血尿分泌物培訓(xùn)

1、血液常規(guī)規(guī)檢查的的基礎(chǔ)知知識(shí)一、紅細(xì)細(xì)胞（RRBC）計(jì)計(jì)數(shù)意義義紅細(xì)胞增增多見于于：（1）血血液中紅紅細(xì)胞絕絕對(duì)值增增多，見見于真性性紅細(xì)胞胞增多癥癥；（2）機(jī)機(jī)體長(zhǎng)期期缺氧，如如慢性肺肺源性心心臟病、發(fā)紺性性先天性性心臟病病引起繼繼發(fā)性紅紅細(xì)胞增增多；（3）因因一時(shí)性性血漿中中水分丟丟失過多多、血液液濃縮，如如劇烈吐吐瀉、脫脫水、燒燒傷引起起相對(duì)性性紅細(xì)胞胞增多。紅細(xì)胞減減少見于于各種原原因引起起的貧血血，如骨骨髓造血血功能障障礙，造造血原料料缺乏，紅紅細(xì)胞破破壞過多多、過早早等。二、血紅紅蛋白（HHb）測(cè)測(cè)定意義義其增減減的意義義大致與與紅細(xì)胞胞增減相相似，但但在各種種不同類類型貧血血時(shí)，

2、紅紅細(xì)胞數(shù)數(shù)與血紅紅蛋白量量的減低低不一定定呈平行行關(guān)系。如小紅紅細(xì)胞性性貧血時(shí)時(shí)，血紅紅蛋白含含量比紅紅細(xì)胞數(shù)數(shù)減少更更為明顯顯；在大大紅細(xì)胞胞性貧血血時(shí)，則則紅細(xì)胞胞減少的的程度較較血紅蛋蛋白減少少更為嚴(yán)嚴(yán)重。三、紅細(xì)細(xì)胞形態(tài)態(tài)學(xué)檢查查紅細(xì)胞大大小異常常包括：1.小紅紅細(xì)胞，直直徑小于于6m，厚厚度薄，常常見于缺缺鐵性貧貧血。2.大紅紅細(xì)胞，直直徑大于于10m，體體積大，常常見于維維生素BB12或或葉酸缺缺乏引起起的巨幼幼紅細(xì)胞胞性貧血血。3.紅細(xì)細(xì)胞大小小不均，大大小相差差1倍以以上，常常見于各各種增生生性貧血血，但不不見于再再生障礙礙性貧血血。紅細(xì)胞形形態(tài)異常常包括：1.球形形紅細(xì)胞胞

3、，直徑徑縮小，厚厚度增加加，常見見于遺傳傳性球形形紅細(xì)胞胞增多癥癥、自身身免疫性性溶血性性貧血。2.靶形形紅細(xì)胞胞，呈靶靶形，主主要見于于珠蛋白白生成障障礙性貧貧血、某某些血紅紅蛋白病病、脾切切除術(shù)后后等3.橢圓圓形紅細(xì)細(xì)胞，長(zhǎng)長(zhǎng)徑增大大，橫徑徑縮小，呈呈橢圓形形，見于于遺傳性性橢圓形形細(xì)胞增增多癥，也也可見于于巨幼紅紅細(xì)胞性性貧血。4.鐮形形紅細(xì)胞胞，如鐮鐮刀形、柳葉狀狀等，主主要見于于鐮形紅紅細(xì)胞性性貧血。5.紅細(xì)細(xì)胞緡線線狀形成成，呈平平行疊串串狀排列列，見于于骨髓瘤瘤、高球球蛋白血血癥、高高纖維蛋蛋白血癥癥等。紅細(xì)胞染染色異常常，紅細(xì)細(xì)胞染色色深淺反反映著血血紅蛋白白含量，包包括：1.

4、低色色素性，紅紅細(xì)胞內(nèi)內(nèi)含血紅紅蛋白減減少，見見于缺鐵鐵性貧血血及其他他低色素素性貧血血。2.高色色素性，紅紅細(xì)胞內(nèi)內(nèi)含血紅紅蛋白較較多，多多見于巨巨幼紅細(xì)細(xì)胞性貧貧血。3.嗜多多色性，是是未完全全成熟的的紅細(xì)胞胞，呈灰灰藍(lán)色，體體積稍大大，見于于骨髓造造紅細(xì)胞胞功能旺旺盛的增增生性貧貧血。紅細(xì)胞結(jié)結(jié)構(gòu)異常常包括：1.嗜堿堿性點(diǎn)彩彩，見于于重金屬屬（鉛、鉍、銀銀等）中中毒，硝硝基苯、苯胺等等中毒及及溶血性性貧血、惡性腫腫瘤等。2.卡卡波（CCaboot）環(huán)環(huán)，可能能是幼紅紅細(xì)胞核核膜的殘殘余物，見見于溶血血性貧血血、某些些增生性性貧血。3.何-喬（HHoweell-Jollly）小小體，可可能

5、是細(xì)細(xì)胞核的的殘余物物，見于于巨幼紅紅細(xì)胞性性貧血、溶血性性貧血及及脾切除除術(shù)后。四、白細(xì)細(xì)胞（WWBC）計(jì)計(jì)數(shù)意義義白細(xì)胞增增多見于于：急性感感染：包包括化膿膿菌感染染、桿菌菌感染引引起腎孟孟腎炎、膽囊炎炎等，病病毒感染染引起傳傳染性單單核細(xì)胞胞增多癥癥、乙型型腦炎等等，寄生生蟲感染染引起急急性血吸吸蟲病，螺螺旋體病病引起的的鉤端螺螺旋體病病等，重重度感染染時(shí)可引引起白細(xì)細(xì)胞總數(shù)數(shù)顯著增增高并可可出現(xiàn)明明顯核左左移。嚴(yán)重?zé)裏齻⑤^較大手術(shù)術(shù)后、心心肌梗死死等引起起的組織織損傷、壞死。數(shù)量極極度增高高時(shí)，見見于惡性性腫瘤、白血病病，尤其其是慢性性白血病病。見于急急性失血血，尤其其是內(nèi)臟臟破裂、

6、宮外孕孕等引起起的內(nèi)出出血。見于急急性化學(xué)學(xué)藥物有有機(jī)磷中中毒，也也見于糖糖尿病酮酮癥酸中中毒、尿尿毒癥等等引起的的代謝性性中毒。白細(xì)胞總總數(shù)減少少見于：革蘭陰陰性桿菌菌感染，如如傷寒、副傷寒寒沙門菌菌，病毒毒感染，如如流感、病毒性性肝炎，寄寄生蟲感感染，如如瘧疾等等。某些血血液病，如如再生障障礙性貧貧血、粒粒細(xì)胞缺缺乏癥、白細(xì)胞胞不增多多型白血血病等。自身免免疫性疾疾病，如如系統(tǒng)性性紅斑狼狼瘡、免免疫抗體體導(dǎo)致的的白細(xì)胞胞減少。理化損損傷及藥藥物反應(yīng)應(yīng)，如苯苯及其衍衍生物引引起的放放射線損損傷、化化學(xué)品中中毒，如如氯霉素素、保泰泰松、抗抗癌藥等等引起的的各種反反應(yīng)。其他，如如肝硬化化、脾功功

7、能亢進(jìn)進(jìn)等。五、白細(xì)細(xì)胞分類類（DCC）意義義中性粒細(xì)細(xì)胞（NN）總數(shù)數(shù)的增多多或減少少的臨床床意義與與白細(xì)胞胞相似。嗜酸性性粒細(xì)胞胞（E）增增多見于于：過敏性性變態(tài)反反應(yīng)，如如支氣管管哮喘、藥物性性皮疹、血管神神經(jīng)性水水腫、血血清病等等。寄生蟲蟲病，如如腸道寄寄生蟲鉤鉤蟲、蛔蛔蟲等。某些皮皮膚病，如如濕疹、天皰瘡瘡、剝脫脫性皮炎炎等。急性傳傳染病恢恢復(fù)時(shí)，一一般在常常起病時(shí)時(shí)細(xì)胞數(shù)數(shù)減少，當(dāng)當(dāng)開始恢恢復(fù)時(shí)可可呈現(xiàn)增增多，提提示病情情好轉(zhuǎn)。某些血血液病及及惡性腫腫瘤，如如慢性粒粒細(xì)胞性性白血病病、淋巴巴瘤、肺肺癌等。嗜酸性性粒細(xì)胞胞減少見見于：當(dāng)腎上上皮質(zhì)功功能亢進(jìn)進(jìn)或應(yīng)用用腎上腺腺皮質(zhì)激激素

