三教學(xué)案 班級 姓名 學(xué)號 2011.2.17 PAGE 26【課題(kt)】專題(zhunt)二 2.2.1 動物(dngw)細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)【教學(xué)目標(biāo)】簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)，動物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動物的過程和應(yīng)用前景【教學(xué)過程】回憶：植物細(xì)胞工程我們學(xué)習(xí)了哪些技術(shù)？最基礎(chǔ)的技術(shù)是什么？ 動物細(xì)胞工程我們又將學(xué)習(xí)哪些技術(shù)呢？（閱讀書本P44）你覺得哪項(xiàng)技術(shù)是動物細(xì)胞工程中最基本的技術(shù)呢？你覺得哪些技術(shù)與植物細(xì)胞工程是雷同？【動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程】閱讀書本思考：圖中步驟和分別是什么？目的是什么？能否直接去培養(yǎng)動物的組織或器官而獲得更多的細(xì)胞呢？（2

2、）選擇原材料時(shí)，是選用幼嫩的組織、器官還是成熟或是衰老的組織和器官呢？為什么？（3）步驟能否用胃蛋白酶？為什么？使用蛋白酶說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要成分是什么？如果處理時(shí)間過長會有什么結(jié)果？（4）步驟是什么操作？ （5）細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中生長具有什么特點(diǎn)？因此要求培養(yǎng)瓶具有哪些特點(diǎn)？細(xì)胞能否在培養(yǎng)瓶中一直分裂下去？（6）是進(jìn)行什么操作？在此之前的培養(yǎng)一般稱為什么培養(yǎng)，在此之后的培養(yǎng)一般稱為什么培養(yǎng)？（7）是進(jìn)行什么操作？一般傳代細(xì)胞傳至多少代就不易傳下去了？有沒有可能產(chǎn)生不死細(xì)胞，該細(xì)胞是產(chǎn)生的原因是什么？為什么使用的或冷凍保存的細(xì)胞一般都選擇10代以內(nèi)？ （8）你能否用簡要的文字圖概括一下(yxi)動

3、物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程。（9）動物(dngw)細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過脫分化的過程嗎？為什么？【動物(dngw)細(xì)胞培養(yǎng)的條件】多細(xì)胞動物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識，思考并討論以下問題：體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件？思考：（1）如何實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)液的無菌和無毒？ （2）溫度和PH一般控制在什么范圍內(nèi)？ （3）為什么要提供氧氣和二氧化碳？如何提供？2、體外培養(yǎng)細(xì)胞需要提供哪些物質(zhì)？3、比較動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的異同比較項(xiàng)目原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目的植物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)【動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用】（1）動物細(xì)胞的代謝產(chǎn)物的大規(guī)模生產(chǎn)能否通過動物細(xì)胞培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)？（2）為什么說動物

4、細(xì)胞培養(yǎng)與動物基因工程關(guān)系密切？（3）動物細(xì)胞的培養(yǎng)能否用于檢測有毒物質(zhì)？原理是什么？【動物細(xì)胞培養(yǎng)】鞏固訓(xùn)練1下列與動物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的表述中，不正確的是 （ ）A培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清B原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右便會出現(xiàn)生長停滯C動物細(xì)胞培養(yǎng)一般能夠傳到4050代，但其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變D動物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細(xì)胞2動物細(xì)胞培養(yǎng)液和植物組織培養(yǎng)液的共有成分是 （ ）A葡萄糖 B蔗糖 C動物血清 D維生素3動物細(xì)胞(xbo)培養(yǎng)的細(xì)胞來自于 （ ）A任何個(gè)體的細(xì)胞(xbo)B只能取自動物胚胎細(xì)胞C只能(zh nn)取自幼齡動物的組

