早期不明原因自然流產患者氧化應激和炎癥反應產物水平的研究

早期不明原因自然流產患者氧化應激和炎癥反應產物水平的研究

近年來，早期自然流產的發(fā)病率有所增加。許多患者已發(fā)展為復發(fā)性流產，嚴重影響了女性的身心健康。氧化應激與炎癥學說成為產科領域近幾年來的研究熱點。也有研究表明氧化應激和炎癥反應參與了血管內皮的損傷,而血管形成與胚胎良好血供是早期胚胎著床及妊娠成功的關鍵。本研究檢測正常妊娠及不明原因早期自然流產患者血漿8-異前列腺素(8-isoprostane)等氧化應激產物和高敏C-反應蛋白(high-sensitiveC-reactiveprotein,hs-CRP)等炎癥標志物的變化,研究氧化應激與炎癥反應在早期妊娠不明原因流產發(fā)病中的作用。1數據和方法1.1然保持了20例,年齡已20歲選擇2008年12月至2010年12月在我院就診,以B超確診,排除生殖器官解剖異常、內分泌、遺傳、全身及生殖泌尿等顯性感染等因素,考慮為早期不明原因自然流產患者(流產組),共40例,年齡21～32歲,孕周為8～10周;同期選取門診正常早孕要求人工流產的婦女(正常早孕組)35例,年齡22～31歲,孕周為孕8～10周以及健康非孕婦女(健康非孕組)20例,年齡21～35歲,作為對照。兩對照組婦女均排除肝、腎疾患史及免疫性疾病史,且至少有一次正常足月分娩史,現無宮內感染及其他臨床發(fā)熱征象,無自然流產、死胎、死產史。全部研究對象在收集標本前未接受任何藥物治療,在受檢前1個月內均無急性病史。1.2免疫酶分析方法空腹8～12h后于清晨(流產組和正常早孕組均于治療前)取肘靜脈血5mL,分離血漿置-70℃保存待檢。8-isoprostane采用特異性的免疫酶分析方法測量,丙二醛(MDA)以硫代巴比妥酸反應產物比色法檢測,氧化修飾低密度脂蛋白(ox-LDL)用ELISA法測定,白細胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)用ELISA法測定,hs-CRP用透射免疫比濁法測定,所有操作嚴格按試劑盒說明進行。1.3氧化應激產物與炎癥反應產物的相關性數據以xˉ±sxˉ±s表示,組間比較采用t檢驗,氧化應激產物與炎癥反應產物的關系采用直線相關分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。2結果2.1學意義整體觀念法血漿8-isoprostane、ox-LDL流產組明顯高于兩對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01,P<0.05);而MDA在流產組也高于對照組,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);正常早孕組8-isoprostane、MDA、ox-LDL高于健康非孕組,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表1。2.2差異有統(tǒng)計學意義流產組炎癥反應產物hs-CRP、IL-6和TNF-α水平均高于正常早孕組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05,P<0.01);流產組3者的水平也高于健康非孕組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05,P<0.01);而正常早孕組也高于健康非孕組,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表2。2.3ox-ldl與hs-crp、il-6、tnf-的相關性相關分析表明,流產組血漿8-isoprostane水平與hs-CRP、IL-6、TNF-α呈正相關(分別為r=0.897,r=0.864,r=0.766,均P<0.05);ox-LDL也與hs-CRP、IL-6、TNF-α呈正相關(分別為r=0.434,r=0.412,r=0.402,均P<0.05);而MDA與hs-CRP、IL-6、TNF-α無相關性(分別為r=0.198,r=0.201,r=0.109,均P>0.05)。