龍眼肉水提物的生物活性及其抗疲勞作用

龍眼肉水提物的生物活性及其抗疲勞作用

龍眼又名龍眼，俗稱圓眼。這是一種無病兒童科植物。產(chǎn)于中國東南、南部和西南部的省份。它的水果用于生吃和加工?！睹t(yī)別錄》稱其為“益智”,言其功能養(yǎng)心益智故也?！堕_寶本草》稱“亞荔枝”,言其形狀如荔枝也。龍眼肉、核、皮及根均可作藥用。性溫味甘,益心脾,補(bǔ)氣血;具有良好滋養(yǎng)補(bǔ)益作用,可用于心脾虛損、氣血不足所致的失眠、健忘、驚悸、眩暈等癥。因此,龍眼的深加工研究應(yīng)對其生理活性物質(zhì)進(jìn)行研究。龍眼果肉水提物中含有多種重要的生理活性組分,具有復(fù)雜的生物活性。前期研究表明,龍眼果肉水提物能提高小鼠的耐力并具有抗氧自由基的作用。本實(shí)驗(yàn)對人體抗疲勞作用及其機(jī)制進(jìn)行探討。1材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)材料1.1.1純化水預(yù)處理將去皮及去核龍眼肉取適量置于煎煮容器內(nèi),加入相當(dāng)于藥材量10倍的冷純化水浸泡8h,強(qiáng)火煮沸,再以文火煎煮30min,過濾;藥渣加5倍量純化水繼續(xù)煎煮,煮沸后改文火再煎煮20min,過濾。合并兩次濾液,經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮而成,水提液含生藥量30g/ml。1.1.2明顯的員工素質(zhì)選擇參加2009年世界啦啦隊(duì)錦標(biāo)賽的廣西師范大學(xué)舞蹈啦啦隊(duì)運(yùn)動(dòng)員36名,男女各半,納入標(biāo)準(zhǔn)一級(jí)運(yùn)動(dòng)員。運(yùn)動(dòng)員健康狀況良好,近半年中能保證正常參加訓(xùn)練和比賽。選入前沒有服用以增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)及抗疲勞為主要目的中西醫(yī)藥物。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1分組方法所有對象隨機(jī)分為兩組。試驗(yàn)組18名,對照組18名。1.2.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)與審批、過程觀察采用雙盲法,實(shí)施步驟如下:①運(yùn)用隨機(jī)發(fā)生器制作分配卡,然后將其裝入密封袋內(nèi),密封袋順序編號(hào)。②以食用色素、生理鹽水、香精及白糖等為主要原料制作安慰劑,安慰劑劑型、外觀、口感與龍眼水提物基本一致。③試驗(yàn)時(shí)按納入研究時(shí)間先后順序編號(hào)拆開序號(hào)相同的密封袋,按照密封袋內(nèi)隨機(jī)分配卡發(fā)放順序號(hào)相同的一套藥物。④雙盲編碼由桂林醫(yī)學(xué)院不具體參加試驗(yàn)的負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)。⑤揭盲條件:試驗(yàn)過程掌握中出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)由該對象所在運(yùn)動(dòng)隊(duì)試驗(yàn)負(fù)責(zé)人向試驗(yàn)總負(fù)責(zé)人申請緊急個(gè)別揭盲,以便不良反應(yīng)的處理。全部試驗(yàn)結(jié)束,并對試驗(yàn)資料進(jìn)行整理和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后,由總負(fù)責(zé)人主持,所有試驗(yàn)運(yùn)動(dòng)隊(duì)負(fù)責(zé)人參加全部對象揭盲。1.2.3人體試驗(yàn)的方法在人體試驗(yàn)時(shí),實(shí)驗(yàn)組每天早晚各服龍眼水提物1服,對照組服用等量安慰劑,連續(xù)服用30天,直至訓(xùn)練結(jié)束。1.2.4對復(fù)方中藥抗疲勞效果和其他營養(yǎng)的影響對人體受試者試驗(yàn)前測定運(yùn)動(dòng)力竭時(shí)間,并采用放免法運(yùn)動(dòng)后血清睪酮、皮質(zhì)醇以及生化指標(biāo)LDH和BUN;訓(xùn)練期間,兩組采用相同的負(fù)荷量,教練員的訓(xùn)練手段和方法一致且相對較穩(wěn)定,在此期間受試者應(yīng)避免服用可能對復(fù)方中藥抗疲勞液抗疲勞作用有影響的其他營養(yǎng)品。試驗(yàn)最后一次訓(xùn)練后即刻再復(fù)查上述指標(biāo)。安全性觀察指標(biāo):包括不良反應(yīng),血常規(guī)、大便常規(guī)、小便常規(guī),肝功能腎功能。