與乳腺癌治療、基因分型、預后相關的標記物課件

與乳腺癌治療、基因分型、預后相關的標記物與乳腺癌治療、基因分型、預后相關的標記物乳腺癌治療——全身的綜合治療手術放療化療HER-2、分子分型標記物、耐藥基因類等內分泌治療ER、PR、HER-2基因靶向治療HER-2預后評估

HER-2P53Ki67分子分型（ER、PR、HER-2、CK5/6、EGFR、Ki67）乳腺癌治療——全身的綜合治療乳腺癌腫瘤標記物的檢測

必做指標：ER、PR、HER-2、CK5/6、Ki-67

選作：21基因檢測、EGFR

本院：ER、PR、PS2（內分泌治療相關指標）

HER-2、TOP-Ⅱ（靶向治療及化療相關指標）

P53（癌基因）

CK5/6、P120（基因分型、組織學分類）

Ki-67（增殖活性，基因分型）乳腺癌腫瘤標記物的檢測必做指標：ER、PR、HER-2、C一，HER-2一，HER-2一，HER-2HER-2基因具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白人類表皮生長因子受體家族的第2個成員(humanepidermalgrowthfactorreceptor,HER-2)原癌基因作用：細胞增殖、分化、移動和存活的重要調節(jié)因子。擴增和過表達見于多種腫瘤組織:包括乳腺癌、卵巢癌、結腸癌、肺癌、胃癌、前列腺癌和宮頸癌等一，HER-2HER-2基因一，HER-2HER-2基因與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及預后密切相關隨著其單抗（Herceptin赫賽汀，曲妥珠單抗）治療臨床試驗的成功，對HER2基因的檢測至關重要，已成為病理工作的一部分。HER-2乳腺癌完美的分子靶點一，HER-2HER-2基因一，HER-2乳腺癌HER-2基因檢測的臨床意義1，預后評估

Her-2基因擴增者,患者無瘤生存期及總生存期短

并與淋巴結轉移、腫瘤高增殖活性等相關。2，選擇治療方案靶向治療:單克隆抗體化療Her-2水平可預測化療反應性，HER-2+/ER-乳腺癌和基底樣乳腺癌對含蒽環(huán)類的新輔助化療有效率較luminal乳腺癌高.每個乳腺癌患者均應進行Her-2檢測一，HER-2乳腺癌HER-2基因檢測的臨床意義一，HER-2準確HER-2基因狀態(tài)檢測的必要性

臨床確定否應用Herceptin的必要條件指導化療藥物的選擇判斷患者的預后準確檢測：病人得以相應治療，Her-2擴增患者可獲得與Her-2陰性患者相近的生存期假陽性：增添不必要的治療，病人機體、經(jīng)濟雙重損失假陰性：病人失去潛在的有效治療，接受不適宜的治療，預后更差。一，HER-2一，HER-2HER-2檢測方法HER-2受體蛋白水平檢測-免疫組織化學（IHC)HER-2基因擴增水平檢測-原位雜交（ISH）熒光ISH（FISH）顯色ISH（CISH）銀增強ISH（SISH）

一，HER-2HER-2檢測方法HER-2受體蛋白水一，HER-2檢測對象所有乳腺原發(fā)性浸潤性癌復發(fā)灶轉移灶一，HER-2檢測對象所有乳腺原發(fā)性浸潤性癌HER-2檢測標準的變化HER-2檢測標準的變化乳腺癌HER-2檢測指南2014版

--中華病理學雜志2014，vol.43.No4IHC：3+:＞10%強而完整的膜著色,2+:≤10強而完整的膜著色,

＞10%不完整和/或弱或中等強度的膜著色1+：＞10%不完整、微弱膜著色0：無著色，或≤10不完整、微弱或難以察覺的膜著色只評定浸潤癌0、1+為陰性，2+為不確定;3+為陽性2+需進一步ISH基因擴增狀態(tài)測定乳腺癌HER-2檢測指南2014版

--中華病理學雜志201二，ER/PR二，ER/PR二，ER/PR

ER、PR與內分泌治療雌激素受體（EstrogenRecetor,ER)

