課時(shí)考點(diǎn)4 3 生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用

課時(shí)考點(diǎn)43生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用

||三年高考真題演練|

一、選擇題

1.（2015?江蘇卷，11）下列關(guān)于固定化醐和固定化細(xì)胞的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.固定化酶的主要目的是實(shí)現(xiàn)酶的重復(fù)利用

B.溶解氧交換受阻是固定化酶應(yīng)用的重要限制因素

C.固定化細(xì)胞用于生產(chǎn)能分泌到細(xì)胞外的產(chǎn)物

D.凝膠與被包埋細(xì)胞之間不是通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合

2.（2015?江蘇卷，7）下列關(guān)于酶的敘述，正確的是（）

A.發(fā)燒時(shí)，食欲減退是因?yàn)橥僖旱矸勖甘チ嘶钚?/p>

B.口服多酶片中的胰蛋白酶可在小腸中發(fā)揮作用

C.用果膠酶澄清果汁時(shí)，溫度越低澄清速度越快

D.洗衣時(shí)，加少許白醋能增強(qiáng)加酶洗衣粉中酶的活性

3.（2015?江蘇卷，20）下圖為制備人工種子部分流程示意圖，下列敘述正確的是（）

誘導(dǎo)胚狀體海藻酸鈉溶液3溶液無(wú)菌水N洗

A.胚狀體是外植體在培養(yǎng)基上脫分化形成的一團(tuán)愈傷組織

B.該過(guò)程以海藻酸鈉作為營(yíng)養(yǎng)成分，以CaCh溶液作為凝固劑

C.可在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖，為胚狀體提供碳源

D.包埋胚狀體的凝膠珠能夠隔絕空氣，有利于人工種子的儲(chǔ)藏

4.（2015?江蘇卷，25）（多選）圖1、2分別為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中部分操作

步驟示意圖，下列敘述正確的是（）

鳥血細(xì)胞液

圖1

DNA濃41；溶液

圖2

A.圖1、2中加入蒸儲(chǔ)水稀釋的目的相同

B.圖1中完成過(guò)濾之后保留濾液

C.圖2中完成過(guò)濾之后棄去濾液

D.在圖1雞血細(xì)胞液中加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì)

5.（2013?高考江蘇卷，T4）某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)，操作錯(cuò)誤的是

（）

A.加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨

B.用蛋白酶純化過(guò)濾后的研磨液中的DNA

C.加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌

D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱

6.（2013?高考江蘇卷，T6）下列有關(guān)固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述，正確的是（）

A.可用包埋法制備固定化酵母細(xì)胞

B.反應(yīng)產(chǎn)物對(duì)固定化醐的活性沒(méi)有影響

C.葡萄糖異構(gòu)酶固定前后專一性不同

D.固定化細(xì)胞可以催化各種反應(yīng)底物的一系列反應(yīng)

7.（2014?高考江蘇卷，T18）下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述，正確的是（）

A.高溫易使酶失活，因此冷水洗滌去污效果應(yīng)該比溫水好

B.洗衣粉中表面活性劑對(duì)堿性蛋白酶活性有一定的促進(jìn)作用

C.在pH低于7.0的自來(lái)水中，堿性蛋白酶依然能起作用

D.洗衣粉中酶主要是通過(guò)快速分解溶在水里的污漬發(fā)揮作用

8.（2014?高考江蘇卷，T16）下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述，錯(cuò)誤的是

（）

A.酵母和菜花均可作為提取DNA的材料

B.DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸儲(chǔ)水

C.向雞血細(xì)胞液中加蒸微水?dāng)嚢?，可?jiàn)玻璃棒上有白色絮狀物

I）.DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍(lán)

二、非選擇題

9.（2015?山東卷，35）乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，具有重要應(yīng)用價(jià)

值。乳糖酶的制備及固定化步驟如下：

（1）篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí)，宜用作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。培養(yǎng)基中瓊

脂的作用是。從功能上講，這種培養(yǎng)基屬于

（2）培養(yǎng)微生物L(fēng)前，宜采用方法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌。

(3)純化后的乳糖酶可用電泳法檢測(cè)其分子量大小。在相同條件下，帶電荷相同的蛋白

質(zhì)電泳速度越快，說(shuō)明其分子量越。

(4)乳糖酶宜采用化學(xué)結(jié)合法(共價(jià)鍵結(jié)合法)進(jìn)行固定化，可通過(guò)檢測(cè)固定化乳糖酶的

一確定其應(yīng)用價(jià)值。除化學(xué)結(jié)合法外，的的固定化方法還包括、、

離子吸附法及交聯(lián)法等。

10.(2015?海南卷，30)生產(chǎn)果汁時(shí)，用果膠酶處理果泥可提高果汁的出汁量?；卮鹣?/p>

列相關(guān)問(wèn)題：

(1)某同學(xué)用三種不同的果膠酶進(jìn)行三組實(shí)驗(yàn)，各組實(shí)驗(yàn)除酶的來(lái)源不同外，其他條件

都相同，測(cè)定各組的出汁量，據(jù)此計(jì)算各組果膠酶的活性的平均值并進(jìn)行比較。這一實(shí)驗(yàn)的

目的是。

(2)現(xiàn)有一種新分離出來(lái)的果膠酶，為探究其最適溫度，某同學(xué)設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)：取試