5、織細(xì)胞D胚胎或幼齡動物的器官和組織細(xì)胞4下列對動物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)正確的是 ( )A動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白B 動物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細(xì)胞分散C 細(xì)胞所謂癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)過程中D培養(yǎng)至50代后傳代細(xì)胞將全部死亡【動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物】討論：如何用高產(chǎn)奶牛的一個(gè)體細(xì)胞培育出一頭奶牛？克隆羊多利產(chǎn)生過程：（1）克隆羊多利培育過程中使用到了哪些動物細(xì)胞工程技術(shù)？（2）其中最能體現(xiàn)“克隆”含義的生物技術(shù)是什么？該項(xiàng)技術(shù)說明了什么？歸納：動物核移植技術(shù)：思考：從細(xì)胞核的來源看，動物核移植技術(shù)可以分為哪兩種？哪一種技術(shù)難度更高？為什么？閱讀：1、在體細(xì)胞的細(xì)胞核

6、移植到受體卵母細(xì)胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核？用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10以內(nèi)的細(xì)胞，想一想，這是為什么？3、你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物，是對體細(xì)胞供體動物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？【體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用(yngyng)前景】思考：（1）你可以大量繁殖優(yōu)質(zhì)(yuzh)奶牛了嗎？（2）面臨著瀕危物種大熊貓，你有什么(shn me)良策能增加它的數(shù)量呢？（3）轉(zhuǎn)基因動物的優(yōu)良品質(zhì)如何保持下去？（4）器官移植的器官來源有新的渠道了嗎？（5）細(xì)胞核移植技術(shù)還有哪些應(yīng)用呢？（6）細(xì)胞核移植技術(shù)還存在哪些問題？總結(jié)：核移植技術(shù)的應(yīng)用有哪些？跟進(jìn)練習(xí)1一只羊的卵

7、細(xì)胞核被另一只羊的體細(xì)胞核置換后，這個(gè)卵細(xì)胞經(jīng)過多次分裂，再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育，結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)具有多種用途，但是不能 （ ）A有選擇地繁殖某一性別的家畜 B繁殖家畜中的優(yōu)秀個(gè)體C用于保存物種 D改變動物的基因型2下列哪項(xiàng)屬于克?。?）A將雞的某個(gè)DNA片段整合到小鼠的DNA分子中B將抗藥菌的某基因引入草履蟲的細(xì)胞內(nèi)C將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞 D將某腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個(gè)細(xì)胞群3生物技術(shù)的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復(fù)生”將不再是神話。如果世界上最后一只野驢剛死亡，以下較易成功“復(fù)生”野驢的方法是 （ ）A將野驢的體細(xì)胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，

8、經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個(gè)體B將野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個(gè)體C取出野驢的體細(xì)胞核移植到母家驢的去核卵細(xì)胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個(gè)體D將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個(gè)體4在動物細(xì)胞培養(yǎng)中，不會發(fā)生的是（ ）A酶促反應(yīng)B細(xì)胞(xbo)生長C細(xì)胞增殖D細(xì)胞融合5為了(wi le)使用于培養(yǎng)的動物組織細(xì)胞分散開，以便配置成一定濃度的細(xì)胞懸浮液，選取的組織應(yīng)該先用哪種物質(zhì)進(jìn)行處理（ ）A胃蛋白酶(wi dn bi mi)B胰蛋白酶C鹽酸D胰脂肪酶6（多選）美國一個(gè)研究小組利用成年豬的動脈血管細(xì)胞和模擬胚胎環(huán)境的新型生物反應(yīng)器,成功地在實(shí)驗(yàn)室里培育出新的動脈血管.這種血管的外形和

9、功能都與真的血管一樣,這一研究成果是生物組織培養(yǎng)領(lǐng)域的重大進(jìn)展.下列關(guān)于以上技術(shù)的敘述中,正確的是 （ ） A屬于“克隆” B可能要利用去核卵細(xì)胞 C關(guān)鍵是激發(fā)血管細(xì)胞的全能性 D關(guān)鍵是激發(fā)血管細(xì)胞發(fā)育成血管的潛能7（多選）下列對動物核移植技術(shù)的描述正確的是A哺乳動物核移植包括胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎核移植B體細(xì)胞核移植的過程中可通過顯微操作去核法去除卵母細(xì)胞中的核C體細(xì)胞核移植過程中通常采用M期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞D通過體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物是對體細(xì)胞動物進(jìn)行了100%的復(fù)制【課題】專題二 2.2.2 動物細(xì)胞融合和單克隆抗體【教學(xué)目標(biāo)】簡述動

