神經(jīng)分子生物學(xué)II課件

1、神經(jīng)分子生物學(xué)II課件簡介3類1）代表受體通道: AchR, (GABA，甘氨酸， 5-HT，)特征：a. 5個(gè)亞基為共同特征b. N末端為17-24aa信號(hào)肽c. N，C末端都在膜外側(cè)d. 4個(gè)跨膜區(qū)：M1-M4， M3-4之間有內(nèi)襻2）谷氨酸門控通道： 依藥物分類如下甲基-天冬氨酸受體 紅藻酸受體使君子酸受體特征：克隆表明為AchR受體2倍，功能不清3）ATP/ADP通道受體：非離子選擇性，僅存2個(gè)跨膜區(qū)域1煙堿型膽堿受體：功能：鈣離子內(nèi)流位置：肌肉接頭后膜電生理：Ach 彌散細(xì)胞外，受體結(jié)合內(nèi)向電流除極動(dòng)作電位降解：膽堿酯酶生化本質(zhì)：2分子膽堿與受體結(jié)合生成復(fù)合物通道構(gòu)象改變通道電流改變

2、分子量: 55.000 ，糖蛋白 1）N末端： 親水，后繼3個(gè)疏水片段2）N，C末端：存在與細(xì)胞膜外立體結(jié)構(gòu)：，2， 1）5個(gè)亞單位組成2）中心軸對(duì)稱結(jié)構(gòu)3）N末端位于孔道前庭4) 孔道形成：各亞單位M2螺旋形成2-氨基丁酸特征：神經(jīng)抑制性遞質(zhì)，介導(dǎo)40%抑制效應(yīng)生成：三羧循環(huán)衍生物，酶： 谷氨酸脫羧酶位置：GABA存于N末梢囊泡， N沖動(dòng) Ga+內(nèi)流GABA釋放 效應(yīng)分類：三種受體：GABA a,b,c1) GABAa: 配體門控Cl-通道 電導(dǎo) 超級(jí)化2) GABAc: 與快Cl-電導(dǎo)有關(guān)，類似 A3) GABAb: G-蛋白偶聯(lián)受體有關(guān) Ca+, K+調(diào)節(jié)， 抗驚厥藥物作用位點(diǎn)結(jié)構(gòu)：類似

3、 nAChR受體1）每亞基有4疏水跨膜區(qū)：M1- M42）N，C 末端位于細(xì)胞外3）M3，M4之間存在有內(nèi)環(huán)3. 甘氨酸受體：配體門控Cl-通道分布：橋，延，脊髓功能A：介導(dǎo)抑制性突觸傳遞結(jié)構(gòu)：略4.5-HT3受體：唯一5-HT配體門控離子通道功能：1）活化 Na+, K+通道開放內(nèi)向電流 除極化2）調(diào)控多種遞質(zhì)釋放：Ach, dopa, GABA機(jī)理：激活 開放末梢鈣通道 Ca+ 釋放遞質(zhì) （dopa ）5. N-甲基-D-天冬氨酸受體（谷氨酸類）： 主要中樞興奮性遞質(zhì)分類：a) G-蛋白偶聯(lián)受體：第二信使作用b) 離子型受體依據(jù)激動(dòng)劑分三亞類：I: NMDA (N-甲基-D-天冬氨酸受體)

4、II：KA （紅藻酸）III：AMPA（使君子酸）（II-III統(tǒng)稱為非NMDA）作用方式、功能：a) 電壓依賴Mg+阻滯作用，特征為電壓與配體的雙重依賴，參與學(xué)習(xí)/記憶b) 鈣離子高通透性：高度興奮導(dǎo)致神經(jīng)興奮毒性c) 甘氨酸協(xié)同激動(dòng)方式d) 多結(jié)合位點(diǎn)：受體功能精細(xì)調(diào)節(jié)；如：鋅、多胺、H+、磷酸化分子生物基礎(chǔ)： 1）NMDA基因家族：a. 2個(gè)編碼亞單位的基因：NR1， NR2a) NR1：為獨(dú)立基因，8個(gè)剪接變體b) NR2：4個(gè)獨(dú)立基因，NR2A-D; NR2D有2個(gè)剪接變體b. 上述亞單位參與NMDA受體形成c. NR2單獨(dú)表達(dá)不能形成受體：參與修飾通道受體功能d. NR1:受體通道

5、部分2)蛋白質(zhì)化學(xué)基礎(chǔ)： a. NR1A：920aa, Mr. 103.000;似AMPA與KA b. NR2 A-D:1442、1456、1333、1330 aa3) NMDA受體亞單位二級(jí)結(jié)構(gòu)： a. TM2特性：構(gòu)成孔道襯里，存天冬氨酸殘基與Ca+通透性有關(guān)，其它殘基可與Mg+結(jié)合位點(diǎn)有關(guān) b. AA與特異性：天冬氨酸取代AMPA的Q(谷酰)/R(精) 獲鈣通透性，無Mg+拮抗作用 c.點(diǎn)突變提示Ca+, Mg+ 可能結(jié)合多個(gè)位點(diǎn)6 AMPA受體 （使君子受體）4個(gè)結(jié)構(gòu)相似亞單位組成 :GluR1GluR4亞單位特征：1）氨基酸70%同源，900 aa, Mr. 100.0002）C端部

6、分可能形成4個(gè)跨膜區(qū)3）單一亞單位表達(dá)時(shí)能夠形成配體門控離子通道4）多亞單位組合可產(chǎn)生新協(xié)同效應(yīng):提示多聚體5）GluR A,C,D形成多聚體為雙向整流: 對(duì)Ca+, Mg+通透6）GluR B 形成的通道對(duì)二價(jià)離子無通透7）TM II位點(diǎn)的特異性決定離子通透性：R（精氨酸）= A丙，C半，D天Q（谷氨酰胺）= D天7 KA受體（紅藻酸受體） 亞單位克隆：5個(gè)KA亞單位cDNA， 2組1）GluR5-GluR7 特征：彼此同源70%，與AMPA同40%2) KA1, KA2:特征：彼此同源70%，與AMPA, GluR同源30-40%表達(dá)：大腦內(nèi)鑲嵌表達(dá)，參與環(huán)路突觸傳遞通道形成：1）功能性通

7、道：GluR5 or 6 同聚體2）KA1/2與GluR5/6共同表達(dá)：形成不同于上述同聚體特異通道GluR6 TMII區(qū)Q/R位點(diǎn)與TMI區(qū)剪接位點(diǎn)I/V和/Y/C： 1）TM I區(qū)I（異）/V（纈）和/Y（酪）/C（半）可形成8種剪接體 2）GluR5,6的Q/R位點(diǎn)含有30%與70%的精氨酸 3）mRNA剪接影響GluR6結(jié)構(gòu) 改變Ca+流量a. TM I = V, C; GluR 6 = R 提高鈣通透b. R/Q同時(shí)表達(dá)時(shí)鈣通透性降低c.TM I = I，Y; GluR6 = Q 鈣通透性不變7 P2x受體: ATP/ADP受體 分布：周圍、中樞神經(jīng)ex. 交感神經(jīng)、膀胱、N末梢，神經(jīng)元 ATP/ADP受體分類： 1）離子型受體（P2x）：ATP門控離子通道2）G-蛋白偶聯(lián)受體（P2y）:經(jīng)磷脂酶C影響通道功能P