管16支，分別加入等量的果泥、果膠酶、緩沖液，混勻，平均分為4組，分別置于0℃、

5°C、10°C、40"C下保溫相同時(shí)間，然后，測(cè)定各試管中的出汁量并計(jì)算各組出汁量平均

值。該實(shí)驗(yàn)溫度設(shè)置的不足之處有一.和一

(3)某同學(xué)取5組試管(A?E)分別加入等量的同種果泥，在A、B、C、D4個(gè)實(shí)驗(yàn)組的試

管中分別加入等量的緩沖液和不同量的同種果膠酶，然后，補(bǔ)充蒸儲(chǔ)水使4組試管內(nèi)液體體

積相同；E組加入蒸儲(chǔ)水使試管中液體體積與實(shí)驗(yàn)組相同。將5組試管置于適宜溫度下保溫

一定時(shí)間后，測(cè)定各組的出汁量。通過(guò)A?D組實(shí)驗(yàn)可比較不同實(shí)驗(yàn)組出汁量的差異。本實(shí)

驗(yàn)中，若要檢測(cè)加入酶的量等于0而其他條件均與實(shí)驗(yàn)組相同時(shí)的出汁量，E組設(shè)計(jì)

—(填"能''或“不能”)達(dá)至U目的，其原因是

11.(2014?高考江蘇卷，T30)為了獲得B-胡蘿卜素產(chǎn)品，某小組開展了產(chǎn)胡蘿卜

素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是;為了減少滅菌后器皿被污染，滅

菌前應(yīng)該________o

(2)為了篩選出酵母菌，培養(yǎng)基中添加了青霉素，其目的是

(3)下圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是。(填序

號(hào))

①安全閥、放氣閥、壓力表②放氣閥、安全閥、壓力表

③安全閥、放氣閥、溫度表④放氣閥、安全閥、溫度表

(4)為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線，結(jié)果其中一塊平板

的各劃線區(qū)均未見(jiàn)菌生長(zhǎng)，最可能的原因是

⑸為增加胡蘿卜素提取量，在研磨酵母細(xì)胞時(shí)，添加石英砂的目的是

研磨時(shí)________(填“需要”或“不需要”)添加CaCOs,理由是

12.(2014?高考江蘇卷，T29)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物，先用植物外植體獲得愈傷

組織，然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過(guò)程稱為_______。

35

30一細(xì)胞「一重

25?pH

?威糖,

G20

E一

)之

8

10

時(shí)回d

(2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如上圖所示。細(xì)胞干重在

12d后下降的原因有

培養(yǎng)液中蔗糖的作用是_、__?

(3)多倍體愈傷組織細(xì)胞中產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞

經(jīng)________處理，會(huì)產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測(cè)愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目，壓片前常用

纖維素酶和_______酶解離愈傷組織。若愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)誘導(dǎo)處理后，觀察到染色體數(shù)

為8n的細(xì)胞，合理的解釋是、。

(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物，生產(chǎn)中采用植物細(xì)胞的固定化技術(shù)，其原理與酵母

細(xì)胞固定化類似。下列說(shuō)法正確的有________(填序號(hào))o

①選取旺盛生長(zhǎng)的愈傷組織細(xì)胞包埋

②必須在光照條件下培養(yǎng)

③培養(yǎng)過(guò)程中需通空氣

④固定化后植物細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)變慢

13.(2013?高考山東卷，T34)胡蘿卜素是一種常用的食用色素，可分別從胡蘿卜或產(chǎn)

胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得，流程如下：

薛母由R群母曲R曲體向心

的飾選一的培養(yǎng)一裳解一沉淀、

萃取f過(guò)境一濃給一胡歲卜索

胡夢(mèng)卜一粉碎一十燥/的鑒定

(1)篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌R時(shí)，可選用或平板劃線法接種。采用平板劃線

法接種時(shí)需先灼燒接種環(huán)，其目的是

(2)培養(yǎng)酵母菌R時(shí)，培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長(zhǎng)提供

和O

(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí)，干燥過(guò)程應(yīng)控制好溫度和以防止胡蘿卜素的

分解；萃取過(guò)程中宜采用方式加熱以防止溫度過(guò)高；萃取液濃縮前需進(jìn)行過(guò)濾，其

目的是。

(4)紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素。鑒定過(guò)程中需用胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品作為

||兩年模擬試題精練||

1.(2015?湖南懷化第一次模擬)胡蘿卜素可以預(yù)防白內(nèi)障、有助于保護(hù)眼睛晶體的纖

維部分，還可以促進(jìn)眼內(nèi)感光色素的生成，加強(qiáng)視力的形成；還可以預(yù)防夜盲癥，加強(qiáng)眼睛

變色的功能。請(qǐng)根據(jù)其提取過(guò)程及胡蘿卜素的性質(zhì)，回答下列問(wèn)題。

(1)胡蘿卜素是________色結(jié)晶。從胡蘿卜中提取胡蘿卜素，常用作為溶劑。

(2)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用萃取法。在胡蘿卜顆粒的加熱干燥過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格控