8、治療療時(shí)。急性發(fā)發(fā)熱性傳傳染病，尤尤其在傷傷寒、副副傷寒、嚴(yán)重?zé)裏齻⒋蟠笫中g(shù)后后。嗜堿性粒粒細(xì)胞（B）增增多見于于：某些血血液病如如慢性粒粒細(xì)胞性性白血病病、紅細(xì)細(xì)胞增多多癥；脾切除除術(shù)后、疫苗預(yù)預(yù)防注射射后等。嗜堿性性粒細(xì)胞胞減少一一般無臨臨床意義義。1.淋巴巴細(xì)胞（LL）增多多見于：初生嬰嬰兒、兒兒童的生生理性增增多；某些血血液病如如再生障障礙性貧貧血、粒粒細(xì)胞減減少癥可可引起淋淋巴細(xì)胞胞相對(duì)性性增多；某些感感染，如如病毒感感染性疾疾病、細(xì)細(xì)菌性感感染如百百日咳、慢性感感染如結(jié)結(jié)核病的的恢復(fù)期期；急、慢慢性淋巴巴細(xì)胞性性白血病病。2.淋巴巴細(xì)胞減減少大多多是相對(duì)對(duì)性減少少，或見見于長(zhǎng)期期

9、接觸放放射線或或應(yīng)用腎腎上腺皮皮質(zhì)激素素治療后后。單核細(xì)胞胞（M）增增多見于于：某些感感染如結(jié)結(jié)核病活活動(dòng)期，亞亞急性細(xì)細(xì)菌性心心內(nèi)膜炎炎、瘧疾疾等；某些血血液病，如如淋巴瘤瘤、高雪雪病、單單核細(xì)胞胞性白血血病且可可出現(xiàn)原原、幼單單核細(xì)胞胞。單核核細(xì)胞減減少一般般無特殊殊臨床意意義。六、白細(xì)細(xì)胞的常常見形態(tài)態(tài)變化中性粒細(xì)細(xì)胞的核核象變化化包括：核左移移，常見見于感染染，尤以以急性化化膿性感感染最常常見，其其他如急急性中毒毒、急性性溶血時(shí)時(shí)也可出出現(xiàn)。核右移移，主要要見于營(yíng)營(yíng)養(yǎng)性巨巨幼紅細(xì)細(xì)胞性貧貧血、使使用抗代代謝藥物物治療后后、感染染恢復(fù)期期等。中性粒細(xì)細(xì)胞的形形態(tài)異常常包括：中毒顆顆粒：常

10、常見于嚴(yán)嚴(yán)重的化化膿性感感染、大大面積燒燒傷等?？张葑冏冃裕撼３Ｒ娪趪?yán)嚴(yán)重感染染，特別別是敗血血癥，因因粒細(xì)胞胞受損發(fā)發(fā)生脂肪肪變性所所致。核變性性，臨床床意義同同空泡變變性。棒狀小小體，僅僅見于白白血病細(xì)細(xì)胞中，但但在急性性淋巴細(xì)細(xì)胞白血血病則不不出現(xiàn)棒棒狀小體體。淋巴細(xì)胞胞形態(tài)變變異根據(jù)據(jù)形態(tài)特特點(diǎn)分為為3型：型（空空泡型）、型（不不規(guī)則型型）、型（幼幼稚型）。除以上上3型外外，尚可可有呈漿漿細(xì)胞樣樣或組織織細(xì)胞樣樣的異形形淋巴細(xì)細(xì)胞，見見于：病毒感感染性疾疾??；某些細(xì)細(xì)菌性感感染，原原蟲、螺螺旋體感感染；某些免免疫性疾疾病、藥藥物過敏敏等。七、血小小板計(jì)數(shù)數(shù)意義血小板減減少見于于：血小板

11、板生成減減少，如如再生障障礙性貧貧血、急急性白血血病、骨骨髓纖維維化、放放射線損損傷；血小板板破壞過過多，如如免疫性性血小板板減少性性紫癜、過敏性性藥物損損傷；血小板板消耗過過多，如如彌散性性血管內(nèi)內(nèi)凝血、血栓性性血小板板減少性性紫癜；血小板板分布異異常，如如脾腫大大、輸入入大量血血漿血液液受稀釋釋等。血小板增增多見于于：急性大大失血和和溶血后后可呈反反應(yīng)性增增多；骨髓增增生病，如如原發(fā)性性血小板板增多癥癥、慢性性粒細(xì)胞胞性白血血病、真真性紅細(xì)細(xì)胞增多多癥等。血小板學(xué)學(xué)形態(tài)檢檢查正常常血小板板呈圓形形或橢圓圓形，直直徑24m，含含嗜天青青顆粒。功能正正常的血血小板多多數(shù)個(gè)成成簇聚集集，若呈呈單

12、個(gè)分分散分布布提示血血小板功功能不良良。幼稚稚血小板板體積大大，胞質(zhì)質(zhì)藍(lán)色加加深。當(dāng)當(dāng)血小板板異常增增生時(shí)，呈呈大小不不等，形形態(tài)異常常。血常規(guī)檢檢驗(yàn)中的的注意事事項(xiàng)血細(xì)胞檢檢驗(yàn)是指指對(duì)血液液中白細(xì)細(xì)胞（WWBC）、紅細(xì)胞胞（RBBC）、血小板板（PLLT）、血紅蛋蛋白（HHGB）及及相關(guān)數(shù)數(shù)據(jù)的計(jì)計(jì)數(shù)檢測(cè)測(cè)分析，也也稱血常常規(guī)檢驗(yàn)驗(yàn)。血常常規(guī)檢驗(yàn)驗(yàn)不僅是是診斷各各種血液液病的主主要依據(jù)據(jù)，而且且對(duì)其它它系統(tǒng)疾疾病的診診斷和鑒鑒別也可可提供許許多重要要信息，是是臨床醫(yī)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)驗(yàn)中最常常用、最最重要的的基本內(nèi)內(nèi)容之一一。血常常規(guī)檢驗(yàn)驗(yàn)的最原原始的手手段是通通過顯微微鏡人工工鏡檢，隨隨著基礎(chǔ)礎(chǔ)醫(yī)學(xué)

13、的的發(fā)展，高高科學(xué)技技術(shù)的應(yīng)應(yīng)用，血血液細(xì)胞胞分析儀儀已成為為取代鏡鏡檢進(jìn)行行血常規(guī)規(guī)分析的的重要手手段，尤尤其是帶帶分類的的血液分分析儀。無論是鏡鏡檢、還還是使用用血液分分析儀，要要獲得血血常規(guī)檢檢驗(yàn)的穩(wěn)穩(wěn)定可靠靠、準(zhǔn)確確的數(shù)據(jù)據(jù)，防止止臨床診診療人出出錯(cuò)誤的的判斷，實(shí)實(shí)驗(yàn)室檢檢驗(yàn)要充充分考慮慮影響血血常規(guī)檢檢驗(yàn)中的的多種影影響因素素，并嚴(yán)嚴(yán)格加以以控制：一標(biāo)本本的采集集為了取得得準(zhǔn)確、可靠的的檢驗(yàn)結(jié)結(jié)果，必必須取得得高質(zhì)量量的標(biāo)本本。高質(zhì)質(zhì)量的標(biāo)標(biāo)本是高高質(zhì)量檢檢驗(yàn)的第第一步。保證血血液標(biāo)本本中各項(xiàng)項(xiàng)細(xì)胞的的完整形形態(tài)是作作為血常常規(guī)檢驗(yàn)驗(yàn)用的高高質(zhì)量的的標(biāo)本的的最基本本的要求求。血液液細(xì)

14、胞檢檢驗(yàn)標(biāo)本本的制備備分為采采集和抗抗凝2個(gè)個(gè)步驟。1標(biāo)本本的采集集按采血部部位的不不同，取取得血常常規(guī)檢驗(yàn)驗(yàn)標(biāo)本，最最常用的的途徑是是靜脈采采血和末末梢毛細(xì)細(xì)血管采采血。各各類文獻(xiàn)獻(xiàn)均表明明，靜脈脈血血樣樣是最可可靠的標(biāo)標(biāo)本，手手指血是是末梢毛毛細(xì)血管管血樣中中與靜脈脈血差異異最小且且較為穩(wěn)穩(wěn)定的血血樣。有有研究表表明，與與靜脈血血相比，手手指血的的準(zhǔn)確性性和可重重復(fù)性仍仍然較差差：白細(xì)細(xì)胞計(jì)數(shù)數(shù)明顯高高（+88%）而而血小板板計(jì)數(shù)明明顯低（-9%）。因此，絕絕大多數(shù)數(shù)專家建建議：血血常規(guī)檢檢驗(yàn)特別別是應(yīng)用用血液分分析儀時(shí)時(shí)，應(yīng)使使用靜脈脈血。2標(biāo)本本的抗凝凝用于血常常規(guī)檢驗(yàn)驗(yàn)的血樣樣必須經(jīng)