10、物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)，動物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動物的過程和應(yīng)用前景【教學(xué)過程】一 動物細(xì)胞融合思考：通過長期的實(shí)驗(yàn)，科學(xué)家們采用體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了“番茄馬鈴薯”植株。動物細(xì)胞可以嗎？自然界中有沒有自然狀態(tài)下的動物細(xì)胞融合的例證。閱讀書本圖2-23，寫出兩種動物細(xì)胞融合的基本過程。思考：為什么滅活的病毒可以促進(jìn)細(xì)胞的融合？什么是滅活？為什么要滅活？比較：1、植物體細(xì)胞雜交時(shí)首先應(yīng)做什么處理？動物細(xì)胞融合時(shí)需要嗎？為什么？2、植物原生質(zhì)體融合的方法有哪些？動物細(xì)胞可以使用這些方法嗎？還有什么特殊方法？植物和動物細(xì)胞在融合(rngh)的原理上是否相同？3、植物體細(xì)胞(xbo)雜交的目的時(shí)什么？動

11、物細(xì)胞融合的目的也一樣嗎？總結(jié)(zngji)：動物細(xì)胞融合定義：二 單克隆抗體回憶：1.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？2.一個(gè)淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)能分泌多種抗體嗎？3.一種抗原侵入機(jī)體之后，引起機(jī)體免疫反應(yīng)產(chǎn)生的抗體只有一種嗎？4.簡述獲得抗體的傳統(tǒng)途徑？5.這種方法獲得的抗體有什么缺陷？某同學(xué)的方案：利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，培養(yǎng)大量漿細(xì)胞，從而獲得大量抗體。試評價(jià)該方案的可行性。你有沒有更好的方案？思考：1、為什么要注射抗原？2、融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞？3、融合后要進(jìn)行什么操作？目的是什么？雜交瘤細(xì)胞具有什么特點(diǎn)？4、獲得雜交瘤細(xì)胞后還要進(jìn)行什么操作？操作的目的是什么？5、如何培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞？6、單

12、克隆抗體具有什么優(yōu)點(diǎn)？思考：怎樣(znyng)篩選出雜交瘤細(xì)胞？已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩條DNA合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，你能否根據(jù)這些(zhxi)信息設(shè)計(jì)篩選雜交瘤細(xì)胞的方案。三 單克隆抗體(kngt)的應(yīng)用閱讀書本回答：單克隆抗體最廣泛的用途是什么？作為診斷試劑，它有哪些優(yōu)點(diǎn)？2、單克隆抗體還可以用于哪些方面？【動物細(xì)胞融合與單克隆抗體】鞏固訓(xùn)練1.科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是 （ ）A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞

13、B.不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D.不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞2.動物細(xì)胞融合的目的中最重要的是 （ ）A.克服遠(yuǎn)源雜交不親和 B.制備單克隆抗體 C.培育新物種 D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞3.能使動物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是 （ ）A.離心 B.滅活的病毒 C.電刺激 D.振動4單克隆抗體制備過程中使用的骨髓瘤細(xì)胞是一種缺陷型細(xì)胞，在含有次黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基（HAT）中無法生長；而小鼠脾細(xì)胞是正常細(xì)胞，在HAT培養(yǎng)基上可正常存活。用聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合后，經(jīng)過數(shù)代培養(yǎng)，最終可在HAT培養(yǎng)基上存活并能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是 （ ）A骨髓瘤細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞 B脾細(xì)胞

14、之間形成的融合細(xì)胞C骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞之間形成(xngchng)的融合細(xì)胞 D脾細(xì)胞(xbo)5研究(ynji)單克隆抗體治療癌癥的思路是 （ ）A利用單克隆抗體特異性地對抗癌細(xì)胞 B以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細(xì)胞C抗癌物質(zhì)在克隆細(xì)胞中大量合成D單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細(xì)胞結(jié)合6用動物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是 （ ）A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D篩選雜交積累細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體7.動物細(xì)胞

