食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)之副溶血性弧菌檢驗(yàn)課件

一種重要的食源性致病菌主要與海產(chǎn)品消費(fèi)有關(guān)我國沿海地區(qū)細(xì)菌性食源性疾病暴發(fā)最主要的致病因子國外海產(chǎn)品副溶菌限量美國FDA規(guī)定軟體貝類總體副溶菌密度<104MPN/g；日本規(guī)定生食貝類與魚片總體副溶菌密度<100CFU/g

副溶血性弧菌（Vibrio

parahaemolyticus）一種重要的食源性致病菌副溶血性弧菌（Vibrioparah1國外檢驗(yàn)方法美國FDA方法－BAM

網(wǎng)絡(luò)版第9章弧菌2004

第8版1995/1998加拿大

MFHPB-15海產(chǎn)品和貝類副溶血性弧菌的檢驗(yàn),1997MFLP-57海產(chǎn)品和貝類副溶血性弧菌的計(jì)數(shù),1996日本

食品衛(wèi)生檢查指針微生物編,2004ISO標(biāo)準(zhǔn)

8914:1990（E）微生物學(xué)：副溶血性弧菌檢驗(yàn)的總體指南NMKL

食品中致病菌的檢測和計(jì)數(shù),1997CCFRA

副溶血性弧菌檢驗(yàn)17.1:1995國外檢驗(yàn)方法美國FDA方法－BAM2以科學(xué)技術(shù)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)為依據(jù)，經(jīng)科學(xué)研究制定與國際方法接軌修訂法同時(shí)體現(xiàn)定性、定量分析流程標(biāo)準(zhǔn)的修訂原則標(biāo)準(zhǔn)的修訂原則3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)研究實(shí)驗(yàn)室內(nèi)研究4MPN計(jì)數(shù)與涂布平板計(jì)數(shù)的對(duì)比

MPN計(jì)數(shù)與涂布平板計(jì)數(shù)的對(duì)比5培養(yǎng)基上可疑菌落的準(zhǔn)確性培養(yǎng)基上可疑菌落的準(zhǔn)確性6染菌試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)研究

染菌試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)研究7染菌試驗(yàn)的合作研究染菌試驗(yàn)的合作研究8合作比對(duì)研究合作比對(duì)研究9樣品制備增菌（定性/定量）分離純培養(yǎng)初步鑒定確定鑒定報(bào)告檢驗(yàn)方法文本要點(diǎn)樣品制備檢驗(yàn)方法文本要點(diǎn)108~18hFDA:16~18h增菌時(shí)間8~18h增菌時(shí)間11

TCBS平板科瑪嘉弧菌顯色平板圓的、半透明的、表面光滑的粉紫色菌落，直徑2mm～3mm圓的、半透明的、表面光滑的綠色菌落，有粘性，直徑2mm～3mmTCBS平板科瑪嘉弧菌顯色平板圓的、12TSA3個(gè)或以上純培養(yǎng)TSA純培養(yǎng)13使用MPN表首先，如果最高稀釋度及其相鄰較低稀釋度的全部管均為陰性，剔除最高稀釋度。只要這種情形存在，并且余下4個(gè)稀釋度，繼續(xù)剔除這些稀釋度。其次，如果只余下3個(gè)稀釋度，采用這3個(gè)稀釋度，如A所示。使用MPN表首先，如果最高稀釋度及其相鄰較低稀釋度的全部管均14使用MPN表如果還剩下3個(gè)以上的稀釋度，那么找到全部管均為陽性的最高稀釋度。此處存在3種情形。第1種情形，全部管均為陽性的稀釋度在余下的3個(gè)最高稀釋度中，采用這3個(gè)稀釋度。示例B中，首先剔除最高稀釋度，由于全部管均為陽性的稀釋度在余下的3個(gè)最高稀釋度中，因此使用這3個(gè)稀釋度。示例C中，全部管均為陽性的稀釋度在余下的3個(gè)最高稀釋度中。使用MPN表如果還剩下3個(gè)以上的稀釋度，那么找到全部管均為陽15使用MPN表第2種情形，全部管均為陽性的稀釋度不在余下的3個(gè)最高稀釋度中。那么，選擇靠近全部管均為陽性的稀釋度的2個(gè)更高的稀釋度，并將更高稀釋度的陽性管數(shù)加到第3個(gè)更高稀釋度中，示例D中。全部管均為陽性的稀釋度為1g，選擇0.1g和0.01g，形成第3個(gè)稀釋度0.001g的有陽性管的更高稀釋度只要一個(gè)。使用MPN表第2種情形，全部管均為陽性的稀釋度不在余下的3個(gè)16使用MPN表第3種情形，沒有全部管均為陽性的稀釋度。那么，選擇最低的2個(gè)稀釋度，將余下更高稀釋度的陽性管數(shù)加到第3低的稀釋度中。示例E中，沒有全部管均為陽性的稀釋度，最低的2個(gè)稀釋度為10g和1g，將0.1g、0.01g和0.001g的陽性管數(shù)相加，形成第3個(gè)稀釋度0.1g。使用MPN表第3種情形，沒有全部管均為陽性的稀釋度。那么，選17使用MPN表如果選擇的3個(gè)稀釋度不在表中，如有可能，重做試驗(yàn)。如果仍然需要這個(gè)MPN值，使用3個(gè)最高稀釋度。示例F中，使用了3個(gè)最高稀釋度。

使用MPN表如果選擇的3個(gè)稀釋度不在表中，如有可能，重做試驗(yàn)18使用MPN表如果這些稀釋度仍不在表中，那么使用有陽性管的最高稀釋度，

MPN/g=(1/m)*2.303*log10(全部管樣品克數(shù)之和/陰性管樣品克數(shù)之和)