15、經(jīng)抗凝劑劑抗凝處處理，在在目前的的眾多抗抗凝劑中中，EDDTA鹽鹽（EDDTA-Na22,EDDTA-K2,EDTTA-KK3）是是對(duì)白細(xì)細(xì)胞形態(tài)態(tài)和血小小板影響響相對(duì)較較小的抗抗凝劑，最最適合用用于血常常規(guī)檢驗(yàn)驗(yàn)。除采采血因素素的影響響（生理理性因素素、采血血部位等等）外，多多數(shù)情況況下，血血樣的質(zhì)質(zhì)量取決決于血液液和抗凝凝劑的比比例。血血液比例例過高時(shí)時(shí)，由于于抗凝劑劑相對(duì)不不足，血血漿中出出現(xiàn)微凝凝血塊的的可能性性增加，在在用于血血細(xì)胞分分析儀時(shí)時(shí)，微凝凝血塊可可能阻塞塞儀器，同同時(shí)影響響一些檢檢驗(yàn)指標(biāo)標(biāo)。血液液比例過過低，抗抗凝劑相相對(duì)過剩剩，對(duì)檢檢驗(yàn)指標(biāo)標(biāo)會(huì)造成成嚴(yán)重影影響。血血液經(jīng)

16、EEDTAA抗凝后后，白細(xì)細(xì)胞的形形態(tài)會(huì)發(fā)發(fā)生改變變，這種種改變和和時(shí)間及及EDTTA濃度度有關(guān)。EDTTA的最最佳濃度度（與血血液比）為為1.55mg/ml,如果血血樣少，EEDTAA的濃度度達(dá)到22.5mmg/mml，中中性粒細(xì)細(xì)胞腫脹脹、分葉葉消失，血血小板腫腫脹、崩崩解、產(chǎn)產(chǎn)生正常常血小板板大小的的碎片，這這些改變變都會(huì)使使血常規(guī)規(guī)檢驗(yàn)和和血細(xì)胞胞計(jì)數(shù)得得出錯(cuò)誤誤結(jié)果。這一點(diǎn)點(diǎn)在用自自動(dòng)血細(xì)細(xì)胞分析析儀時(shí)尤尤為重要要。靜脈血和和末梢血血均可經(jīng)經(jīng)抗凝劑劑抗凝成成全血標(biāo)標(biāo)本（標(biāo)標(biāo)本中不不含稀釋釋液，或或?qū)?biāo)本本造成的的稀釋的的影響極極?。?，顯顯而易見見，末梢梢血抗凝凝標(biāo)本要要達(dá)到合合適的血

17、血液和抗抗凝劑的的比例是是非常困困難的。因此，多多數(shù)專家家建議，在在制備全全血比例例是非常常困難的的。因此此，多數(shù)數(shù)專家建建議，在在制備全全血標(biāo)本本時(shí)，應(yīng)應(yīng)使用定定量的含含EDTTA鹽的的真空采采血管采采集靜脈脈血。無論鏡檢檢，或是是使用血血液細(xì)胞胞分析儀儀，由于于絕大多多數(shù)的對(duì)對(duì)標(biāo)本稀稀釋的稀稀釋液中中含有抗抗凝劑，在在一定量量的稀釋釋液中可可直接加加入微量量靜脈血血或末梢梢血液（110-440l）即即可制備備成通常常所說的的預(yù)稀釋釋標(biāo)本。多數(shù)情情況下，預(yù)預(yù)稀釋標(biāo)標(biāo)本的制制備適用用于末梢梢血的血血樣。二標(biāo)本本的稀釋釋血液是由由血細(xì)胞胞和血漿漿兩部分分組成的的紅色粘粘稠混懸懸液。在在進(jìn)行血血細(xì)

18、胞檢檢驗(yàn)計(jì)數(shù)數(shù)時(shí)，直直接用血血液計(jì)數(shù)數(shù)是困難難的，無無論是鏡鏡檢還是是用血細(xì)細(xì)胞分析析儀，血血液均需需合適準(zhǔn)準(zhǔn)確的稀稀釋后才才能進(jìn)行行血細(xì)胞胞的檢驗(yàn)驗(yàn)計(jì)數(shù)?；谘?xì)胞分分析儀的的基本原原理，在在血細(xì)胞胞分析儀儀的設(shè)計(jì)計(jì)應(yīng)用中中，稀釋釋倍數(shù)和和計(jì)數(shù)容容量是最最重要的的設(shè)計(jì)指指標(biāo)之一一。自50年年代初，美美國(guó)庫爾爾特先生生研制了了電阻法法（小孔孔原理）血血細(xì)胞分分析儀以以來，血血細(xì)胞的的稀釋液液為介質(zhì)質(zhì)的流動(dòng)動(dòng)的形式式通過傳傳感器測(cè)測(cè)量計(jì)數(shù)數(shù)（如圖圖-1），血血細(xì)胞通通過傳感感器時(shí)一一定需要要排隊(duì)通通過，否否則可能能就會(huì)造造成重合合損失（如如圖-22）。實(shí)際應(yīng)用用時(shí)，是是將血液液稀釋于于稀釋液液

19、中形成成稀釋標(biāo)標(biāo)本（稀稀釋比為為1：NN），以以流動(dòng)檢檢測(cè)的方方式測(cè)出出一定量量（V）的的稀釋標(biāo)標(biāo)本內(nèi)的的血細(xì)胞胞數(shù)（TT），經(jīng)經(jīng)換算后后得出血血液中的的細(xì)胞濃濃度（LL）：LL-TN/VV。由此可見見，準(zhǔn)確確合理的的稀釋倍倍數(shù)（在在用于儀儀器時(shí)，RRBC、PLTT的稀釋釋倍數(shù)一一般為11：1000000至1：30000；WWBC、HGBB的稀釋釋倍數(shù)一一般為11：2550左右右）和準(zhǔn)準(zhǔn)確、穩(wěn)穩(wěn)定的測(cè)測(cè)量容量量是血細(xì)細(xì)胞檢測(cè)測(cè)的又一一重要基基礎(chǔ)。稀稀釋倍數(shù)數(shù)過低，會(huì)會(huì)形成細(xì)細(xì)胞排隊(duì)隊(duì)通過傳傳感器的的重合缺缺損；稀稀釋倍數(shù)數(shù)過大，則則會(huì)造成成一定測(cè)測(cè)量容量量?jī)?nèi)血細(xì)細(xì)胞的數(shù)數(shù)量過少少，這都都會(huì)嚴(yán)重

20、重影響血血液細(xì)胞胞檢驗(yàn)的的測(cè)量精精度。三標(biāo)本本的儲(chǔ)存存如前文所所述，抗抗凝劑因因時(shí)間和和濃度的的不同，會(huì)會(huì)造成對(duì)對(duì)血細(xì)胞胞形態(tài)的的影響。有研究究表明，用用EDTTA抗凝凝靜脈血血標(biāo)本，在在標(biāo)本收收集后的的5分鐘鐘內(nèi)或330分鐘鐘后，88小時(shí)內(nèi)內(nèi)（室溫溫）檢測(cè)測(cè)，可以以得到最最佳的檢檢測(cè)結(jié)果果。如果果不需要要血小板板和白細(xì)細(xì)胞分類類的準(zhǔn)確確數(shù)據(jù)，則則標(biāo)本可可以在22-8的條件件下存入入至244小時(shí)。預(yù)稀釋標(biāo)標(biāo)本一般般需要在在標(biāo)本制制備后110分鐘鐘內(nèi)予以以測(cè)量；如果稀稀釋液中中添加細(xì)細(xì)胞穩(wěn)定定劑，預(yù)預(yù)稀釋標(biāo)標(biāo)本的存存放時(shí)間間也不可可超過44小時(shí)。總之，影影響血常常規(guī)檢驗(yàn)驗(yàn)結(jié)果的的因素很很多，要要

21、想取得得準(zhǔn)確的的檢驗(yàn)數(shù)數(shù)據(jù)，就就要在實(shí)實(shí)驗(yàn)的每每一個(gè)步步驟中都都嚴(yán)格按按照操作作規(guī)程進(jìn)進(jìn)行。血液標(biāo)本本的采集集及運(yùn)送送是保證證結(jié)果的的重要環(huán)環(huán)節(jié)血液標(biāo)本本的采集集及運(yùn)送送是保證證結(jié)果的的重要環(huán)環(huán)節(jié)，正正確的血血液常規(guī)規(guī)標(biāo)本的的采集、接收及及保存，使使標(biāo)本中中的待測(cè)測(cè)成分不不受影響響，保證證檢測(cè)結(jié)結(jié)果準(zhǔn)確確可靠。范圍適適用于血血液白細(xì)細(xì)胞、紅紅細(xì)胞、血紅蛋蛋白、血血小板、紅細(xì)胞胞比積、紅細(xì)胞胞體積分分布寬度度、平均均血紅蛋蛋白含量量、平均均血紅蛋蛋白濃度度、平均均紅細(xì)胞胞體積、血小板板體積分分布寬度度、血小小板壓積積、白細(xì)細(xì)胞分類類、嗜酸酸細(xì)胞計(jì)計(jì)數(shù)。采血時(shí)凡凡位于體體表的淺淺靜脈均均可作為為采