15、融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導(dǎo)融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細(xì)胞A.B. C.D.8.“生物導(dǎo)彈”是指 （ ）A.單克隆抗體 B.雜交瘤細(xì)胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞D.在單抗上連接抗癌藥物9單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是 （ ）B淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞A B C D10關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是 （ ）A可以制成診斷盒用于疾病的診斷 B可以與藥物結(jié)合，用于病變細(xì)胞

16、的定向治療C可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)11（多選）下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中，正確的是（ ）AB淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合，一般不需要滅活的仙臺病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)B融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體C體外培養(yǎng)時(shí)，一個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖D單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性明顯12（多選）下列細(xì)胞中與單克隆抗體的制備(zhbi)有關(guān)的是（ ）A.B細(xì)胞(xbo) BT淋巴細(xì)胞 C.骨髓瘤細(xì)胞(xbo) D雜交瘤細(xì)胞破傷風(fēng)桿菌老鼠提取細(xì)胞A 鼠骨髓瘤細(xì)胞 細(xì)胞融合篩選細(xì)胞B細(xì)胞培養(yǎng)篩選細(xì)胞C繼

17、續(xù)培養(yǎng)從培養(yǎng)液中提取抗體13、破傷風(fēng)桿菌侵入哺乳動物后能產(chǎn)生破傷風(fēng)毒素，使動物致死，為獲得抗破傷風(fēng)毒素的單克隆抗體，可以采用如下辦法：回答下列問題：細(xì)胞融合所用的細(xì)胞A應(yīng)是 ，要使兩種細(xì)胞融合，可用 作為誘導(dǎo)劑。過程中有兩次篩選，第一次篩選的細(xì)胞B是 細(xì)胞，第二次篩選的細(xì)胞C是 細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)前用破傷風(fēng)桿菌感染老鼠誘導(dǎo)老鼠產(chǎn)生特異性免疫的 。進(jìn)行感染時(shí)需劃破老鼠皮膚進(jìn)行按種，劃破的傷口應(yīng)深一些還是淺一些？為什么？ （4）制備單克隆抗體的原理是 。（5）單克隆抗體是由 細(xì)胞產(chǎn)生的。（6）制備單克隆抗體用到的動物細(xì)胞工程技術(shù)手段有 。（7）靜脈注入而不是口服單克隆抗體的原因是 。（8）單克隆抗體與傳統(tǒng)

18、方法獲得的抗體相比具有的特點(diǎn)是 （9）試設(shè)想運(yùn)用生物工程其它領(lǐng)域的技術(shù)制備單克隆抗體的一條途徑_ .14、下圖是制備分泌抗X抗體的過程，據(jù)圖回答：（1）給小鼠注射抗原(kngyun)的目的是_。（2）在單克隆抗體制備過程中之所以選用(xunyng)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有_ _的特性(txng)。（6）圖中有兩次篩選過程，其中步驟的目的是篩選出_，步驟的目的是篩選出_。（7）請根據(jù)以下信息，設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細(xì)胞。已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增

19、殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。方法：_ _。原理：_ _。24(1)獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞(2)既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體(3)動物細(xì)胞融合 動物細(xì)胞培養(yǎng) 滅活病毒 (4)動物血清(5)胰蛋白酶 (6)雜交瘤細(xì)胞 能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞(7)方法：培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞原理：加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖二、相關(guān)知識連接1 胰蛋白酶 2 影響酶活性

20、的因素 3 培養(yǎng)基和培養(yǎng)液 4 植物體細(xì)胞雜交 6、動物核移植是指將動物的一個(gè)細(xì)胞的 ，移入一個(gè)已經(jīng) 的卵母細(xì)胞中，使其 并發(fā)育成一個(gè) ，這個(gè)胚胎最終發(fā)育成動物個(gè)體?？煞譃?和 。7、克隆的條件：具有包含物種 的活細(xì)胞；能有效調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的 ；完成 的必要的環(huán)境條件。8、動物體細(xì)胞核移植可用于加速家畜 進(jìn)程，促進(jìn) 繁育；保護(hù) ；生產(chǎn) ；作為異種移植的 ；用于組織器官的 。9、克隆動物存在 、 、 等問題。四、知識探究 植物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目的植物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)五、思維(swi)拓展六、鞏固(gngg)性練習(xí) 專題(zhunt)2 細(xì)胞工程 2.2