孕激素受體（ProgesteroneRecetor,PR)約2/3的乳腺癌患者為HR陽性(ER和/或PR陽性）。對于HR陽性乳腺癌患者，術后給予他莫昔芬（三苯氧胺

）治療，使其復發(fā)率降低47%,死亡率降低26%，且療效不依賴患者年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、淋巴結是否有轉移以及既往是否曾接受化療等因素。ER陰性的浸潤性乳腺癌患者基本不能從內分泌激素治療中獲益因此，對乳腺癌患者進行HR檢測是乳腺癌診斷的必要程序,缺少將是一個不完整的病理診斷。

二，ER/PR

ER、PR與內分泌治療雌激素受體（Estr二，ER/PR

ER、PR與治療、預后因素的關系ER表達水平與下列因素呈正相關總生存率無病生存率無復發(fā)生存率

5年生存率至治療失敗時間內分泌治療反應及復發(fā)時間。PR表達水平與下列因素呈正相關總生存率至治療失敗時間內分泌治療反應及復發(fā)時間

PR狀態(tài)可能提供獨立于ER外的附加預測價值.

二，ER/PR

ER、PR與治療、預后因素的關系ER表達水ER、PR與內分泌治療反應率ER、PR與內分泌治療反應率《ASCO/CAP乳腺癌激素受體IHC檢測指南》ASCO/CAP（美國臨床腫瘤學會與美國病理醫(yī)師學會）組成的國際專家組，通過系統(tǒng)的文獻回顧和評估后發(fā)現(xiàn)，目前在世界范圍內可能有近20%的乳腺癌ER/PR的免疫組化檢測結果是錯誤的（假陰性和假陽性）。原因是多方面的《ASCO/CAP乳腺癌激素受體IHC檢測指南》于2010年應運而生旨在提高IHC檢測乳腺癌ER和PR表達狀態(tài)的準確性，以行針對性的內分泌治療。《ASCO/CAP乳腺癌激素受體IHC檢測指南》ASCO/C

二，ER/PR

ER/PR檢測方法目前確定IHC為ER/PR

狀態(tài)的最佳檢測方法資料分析表明，相對于RT-PCR、RNA分析方法，采用IHC檢測ER/PR

與輔助內分泌治療療效之間具有明顯相關性。

二，ER/PRER/PR檢測方法目前確定IHC為二，ER/PRER/PR標準化組織處理標準化:其中固定液為10%中性緩沖福爾馬林，腫瘤離體到固定1h之內固定時間應為6～72小時對照設立：陽性內對照：標本中的正常乳腺導管上皮細胞，呈現(xiàn)強度不一的著色。取材時應將腫瘤及瘤旁正常組織同時取材并及時固定，使IHC染色具有平行處理的內在正常陽性對照。陽性外對照：采用明確陰性、中等陽性、強陽性的細胞株或子宮內膜組織陰性內對照：組織中的間質細胞、肌上皮細胞。檢測方法應具有準確性和可重復性；出現(xiàn)非常規(guī)染色結果時，應換蠟塊重新檢測或送第三方檢測。結果判讀標準化二，ER/PRER/PR標準化組織處理標準化:其二，ER/PR檢測人群

指南建議所有新診斷的浸潤性乳腺癌患者；對于同時多發(fā)性癌，應至少對其中一個病灶進行檢測，以最大者為佳；復發(fā)病灶應行再檢測轉移灶應行再檢測原發(fā)癌與轉移癌的HR狀態(tài)可能不一致，不一致者約占20%～25%?；趦确置谥委煹闹匾裕瑧摻o予轉移患者再次檢測的機會。原發(fā)灶檢測也有假陰性的可能。導管內癌由于最新研究提示采用內分泌治療可使DCIS發(fā)展至浸潤癌的危險降低40%～50%，專家組認可對這類患者進行ER狀態(tài)評估的價值，但不作正式推薦，是否檢測由患者和醫(yī)師決定。指南也提出，對ER陽性DCIS患者可考慮推薦他莫昔芬治療。