22、血部部位，通通常采用用肘部靜靜脈，肘肘部靜脈脈不明顯顯時(shí)，可可用手背背靜脈或或內(nèi)踝靜靜脈。幼幼兒可于于頸外靜靜脈采血血。采血血處應(yīng)避避免有皮皮膚紅腫腫、潰瘍瘍等現(xiàn)象象。采血血時(shí)如病病人檢測(cè)測(cè)項(xiàng)目多多，應(yīng)先先采常規(guī)規(guī)血，防防止血小小板發(fā)生生聚集。止血帶帶壓迫時(shí)時(shí)間不能能過長(zhǎng)，最最好不超超過0.5 mmin，以以避免瘀瘀血和血血液濃縮縮（有試試驗(yàn)證明明，壓迫迫時(shí)間過過長(zhǎng)，可可引起纖纖溶活性性增強(qiáng)，血血小板釋釋放及某某些因子子活性增增強(qiáng)，影影響某些些實(shí)驗(yàn)結(jié)結(jié)果）。最好采采用封閉閉式真空空采血器器，既有有利于標(biāo)標(biāo)本的收收集運(yùn)送送和保存存，又便便于防止止血液交交叉感染染。抽血血時(shí)避免免產(chǎn)生大大量泡沫沫，

23、否則則可能導(dǎo)導(dǎo)致溶血血。溶血血標(biāo)本會(huì)會(huì)造成紅紅細(xì)胞計(jì)計(jì)數(shù)降低低，紅細(xì)細(xì)胞比積積降低。血液抽抽出后立立即輕輕輕搖動(dòng)，使使血液和和抗凝劑劑混勻，以以防血液液凝固。血液檢檢查的標(biāo)標(biāo)本量與與抗凝劑劑比例要要合適。血液比比例過高高時(shí)，血血漿中容容易出現(xiàn)現(xiàn)微凝血血塊，可可能阻塞塞血細(xì)胞胞分析儀儀，同時(shí)時(shí)影響一一些檢驗(yàn)驗(yàn)結(jié)果。血液比比例過低低，抗凝凝劑相對(duì)對(duì)過剩，會(huì)會(huì)引起血血細(xì)胞形形態(tài)和體體積的一一些改變變，這些些改變會(huì)會(huì)使血常常規(guī)檢驗(yàn)驗(yàn)得出錯(cuò)錯(cuò)誤結(jié)果果。血液標(biāo)本本的保存存與運(yùn)送送。血常常規(guī)血液液標(biāo)本采采集后應(yīng)應(yīng)立即送送檢，如如不能及及時(shí)送檢檢或分析析，必須須采取保保存措施施，應(yīng)在在48低溫冰冰箱冷藏藏，但

24、低低溫保存存不要超超過4 h，保保存條件件非常重重要，不不適當(dāng)保保存直接接影響實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果果。標(biāo)本本應(yīng)由檢檢驗(yàn)人員員或臨床床醫(yī)護(hù)人人員采集集，住院院病人標(biāo)標(biāo)本應(yīng)有有明確標(biāo)標(biāo)記，與與醫(yī)師申申請(qǐng)單內(nèi)內(nèi)容相符符。標(biāo)本本運(yùn)送要要做到專專人專送送。血涂片的的制備將血標(biāo)本本均勻地地涂抹在在清潔干干燥的載載玻片上上，經(jīng)染染色后在在顯微鏡鏡下檢查查，這是是血細(xì)胞胞形態(tài)學(xué)學(xué)檢查的的基本方方法，臨臨床應(yīng)用用很廣，特特別是對(duì)對(duì)各種血血液病的的形態(tài)學(xué)學(xué)診斷很很有價(jià)值值。但是是，如果果血徐片片制備不不良，染染色不佳佳，常使使血細(xì)胞胞的形態(tài)態(tài)學(xué)鑒別別和診斷斷發(fā)生困困難，甚甚至導(dǎo)致致錯(cuò)誤的的結(jié)論。如血膜膜過厚，細(xì)細(xì)胞重疊疊縮

25、小；血膜太太薄，白白細(xì)胞多多集中于于邊緣。因此，制制備厚薄薄適宜、分布均均勻的血血涂片是是血液學(xué)學(xué)檢驗(yàn)的的基本技技術(shù)之一一。一、載玻玻片的清清潔新載玻片片上常有有游離堿堿質(zhì)，必必須用約約lmoolLL HCCI浸泡泡24hh后，再再用清水水徹底沖沖洗，干干燥備用用。用過過的載玻玻片可放放入含適適量肥皂皂或合成成洗滌劑劑的清水水中煮沸沸20mmin，再再用熱水水將肥皂皂和血膜膜洗凈，用用清水反反復(fù)沖洗洗，干燥燥備用。如急用用載玻片片，可將將其置00、9乙乙醇中浸浸泡lhh，用蒸蒸餾水洗洗凈后，擦擦干或烘烘干備用用。使用用載玻片片時(shí)，只只能手持持玻片邊邊緣，切切勿用手手觸及玻玻片表面面，以保保持玻

26、片片清潔、干燥、中性、無油膩膩。二、制作作血涂片片的標(biāo)本本血涂片既既可由非非抗凝的的靜脈血血和毛細(xì)細(xì)血管血血制備，也也可由EEDTAA抗凝血血制備。EDTTA抗凝凝血中，鈣鈣離子被被螫合后后，能阻阻止血小小板聚集集，推片片時(shí)血小小板均勻勻平鋪，顯顯微鏡下下易于對(duì)對(duì)血小板板進(jìn)行觀觀察評(píng)價(jià)價(jià)。但有有時(shí)可觀觀察到因因EDTTA引起起的紅細(xì)細(xì)胞皺縮縮及白細(xì)細(xì)胞叢集集現(xiàn)象。但隨著著血液分分析儀的的逐步普普及，血血標(biāo)本多多為EDDTA抗抗凝血，除除作全血血細(xì)細(xì)胞胞計(jì)數(shù)及及多參數(shù)數(shù)分析外外，制備備血涂片片也非常常方便，雖雖有上述述弊端，但但顯微鏡鏡下易于于發(fā)現(xiàn)。三、血涂涂片的制制備血涂片的的制備方方法很多多

27、，如手手工推片片法、自自動(dòng)推片片法、載載（蓋）玻玻片壓拉拉法、旋旋轉(zhuǎn)涂片片法、棕棕黃層（bbufffyccoatt）涂片片法及厚厚血膜涂涂片法等等，現(xiàn)介介紹如下下。1、手工工推片法法取血標(biāo)標(biāo)本一滴滴置載玻玻片的一一端，以以邊緣平平滑的推推片一端端，從血血滴前沿沿方向接接觸血液液，使血血液沿推推片散開開，推片片與載玻玻片保持持2530oo的平面面夾角，平平穩(wěn)地將將血向前前推動(dòng)，血血液即在在載玻片片上形成成一薄層層血膜。將制成成的血膜膜在空氣氣中揮動(dòng)動(dòng)，使迅迅速干燥燥，以免免血細(xì)胞胞皺縮。一張良好好的涂片片，要求求厚薄適適宜，頭頭體尾分分明，邊邊緣整齊齊，兩側(cè)側(cè)應(yīng)留有有空隙。玻片的的一端應(yīng)應(yīng)留有貼

28、貼標(biāo)簽的的地方。涂片的的好壞與與血滴大大小、推推片與載載片之間間角度、推片時(shí)時(shí)的速度度有關(guān)。血滴大大、角度度大、速速度快，則則血膜厚厚；反之之則血膜膜薄。血血膜分布布不勻，主主要是推推片邊緣緣不齊、用力不不勻或載載玻片不不清潔所所致。2、載玻玻片壓拉拉法取兩兩張貼有有標(biāo)簽的的載玻片片備用，將將血液滴滴于一張張載玻片片的近中中央處，立立即將另另一載玻玻片于之之貼合，四四角對(duì)齊齊，標(biāo)簽簽一端一一個(gè)，使使貼合后后的玻片片間留下下如標(biāo)簽簽一樣厚厚的間距距。先將將血滴沿沿縱向輕輕壓展開開，再將將兩玻片片橫向均均勻拉開開，得到到兩張血血膜。此此法最適適用于血血細(xì)胞的的活體染染色，預(yù)預(yù)先將染染料滴加加在玻片

29、片上，干干燥后備備用。涂涂制時(shí)先先將血液液與染料料混染一一段時(shí)間間，再按按上述方方法制成成血涂片片，顯微微鏡下檢檢查，如如網(wǎng)織紅紅細(xì)胞的的檢驗(yàn)。3、旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)器涂片片法旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)涂片器器的基本本結(jié)構(gòu)是是：在與與電動(dòng)機(jī)機(jī)轉(zhuǎn)軸垂垂直的方方向裝一一水平轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)盤，正正中夾置置載玻片片。徐制制時(shí)將血血標(biāo)本滴滴加在載載玻片的的中央，開開動(dòng)旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)涂片機(jī)機(jī)，在規(guī)規(guī)定的時(shí)時(shí)間內(nèi)即即可制備備一張良良好的血血涂片。對(duì)該儀儀器的要要求應(yīng)具具有低慣慣性高轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)矩，開開動(dòng)時(shí)能能立即加加速（550000rmmin），關(guān)關(guān)機(jī)時(shí)能能迅速停停止（OO、255s內(nèi)）。使用這這種儀器器涂片，白白細(xì)胞及及紅細(xì)胞胞能均勻勻分布在在玻片上上，且形形態(tài)