制好和時(shí)間控制在一定范圍，原因是

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

(3)萃取過(guò)程中宜采用方式加熱；萃取液濃縮前需進(jìn)行

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

(4)玫瑰精油的提取方法是法；檸檬芳香油的制備通常用法。

2.(2015?河北唐山第三次模擬)根據(jù)相關(guān)知識(shí)，回答胡蘿卜素提取和腐乳制作方面的

問(wèn)題：

(1)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí)，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和，以提高萃

取效率；水蒸氣蒸儲(chǔ)法(填適合或不適合)胡蘿卜素的提取，原因是

鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時(shí)，通常可采用法，并以樣品

作為對(duì)照。

(2)許多微生物參與了豆腐的發(fā)酵，傳統(tǒng)的制作過(guò)程中，豆腐塊上生長(zhǎng)的微生物來(lái)自空

氣中,其產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)水解為氨基酸和;其產(chǎn)生的脂

肪酶能將豆腐中的脂肪水解為和_。加鹽腌制的目的是

3.(2015?河南濮陽(yáng)第二次模擬)某校生物興趣小組設(shè)計(jì)了有關(guān)胡蘿卜的一系列實(shí)驗(yàn),

大致流程如下:

獲褥

請(qǐng)回答：

(1)配制①過(guò)程的培養(yǎng)基分裝后要進(jìn)行

其中生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量比值應(yīng)_______,以促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)。

(2)接種前，要對(duì)胡蘿卜切塊進(jìn)行。若在培養(yǎng)幾天后，發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)

基上長(zhǎng)出有光澤的黏液狀菌落，這屬于污染。

(3)圖1為從胡蘿卜中提取胡蘿卜素的裝置，常用的方法是法，其效率主要取

決于o

圖1圖2

(4)裝置③的作用是。胡蘿卜在加入裝置④前，一般要進(jìn)行粉碎、

一處理。處理時(shí)應(yīng)注意,否則會(huì)導(dǎo)致胡蘿卜素分解。一般情況下，

提取效率與顆粒含水量成比。

(5)采用裝置⑤的目的是。

(6)圖2為胡蘿卜素的紙層析結(jié)果示意圖，圖中B胡蘿卜素是。就實(shí)

驗(yàn)?zāi)康亩?，該紙層析鑒定法與“葉綠體中色素的提取和分離”實(shí)驗(yàn)中的層析法不同點(diǎn)是

4.(2015?江西景德鎮(zhèn)第二次質(zhì)檢)某年我國(guó)某地由于柑橘大實(shí)蠅的危害，橘農(nóng)遭受到

了很大的損失，當(dāng)?shù)卣氡M一切辦法幫助橘農(nóng)盡量減少損失。

(1)有人想提取橘皮精油獲取利潤(rùn)，一般提取橘皮精油的方法是法，用這種方

法提取橘皮精油的主要步驟是：石灰水浸泡、漂洗、、、靜置、。

(2)橘皮精油的提取之所以不采取水蒸氣蒸儲(chǔ)法，是因?yàn)樗姓魞?chǔ)會(huì)導(dǎo)致原料

和有效成分等問(wèn)題。

(3)在提取橘皮精油時(shí)，橘皮在石灰水中的浸泡時(shí)間為以上，并且橘皮要浸透,

這樣最后才會(huì)得到高的出油率。

⑷從橘皮中提取的橘皮精油的特點(diǎn)是

具有誘人的橘香味。

(5)某橘農(nóng)發(fā)現(xiàn)自家有一株橘樹具有抗蟲性狀，欲利用組織培養(yǎng)技術(shù)大量繁殖，組織培

養(yǎng)的選材非常關(guān)鍵，植物材料的選擇直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。若用花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)則應(yīng)選

擇花粉發(fā)育至期的花藥培養(yǎng)成功率最高。確定花粉發(fā)育時(shí)期最常用的方法有

法，某些植物的花粉不易著色，需采用法。

(6)影響植物組織培養(yǎng)的因素很多，其中最關(guān)鍵的激素有________和。請(qǐng)解釋

橘樹上的細(xì)胞不離體便不能長(zhǎng)成完整植株的根本原因：

5.(2015?東北三省三校第二次聯(lián)考)玫瑰精油是制作高級(jí)香水的主要成分，能使人產(chǎn)