1.2.5統(tǒng)計(jì)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x—±sx—±s表示,用配對資料的t檢驗(yàn),P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2運(yùn)動(dòng)員用藥前后力竭運(yùn)動(dòng)情況一般資料統(tǒng)計(jì)結(jié)果(見表1)納入研究對象一般資料及測試資料逐項(xiàng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,試驗(yàn)組與對照組年齡、身高、體重、訓(xùn)練年限及運(yùn)動(dòng)項(xiàng)目分布之間的差別均無顯著性意義,說明組間具有可比性。運(yùn)動(dòng)員在服藥前、后進(jìn)行力竭運(yùn)動(dòng)的時(shí)間(見表2)實(shí)驗(yàn)組運(yùn)動(dòng)員在服藥后至力竭的時(shí)間顯著延長,而對照組則沒有變化。運(yùn)動(dòng)員血清檢測結(jié)果(見表3)與實(shí)驗(yàn)前相比,用藥后試驗(yàn)組運(yùn)動(dòng)員血清睪酮水平提高、皮質(zhì)醇以及LDH和BUN顯著減少,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而對照組變化不明顯。安全性指標(biāo)治療前后檢查結(jié)果:試驗(yàn)組與對照組用藥前后血、尿、大便常規(guī),肝、腎功能檢查,均未見異常變化,全部研究對象都沒有發(fā)現(xiàn)明顯不良反應(yīng)。3討論3.1皮質(zhì)醇的作用睪酮是一種類固醇荷爾蒙,由男性的睪丸或女性的卵巢分泌,腎上腺亦分泌少量睪酮。睪酮可能影響許多身體系統(tǒng)和功能,生理功能包括:紅細(xì)胞的生成,體內(nèi)鈣平衡,骨鈣化作用,影響脂代謝,糖代謝和前列腺增長。由于運(yùn)動(dòng)員在訓(xùn)練時(shí)物質(zhì)分解代謝大于合成代謝,訓(xùn)練后恢復(fù)期內(nèi)的合成代謝就特別重要。因此,大運(yùn)動(dòng)量后血睪酮的水平的穩(wěn)定是運(yùn)動(dòng)員保持良好的機(jī)能狀態(tài)的前提之一。但是如果人為直接注射睪酮,往往會(huì)帶來很多的副作用,故睪酮作用興奮劑被禁用。而皮質(zhì)醇是腎上腺皮質(zhì)分泌的一種糖皮質(zhì)激素,在操縱情緒和健康、免疫細(xì)胞和炎癥、血管和血壓間聯(lián)系,以及維護(hù)締結(jié)組織(例如骨骼、肌肉和皮膚)等方面具有特別重要的功效。壓力狀態(tài)下,皮質(zhì)醇一般會(huì)維持血壓穩(wěn)定和控制過度發(fā)炎。同時(shí)它能增強(qiáng)肝內(nèi)糖異生有關(guān)酶的活性,使糖異生過程加強(qiáng),提高血壓、血糖水平,導(dǎo)致肌肉和血中乳酸的水平上升;身體應(yīng)激時(shí)皮質(zhì)醇大量分泌,其許多作用與睪酮相反。研究中同時(shí)發(fā)現(xiàn)對照組運(yùn)動(dòng)員皮質(zhì)醇仍維持在一定水平,而服藥組運(yùn)動(dòng)員皮質(zhì)醇水平明顯下降,這提示龍眼水提物可能抑制皮質(zhì)醇的過度合成與分泌。3.2對肉中氨基酸的代謝劇烈運(yùn)動(dòng)將導(dǎo)致機(jī)體相對缺氧,葡萄糖有氧氧化不能滿足機(jī)體的能量需求,糖酵解作用加快,進(jìn)而產(chǎn)生大量的乳酸。乳酸濃度增加導(dǎo)致肌肉組織內(nèi)H+濃度上升,pH值下降。而肌肉組織的pH值降低可抑制Ca2+結(jié)合肌鈣蛋白C,降低活化橫橋數(shù)目及活動(dòng)性,抑制肌漿網(wǎng)對Ca2+重吸收及Ca2+釋放,是導(dǎo)致疲勞產(chǎn)生的一個(gè)主要方面。同時(shí),蛋白質(zhì)及氨基酸的分解代謝加強(qiáng),而尿素氮是人體蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物。氨基酸脫氨基產(chǎn)生NH3和CO2,兩者在肝臟中合成尿素,每克蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生尿素0.3。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,龍眼水提物可以明顯降低運(yùn)動(dòng)后血清中乳酸的含量,加快運(yùn)動(dòng)員體內(nèi)尿素氮的清除,提示其可以改善運(yùn)動(dòng)員有氧供能的能力,維持細(xì)胞膜的完整性,從而可以提高機(jī)體的耐力。4降、抑制運(yùn)動(dòng)后皮質(zhì)醇的合成綜上