30、保持持完好。4、棕黃黃層涂片片法為了了獲得較較多的有有核細(xì)胞胞，使用用離心的的方法，將將EDTTA抗凝凝血作分分層離心心（RCCF22660g，55minn），取取紅細(xì)胞胞層上的的棕黃層層（有核核細(xì)胞和和血小板板集中層層，）作作標(biāo)本，用用手工推推制成涂涂片供檢檢查用。5、厚血血膜涂片片法從指指尖或耳耳垂取血血1滴（約約20uul）于于載玻片片中央，用用推片的的一角將將血由內(nèi)內(nèi)向外旋旋轉(zhuǎn)涂布布，制成成厚薄均均勻、直直徑約11、5ccm的圓圓形血膜膜，自然然干燥后后，滴加加數(shù)滴蒸蒸餾水，使使紅細(xì)胞胞溶解，脫脫去血紅紅蛋白。傾去水水后血膜膜呈灰白白色，干干后染色色鏡檢。厚血膜膜片因取取血量多多，待檢

31、檢成分較較集中，因因此特別別適合于于瘧原蟲蟲、絲蟲蟲的微絲絲蚴等的的檢查。血細(xì)胞常常用的染染色方法法細(xì)胞涂片片，在用用普通光光學(xué)顯微微鏡觀察察之前需需要固定定和染色色。固定定是將細(xì)細(xì)胞蛋白白質(zhì)和多多糖等成成分迅速速交聯(lián)凝凝固，以以保持其其原有結(jié)結(jié)構(gòu)不發(fā)發(fā)生變化化。染色色的目的的是使細(xì)細(xì)胞的主主要結(jié)構(gòu)構(gòu)，如細(xì)細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核核、細(xì)胞胞器等染染上不同同的顏色色，便于于顯微鏡鏡下觀察察。各種種細(xì)胞涂涂片，常常用的染染色方法法有瑞氏氏（Wrrighht）、姬姆薩薩（Giiemssa）、巴氏（PPaPaaniccolaaou）和和蘇木素素一伊紅紅比emmat00Xyllin eossin，HHE）染染色。

32、一、染料料與染色色染料（ddyess）是一一種具有有顏色的的有機(jī)化化合物，最最早用于于織物的的著色。隨著生生物醫(yī)學(xué)學(xué)的不斷斷發(fā)展，顯顯微鏡技技術(shù)的出出現(xiàn)和逐逐步完善善，科學(xué)學(xué)家們用用染料將將生物組組織細(xì)胞胞和病原原體著色色，以利利在顯微微鏡下觀觀察各種種結(jié)構(gòu)，這這種染料料稱為生生物學(xué)染染色劑（bbiollogyy sttainns，BBS），生生物染色色劑的發(fā)發(fā)現(xiàn)和利利用促進(jìn)進(jìn)了醫(yī)學(xué)學(xué)生物學(xué)學(xué)的進(jìn)一一步發(fā)展展。（一）細(xì)細(xì)胞學(xué)的的基本染染料染料可分分為兩大大類，即即天然染染料和人人工合成成染料。生物染染色劑多多屬于后后者。各各種生物物學(xué)染色色劑都具具有產(chǎn)生生顏色和和與被染染組織親親合兩種種性質(zhì)。

33、這兩種種性質(zhì)主主要由兩兩種特殊殊基團(tuán)即即發(fā)色基基團(tuán)（cchroomopphorro）和和助色基基團(tuán)（aauxoochrromee）所產(chǎn)產(chǎn)生。所謂發(fā)色色基團(tuán)，是是染料產(chǎn)產(chǎn)生顏色色標(biāo)志的的未飽和和基團(tuán)。不同的的有機(jī)化化合物可可以吸收收不同波波長(zhǎng)的光光，如吸吸收可見見光區(qū)以以外的光光，這些些物質(zhì)是是無色的的；如吸吸收可見見光區(qū)內(nèi)內(nèi)某些波波長(zhǎng)的光光，這些些物質(zhì)是是有色的的，其肉肉眼可見見的顏色色為被吸吸收光顏顏色的互互補(bǔ)色。一般飽飽和芳香香族化合合物很少少有可見見光區(qū)的的吸收帶帶，因而而無顏色色可見。相反，如如苯的衍衍生物則則具有此此吸收帶帶而呈現(xiàn)現(xiàn)顏色。這些化化合物顯顯示的吸吸收帶與與不穩(wěn)定定價(jià)鍵（

34、如如鍵）有有關(guān)。對(duì)對(duì)苯二酚酚是無色色的，但但氧化失失去兩個(gè)個(gè)氫原子子時(shí)變?yōu)闉榫唿S色色的對(duì)醌醌式結(jié)構(gòu)構(gòu)，這種種使有機(jī)機(jī)化合物物在可見見光區(qū)內(nèi)內(nèi)產(chǎn)生光光吸收的的基團(tuán)稱稱為發(fā)色色基團(tuán)，常常見的發(fā)發(fā)色基團(tuán)團(tuán)有烯基基、炔基基、羰基基、偶氮氮基、亞亞硝基等等。助色色基團(tuán)是是一種能能使化合合物發(fā)生生電離作作用的輔輔助原子子團(tuán)，能能與發(fā)色色基團(tuán)構(gòu)構(gòu)成更完完整的共共軛體系系，使分分子激發(fā)發(fā)能進(jìn)一一步降低低，染料料的色澤澤加深并并使其與與被染組組織更具具親合力力，染料料的助色色基團(tuán)是是使染料料成為鹽鹽類的部部分，助助色基團(tuán)團(tuán)的性質(zhì)質(zhì)決定染染料在水水溶液中中的荷電電性，常常見的助助色基團(tuán)團(tuán)有羥基基、竣基基、氨基基等

35、。根根據(jù)助色色基團(tuán)的的性質(zhì)，將將生物學(xué)學(xué)染色劑劑分成堿堿性染料料和酸性性染料兩兩大類，即即能接受受質(zhì)子者者為堿性性染料，能能釋放質(zhì)質(zhì)子者為為酸性染染料。1、堿性性染料（bbasiic ddyess）屬苯苯胺類藍(lán)藍(lán)色染料料，如噻噻嗪（tthiaazinns）系系列，包包括亞甲甲藍(lán)（mmethhyleene bluue）、天青AA（azzureeA）、天青BB（azzuree B）、天青CC（azzuree C）和和硫堇（tthiooninne），它它們的區(qū)區(qū)別在于于結(jié)合甲甲基的數(shù)數(shù)量。以以天青BB為例，它它含有兩兩個(gè)發(fā)色色基團(tuán)，一一個(gè)次氨氨基（N一）和和一個(gè)鄰鄰醌式基基團(tuán)。助助色基團(tuán)團(tuán)為氨基基（

36、一NNH2），結(jié)結(jié)合一個(gè)個(gè)質(zhì)子后后荷正電電，亦稱稱陽離子子染料。因此，這這些染料料與細(xì)胞胞內(nèi)的酸酸性成分分，如DDNA、RNAA、特異異的中性性顆?；|(zhì)、某某些胞漿漿蛋白等等結(jié)合，主主要是染染細(xì)胞核核的染料料。還有有一個(gè)很很重要染染核染料料是蘇木木（heemattoxyylinne），屬屬媒染料料（moordaant dyees），需需媒染劑劑（如AAl3+）參與與才能使使細(xì)胞核核著色。2、酸性性染料（aacidd dyyes）細(xì)細(xì)胞學(xué)較較重要的的酸性染染料有兩兩大類，即即熒烷一一氧雜蒽蒽染料（hhoraanexanntheene dyees）和和偶氮染染料（aazoddyess）。前前者是

37、一一類以氧氧雜蒽和和醌式苯苯環(huán)作為為發(fā)色基基團(tuán)，以以羧基（COOOH）為為助色基基團(tuán)的染染料，因因?yàn)轸然芴峁┕┮粋€(gè)質(zhì)質(zhì)子，亦亦稱“陰離子子染料”。這類類染料的的代表是是伊紅YY（eoosinn Y，俗俗稱黃色色伊紅）和和伊紅BB（eoosinn B，俗俗稱藍(lán)色色伊紅）。這兩種種染料特特別適于于與噻嗪嗪類染料料（亞甲甲藍(lán)，天天青B等等）作對(duì)對(duì)比染色色，形成成紅藍(lán)分分明、色色澤艷麗麗的結(jié)果果，因?yàn)闉橐良t具具較強(qiáng)的的擴(kuò)散吸吸附染色色特性。酸性偶偶氮類染染料有橙橙黃G（oorannge G）、剛果紅紅（coongoo reed）、亮藏花花精（bbrillliaant crooceiin）等等。由于