生愉悅感。由于它的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，能隨水蒸氣一同蒸儲(chǔ)，根

據(jù)以上內(nèi)容完成以下問(wèn)題：

鮮攻瑰花一一①―?油水混合物

1加入q_

玫現(xiàn)精油包生除小?人③-分離油層

(1)完成上述圖解：①.；

②；

③。

(2)新鮮的柑橘皮中含有大量的果蠟、果膠和水分。橘皮中的精油提取適宜采用壓榨法,

為了提高出油率，需要將橘皮用浸泡。橘皮精油不適合采用蒸儲(chǔ)法的原因是

____________________________________________O

(3)胡蘿卜含有豐富的胡蘿卜素，在提取胡蘿卜素的實(shí)驗(yàn)中，為最適宜的萃取

劑。

(4)將提取的胡蘿卜素粗品通過(guò)法進(jìn)行鑒定。通過(guò)分析該實(shí)驗(yàn)，寫出影響萃取

效率的主要因素

(寫出兩點(diǎn)即可)。

6.(2015?河南開封模擬)下圖表示菊花的嫩枝和月季的花藥的離體培養(yǎng)過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖

回答下面的問(wèn)題。

菊花的組織培養(yǎng)

孕穗期接種的花藥從花藥中長(zhǎng)出花粉植株

穎花花粉愈傷組織

月季的花藥培養(yǎng)

(1)對(duì)菊花來(lái)說(shuō)，要選取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝來(lái)進(jìn)行組織培養(yǎng)，其原因是

_______________________________________________________,

對(duì)月季來(lái)說(shuō)，適宜花粉培養(yǎng)的時(shí)期是花粉應(yīng)處于期。為確定該花粉是否處于該

時(shí)期，最常用的方法是。

(2)在培養(yǎng)嫩枝組織和花粉的培養(yǎng)基中都要加入一定的植物激素，常用的植物激素有

(3)某同學(xué)在培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上感染了幾種細(xì)菌。若在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)

基中加入指示劑培養(yǎng)幾種菌后，指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細(xì)

菌。為了避免微生物對(duì)培養(yǎng)造成的影響，所以在進(jìn)行接種時(shí)應(yīng)注意

①接種室要消毒

②只要戴口罩，操作時(shí)便可說(shuō)話

③外植體可預(yù)先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡，取出用無(wú)菌水沖洗后，再用0.1%的氯化

汞溶液消毒，并用無(wú)菌水沖洗干凈

④接種操作要在酒精燈火焰旁進(jìn)行

⑤接種完畢應(yīng)立即蓋好瓶蓋

A.①②③④⑤B.①②③④

C.①@④⑤D.②③④⑤

(4)月季的花藥培養(yǎng)與菊花的嫩枝組織培養(yǎng)不同，從植物產(chǎn)生的途徑來(lái)說(shuō)，花粉植株產(chǎn)

生的途徑除了圖中所示外，還可以通過(guò)階段發(fā)育而來(lái)，這兩種發(fā)育途徑的差別主要

取決于。

(5)不同植物對(duì)各種條件的要求往往不同，進(jìn)行菊花組織培養(yǎng)一般將溫度控制在

℃,并且對(duì)光照的控制為。

7.(2014?河南豫南五市第二次模擬)下圖為通過(guò)花藥培養(yǎng)獲得月季花粉植株的一種途

徑。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題。

儡/一［^i］一小一初一研

(1)選擇花藥時(shí)一般要通過(guò)來(lái)確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。一般來(lái)

說(shuō)，在.期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞的一側(cè)。為此，通常會(huì)選擇的花蕾，成

功率最高。

(2)除了這里的胚狀體(花粉胚)還有,一般是由某些脫分化的細(xì)胞轉(zhuǎn)變而來(lái)，

在形態(tài)上具有與發(fā)育成的胚非常相似的結(jié)構(gòu)，胚芽、胚軸、胚根等結(jié)構(gòu)完整，具有

發(fā)育成完整個(gè)體的能力。

(3)上述途徑是通過(guò)胚狀體階段發(fā)育成植株，還可以將花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成

再將其誘導(dǎo)分化成植株。

(4)某同學(xué)在培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上感染了幾種細(xì)菌。若在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)

基中加入指示劑培養(yǎng)兒種菌后，指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細(xì)

菌；若在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入_______染料，培養(yǎng)幾種菌后，培養(yǎng)基中出現(xiàn)

透明圈，就可以鑒定其中含有纖維素分解菌。

(5)在培養(yǎng)過(guò)程中為了檢驗(yàn)制備的培養(yǎng)基是否合格，采取的措施是

如果，說(shuō)明培養(yǎng)基制備成功，否則需要重新制備。

8.(2014?河北邢臺(tái)一模)“迷你植物”是通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)，在人工控制的無(wú)菌

環(huán)境下，生長(zhǎng)在玻璃或透明塑料容器等相對(duì)密封的空間內(nèi)的一系列微型植物的總稱，如圖甲

所示。圖乙是“迷你植物”組織培養(yǎng)過(guò)程示意圖，圖丙是兩種植物激素對(duì)愈傷組織分化的影

響示意圖?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)培育“迷你植物”的原理是植物細(xì)胞具有。為了使培育的“迷你植物”無(wú)

