標準解讀
《GA/T 1965-2021 法庭科學(xué) 硅藻rbcL基因特異片段檢測 毛細管電泳熒光檢測法》是一項針對法庭科學(xué)領(lǐng)域中硅藻鑒定的技術(shù)標準。該標準主要介紹了如何通過毛細管電泳熒光檢測技術(shù)來分析硅藻的rbcL基因特異性片段,從而為司法鑒定提供科學(xué)依據(jù)。
rbcL基因是指編碼核糖體大亞基蛋白的葉綠體基因,在植物分類學(xué)上具有較高的保守性和特異性,是區(qū)分不同種類硅藻的重要分子標記之一。本標準詳細規(guī)定了從樣本準備到結(jié)果分析的全過程,包括但不限于DNA提取、PCR擴增條件設(shè)置、毛細管電泳參數(shù)選擇以及數(shù)據(jù)解讀等關(guān)鍵步驟。
在實際操作過程中,首先需要從待測樣品中有效提取出高質(zhì)量的DNA;然后利用特定引物對目標區(qū)域進行PCR擴增;接著將擴增產(chǎn)物通過毛細管電泳分離,并采用熒光染料標記以提高檢測靈敏度;最后根據(jù)電泳圖譜特征識別并定量目標序列。
此外,該標準還強調(diào)了實驗室內(nèi)質(zhì)量控制的重要性,要求定期校準儀器設(shè)備、使用陽性對照和陰性對照樣品驗證實驗體系的有效性及重復(fù)性,確保檢測結(jié)果準確可靠。同時,對于可能出現(xiàn)的各種干擾因素也給出了相應(yīng)的處理建議,旨在最大程度減少誤差來源,保證最終結(jié)論的科學(xué)性和公正性。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2021-10-14 頒布
- 2022-05-01 實施
文檔簡介
ICS13310
CCSA.92
中華人民共和國公共安全行業(yè)標準
GA/T1965—2021
法庭科學(xué)硅藻rbcL基因特異片段檢測
毛細管電泳熒光檢測法
Forensicscience—MethodsfordetectionofrbcLgeneofdiatom—
Capillaryelectrophoresisandfluorescencemethod
2021-10-14發(fā)布2022-05-01實施
中華人民共和國公安部發(fā)布
GA/T1965—2021
前言
本文件按照標準化工作導(dǎo)則第部分標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定
GB/T1.1—2020《1:》
起草
。
請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任
。。
本文件由全國刑事技術(shù)標準化技術(shù)委員會提出并歸口
(SAC/TC179)。
本文件起草單位廣州市刑事科學(xué)技術(shù)研究所中山大學(xué)廣東省公安廳
:、、。
本文件主要起草人劉超徐曲毅劉宏趙建肖成李越汪冠三劉長暉楊幸怡徐際超
:、、、、、、、、、。
Ⅰ
GA/T1965—2021
法庭科學(xué)硅藻rbcL基因特異片段檢測
毛細管電泳熒光檢測法
1范圍
本文件規(guī)定了法醫(yī)物證檢驗水中尸體組織中硅藻的材料準備操作方法聚合酶鏈式反應(yīng)
、、(Poly-
擴增硅藻葉綠體核酮糖二磷酸羧化酶大亞基基因特異片段和實時熒
merasechainReaction,PCR)-1,5-
光定量檢驗結(jié)果判定及注意事項
。
本文件適用于法庭科學(xué)檢驗中對硅藻rbc基因片段的檢驗
L。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文
。,
件僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于
,;,()
本文件
。
法庭科學(xué)實驗室建設(shè)規(guī)范
GA/T382—2014DNA
3術(shù)語和定義
下列術(shù)語和定義適用于本文件
。
31
.
rbcL基因rbcLgene
葉綠體核酮糖二磷酸羧化酶大亞基基因
-1,5-。
4原理
在溺死過程中肺泡毛細血管屏障損傷導(dǎo)致水中的浮游生物如硅藻隨溺液進入血液循環(huán)從而
,-(),
到達人體內(nèi)各器官檢測這些浮游生物的存在可用于診斷溺死溺死相關(guān)硅藻舟形藻菱形藻小環(huán)
。,。(、、
藻變異直鏈藻針桿藻骨條藻等的葉綠體中含有rbc基因該基因片段與人類及共生菌沒有同源
、、、)L,
性在水中尸體的體循環(huán)器官肝臟或腎臟中檢測到該基因的特異片段可證實溺死相關(guān)硅藻脫氧核
。(),
糖核酸的存在
(DeoxyribonucleicAcid,DNA)。
5儀器設(shè)備
包括
:
可調(diào)微量移液器
a)(2μL、10μL、100μL、1000μL);
高速臺式冷凍離心機可控溫至且離心速度可達以上
b),4℃12000r/min;
擴增儀
c)PCR
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