文獻解讀ALK重排的肺癌患者對一代、二代ALK抑制劑耐藥的分子機制

.../MolecularMechanismsofResistancetoFirst-andSecond-GenerationALKInhibitorsinALK-RearrangedLungCancerCancerDiscovJuly2016IF:19.783背景1.ALK重排是非小細胞肺癌的一種典型的分子亞型。2.雖然使用一代ALK抑制劑克唑替尼后,大部分患者病情得到了控制,但是基本上都會在用藥1-2年后復發(fā),有接近1/3的患者克唑替尼耐藥是由靶基因的改變造成的。3.近年來,一些二代藥物在治療ALK陽性非小細胞肺癌中發(fā)揮了非常明顯的作用,而且二代藥物對一些沒有ALK耐藥突變或者融合基因擴增的患者仍然有效,這表明一些患者的克唑替尼耐藥是由于ALK活性抑制不夠充分導致的。4.盡管二代藥物更為有效,但是患者仍然會復發(fā),而目前對二代藥物耐藥的研究還停留在體外實驗,案例報道,和小規(guī)模臨床試驗階段,需要對耐藥機制有更深入的研究。摘要目前針對ALK陽性的非小細胞肺癌患者,主流的治療方式為首先使用一代ALK抑制劑克唑替尼,在疾病進展后繼續(xù)使用二代藥物,如色瑞替尼和Alectinib。即使患者不存在導致克唑替尼耐藥的ALK突變,二代藥物同樣也會有效。因此作者對持續(xù)使用ALK抑制劑進行治療的ALK陽性患者進行了多次組織活檢,并發(fā)現(xiàn),每一個ALK抑制劑都對應一個獨特的ALK耐藥突變頻譜,并且在使用了二代藥物以后,ALKG1202R突變頻率明顯升高。為了研究如何克服二代藥物耐藥,在一系列克唑替尼耐藥的患者來源的細胞系中,作者研究了三代藥物Lorlatinib的作用活性,并且發(fā)現(xiàn),攜帶ALK耐藥突變的細胞系對Lorlatinib敏感,而不攜帶ALK突變的細胞系則對Lorlatinib耐藥。意義:1.ALK基因繼發(fā)突變是導致二代ALK抑制劑耐藥的主要機制,并預示著對三代藥物Lorlatinib敏感。2.本文強調(diào)了反復活檢的重要性以及在靶向治療疾病進展過程中,特別是在使用二代ALK抑制劑以后,進行基因分型的重要性。ALK耐藥突變在二代藥物耐藥患者中高頻出現(xiàn)1.在克唑替尼耐藥的樣本中,L1196M和G1269A突變出現(xiàn)頻率最高,但是只有7%和4%,除此之外,還檢出C1156Y<2%>,G1202R<2%>,I1171T<2%>,S1206Y<2%>,和E1210K<2%>突變,以及ALK擴增。2.在超過一半<13/24;54%>的色瑞替尼耐藥的樣本中檢出了ALK突變,其中有17%的樣本檢出了兩個以上ALK突變。最高頻檢出的突變?yōu)镚1202R<21%>和F1174C/L〔16.7%,所有檢出突變都已被證實或在本文中證實與耐藥相關。3.在Alectinib耐藥的樣本中,檢出頻率最高的是G1202R突變〔29%,其次還檢出I1171T/S<12%>,V1180L<6%>,以及L1196M<6%>。ALK耐藥突變在二代藥物耐藥患者中高頻出現(xiàn)與一代藥物耐藥相比,在二代藥物耐藥的樣本中ALK突變更為多見<P=0.0002>,而且兩者有不同的突變頻譜。而且G1202R是二代藥物耐藥后最常出現(xiàn)的突變類型。ALK抑制劑連續(xù)用藥導致耐藥突變組合出現(xiàn)——Acasereport1.E1210K突變可在能是早期克唑替尼耐藥克隆中出現(xiàn),接下來的Brigatinib治療使這一突變富集并產(chǎn)生了S1206C突變。2.手術可能將存在S1206C的克隆徹底清除,而E1210K突變可能仍存在于微小病灶中。3.在Brigatinib耐藥后的第二次切除樣本中檢測到了E1210K突變和新出現(xiàn)的突變D1203N。結論：在ALK抑制劑連續(xù)用藥的ALK陽性患者中,存在ALK耐藥突變組合出現(xiàn)的情況。ALK突變是導致ALK抑制劑耐藥的主要原因——其他樣本情況1.雖然在個別患者中可能存在旁路信號被激活的情況,但是ALK突變?nèi)匀皇菍е翧LK抑制劑耐藥的主要原因。2.雖然在耐藥樣本中TP53突變檢出頻率也較高,但無法判斷這些突變是否在用藥之前就已經(jīng)存在。EMT過程與ALK抑制劑耐藥有關——Acasereport一位ALK陽性患者依次使用了克唑替尼、Alectinib和色瑞替尼,在色瑞替尼耐藥后的活檢中,發(fā)現(xiàn)了一個惡性梭形細胞瘤,組織染色顯示發(fā)生了上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化〔EMT過程。結論：EMT過程可能是該患者色瑞替尼耐藥的主要原因。EMT過程與ALK抑制劑耐藥有關——其他樣本情況有42%〔5/12的樣本檢測到了間充質(zhì)形態(tài),有趣的是,在這五個樣本中,有3個同時檢測到了ALK耐藥突變。作者認為,在ALK抑制劑持續(xù)治療過程中,EMT過程可能被激活,成為導致耐藥的一個因素,但這并不是唯一因素。Lorlatinib對導致二代藥物耐藥的ALK突變敏感1.在Ba/F3細胞系中,Lorlatinib是唯一一個能夠抑制所有存在單個突變的ALK蛋白磷酸化的藥物。2.克唑替尼、色瑞替尼、Alectinib以及Brigatinib對存在突變組合〔D1203N+E1210K和F1174C+D1203N的ALK蛋白均無活性,而Lorlatinib仍保持了良好的活性。1.在色瑞替尼耐藥的、ALK重排NSCLC患者來源的細胞系中,Lorlatinib對存在ALK突變的細胞系〔MGH051-2C和MGH084-1D表現(xiàn)出了明顯的生長抑制作用。2.對于不存在ALK突變的細胞系〔MGH049-1A和MGH075-2E生長抑制作用不明顯。1.如果在二代藥物耐藥的樣本中存在ALK耐藥突變,這預示著腫瘤仍然是ALK依賴的,使用泛ALK抑制劑Lorlatinib可能仍然有效。2.如果在二代藥物耐藥的樣本中未檢出ALK耐藥突變,那說明腫瘤脫離了ALK依賴,使用Lorlatinib可能無效?？偨Y1.使用ALK抑制劑不同,ALK耐藥突變的突變頻率和頻譜也不同,并且隨著連續(xù)用藥