病毒，選材時(shí)一般選取，原因是

(2)為了保證“迷你植物”的正常生長(zhǎng)，容器內(nèi)裝有的凝膠狀透明培養(yǎng)基中需要含有植

物生長(zhǎng)所需要的

(3)在培育“迷你植物”時(shí)，為了有利于嫩枝組織細(xì)胞形成愈傷組織，常常需要在配制

好的培養(yǎng)基中添加

嫩枝組織細(xì)胞接種后2?5天，若發(fā)現(xiàn)其邊緣局部污染，可能的原因是

(4)在圖乙中，若愈傷組織沒(méi)有形成根，但分化了芽，其原因可能是

若要獲得更多的愈傷組織，培養(yǎng)基中兩種植物激素的含量應(yīng)該是

選修3現(xiàn)代生物科技專題

課時(shí)考點(diǎn)44基因工程的工具與操作程序

||三年高考真題演練||

一、選擇題

1.（2015?重慶卷，6）下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述，正確的是（）

A.表達(dá)載體中的胰島素基因可通過(guò)人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得

B.表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動(dòng)于復(fù)制原（起）點(diǎn)

C.借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)

D.啟動(dòng)子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用

二、非選擇題

2.（2015?課標(biāo)卷H,40）已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)（P）,該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，

由305個(gè)氨基酸組成。如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸，240位的谷氨酰胺變成

苯丙氨酸，改變后的蛋白質(zhì)（P）不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性?；卮鹣铝袉?wèn)

題：

（1）從上述資料可知，若要改變蛋白質(zhì)的功能，可以考慮對(duì)蛋白質(zhì)的_______進(jìn)行改造。

（2）以P基因序列為基礎(chǔ),獲得Pi基因的途徑有修飾基因或合成基因，

所獲得的基因表達(dá)時(shí)是遵循中心法則的，中心法則的全部?jī)?nèi)容包括的復(fù)制，以及遺

傳信息在不同分子之間的流動(dòng)，即：。

（3）蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程，其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過(guò)

和，進(jìn)而確定相對(duì)應(yīng)的脫氧核甘酸序列，據(jù)此獲得基因，再經(jīng)表達(dá)、純化

獲得蛋白質(zhì)，之后還需要對(duì)蛋白質(zhì)的生物進(jìn)行鑒定。

3.（2015?福建卷，33）GDNF是一種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，對(duì)損傷的神經(jīng)細(xì)胞具有營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)

作用。研究人員構(gòu)建了含GDNF基因的表達(dá)載體（如圖1所示），并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中，

用于干細(xì)胞基因治療的研究。請(qǐng)回答：

將動(dòng)子海\

①②③

200bp

W重贏700bp）

反向連接蛾體的切電泳分析圖譜

注:bp表示堿基對(duì):載體和基因片段上的小箭頭注表示電泳條帶

表示相關(guān)限制旃的陶切位點(diǎn)①、②、③衰示電泳泳道

圖】圖2

(1)在分離和培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的過(guò)程中，使用胰蛋白酶的目的是。

(2)構(gòu)建含GDNF基因的表達(dá)載體時(shí)，需選擇圖1中的限制酶進(jìn)行酶切。

(3)經(jīng)酶切后的載體和GDNF基因進(jìn)行連接，連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體主要有3種：?jiǎn)?/p>

個(gè)載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接(如圖1所示)。為鑒定

這3種連接方式，選擇HpaI酶和BamHI酶對(duì)篩選得到的載體進(jìn)行雙酶切，并對(duì)酶切后的

DNA片段進(jìn)行電泳分析，結(jié)果如圖2所示。圖中第泳道顯示所鑒定的載體是正向連

接的。

(4)將正向連接的表達(dá)載體導(dǎo)入神經(jīng)干細(xì)胞后，為了檢測(cè)GDNF基因是否成功表達(dá)，可用

相應(yīng)的與提取的蛋白質(zhì)雜交。當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)，需進(jìn)行

培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞，用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)。

4.(2015?江蘇卷，32)胰島素A、B鏈分別表達(dá)法是生產(chǎn)胰島素的方法之一。圖1是該

方法所用的基因表達(dá)載體，圖2表示利用大腸桿菌作為工程菌生產(chǎn)人胰島素的基本流程(融

合蛋白A、B分別表示B一半乳糖昔酶與胰島素A、B鏈融合的蛋白)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

啟動(dòng)^半乳精卡隨編碼區(qū)

品制原點(diǎn)長(zhǎng)苗

胰島索

氨節(jié)青霉A或R鏈編碼區(qū)

抗性基因

圖1

Q皿般幽嚼

大M桿前9眼合雄白A5

Q叢區(qū)丐型喝皿jJ皿

圖2

(D圖1基因表達(dá)載體中沒(méi)有標(biāo)注出來(lái)的基本結(jié)構(gòu)是_______o

(2)圖1中啟動(dòng)子是酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能啟動(dòng)目的基因的表達(dá)；

氨茉青霉素抗性基因的作用是.