二，ER/PR檢測人群指南建議二，ER/PR陽性界值

大規(guī)模研究表明，HR水平在腫瘤細胞低水平表達（1%）時即與臨床療效顯著相關。由于他莫昔芬和其他內分泌治療藥物在降低死亡率方面具有確切作用且相對低毒的特點，專家組認為，在低水平ER狀態(tài)下即可考慮采用內分泌治療，因此將≥1%陽性細胞作為陽性界值（<1%為陰性界值）。新界值的啟用將會使內分泌治療的應用比例輕度上升。二，ER/PR陽性界值大規(guī)模研究表明，HR水平在腫二，ER/PR結果判讀指南推薦檢測的最佳計算方法如下：

陽性:大于1%的腫瘤細胞核呈免疫陽性則ER或PR為（+）。

陰性：在能證明樣本為ER或PR陽性的情況下（可見陽性對照結果）,少于1%的腫瘤細胞核免疫陽性則ER或PR為陰性；

無法判讀：腫瘤組織無著色，外對照組織沒有達到預期結果或內對照組織沒有任何著色，則ER或PR檢測結果無法解釋。

二，ER/PR結果判讀指南推薦檢測的最佳計算方法如下：二，ER/PR結果報告

IHC檢測結果必須報告的內容包括染色陽性腫瘤細胞的百分比報告染色強度（弱、中、強）結果應為陽性、陰性、不可判讀。二，ER/PR結果報告

IHC檢測結果必須報告的內容包三，Ki-67三，Ki-67三，Ki-67增殖相關基因Ki67是一種非組蛋白核抗原,基因定位于人染色體10q5,細胞除G0期外,其它各期（G1、S、G2、M）均有表達。在增殖細胞中其表達始于G1期,在S期、G2期逐漸增強,到M期達到高峰,之后迅速降解。其陽性表達高低與細胞增殖活性密切相關,故檢測Ki67表達可反映出腫瘤細胞的增殖狀態(tài),被視為評估腫瘤細胞惡性增殖的可靠標志。三，Ki-67增殖相關基因三，Ki-67預后高Ki-67預后差新輔助化療前后效果判斷指標基因分型的指標判斷核著色為陽性（不管著色強度）評估整張切片的平均陽性百分比。包括hotspot.

（2011年乳腺癌國際工作組乳腺癌Ki-67評估推薦指南）評估整張切片，避開hotspot。僅評估hotspot計數(shù)細胞數(shù)，報道不一?！?00個浸潤癌癌細胞（2011年乳腺癌國際工作組乳腺癌Ki-67評估推薦指南）三，Ki-67預后高Ki-67預后差四，乳腺癌基因分型相關標記物四，乳腺癌基因分型相關標記物乳腺癌基因分型乳腺癌是一類高度異質性的腫瘤,不同病人在以下方面存在明顯的個體差異：分子免疫表型病理組織形態(tài)生物學行為治療的反應這種差異被認為是由乳腺癌關鍵基因的異常表達所致此為基因分型的分子生物學基礎?；蚍中突贗HC及基因檢測基于IHC基因分型的常用標記物有ER、PR、HER2、CK5/6、Ki67。乳腺癌基因分型乳腺癌是一類高度異質性的腫瘤,乳腺癌基因分型乳腺癌基因分型乳腺癌基因分型Perou

和Sorlie2000-2003年乳腺癌基因分型Perou和Sorlie2000-2002011年StGallen基于IHC的乳腺癌分子分型2011年StGallen基于IHC的乳腺癌分子分型四，乳腺癌基因分型相關標記物三陰型乳腺癌三陰性乳腺癌(Triplenegativebreastcancer,TNBC)：雌激素受體(ER)孕激素受體(PR)均為陰性的乳腺癌Her-2

伴P53突變，Her-1高表達。三陰性乳腺癌占所有乳腺癌的15%左右。組織學特征：多為導管癌,組織學分級多為高級別。臨床特點：復發(fā)早,進展快,生存短,因目前尚無針對性的治療而而引起關注。治療：缺乏有效的內分泌治療和靶向治療，化療顯得重要。四，乳腺癌基因分型相關標記物四，乳腺癌基因分型相關標記物基底細胞樣乳腺癌占所有乳腺癌的15%左右，多見于年輕人Basallike型可能來源于最原始的乳腺癌干細胞診斷標準不完全一致。一般標準：ER、PR及HER2陰性，

