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1、實驗一免疫學(xué)應(yīng)用天然免疫實驗一免疫學(xué)應(yīng)用天然免疫實驗一免疫學(xué)應(yīng)用天然免疫實驗一免疫學(xué)應(yīng)用天然免疫實驗一免疫學(xué)應(yīng)用天然免疫實驗一免疫學(xué)實驗內(nèi)容一、討論:(一)免疫學(xué)應(yīng)用(預(yù)防、診斷、治療)(二)固有免疫的組成、功能二、示教(一)常見各類疫苗(二)小吞噬、大吞噬(三)血腦屏障三、操作(一)人中性粒細(xì)胞噬菌實驗(二)鼠尾靜脈注射及血腦屏障實驗內(nèi)容一、討論:(一) 免疫學(xué)應(yīng)用免疫預(yù)防:如各類疫苗免疫診斷:如已知抗體鑒別未知細(xì)菌免疫治療:破傷風(fēng)抗毒素(一) 免疫學(xué)應(yīng)用免疫預(yù)防:如各類疫苗1. 固有免疫(innate immunity) 非特異性免疫/先天性免疫/天然免疫概念:機體在長期種系進(jìn)化過程中形成
2、的天然防御功能,機體的第一道防線。該系統(tǒng)與生俱來,發(fā)生非特異性抗感染效應(yīng)并清除體內(nèi)損傷、衰老或畸變的細(xì)胞參與適應(yīng)性免疫應(yīng)答INNATE IMMUNE SYSTEM(二) 固有免疫的組成、功能、檢查方法1. 固有免疫(innate immunity)INNATE固有免疫組織屏障體表屏障:物理、化學(xué)、生物屏障內(nèi)部屏障:血腦屏障、血胎屏障。中性粒細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞、 DC、NK、 NKT、 T、B-1B細(xì)胞、肥大細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等。固有免疫分子:補體、細(xì)胞因子、抗菌肽、 溶菌酶、乙型溶素等。固有免疫細(xì)胞:2. 固有免疫系統(tǒng)的組成INNATE IMMUNE SYSTEM固有免疫組織屏障
3、體表屏障:物理、化學(xué)、生物屏障內(nèi)部屏障:血腦物理屏障:皮膚黏膜、腸蠕動、呼吸道上皮纖毛運動、尿液沖洗?;瘜W(xué)屏障:汗腺分泌的乳酸、皮脂腺分泌的不飽和脂肪酸、胃酸、呼吸道和消化黏液中的溶菌酶、抗菌肽、補體等。生物學(xué)屏障:皮膚黏膜寄生的正常菌群,如大腸桿菌可分泌細(xì)菌素抑制厭氧菌和革蘭氏陽性菌定居和繁殖。體表屏障物理屏障:皮膚黏膜、腸蠕動、呼吸道上皮纖毛運動、尿液沖洗。體內(nèi)部屏障:血腦脊液屏障軟腦膜、脈絡(luò)叢INNATE IMMUNE SYSTEM內(nèi)部屏障:血腦脊液屏障軟腦膜、脈絡(luò)叢INNATE IMMU血胎屏障:絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 + 基蛻膜INNATE IMMUNE SYSTEM血胎屏障:絨毛膜滋養(yǎng)層
4、細(xì)胞 + 基蛻膜INNATE IMMU固有免疫分子補體細(xì)胞因子急性期蛋白抗微生物肽溶菌酶乙型溶素固有免疫分子補體固有免疫細(xì)胞吞噬細(xì)胞(phagocyte)中性粒細(xì)胞(neutrophil)單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞樹突狀細(xì)胞特殊淋巴細(xì)胞自然殺傷細(xì)胞(natural killer, NK)NK T細(xì)胞B-1 B細(xì)胞其它固有免疫細(xì)胞肥大細(xì)胞(mast cell)嗜堿性粒細(xì)胞(basophil)嗜酸性粒細(xì)胞(eosinophil)固有免疫細(xì)胞吞噬細(xì)胞(phagocyte)中性粒細(xì)胞(多形核白細(xì)胞)Bone marrowHSCNeutrophils in blood circulationtissuesinf
5、lammation中性粒細(xì)胞(多形核白細(xì)胞)Bone marrowHSCNeu抗感染抗腫瘤維持自身耐受參與特異性免疫: 參與特異性免疫的啟動 影響特異性免疫的強度 影響特異性免疫的類型3. 固有免疫的功能抗感染3. 固有免疫的功能二、示教(一)常見各類疫苗(二)小吞噬、大吞噬(三)血腦屏障二、示教(一)常見各類疫苗中性粒細(xì)胞葡萄球菌中性粒細(xì)胞葡萄球菌雞紅細(xì)胞巨噬細(xì)胞雞紅細(xì)胞巨噬細(xì)胞血腦屏障血腦屏障三、操作(一)人中性粒細(xì)胞噬菌實驗(二)鼠尾靜脈注射及血腦屏障(見示教三、操作(一)人中性粒細(xì)胞噬菌實驗1. 人中性粒細(xì)胞噬菌實驗取肝素抗凝劑0.02ml(25單位/ml)入凹玻片。無名指采血0.02 ml 至有肝素的凹玻片中,混勻。加入一滴葡萄球菌菌液,混勻。凹玻片置鋪有紗布的有蓋容器內(nèi)(此容器先放37溫箱中預(yù)溫) 37溫箱孵育20分鐘。 制作血涂片,室溫干燥。均勻滴加3滴吉姆薩染液A,染色1分鐘。均勻滴加6滴吉姆薩染液B,染色3分鐘。洗滌后室溫干燥。鏡下觀察,計算吞噬百分率 。實驗步驟1. 人中性粒細(xì)胞噬菌實驗取肝素抗凝劑0.02ml(25單位血推片方法血推片方法血涂片質(zhì)量評價頭體尾 分明厚 薄 均 勻長 度 適 中血涂片質(zhì)量評價頭體尾 分明均勻滴加3滴吉姆薩染液A,染色1分鐘。均勻滴加6滴吉姆薩染液B,染色3分鐘。染色方法均勻滴加3滴吉姆薩染液A,染
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