3討論3.1正常早孕患者血漿炎癥反應變化氧化應激就是指體內氧化與抗氧化作用失衡,傾向于氧化,進而激活或損傷內皮細胞。孕早期囊胚在著床后早期,絨毛滋養(yǎng)細胞侵入母體子宮螺旋動脈管腔,使其轉化為低阻力松弛管腔,閉合了螺旋動脈,限制了母體血液流入胎盤。因此,胎盤在一個低氧環(huán)境中發(fā)育,從而使分化細胞免受大劑量活性氧損傷而受到保護,同時胎盤組織抗氧化作用也隨之增強。因此,正常妊娠期氧化和抗氧化作用保持相對平衡,不會產生氧化應激。我們檢測正常早期妊娠外周血中氧化應激產物MDA、ox-LDL、8-isoprostane,發(fā)現正常早孕組上述3種產物均高于健康非孕組,但差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05);且正常早孕組上述3種產物均低于早孕流產組,其中ox-LDL、8-isoprostane差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.05),MDA差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);表明正常早期妊娠期存在氧化應激,但維持在較低水平,氧化和抗氧化作用保持相對平衡,使妊娠得以繼續(xù)。炎癥反應是指患者無全身或局部顯性感染征象,但是存在低水平、持續(xù)的炎癥狀態(tài),表現為炎癥因子如hs-CRP、IL-6、TNF-α等輕度升高。CRP主要是肝臟在IL-1和IL-6刺激下產生的,是反映全身炎癥反應的敏感標志物。隨著一些高靈敏度檢測方法的出現,低水平的CRP亦可被檢測出來,因此被稱為hs-CRP。IL-6是一種糖蛋白,主要由淋巴細胞及單核巨噬細胞分泌,是一種重要的促炎因子,有廣泛的生物學作用,它可誘導B細胞分化并產生免疫球蛋白,促進T細胞增殖生長等。TNF-α是一種多肽類物質,主要由單核巨噬細胞產生,參與機體多種生理與免疫過程的重要介質,IL-6與TNF-α在妊娠、分娩及胎兒生長發(fā)育中均具有重要作用。我們的研究發(fā)現,35例正常早孕患者血漿TNF-α、hs-CRP、IL-6的水平均高于健康非孕組,但差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05),表明正常早期妊娠期存在炎癥反應;但自然流產患者血漿TNF、hs-CRP、IL-6的水平均高于正常早孕組和健康非孕組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.01),表明正常早期妊娠期炎癥反應維持在較低水平,對調節(jié)胎盤組織的正常生長和功能發(fā)揮,參與正常妊娠的維持起著一定的作用。3.2早期妊娠合并心臟病理變化的機制我們發(fā)現,炎癥標志物與氧化應激產物在早期妊娠流產中均顯著升高,盡管MDA與hs-CRP、TNF-α、IL-6無明顯相關性,但炎癥標志物hs-CRP、TNF-α、IL-6與氧化應激標志物8-isoprostane、ox-LDL均具有相關性,說明早期流產同時存在氧化應激與炎癥反應,且二者相關性好。據文獻和以上研究結果,我們認為,炎癥和氧化應激反應在早期妊娠流產的發(fā)生發(fā)展中可能起如下作用:受炎癥刺激物作用和氧化應激產物8-isoprostane、ox-LDL刺激,一方面,TNF-α吸引中性粒細胞、單核細胞向損傷區(qū)域聚集,釋放炎癥介質;TNF-α、IL-6刺激肝臟產生CRP,并誘導巨噬細胞、血管內皮細胞產生并釋放一氧化氮、中性粒細胞產生大量氧自由基,導致白細胞侵潤、炎癥產物CRP沉積和氧自由基聚集,又使體內過氧化反應得到增強;另一方面,TNF-α抑制脂蛋白脂肪酶活性,導致脂質代謝異常;同時8-isoprostane、ox-LDL也是炎癥過程潛在的誘導劑,它直接損傷巨噬細胞、內皮細胞表達黏附分子、細胞因子、促炎因子及其它炎癥反應的中介物,這些細胞因子之間也可以互相誘生形成復雜的網絡體系,共同促進炎癥進程;內皮細胞還通過上調其表面黏附分子促進白細胞的附壁和黏附,