38、于酸性染染料是陰陰離子型型染料，因因此它們們與細(xì)胞胞中的堿堿性成分分結(jié)合并并染色，如如血紅蛋蛋白、嗜嗜酸性顆顆粒成分分及胞漿漿中的一一些蛋白白質(zhì)。除上述酸酸性和堿堿性染料料外，有有的還將將在同一一條件下下既具陰陰離子型型又有陽陽離子型型的染色色劑稱復(fù)復(fù)合染料料，如瑞瑞氏染色色劑、姬姬姆薩染染色劑等等。（二）染染色原理理細(xì)胞著色色的原理理至今雖雖無滿意意的解釋釋，但多多數(shù)學(xué)者者認(rèn)為是是物理作作用和化化學(xué)作用用綜合的的結(jié)果。1、物理理作用包括毛細(xì)細(xì)管現(xiàn)象象和滲透透、吸收收、吸附附作用等等。通過過這些因因素，染染料的色色素粒子子就能順順利地進(jìn)進(jìn)入組織織、細(xì)胞胞并與其其牢固結(jié)結(jié)合而著著色。瑞氏染色色法

39、Wrfeeht和和Gieemsaa都于119022年報(bào)告告了各自自的新的的血液學(xué)學(xué)染色劑劑，其主主要特點(diǎn)點(diǎn)是在制制備多色色性亞甲甲藍(lán)（主主要指天天青B）方方面做了了改進(jìn)，使使血細(xì)胞胞和瘧原原蟲著色色較好，操操作簡(jiǎn)便便。上述染色色法均是是含伊紅紅和亞甲甲基藍(lán)衍衍生物的的復(fù)合染染料。在在臨床檢檢驗(yàn)工作作中，瑞瑞氏染色色法常用用于血液液、其他他體液、分泌物物和排泄泄物涂片片中各種種細(xì)胞的的染色，有有利于在在顯微鏡鏡下觀察察細(xì)胞形形態(tài)及對(duì)對(duì)細(xì)胞進(jìn)進(jìn)行分類類檢查?！救旧怼咳鹗先旧謨上嘞噙M(jìn)行，第第一相是是酸性染染料伊紅紅與細(xì)胞胞中的堿堿性物質(zhì)質(zhì)如血紅紅蛋白、嗜酸性性顆粒等等結(jié)合；堿性染染料天青青

40、B與細(xì)細(xì)胞中的的酸性物物質(zhì)如核核染色質(zhì)質(zhì)（chhromattin）、特異中中性顆粒粒、血小小板及富富含核蛋蛋白的胞胞質(zhì)結(jié)合合。第二二相是天天青B和和伊紅在在適宜條條件下形形成紫色色的天青青B一伊伊紅復(fù)合合物（aazurre BBeoosinn coompllex），這這種復(fù)合合物是形形成RoomannowsskyGieemsaa效應(yīng)的的基礎(chǔ)。RomaanowwskyyGiiemssa效應(yīng)應(yīng)包括：白細(xì)胞胞核染色色質(zhì)染成成紫色，瘧瘧原蟲的的染色質(zhì)質(zhì)染成紅紅色；中性粒粒細(xì)胞的的顆粒及及血小板板顆粒區(qū)區(qū)染成紫紫色；產(chǎn)生本本效應(yīng)必必須有兩兩種染料料參與，一一種是天天青B，另另一種是是伊紅。Witttek

41、iind（119855）指出出，天青青B與DDNA分分子中的的磷酸基基結(jié)合，而而伊紅既既與DNNA分子子中的陽陽離子部部位結(jié)合合，又與與天青BB結(jié)合，與與天青BB的結(jié)合合力來源源于電子子供一受受體的電電子轉(zhuǎn)移移力，天天青B的的甲氨基基（NNHCHHs）與與伊紅分分子中的的叛基（COOOH）間間形成氫氫鍵。因因此，天天青B是是噻嗪類類染料中中能與伊伊紅形成成復(fù)合物物的最佳佳選擇，因因?yàn)閾碛杏兴膫€(gè)甲甲基側(cè)鏈鏈的亞甲甲藍(lán)不能能以氫鍵鍵與伊紅紅結(jié)合。甲醇除作作為染料料的溶劑劑，能將將瑞氏染染料解離離成帶正正電荷的的天青BB和帶負(fù)負(fù)電荷伊伊紅外，因因其具有有脫水力力，還可可將細(xì)胞胞固定為為一定形形態(tài)，并

42、并使蛋白白沉淀為為顆粒狀狀、網(wǎng)狀狀結(jié)構(gòu)，增增加細(xì)胞胞與染料料的接觸觸表面，增增強(qiáng)染色色效果。細(xì)胞中的的各種有有機(jī)物質(zhì)質(zhì)（特別別是蛋白白質(zhì)）、染料等等對(duì)環(huán)境境的州值值非常敏敏感。如如環(huán)境偏偏酸，氫氫離子增增多，降降低對(duì)堿堿性染料料的親和和力；增增強(qiáng)伊紅紅著色，出出現(xiàn)異常常紅染；相反，則則可出現(xiàn)現(xiàn)異常藍(lán)藍(lán)染。最最佳環(huán)境境應(yīng)維持持在PHH值6 466、8。因此，必必須使用用緩沖溶溶液。【試劑】1、Wrrighht染液液瑞氏染染粉0.1g；甲醇660.00ml。將瑞氏染染料放入入清潔干干燥乳缽缽里，加加少量甲甲醇，充充分研磨磨使染料料溶解，將將已溶解解的染料料倒入棕棕色試劑劑瓶中，未未溶解的的再加少少

43、量甲醇醇研磨，直直至染料料溶完，甲甲醇全部部用完為為止?；蚧?qū)⑷鹗鲜先痉酆秃图状贾敝苯又糜谟谧厣科恐校蛹铀椴ＡЯнm量，立立即用力力振蕩ssminn，置室室溫中，連連續(xù)3天天，每天天振搖223次次，促其其溶解。配好后后放室溫溫，一周周后即可可使用。新配染染液效果果差，放放置時(shí)間間越長(zhǎng)天天青B越越多，染染色效果果越好。久置應(yīng)應(yīng)密封，以以免甲醇醇揮發(fā)或或氧化成成甲酸，甲甲醇需用用AR級(jí)級(jí)。上述述量染液液中也可可加中性性甘油33ml，除除可防止止染色中中甲醇過過早揮發(fā)發(fā)外，并并可使細(xì)細(xì)胞著色色清晰。1、磷酸酸鹽緩沖沖液（PPBS，ppH6.466.8）磷酸二氫氫鉀（無無水）00.3gg；磷酸氫二二

44、鈉（無無水）00.2gg；蒸餾水加加至10000mml。配好后用用磷酸鹽鹽溶液校校正pHH，塞緊緊瓶口備備用?！救旧椒椒ā浚?）用用蠟筆在在血膜兩兩頭劃線線，然后后將血片片平放在在染色架架上；（2）加加瑞氏染染液數(shù)滴滴，覆蓋蓋整個(gè)血血膜，固固定細(xì)胞胞約lmmin；（3）滴滴加等量量或稍多多的緩沖沖液，與與染液充充分混勻勻，染色色5110miin；（4）用用清水沖沖去染液液，待干干后鏡檢檢?！救旧Y(jié)結(jié)果】在在正常情情況下，血血膜外觀觀染成淡淡紫紅色色。顯微微鏡下，紅紅細(xì)胞呈呈粉紅色色，在厚厚薄均勻勻處，略略有碟狀狀感；白白細(xì)胞漿漿中顆粒粒清楚，并并顯示出出各種細(xì)細(xì)胞特有有的色彩彩。細(xì)胞胞核染紫

45、紫紅色，核核染色質(zhì)質(zhì)結(jié)構(gòu)清清楚。染色偏酸酸，則紅紅細(xì)胞和和嗜酸性性粒細(xì)胞胞顆粒偏偏紅，白白細(xì)胞核核呈淡藍(lán)藍(lán)色或不不著色。染色偏偏堿，則則所有細(xì)細(xì)胞呈灰灰藍(lán)色，顆顆粒深暗暗。嗜酸酸性顆粒粒可染成成暗褐色色，甚至至紫黑或或藍(lán)色。中性顆顆粒偏粗粗、偏堿堿，染成成紫黑色色，血膜膜厚的部部位呈綠綠色。【注意事事項(xiàng)】1、未干干透血膜膜的不能能立即染染色，否否則染色色時(shí)易脫脫落。2、染色色時(shí)間，與與染液濃濃度、室室溫及細(xì)細(xì)胞多少少有關(guān)。梁液淡淡、室溫溫低、細(xì)細(xì)胞多，則則染色時(shí)時(shí)間長(zhǎng)；反之則則可減少少染色時(shí)時(shí)間。染染液濃淡淡及染色色時(shí)間長(zhǎng)長(zhǎng)短要摸摸索，特特別是更更換染液液時(shí)更應(yīng)應(yīng)如此。3、染液液不能過過少，以