(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)必需的工具前有o

(4)B一半乳糖甘酶與胰島素A鏈或B鏈融合表達(dá)，可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位

點(diǎn)隱藏在內(nèi)部，其意義在于o

(5)澳化器能切斷肽鏈中甲硫氨酸竣基端的肽鍵，用溟化氟處理相應(yīng)的融合蛋白能獲得

完整的A鏈或B鏈，且6—半乳糖甘酶被切成多個(gè)肽段，這是因?yàn)?/p>

(6)根據(jù)圖2中胰島素的結(jié)構(gòu)，請(qǐng)推測(cè)每個(gè)胰島素分子中所含游離氨基的數(shù)量。你的推

測(cè)結(jié)果是理由是

5.(2015?海南卷，31)在體內(nèi)，人胰島素基因表達(dá)可合成出一條稱為前胰島素原的肽

鏈，此肽鏈在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中經(jīng)酶甲切割掉氨基端一段短肽后成為胰島素原，進(jìn)入高爾基體的胰島

素原經(jīng)酶乙切割去除中間片段C后，產(chǎn)生A、B兩條肽鏈，再經(jīng)酶丙作用生成由51個(gè)氨基酸

殘基組成的胰島素。目前，利用基因工程技術(shù)可大量生產(chǎn)胰島素?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)人體內(nèi)合成前胰島素原的細(xì)胞是，合成胰高血糖素的細(xì)胞是

(2)可根據(jù)胰島素原的氨基酸序列，設(shè)計(jì)并合成編碼胰島素原的序列，用該序

列與質(zhì)粒表達(dá)載體構(gòu)建胰島素原基因重組表達(dá)載體，再經(jīng)過(guò)細(xì)菌轉(zhuǎn)化、篩選及鑒定，即可建

立能穩(wěn)定合成的基因工程菌。

(3)用胰島素原抗體檢測(cè)該工程菌的培養(yǎng)物時(shí)，培養(yǎng)液無(wú)抗原抗體反應(yīng)，菌體有抗原抗

體反應(yīng)，則用該工程菌進(jìn)行工業(yè)發(fā)酵時(shí)，應(yīng)從_______中分離、純化胰島素原。胰島素原經(jīng)

酶處理便可轉(zhuǎn)變?yōu)橐葝u素。

6.

注：圖中限制酶的識(shí)別序列及切割形成的黏性末端均不相同

(2014?高考天津卷，T8)嗜熱土壤芽抱桿菌產(chǎn)生的B-葡萄糖甘酶(BglB)是一種耐熱纖

維素酶，為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用，開展了以下試驗(yàn)：

I.利用大腸桿菌表達(dá)BglB酶

(DPCR擴(kuò)增bglB基因時(shí)，選用________基因組DNA作模板。

(2)如圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。bglB基因不含圖中限制酶識(shí)別序列。為使PCR擴(kuò)增的

bglB基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，擴(kuò)增的bglB基因兩端需分別引入和不同限制酶

的識(shí)別序列。

(3)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的

能力這是因?yàn)?/p>

II.溫度對(duì)BglB酶活性的影響

30405060708090

溫度/X?

圖1溫度對(duì)BglB峰活性的影響

%

、120

芽100

虐80

女60

輕40

20

(4)據(jù)圖1、2可知，80℃保溫30min后，BglB酶會(huì)；為高效利用BglB酶降

解纖維素，反應(yīng)溫度最好控制在________(單選)。

A.50℃B.60"CC.70℃D.80℃

III.利用分子育種技術(shù)提高BglB酶的熱穩(wěn)定性

在PCR擴(kuò)增bglB基因的過(guò)程中，加入誘變劑可提高bglB基因的突變率。經(jīng)過(guò)篩選，可

獲得能表達(dá)出熱穩(wěn)定性高的BglB酶的基因。

(5)與用誘變劑直接處理嗜熱土壤芽胞桿菌相比，上述育種技術(shù)獲得熱穩(wěn)定性高的BglB

酶基因的效率更高，其原因是在PCR過(guò)程中(多選)。

A.僅針對(duì)bglB基因進(jìn)行誘變

B.bglB基因產(chǎn)生了定向突變

C.bglB基因可快速累積突變

D.bglB基因突變不會(huì)導(dǎo)致醐的氨基酸數(shù)目改變

7.(2014?高考山東卷，T36)人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白，可

在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

(l)htPA基因與載體用切割后，通過(guò)DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。

檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA,可采用技術(shù)。

(2)為獲取更多的卵(母)細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其o

采集的精子需要經(jīng)過(guò),才具備受精能力。

(3)將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是。為了獲得母羊，移植

前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可

獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的O

(4)若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到,說(shuō)明目的基因成功表達(dá)。

8.(2013?高考新課標(biāo)全國(guó)卷I,T40)閱讀如下材料：

材料甲：科學(xué)家將牛生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫阎?，得到了體型巨大的“超級(jí)小鼠”；

