復習動物細胞工程問題形式

動物細胞工程復習動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合單克隆抗體技術核移植動物細胞工程技術復習動物細胞工程快速復習題1.動物細胞工程的基礎是什么？2.動物細胞培養(yǎng)的基本原理是什么？3.動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？4.進行動物細胞培養(yǎng)的材料一般有何特點？動物細胞培養(yǎng)技術細胞增殖通常含有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、動物血清等。胚胎組織或幼齡動物的組織的細胞生命力旺盛，分裂能力強。5.原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)有何區(qū)別?6.動物體細胞培養(yǎng)技術能將一個分化的體細胞培養(yǎng)成為一個動物體嗎？為什么？7.為什么要將組織分散成了單個細胞再進行培養(yǎng)？不能8.怎樣將動物組織分散成單個的細胞？9.為何要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離下來？10.細胞貼壁生長對培養(yǎng)容器有何要求？用剪刀剪碎組織，再用胰蛋白酶處理。

當貼壁細胞生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖—細胞出現(xiàn)接觸抑制。培養(yǎng)瓶的內(nèi)表面要光滑、無毒、易于貼附。11.哪些細胞會失去接觸抑制？12.在體外培養(yǎng)動物細胞需要什么物質(zhì)和環(huán)境條件？

腫瘤細胞無菌無毒環(huán)境、充足營養(yǎng)（血清或血漿）、適宜溫度、PH、氣體環(huán)境（O2和CO2，C02的主要作用是維持培養(yǎng)液的PH）。13.為什么對動物細胞進行培養(yǎng)時通常要添加血清？14.多莉羊的誕生在生物學發(fā)展史上有何意義？15.為什么用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞？說明已經(jīng)分化的動物體細胞核，仍然具有全能性，在合適的條件下，仍然可以發(fā)育成新的個體。

10代以內(nèi)的細胞一般能保持正常的二倍體核型。

16.體細胞核移植獲得高產(chǎn)奶牛過程中，利用了哪些現(xiàn)代生物技術手段？17.你認為用上述體細胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物，是對體細胞供體動物進行了100%的復制嗎？動物細胞培養(yǎng)技術、亞顯微操作技術、核移植技術、胚胎移植技術、細胞融合技術否。絕大部分DNA來自于供體細胞核，但其核外還有少量的DNA，即線粒體中的DNA是來自于受體卵母細胞。18.體細胞核移植技術還存在什么問題？成功率非常低；絕大多數(shù)克隆動物還存在健康問題19.什么是克??？從一個共同的祖先通過無性繁殖的方法繁殖出來的一群遺傳特征相同的DNA分子、細胞或個體的過程。20.無性繁殖和有性繁殖的主要區(qū)別是什么？21.動物細胞融合的基本原理是什么？

22.什么是病毒的滅活？有性繁殖是通過產(chǎn)生有性生殖細胞——配子（包括精細胞、卵細胞），配子結(jié)合后生長成新的個體。無性繁殖是不涉及生殖細胞，由母體的一部分直接產(chǎn)生子代的繁殖方法。細胞膜的流動性滅活是指用物理或化學手段使病毒失去感染能力，但是并不破壞病毒的抗原結(jié)構(gòu)。單克隆抗體篩選雜交細胞雜交瘤細胞體外或體內(nèi)細胞培養(yǎng)篩選骨髓瘤細胞誘導細胞融合特異性雜交瘤細胞雜交瘤細胞系提取經(jīng)過免疫的B淋巴細胞動物細胞融合技術動物細胞培養(yǎng)技術單克隆抗體的制備過程：特點：既能產(chǎn)生專一抗體又能大量繁殖特點：特異性強靈敏度高可大量制備注射抗原免疫23.從何處取得經(jīng)過免疫的B淋巴細胞？24.把B淋巴細胞和骨髓瘤細胞放在一起融合時，有幾種融合方式？離心、振動、電激；聚乙二醇；滅活的病毒

從免疫動物的脾臟獲取。B-B融合細胞雜交瘤細胞瘤-瘤融合細胞資料：細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。淋巴細胞有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。骨髓瘤細胞中只有D途徑而沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。在培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細胞，就是雜交瘤細胞。這種培養(yǎng)基被稱為“HAT”選擇培養(yǎng)基。25.如何篩選雜交瘤細胞？26.篩選出的雜交瘤細胞產(chǎn)生的是同一種抗體嗎？否，由于與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞有許多種，因此從這些種雜交瘤細胞中提取抗體的仍然是多種抗體的混合物。27.怎樣從眾多雜交瘤細胞中篩選到能產(chǎn)生我們需要的產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞？通常采用克隆細胞的方法獲得單細胞克隆，再利用抗原抗體雜交法檢測，篩選出分泌產(chǎn)生所需特異抗體的雜交細胞株，然后進行擴大培養(yǎng)。多孔動物細胞培養(yǎng)板將含有雜交瘤細胞的培養(yǎng)液按比例稀釋，分別加入多孔細胞培養(yǎng)板的小孔中，稀釋度保證每個小孔中的細胞數(shù)不多于1個，進行細胞培養(yǎng)。抗原抗體雜交法檢驗呈陽性利用抗原抗體雜交法檢測雜交瘤細胞產(chǎn)生的特異性抗體陽性孔方法——抗原-抗體雜交法

在單克隆抗體制備過程中，兩次篩選的原理和方法是不相同的。第一次篩選第二次篩選28寒.如何欄培養(yǎng)蜘雜交膝瘤細慕胞？體外抗培養(yǎng)初或體槐內(nèi)培欺養(yǎng)29市.單克示隆抗芒體的干概念由單痛個雜切交瘤幅細胞乒通過侵克隆柳，形搜成細裙胞群敞，這繡一細蒜胞群雅所產(chǎn)處生的樹化學擁性質(zhì)鏟單一扭、特前異性櫻強的冶抗體短稱為仔單克記隆抗棋體。30開.單抗害隆抗尋體的狀特點①特異汁性強吸、靈于敏度方高②可以窗大量浙制備31貿(mào).單抗輔隆抗弓體有債何應哪用價膽值？①作為展診斷咽試劑②用于