21、動物細(xì)胞工程 2.2.1 動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)1、動物細(xì)胞工程有哪些常用的技術(shù)手段？ 動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞核移植、動物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等2、什么是動物細(xì)胞培養(yǎng)？ 就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞后，放在適宜的培養(yǎng)基中，使其生長和增值。3、動物細(xì)胞培養(yǎng)包括哪些基本過程？ 、動物組織 + 胰蛋白酶或膠原蛋白酶，得到分散的單個(gè)動物細(xì)胞。 、培養(yǎng)液稀釋動物細(xì)胞，制成細(xì)胞懸浮液，培養(yǎng)瓶培養(yǎng)增值。 、出現(xiàn)接觸抑制時(shí)，再用胰蛋白酶處理成單個(gè)細(xì)胞的懸浮液，繼續(xù)培養(yǎng)增值。4、什么是細(xì)胞貼壁？ 、概念：指培養(yǎng)過程中，細(xì)胞貼附在瓶壁上的現(xiàn)象。 、培養(yǎng)貼附性細(xì)胞的要求(yoqi)：培養(yǎng)

22、瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒。5、什么(shn me)是接觸抑制？ 指貼壁細(xì)胞因?yàn)楸砻嫦嗷ソ佑|(jich)時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞停止分裂增值的現(xiàn)象。6、什么是原代培養(yǎng)？ 指動物組織經(jīng)過胰蛋白酶處理后的初次培養(yǎng)。一般能傳代約10代，得到細(xì)胞株。7、什么是傳代培養(yǎng)？ 指貼壁生長的細(xì)胞（10代后）經(jīng)胰蛋白酶處理后的繼續(xù)培養(yǎng)，得到細(xì)胞系，能無限傳代。 細(xì)胞系的細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生突變，基本上具有癌細(xì)胞的特性。8、動物細(xì)胞培養(yǎng)需要哪些條件？ 、無菌無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)事先進(jìn)行滅菌處理。 、營養(yǎng)（合成培養(yǎng)基的成分）：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素、血漿、血清等。 、溫度：適宜溫度未36.50C0.50C 、PH：7

23、.27.4 、氣體環(huán)境：空氣95%，CO25%9、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)有哪些應(yīng)用？ 、生產(chǎn)病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。 、用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性。10、什么是動物體細(xì)胞核移植技術(shù)？ 、概念：就是將動物的一個(gè)體細(xì)胞的細(xì)胞核，移植到一個(gè)去核卵細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè) 新的胚胎，并使這個(gè)胚胎最終發(fā)育成為動物個(gè)體。 、原理：細(xì)胞核全能性 、過程： 、供體體細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)后，提取細(xì)胞核； 、提取卵巢卵母細(xì)胞，在其減數(shù)分裂第二次分裂中期除去細(xì)胞核，制成無核細(xì)胞質(zhì)； 、將供體核與無核卵母細(xì)胞質(zhì)融合，并培養(yǎng)成早期胚胎； 、將早期胚胎移植到代孕母體子宮內(nèi)，發(fā)育成新個(gè)體。11、怎樣獲得克隆動物？

24、 、原理：細(xì)胞核全能性 、技術(shù)支持：動物體細(xì)胞核移植技術(shù) 、應(yīng)用： 、加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)(cjn)優(yōu)良畜群繁育。 、保護(hù)(boh)瀕危物種 、生產(chǎn)(shngchn)醫(yī)用蛋白、作為異種移植的細(xì)胞、組織或器官供體。 、用于組織器官的移植 、尚存問題：克隆動物存在遺傳和生理缺陷。如體重較大、異常肥胖、發(fā)育困難、臟器缺陷、免疫失調(diào)等12、什么是克隆動物？ 指利用核移植方法的無性繁殖技術(shù)得到的動物。1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程動物血清、葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素胰蛋白酶、剪碎動物胚胎或幼齡動物器官、組織單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸浮液50代細(xì)胞細(xì)胞株細(xì)胞系原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)2、動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的區(qū)別。動