科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。

材料乙：T,溶菌酶在溫度較高時(shí)易失去活性，科學(xué)家對(duì)編碼T,溶菌酶的基因進(jìn)行改造,

使其表達(dá)的T,溶菌酶的第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼幔谠摪腚装彼崤c第97位的半胱氨

酸之間形成了一個(gè)二硫鍵，提高了T,溶菌酶的耐熱性。

材料丙：兔甲和兔乙是同一物種的兩個(gè)雌性個(gè)體，科學(xué)家將兔甲受精卵發(fā)育成的胚胎移

植到兔乙的體內(nèi)，成功產(chǎn)出兔甲的后代，證實(shí)了同一物種的胚胎可在不同個(gè)體的體內(nèi)發(fā)育。

回答下列問(wèn)題：

(1)材料甲屬于基因工程的范疇。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用法。

構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶有和。在培育轉(zhuǎn)基因植物時(shí)，常用農(nóng)桿菌

轉(zhuǎn)化法，農(nóng)桿菌的作用是0

(2)材料乙屬于工程范疇。該工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ)，通過(guò)基

因修飾或基因合成，對(duì).進(jìn)行改造，或制造一種一的技術(shù)。在該實(shí)例中，引起

「溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的序列發(fā)生了改變。

(3)材料丙屬于胚胎工程的范疇。胚胎移植是指將獲得的早期胚胎移植到種的、

生理狀況相同的另一個(gè)雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育成新個(gè)體的技術(shù)。在資料丙的實(shí)例中，

兔甲稱為體，兔乙稱為體。

II兩年模擬試題精練II

1.(2015?河北省“五個(gè)一名校聯(lián)盟”質(zhì)量監(jiān)測(cè))下圖為含鐵量較高轉(zhuǎn)基因水稻的培育

過(guò)程示意圖，請(qǐng)分析回答：

/一■時(shí)結(jié)合色白基因

都第里Q

a重紙質(zhì)粒

ifflT倔粒的夕桿僦

開訪水稻加入培養(yǎng)基/

未成熟?胚7

蚪幽蛾需阻^^^轉(zhuǎn)基因水褶

MSB5養(yǎng)基培養(yǎng)基2培養(yǎng)基3

篩選培養(yǎng)

注：MS培養(yǎng)基為植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基

(1)鐵結(jié)合蛋白基因來(lái)自菜豆，若利用菜豆細(xì)胞內(nèi)形成的mRNA通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程形成

cDNA,將這些cDNA用限制酶處理后儲(chǔ)存在受體菌群體內(nèi)，這些受體菌群被稱為菜豆的

。除了通過(guò)上述方法可以獲取鐵結(jié)合蛋白基因外，還可以通過(guò)化學(xué)合成的方法獲取

鐵結(jié)合蛋白基因，其前提條件是。

(2)構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時(shí)，通常要用同種限制性核酸內(nèi)切酶分別切割,該酶作用

的部位為(填化學(xué)鍵名)。將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時(shí)，可以用處理農(nóng)桿

菌，使重組Ti質(zhì)粒易于導(dǎo)入。完整的重組Ti質(zhì)粒除圖示結(jié)構(gòu)外，還應(yīng)包括等。

(3)將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時(shí)，通過(guò)培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng),

可以獲得，該篩選過(guò)程是通過(guò)在培養(yǎng)基2中加入實(shí)現(xiàn)的。培養(yǎng)基3與培養(yǎng)

基2的區(qū)別是。檢測(cè)培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達(dá)到，需要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻

2.(2015?天津六校第一次聯(lián)考)在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)

常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。下圖為獲

得抗蟲棉的技術(shù)流程。請(qǐng)據(jù)圖回答：

(DA過(guò)程需要的酶有o

(2)要把重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，首先必須用處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿

菌轉(zhuǎn)變?yōu)閼B(tài)；將_______在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。

(3)含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌侵染離體棉花葉片組織后，將離體棉花葉片組織培養(yǎng)成

再生植株要經(jīng)過(guò)[D]和[E]。如要確保再生植株中含有抗蟲基因，可在D

過(guò)程的培養(yǎng)基中加入。

(4)如想利用分子雜交技術(shù)檢測(cè)再生植株中的抗蟲基因是否轉(zhuǎn)錄，應(yīng)該用放射性同位素

標(biāo)記的目的基因作為探針與________雜交。

3.(2014?河北保定二模)下圖表示利用基因工程培育抗蟲棉過(guò)程的示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回

答下列有關(guān)問(wèn)題。

四環(huán)素抗性型困

⑴獲取目的基因的方法主要有兩種：一種是,另一種是

。完成［①］操作所用的工具酶是?

(2)為了完成［②］操作，經(jīng)常使用法。

(3)［③］操作可以快速得到大量棉植株，這種方法叫。

(4)在做抗蟲棉試驗(yàn)時(shí)，已經(jīng)檢測(cè)出棉的植株中含有抗蟲基因，但讓棉鈴蟲食用棉的葉

片時(shí)，棉鈴蟲并沒(méi)有被殺死，原因是

此時(shí)需要對(duì)棉植株中的抗蟲基因進(jìn)行修飾，從變異類型分析，這種對(duì)抗蟲基因的修飾

屬于?