46、以防蒸發(fā)發(fā)沉淀，一一旦染液液沉淀在在血膜上上，則不不易沖掉掉。4、沖洗洗時(shí)不能能先倒掉掉染液，應(yīng)應(yīng)以流水水沖去，以以防染料料沉著在在血膜上上。沖洗洗染料時(shí)時(shí)間不能能過長(zhǎng)，以以防脫色色。沖洗洗完的血血片應(yīng)立立放于架架上，防防止剩余余水分浸浸泡脫色色。5、如血血膜上有有染料顆顆粒沉積積，可用用甲醇溶溶解，但但需立即即用水沖沖掉甲醇醇，以免免脫色。6、染色色過談，可可以復(fù)染染，復(fù)架架時(shí)應(yīng)先先加緩沖沖液，創(chuàng)創(chuàng)造良好好染色環(huán)環(huán)境，而而后加染染液，或或加染液液與緩沖沖液的混混合液，不不可先加加染液。7、染色色過深可可用水沖沖洗或浸浸泡一定定時(shí)間，也也可用甲甲醇脫色色。8、染色色偏酸或或偏堿時(shí)時(shí)，均應(yīng)應(yīng)更換

47、緩緩沖液再再重染。白細(xì)胞計(jì)計(jì)數(shù)的誤誤差因素素分析技術(shù)誤誤差：器器材、標(biāo)標(biāo)本要求求、加蓋蓋玻片影影響、沖沖池影響響、計(jì)數(shù)數(shù)原則（記記上不計(jì)計(jì)下，記記左不記記右）、計(jì)數(shù)室室內(nèi)細(xì)胞胞分布要要均勻、有核紅紅細(xì)胞影影響。固有誤誤差：主主要指記記數(shù)域誤誤差。還還包括計(jì)計(jì)數(shù)池誤誤差和吸吸管誤差差。生理狀狀態(tài)影響響：運(yùn)動(dòng)動(dòng)、勞動(dòng)動(dòng)、冷水水浴、酷酷熱、嚴(yán)嚴(yán)寒等出出現(xiàn)一過過性白細(xì)細(xì)胞增高高。1.技術(shù)術(shù)誤差,可通過過規(guī)范、熟練的的操作,儀器的的校正、試劑的的標(biāo)準(zhǔn)化化和操作作人員責(zé)責(zé)任心的的增強(qiáng)而而減小或或消除(器材,標(biāo)本要要求,加加蓋玻片片影響,充池影影響,計(jì)計(jì)數(shù)原則則,細(xì)胞胞分布要要均勻,有核紅紅細(xì)胞影影響);2

48、.固有有誤差,主要指指計(jì)數(shù)域域誤差,即由于于每次充充池后血血細(xì)胞在在計(jì)數(shù)室室內(nèi)分布布不可能能完全相相同所造造成的誤誤差,屬屬于偶然然誤差.3.生生理狀態(tài)態(tài)影響:運(yùn)動(dòng),勞動(dòng)冷冷熱水浴浴,酷熱熱,嚴(yán)寒寒等常出出現(xiàn)一過過性白細(xì)細(xì)胞增高高;一日日之內(nèi)白白細(xì)胞數(shù)數(shù)最高與與最低可可差1倍倍;吸煙煙者比非非吸煙者者高300%.血細(xì)胞分分析儀的的最新發(fā)發(fā)展血細(xì)胞分分析儀的的發(fā)展已已有500年歷史史了，國(guó)國(guó)內(nèi)醫(yī)院院應(yīng)用血血細(xì)胞分分析儀的的情況也也越來越越普及。近年來來由于綜綜合性高高科技的的飛速發(fā)發(fā)展，血血細(xì)胞分分析儀上上也不斷斷采用了了最新的的電子、光學(xué)、化學(xué)和和計(jì)算機(jī)機(jī)技術(shù)，從從而不斷斷滿足臨臨床工作作對(duì)血

49、液液細(xì)胞分分析的要要求。提提供更加加方便適適用、更更多功能能和參數(shù)數(shù)、更加加準(zhǔn)確、更快速速度的血血細(xì)胞分分析儀，已已經(jīng)是各各血細(xì)胞胞分析儀儀生產(chǎn)廠廠商的目目標(biāo)。一血細(xì)胞胞分析儀儀近年來來的發(fā)展展變化1.血常常規(guī)檢驗(yàn)驗(yàn)多參數(shù)數(shù)化近年來許許多血細(xì)細(xì)胞分析析儀器都都在增加加新的參參數(shù)以滿滿足臨床床在診斷斷和鑒別別診斷方方面的需需求。最最初的血血細(xì)胞計(jì)計(jì)數(shù)儀(Celll CCounnterr)僅僅僅能夠計(jì)計(jì)數(shù)紅細(xì)細(xì)胞(RRBC)和白細(xì)細(xì)胞(WWBC)，后來來又有了了血紅蛋蛋白(HHBG)、血小小板(PPLT)、紅細(xì)細(xì)胞壓積積(HCCT)、平均紅紅細(xì)胞體體積(MMCV)等幾個(gè)個(gè)參數(shù)。而發(fā)展展成為血血細(xì)胞

50、分分析儀(Hemmatoologgy AAnallyzeer)后后，又增增加了許許多分析析和計(jì)算算參數(shù)。最早加加入到并并得到公公認(rèn)的參參數(shù)是紅紅細(xì)胞體體積分布布寬度(RDWW)，目目前該參參數(shù)已經(jīng)經(jīng)成為許許多型號(hào)號(hào)血細(xì)胞胞分析儀儀的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)參數(shù)，在在各種貧貧血的診診斷和治治療中起起著重要要作用，而而該參數(shù)數(shù)是很難難應(yīng)用人人工方法法測(cè)定的的。隨后后有關(guān)平平均血小小板體積積(MPPV)、血小板板體積分分布寬度度(PDDW)、血小板板壓積(PCTT)、大大血小板板比率、白細(xì)胞胞三分群群、白細(xì)細(xì)胞五分分類、血血紅蛋白白濃度分分布寬度度、異常常淋巴細(xì)細(xì)胞提示示、幼稚稚細(xì)胞提提示等各各種參數(shù)數(shù)和功能能也不斷

51、斷的添加加到一些些品牌的的儀器上上，目前前有的儀儀器甚至至可以提提供400500種測(cè)量量或計(jì)算算參數(shù)。但很多多的新參參數(shù)目前前仍不能能應(yīng)用于于臨床，僅僅限定在在實(shí)驗(yàn)室室中供研研究使用用。在美美國(guó)凡進(jìn)進(jìn)入臨床床應(yīng)用的的新的實(shí)實(shí)驗(yàn)參數(shù)數(shù)，需要要經(jīng)過FFDA(美國(guó)食食品和藥藥品管理理局)的的批準(zhǔn)認(rèn)認(rèn)可，其其批準(zhǔn)原原則是經(jīng)經(jīng)過多年年實(shí)驗(yàn)認(rèn)認(rèn)證，該該參數(shù)應(yīng)應(yīng)該是對(duì)對(duì)臨床診診斷有用用的、安安全的和和高效率率的。這這個(gè)認(rèn)證證是非常常嚴(yán)格的的，而在在我國(guó)目目前還缺缺乏這樣樣嚴(yán)格的的認(rèn)證和和批準(zhǔn)體體系。2.多功功能合成成擴(kuò)展血細(xì)胞分分析儀已已經(jīng)不僅僅僅局限限在進(jìn)行行常規(guī)血血細(xì)胞分分析，近近年來它它增加了了許多擴(kuò)

52、擴(kuò)展的功功能。例例如將網(wǎng)網(wǎng)織紅細(xì)細(xì)胞(RRET)的計(jì)數(shù)數(shù)和分析析功能加加入其中中，例如如Bayyer ADVVIA 1200型;SSysmmex SE-90000/SSE-995000/XEE-21100型型;Cooultter MAXXM/SSTKSS/HmmX/GGEN.S型;Abbbottt CEELL-DYNN32000/335000R/440000型等。一些儀儀器另外外增加了了幼稚細(xì)細(xì)胞分析析和有核核紅細(xì)胞胞分析功功能，甚甚至對(duì)血血液細(xì)胞胞中的某某些寄生生蟲進(jìn)行行提示，例例如Syysmeex SSF-330000/SEE-90000/SE-95000/XXE-221000;Baaye