25、物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)有許多相似之處，也有許多不同點(diǎn)。一是它們用的培養(yǎng)基不同，植物組織培養(yǎng)用的一般是固體培養(yǎng)基，而動物細(xì)胞培養(yǎng)用的一般是液體培養(yǎng)基。第二是它們的培養(yǎng)基的成分不同。動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽和維生素，另外還有動物血清。植物組織培養(yǎng)所需要的培養(yǎng)基包含植物生長和發(fā)育的全部營養(yǎng)成分，如礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素和有機(jī)添加物，沒有動物血清。第三是植物組織培養(yǎng)最后一般得到新的植物個(gè)體，而動物細(xì)胞培養(yǎng)因?yàn)閯游矬w細(xì)胞一般不能表達(dá)其全能性，因此得到的是同一種的細(xì)胞。解析：實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菫榱双@取抗破傷風(fēng)毒素的抗體，產(chǎn)生抗體的是經(jīng)免疫的淋巴B細(xì)胞。為使細(xì)胞相互融合，必須

26、有一定的誘導(dǎo)劑輔助，常用的有滅活的仙臺病毒、聚乙二醇等。經(jīng)誘導(dǎo)后的細(xì)胞不一定(ydng)融合，且融合的細(xì)胞也有多種，可能是A與A融合，A與瘤細(xì)胞融合或瘤細(xì)胞與瘤細(xì)胞融合。所以要用一定的方法篩選，選出目的細(xì)胞A與瘤細(xì)胞(xbo)融合的雜種種瘤細(xì)胞，得到的雜種瘤細(xì)胞不一定能產(chǎn)生抗體。能產(chǎn)生抗體的也不定是抗破傷風(fēng)毒素的抗體，所以要再一次篩選，選出產(chǎn)生抗破傷風(fēng)毒素抗體的細(xì)胞?？贵w的產(chǎn)生屬于特異性免疫的體液免疫。另外，破傷風(fēng)桿菌是厭氧生物，為使感染成功，需接種(jizhng)得深一些。答案：效應(yīng)淋巴B細(xì)胞、滅活的仙臺病毒或聚乙二醇雜種瘤細(xì)胞、能產(chǎn)生所需抗體的雜種瘤細(xì)胞體液免疫、應(yīng)深一些，因?yàn)槠苽L(fēng)桿菌是

27、厭氧生物5.動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此回答(1)容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自 。(2)容器A中的動物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是 ，然后用 酶處理，這是為了使細(xì)胞分散開來。這樣做的目的是 。(3)培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行。瓶中的培養(yǎng)基成分有 等。在此瓶中培養(yǎng)一段時(shí)間后，有許多細(xì)胞衰老死亡，這是培養(yǎng)到 代，到此時(shí)的培養(yǎng)稱為 。(4)為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中，用 處理，然后配置成 ，再分裝。(5)在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡。原因是_。6.某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí)，以動物肝細(xì)胞為材料，測定藥物對體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種，甲細(xì)胞為肝腫瘤

28、細(xì)胞，乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：（1）將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其它培養(yǎng)條件均相同。一段時(shí)間后，觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量_。（2）在動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是_。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是_。（3）在兩種細(xì)胞生長過程中，當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí)，其生長_。藥物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞，兩種細(xì)胞頻繁傳代，甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更_。若用動物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液，需用_消化處理。（4）為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的_。（5）已知癌細(xì)胞X過量表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，要試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對甲細(xì)胞生長的影響，可將甲細(xì)胞分為AB兩組，A組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入_，B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入無菌生理鹽水，經(jīng)培養(yǎng)后，從AB兩組收集等量細(xì)胞，通過分別檢測X基因在AB兩組細(xì)胞中的_或_合成水平的差異，確定Y的藥效。7.用動物細(xì)胞培養(yǎng)獲得的細(xì)胞可用來檢測有毒物質(zhì)。請根據(jù)條件(tiojin)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)檢測不同濃度的農(nóng)藥甲胺磷對兔子細(xì)胞形態(tài)變異的影響。所給材料：已培養(yǎng)好的兔子細(xì)胞(xbo)懸浮液，濃度分別為50PPM、100PPM、200PPM、400PPM的甲胺磷溶液、兔子細(xì)胞的液體培養(yǎng)基、