4.(2014?河南濮陽(yáng)第二次模擬)下列是基因工程的有關(guān)問(wèn)題，請(qǐng)回答：

(1)限制性核酸內(nèi)切酶可以識(shí)別雙鏈DNA分子中的特定核昔酸序列，并可以使每條鏈中

特定部位的兩個(gè)核昔酸之間的(填化學(xué)鍵名稱)斷裂，形成的末端總體可分為兩種類

型，分別是_。

(2)目的基因和載體重組時(shí)需要的工具酶是,和限制性核酸內(nèi)切醐相比，它對(duì)

所重組的DNA兩端堿基序列(有或無(wú))專一性要求。

(3)圖1表示構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)的某種質(zhì)粒與目的基因。已知限制醐I的識(shí)別序列和切點(diǎn)

是一GIGATCC一，限制酶H的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一IGATC-o

GGATCC耳胞第用…GATC

CbA(y；CTA《

ttzGeneIKUU表示兩標(biāo)記壁閃

a表示限制?僅有的識(shí)別序列放大

ffil

分析可知，最好選擇限制酶切割質(zhì)粒，限制酶切割目的基因所在的

DNA,這樣做的好處分別是、o

(4)人的膚色正常與白化病受常染色體上基因A和a控制。若白化病基因與相對(duì)應(yīng)的正

?；蛳啾?，白化病基因缺失了一個(gè)限制酶的切點(diǎn)，甲、乙、丙3人白化基因或相對(duì)應(yīng)正常

基因酶切后的電泳結(jié)果如圖2。

限制前切點(diǎn)

圖2

由圖2可以判斷出，乙和丙的基因型分別是、。如果甲與丙婚配，后

代患病的概率為。

5.（2015?江蘇揚(yáng)州模擬）mtDNA是存在于人類細(xì)胞線粒體中雙鏈閉合環(huán)狀的DNA分子,

具有自我復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和控制合成蛋白質(zhì)的功能。mtDNA的類型具有明顯的種族特異性。若用

兩種識(shí)別切割序列完全不同的限制酶M和N切割某人的mtDNA,通過(guò)凝膠電泳分離分析得下

表。限制酶M和N的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如下圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

凝膠電泳結(jié)果

（lkb=l000對(duì)堿基）（+表示該片段的存在以及含量）

分子量/kb酶M酶N酶M+醵N

1.0++

2.0+

3.0+

4.0+

5.0+

6.0+

7.0+

9.0+

10.0+

M酶N陶

I-JGATCC—

-AGATCT-

-TCTAGA--CCTAGG—

（1）該mtDNA的長(zhǎng)度為kb。在該DNA分子中，M酶與N酶的切割位點(diǎn)分別有

________個(gè)。

(2)M酶與N酶切出的能相互粘連的末端能在___酶的作用下相互連接，請(qǐng)將連接

的結(jié)果表示出來(lái)：。連接后的序列是否可以用M酶、N酶進(jìn)行切割？

________,簡(jiǎn)述理由：

(3)下圖為真核細(xì)胞某基因的結(jié)構(gòu)圖以及限制酶M和N的切割位點(diǎn)。

□

日

①現(xiàn)用該基因作為目的基因，若采用直接從供體細(xì)胞中分離，具體方法是

這個(gè)方法雖操作方便，但切割下的基因中含有不能指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的區(qū)域。

因此，目前往往采用逆轉(zhuǎn)錄的人工合成的方法，其基本步驟是：

②若H區(qū)的堿基數(shù)是2000個(gè)，其中陰影區(qū)域堿基數(shù)是800個(gè)，空白區(qū)域中G和C的總

數(shù)共有400個(gè)，則由該區(qū)轉(zhuǎn)錄的rnRNA中A和U總數(shù)是。

6.(2014?湖南六校聯(lián)考)下圖為利用基因工程培育花卉的過(guò)程(字母代表相應(yīng)的物質(zhì)或

結(jié)構(gòu)，數(shù)字代表過(guò)程或方法)。請(qǐng)回答：

供體細(xì)胞一a—?①

運(yùn)載體DNA基因表達(dá)載體

②

受體植物一外植體@@轉(zhuǎn)基因植物

(1)花卉基因工程可細(xì)分為花色基因工程、花形基因工程、香味基因工程等，不同的基

因工程所需要獲取的不同。①過(guò)程需要的酶有O

(2)基因工程中最常用的載體是________,另外還有________、動(dòng)植物病毒等。整合了

目的基因的重組質(zhì)粒，在組成上還含有啟動(dòng)子、終止子和。

(3)②過(guò)程常用的方法是,檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基

因，需要采用技術(shù)。

(4)外植體一般從受體植物的形成層處獲取，原因是這部分細(xì)胞

由外植體培養(yǎng)為轉(zhuǎn)基因植株的③、④過(guò)程分別為

該過(guò)程的理論基礎(chǔ)是。

(5)