其中，m表示具有陽性管的稀釋度中每管的樣品量。使用MPN表如果這些稀釋度仍不在表中，那么使用有陽性管的最高19一種重要的食源性致病菌主要與海產(chǎn)品消費(fèi)有關(guān)我國沿海地區(qū)細(xì)菌性食源性疾病暴發(fā)最主要的致病因子國外海產(chǎn)品副溶菌限量美國FDA規(guī)定軟體貝類總體副溶菌密度<104MPN/g；日本規(guī)定生食貝類與魚片總體副溶菌密度<100CFU/g

副溶血性弧菌（Vibrio

parahaemolyticus）一種重要的食源性致病菌副溶血性弧菌（Vibrioparah20國外檢驗(yàn)方法美國FDA方法－BAM

網(wǎng)絡(luò)版第9章弧菌2004

第8版1995/1998加拿大

MFHPB-15海產(chǎn)品和貝類副溶血性弧菌的檢驗(yàn),1997MFLP-57海產(chǎn)品和貝類副溶血性弧菌的計(jì)數(shù),1996日本

食品衛(wèi)生檢查指針微生物編,2004ISO標(biāo)準(zhǔn)

8914:1990（E）微生物學(xué)：副溶血性弧菌檢驗(yàn)的總體指南NMKL

食品中致病菌的檢測和計(jì)數(shù),1997CCFRA

副溶血性弧菌檢驗(yàn)17.1:1995國外檢驗(yàn)方法美國FDA方法－BAM21以科學(xué)技術(shù)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)為依據(jù)，經(jīng)科學(xué)研究制定與國際方法接軌修訂法同時(shí)體現(xiàn)定性、定量分析流程標(biāo)準(zhǔn)的修訂原則標(biāo)準(zhǔn)的修訂原則22實(shí)驗(yàn)室內(nèi)研究實(shí)驗(yàn)室內(nèi)研究23MPN計(jì)數(shù)與涂布平板計(jì)數(shù)的對(duì)比

MPN計(jì)數(shù)與涂布平板計(jì)數(shù)的對(duì)比24培養(yǎng)基上可疑菌落的準(zhǔn)確性培養(yǎng)基上可疑菌落的準(zhǔn)確性25染菌試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)研究

染菌試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)研究26染菌試驗(yàn)的合作研究染菌試驗(yàn)的合作研究27合作比對(duì)研究合作比對(duì)研究28樣品制備增菌（定性/定量）分離純培養(yǎng)初步鑒定確定鑒定報(bào)告檢驗(yàn)方法文本要點(diǎn)樣品制備檢驗(yàn)方法文本要點(diǎn)298~18hFDA:16~18h增菌時(shí)間8~18h增菌時(shí)間30

TCBS平板科瑪嘉弧菌顯色平板圓的、半透明的、表面光滑的粉紫色菌落，直徑2mm～3mm圓的、半透明的、表面光滑的綠色菌落，有粘性，直徑2mm～3mmTCBS平板科瑪嘉弧菌顯色平板圓的、31TSA3個(gè)或以上純培養(yǎng)TSA純培養(yǎng)32使用MPN表首先，如果最高稀釋度及其相鄰較低稀釋度的全部管均為陰性，剔除最高稀釋度。只要這種情形存在，并且余下4個(gè)稀釋度，繼續(xù)剔除這些稀釋度。其次，如果只余下3個(gè)稀釋度，采用這3個(gè)稀釋度，如A所示。使用MPN表首先，如果最高稀釋度及其相鄰較低稀釋度的全部管均33使用MPN表如果還剩下3個(gè)以上的稀釋度，那么找到全部管均為陽性的最高稀釋度。此處存在3種情形。第1種情形，全部管均為陽性的稀釋度在余下的3個(gè)最高稀釋度中，采用這3個(gè)稀釋度。示例B中，首先剔除最高稀釋度，由于全部管均為陽性的稀釋度在余下的3個(gè)最高稀釋度中，因此使用這3個(gè)稀釋度。示例C中，全部管均為陽性的稀釋度在余下的3個(gè)最高稀釋度中。使用MPN表如果還剩下3個(gè)以上的稀釋度，那么找到全部管均為陽34使用MPN表第2種情形，全部管均為陽性的稀釋度不在余下的3個(gè)最高稀釋度中。那么，選擇靠近全部管均為陽性的稀釋度的2個(gè)更高的稀釋度，并將更高稀釋度的陽性管數(shù)加到第3個(gè)更高稀釋度中，示例D中。全部管均為陽性的稀釋度為1g，選擇0.1g和0.01g，形成第3個(gè)稀釋度0.001g的有陽性管的更高稀釋度只要一個(gè)。使用MPN表第2種情形，全部管均為陽性的稀釋度不在余下的3個(gè)35使用MPN表第3種情形，沒有全部管均為陽性的稀釋度。那么，選擇最低的2個(gè)稀釋度，將余下更高稀釋度的陽性管數(shù)加到第3低的稀釋度中。示例E中，沒有全部管均為陽性的稀釋度，最低的2個(gè)稀釋度為10g和1g，將0.1g、0.01g和0.001g的陽性管數(shù)相加，形成第3個(gè)稀釋度0.1g。使用MPN表第3種情形，沒有全部管均為陽性的稀釋度。那么，選36使用MPN表如果選擇的3個(gè)稀釋度不在表中，如有可能，重做試驗(yàn)。如果仍然需要這個(gè)MPN值，使用3個(gè)最高稀釋度。