53、rr ADDVIAA 1220;AAbboott CELLL-DDYN335000/40000;Couulteer HHmX/LH7750/GENN.S Sysstemm 2型型等。更更有一些些儀器把把流式細(xì)細(xì)胞分析析儀的某某些功能能合并到到血細(xì)胞胞分析儀儀上，這這樣在進(jìn)進(jìn)行常規(guī)規(guī)血細(xì)胞胞分析時(shí)時(shí)就可以以得到某某些淋巴巴細(xì)胞亞亞群的分分析結(jié)果果，例如如在Cooultter STKKS上可可以同時(shí)時(shí)測(cè)定CCD4和和CD88，在AAbboott CELLL-DDYN 40000上可可以測(cè)定定CD33、CDD4、CCD8和和CD661，使使得一機(jī)機(jī)兩用。3.檢測(cè)測(cè)速度的的提高許多儀器器由于增增加了自

54、自動(dòng)進(jìn)樣樣系統(tǒng)，測(cè)測(cè)定速度度加快，一一般可以以達(dá)到每每小時(shí)8801100個(gè)個(gè)樣品，在在不包含含網(wǎng)織細(xì)細(xì)胞檢測(cè)測(cè)的情況況下，CCoullterr GEEN.SS Syysteem 22型每小小時(shí)測(cè)定定1055個(gè)標(biāo)本本;Baayerr ADDVIAA 1220每小小時(shí)1220個(gè)標(biāo)標(biāo)本;而而Syssmexx KXX-21100可可以達(dá)到到每小時(shí)時(shí)1500個(gè)標(biāo)本本。這些些儀器都都可以在在自動(dòng)成成批進(jìn)樣樣的同時(shí)時(shí)，隨時(shí)時(shí)插入急急診檢驗(yàn)驗(yàn)的標(biāo)本本。4.方法法的改進(jìn)進(jìn)和進(jìn)展展為了做到到更加準(zhǔn)準(zhǔn)確的計(jì)計(jì)數(shù)和分分析、更更多的測(cè)測(cè)定和分分析參數(shù)數(shù)，血細(xì)細(xì)胞測(cè)定定和分析析的方法法已經(jīng)不不局限于于某一種種單一的的方法

55、，如如傳統(tǒng)的的電阻抗抗法或后后來應(yīng)用用的激光光散射法法，還加加了多項(xiàng)項(xiàng)技術(shù)的的相互聯(lián)聯(lián)合應(yīng)用用。例如如在白細(xì)細(xì)胞分類類上，各各廠家分分別采用用了不同同的方法法，Cooutller采采用了VVCS技技術(shù)，即即體積測(cè)測(cè)量、射射頻高頻頻傳導(dǎo)性性和激光光散射技技術(shù);SSysmmex則則采用了了直流電電阻抗(DC)與射頻頻(RFF)和特特殊細(xì)胞胞染色技技術(shù);BBayeer公司司的ADDVIAA1200則采用用激光散散射和細(xì)細(xì)胞化學(xué)學(xué)(過氧氧化酶和和嗜堿細(xì)細(xì)胞染色色)技術(shù)術(shù);而AAbboott是是采用多多角度偏偏振光散散射(MMAPSSS)技技術(shù)對(duì)白白細(xì)胞進(jìn)進(jìn)行分析析。除了了在白細(xì)細(xì)胞分類類上采用用多種處

56、處理方法法外，在在紅細(xì)胞胞和血小小板分析析上也采采用了光光學(xué)和電電阻法結(jié)結(jié)合的處處理方法法，以期期得到更更正確的的結(jié)果;對(duì)紅細(xì)細(xì)胞體積積進(jìn)行三三維空間間分析(3D)，體積積大小和和色素含含量的分分析;對(duì)對(duì)血紅蛋蛋白測(cè)定定不僅使使用比色色法，同同時(shí)還使使用激光光散射法法進(jìn)行單單個(gè)紅細(xì)細(xì)胞血紅紅蛋白量量的分析析，以盡盡量減少少高WBBC、乳乳糜血、高膽紅紅素等對(duì)對(duì)HBGG比色的的影響。由于方方法的改改進(jìn)，這這些儀器器已經(jīng)不不僅僅采采用23種試試劑來完完成測(cè)定定工作，常常常是66種以上上的試劑劑聯(lián)合使使用，才才能夠適適應(yīng)方法法的要求求，例如如Bayyer ADVVIA1120型型需要多多達(dá)111種試

57、劑劑，而這這些試劑劑由于技技術(shù)含量量較高，專專用性強(qiáng)強(qiáng)，各廠廠家產(chǎn)品品之間不不能混用用，生產(chǎn)產(chǎn)技術(shù)要要求高，因因此國(guó)內(nèi)內(nèi)還沒有有替代產(chǎn)產(chǎn)品出現(xiàn)現(xiàn)。5.應(yīng)用用的方便便性對(duì)于操作作者來說說，儀器器最大的的優(yōu)越性性還應(yīng)該該體現(xiàn)在在操作的的方便性性和靈活活性上。許多廠廠家都考考慮到了了這一點(diǎn)點(diǎn)。例如如可以使使用靜脈脈或末稍稍血液;可以在在標(biāo)本量量很大的的情況下下選擇全全自動(dòng)進(jìn)進(jìn)樣系統(tǒng)統(tǒng)，也可可使用單單獨(dú)閉蓋蓋或開蓋蓋取樣系系統(tǒng)(閉閉蓋全自自動(dòng)進(jìn)樣樣或單獨(dú)獨(dú)進(jìn)樣對(duì)對(duì)操作者者是非常常安全的的操作方方式);對(duì)項(xiàng)目目可作適適當(dāng)?shù)慕M組合，以以適應(yīng)臨臨床及患患者的需需求，例例如操作作者可以以選擇CCBC方方式(僅

58、僅含細(xì)胞胞計(jì)數(shù)、不分類類)、CCBC+DIFFF方式式(計(jì)數(shù)數(shù)加分類類)、RRET方方式，可可將它們們?nèi)我鈫螁芜x或組組合;條條碼的應(yīng)應(yīng)用給標(biāo)標(biāo)本編號(hào)號(hào)提供了了方便，儀儀器通過過自動(dòng)掃掃描條碼碼，來鑒鑒別標(biāo)本本的來源源、需要要檢測(cè)的的項(xiàng)目和和區(qū)分患患者，最最后根據(jù)據(jù)條碼提提供的信信息將結(jié)結(jié)果返回回到臨床床或病人人檔案中中，為檢檢驗(yàn)數(shù)據(jù)據(jù)的電子子化提供供了極大大方便，也也減少了了編號(hào)帶帶來的差差錯(cuò)。上上述的許許多功能能已經(jīng)在在許多新新型的高高級(jí)五分分類式血血細(xì)胞分分析儀中中得到實(shí)實(shí)現(xiàn)。二血細(xì)胞胞分析儀儀產(chǎn)品的的系列化化和流水水線化1.產(chǎn)品品的系列列化各有實(shí)力力的公司司不斷開開發(fā)系列列化產(chǎn)品品以滿足

59、足不同類類型用戶戶的需要要。例如如Couulteer公司司的ACCT系列列儀器，有有最簡(jiǎn)單單的ACCT 88型只有有8個(gè)參參數(shù)到112參數(shù)數(shù)，到也也有188參數(shù)三三分類的的ACTT DIIFF，亦亦有5分分類的AACT 5-DDIFFF，甚至至還有可可增加動(dòng)動(dòng)物血液液分析的的型號(hào)。Syssmexx的多種種系列化化儀器如如SE系系列、KK系列、F系列列等在我我國(guó)也很很常見。此外AAbboott、ABXX、日本本光電、Sweelabb等公司司都有各各種系列列化儀器器不斷推推出，以以滿足各各種需求求。2.流水水線化在全自動(dòng)動(dòng)血液分分析儀器器的基礎(chǔ)礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)現(xiàn)全自動(dòng)動(dòng)流水線線化，是是血液分分析的又又一大

60、飛飛躍，但但這需要要雄厚的的資金支支持。所所謂流水水線化即即是將血血液常規(guī)規(guī)分析中中的所有有步驟和和項(xiàng)目進(jìn)進(jìn)行系統(tǒng)統(tǒng)性聯(lián)合合，將血血液常規(guī)規(guī)分析、網(wǎng)織紅紅細(xì)胞分分析、血血片的制制備(選選擇、涂涂片、編編號(hào)、染染色、干干燥)等等系列步步驟通過過儀器自自動(dòng)完成成。這種種流水線線可以將將具有不不同功能能的單個(gè)個(gè)設(shè)備用用自動(dòng)傳傳送系統(tǒng)統(tǒng)連接在在一起，例例如Syysmeex的HHST型型小型流流水線血血液分析析儀(圖圖1)將將電腦控控制終端端、SEE-90000血血細(xì)胞分分析儀、R-330000網(wǎng)織細(xì)細(xì)胞分析析儀、SSP-1100血血片涂片片機(jī)連結(jié)結(jié)在一起起，使血血液標(biāo)本本從計(jì)數(shù)數(shù)開始自自動(dòng)按程程序運(yùn)行