CK5/6和(或)EGFR（Her-1）陽性者。常用標準：ER及Her-2二聯(lián)陰性、一種基底細胞型細胞角蛋白陽性(CK5、CK5/6、CK14或CK17；CK5優(yōu)于CK5/6).但重復性尚有疑問。特征：表達一群乳腺上皮基底細胞常表達的基因，包括CK5/6、CK14、CK17，p53高表達，超過60%患者表達EGFR。形態(tài)學常為巢團狀、推擠性邊界，分級高。注：腺樣囊性癌、粘表具有基底細胞樣表型，但預后好，所以此分子分類尚待完善。四，乳腺癌基因分型相關標記物基底細胞樣乳腺癌四，乳腺癌基因分型相關標記物基底細胞樣乳腺癌與三陰性乳腺癌三陰型癌和基因表達譜確定的基底樣型癌有約80重疊。二者的生物學特征有許多相似之處，有重疊性。部分學者認為是同一類型或被交叉使用。部分學者認為是二個不同的概念，屬于乳腺癌的二個亞型。二個概念不能互換。研究顯示約20％的三陰性乳腺癌不表達基底細胞標志物超過7％的基底細胞樣乳腺癌不是三陰性的。Sasa等研究表明臨床上有必要把三陰性乳腺癌根據(jù)IHC基底樣標志物（如CK5/6）分為基底型和非基底型，因為兩者的預后及治療方法不同。四，乳腺癌基因分型相關標記物基底細胞樣乳腺癌與三陰性乳腺癌五，HER-1表皮生長因子(epidermalgrowthfactor,EGF)正常表達的EGF信號系統(tǒng)控制著細胞的增殖、分裂、分化.生長因子受體(GFR)：

根據(jù)GFR的結構和功能,可以將其分為4種類型：HER1(表皮生長因子受體,EGFR或C-erbB-1)HER2(C-erbB-2)、HER3(C-erbB-3)HER4(C-erbB-4)EGFR和Her-2蛋白質在酪氨酸激酶區(qū)域有82%的同源性。

五，HER-1表皮生長因子(epidermalgrowth五，HER-1表皮生長因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)EGFR與腫瘤細胞的增殖、血管生成、腫瘤侵襲、轉移及細胞凋亡抑制有關。EGFR在多種惡性腫瘤中呈高表達,如:非小細胞肺癌、頭頸癌、胃癌、食道癌、結直癌、乳腺癌、膀胱癌等。EGFR的過度表達使腫瘤病人的生存期縮短、化療不敏感.與EGFR及其信號傳導通路有關的靶向治療受到關注。五，HER-1表皮生長因子受體(epidermalgrow五，HER-1EGFR與乳腺癌陽性表達率乳腺癌>>>良性增生性病變,乳腺癌中的EGFR陽性表達率隨病理分級的增高而增加,乳腺癌組織EGFR表達率與ER陰性、PR陰性相關,說明EGFR過度表達的乳腺癌其發(fā)生、發(fā)展可能不依賴女性性激素,內分泌治療療效差、預后不佳。EGFR的表達與Her-2表達無明顯相關性，提示EGFR可能是一個獨立于Her-2的因素。Her-1過度表達是三陰性乳腺癌特征之一.五，HER-1EGFR與乳腺癌五，HER-1靶向治療Lapatinib（拉帕替尼）針對HER-1/HER-2酪氨酸激酶抑制劑,能有效抑制HER-1/HER-2酪氨酸激酶活性。繼曲妥珠單抗(赫賽汀)后的第2個乳腺癌分子靶向新藥。吉非替尼(Gefitinib)：EGFR酪氨酸激酶抑制劑,有明顯的體內外抗腫瘤作用。厄洛替尼：EGFR酪氨酸激酶抑制劑,單藥治療乳腺癌或聯(lián)合用藥靶向治療時療效欠佳，對炎性乳腺癌有較。西妥昔單抗：一種單克隆抗體,特異性作用于EGF