免疫思考題及參考答案

1、試述NK細(xì)胞對靶細(xì)胞的殺傷途徑及分子機制?答：（1）穿孔素/顆粒酶途徑：即抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性（ADCC）。顆粒酶與穿孔素一起貯存于NK細(xì)胞的胞漿顆粒中，NK細(xì)胞借助其FcrRⅢ與結(jié)合于靶細(xì)胞上的IgGFc段結(jié)合，活化的NK細(xì)胞可釋放穿孔素與顆粒酶，其中穿孔素可發(fā)揮類似補體膜攻擊復(fù)合物的功效，在有鈣離子存在的條件下，可在靶細(xì)胞膜上形成“孔道”，使細(xì)胞膜的通透性增加，使水電解質(zhì)快速進(jìn)入胞內(nèi)至靶細(xì)胞崩解破壞。顆粒酶是一種絲氨酸蛋白酶，可循穿孔素形成的“孔道”進(jìn)入靶細(xì)胞內(nèi)，通過激活凋亡有關(guān)的酶系統(tǒng)造成細(xì)胞凋亡。（2）Fas/FasL途徑：Fas分子也稱為APO－1或CD95，屬于Ι型跨膜糖蛋白，F(xiàn)asL是Ⅱ型跨膜糖蛋白,當(dāng)FasL與Fas結(jié)合時，F(xiàn)as能夠向細(xì)胞傳遞“死亡信號”，數(shù)小時內(nèi)細(xì)胞凋亡。Fas的凋亡信號重要是通過與其胞漿區(qū)有關(guān)的死亡構(gòu)造域蛋白（FADD）介導(dǎo)的?；罨驨K細(xì)胞（FasL）＋靶細(xì)胞（Fas）→形成Fas三聚體→胞漿內(nèi)的死亡構(gòu)造域相聚成簇→與Fas有關(guān)死亡構(gòu)造域蛋白結(jié)合→募集和激活caspase8→caspase8級聯(lián)反映造成靶細(xì)胞凋亡。具體為：Fas與FasL結(jié)合后，受體發(fā)生多聚化，胞漿區(qū)的死亡構(gòu)造域蛋白（DD）也發(fā)生多聚化，使得位于胞漿內(nèi)的FADD能夠通過其C端的DD與受體胞漿的DD結(jié)合。FADD首先通過C端的DD結(jié)合Fas，另首先通過N端的死亡反映構(gòu)造域（DEM）與caspase－8N端的DEM結(jié)合，通過caspase－8誘導(dǎo)效應(yīng)性caspase蛋白酶的激活，降解本身的DEM并最后造成細(xì)胞凋亡的發(fā)生。（3）TNF-α/TNFR-1途徑：NK細(xì)胞能夠分泌細(xì)胞因子TNF-α，TNF通過①變化靶細(xì)胞溶酶體的穩(wěn)定性，造成多個水解酶外漏；②影響細(xì)胞膜磷脂代謝；③變化靶細(xì)胞糖代謝使組織中pH減少；④以及活化靶細(xì)胞核酸內(nèi)切酶，降解基因組DNA從而引發(fā)程序性細(xì)胞死亡等機理殺傷靶細(xì)胞。環(huán)節(jié)為：TNF-α＋靶細(xì)胞（I型TNF受體）結(jié)合→形成TNF-R三聚體→胞漿內(nèi)的死亡構(gòu)造域相聚成簇→激活caspase8→造成靶細(xì)胞凋亡。（4）抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCC）：NK細(xì)胞體現(xiàn)的FcγRⅢA(CD16)重要結(jié)合人的IgG1和IgG3的Fc端（Cγ2、Cγ3功效區(qū)），在針對靶細(xì)胞特異性IgG抗體的介導(dǎo)下，可殺傷對應(yīng)的靶細(xì)胞，這一殺傷過程稱為抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。IL-2和IFN-γ明顯增強NK細(xì)胞介導(dǎo)的ADCC作用。NK細(xì)胞發(fā)揮ADCC后，其本身體現(xiàn)Fas并可通過Fas/FasL機制發(fā)生化活誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。2、試述腫瘤免疫治療的辦法有哪些？簡述其原理？答：腫瘤免疫治療是指通過激發(fā)和增強及機體的免疫功效，以達(dá)成控制和殺傷腫瘤細(xì)胞的目的。根據(jù)機體抗腫瘤免疫效應(yīng)機制，腫瘤免疫治療可分為:(1)非特異性免疫治療:是指應(yīng)用某些免疫調(diào)節(jié)劑通過非特異性地增強機體的免疫功效,激活機體的抗腫瘤免疫應(yīng)答,以達(dá)成治療腫瘤的目的。例如：卡介苗、某些細(xì)胞因子如IL-2等均屬于這類。（2）主動免疫治療：是指給機體輸入含有抗原性的瘤苗，運用腫瘤抗原的免疫原性，采用多個有效手段使宿主免疫系統(tǒng)產(chǎn)生針對腫瘤抗原的抗腫瘤免疫應(yīng)答以治療腫瘤的辦法。該法應(yīng)用的前提是宿主的免疫功效狀態(tài)即腫瘤抗原能刺激機體產(chǎn)生免疫反映。具體做法是給荷瘤宿主注射含有免疫原性的瘤苗，也有使用已在體外被已知腫瘤抗原或腫瘤細(xì)胞甚至腫瘤組織裂解物所致敏的樹突狀細(xì)胞，即攜帶腫瘤抗原信息的“樹突狀細(xì)胞瘤苗”免疫荷瘤宿主。以期機體本身主動產(chǎn)生抗腫瘤的適應(yīng)性免疫應(yīng)答。達(dá)成治療腫瘤的目的。此種辦法對地手術(shù)后去除微小的轉(zhuǎn)移瘤灶和隱匿瘤、防止腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有較好的應(yīng)用效果。（3）被動免疫治療：是指直接給機體輸注外源的免疫效應(yīng)物質(zhì)，由這些外源性效應(yīng)物質(zhì)在機體內(nèi)發(fā)揮治療腫瘤作用。重要有下列兩大類：抗腫瘤導(dǎo)向治療，運用高度特異性的單克隆抗體為載體，將細(xì)胞毒性的殺傷分子帶到腫瘤病灶處，可特異地殺傷腫瘤細(xì)胞；過繼免疫療法，是取對腫瘤有免疫力的供者淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)輸給腫瘤者，或取患者本身的免疫細(xì)胞在體外活化、增殖后，再轉(zhuǎn)輸入患者體內(nèi)，使其在患者體內(nèi)發(fā)揮腫瘤作用。，針對機體腫瘤的特異性外源的免疫效應(yīng)物質(zhì)涉及：抗體、細(xì)胞因子、免疫效應(yīng)細(xì)胞等，由這些外源性的免疫效應(yīng)物質(zhì)在宿主體內(nèi)發(fā)揮抗腫瘤作用。該辦法不依賴于機體本身的免疫功效狀態(tài)。3、試述腫瘤干細(xì)胞的靶向治療手段有哪些？簡述其原理？答：（1）干擾腫瘤干細(xì)胞（CSC）傳導(dǎo)通路即克制腫瘤細(xì)胞表面信號通路的活化：如Wnt通路、Hedgehog傳導(dǎo)通路、Norch傳導(dǎo)通路、ＮＦ－κＢ通路等，這些通路多與腫瘤干細(xì)胞的生長、增殖、自我更新、逃逸凋亡等親密有關(guān)。（2）針對CSC特定基因的治療：在CSC中特定基因的體現(xiàn)或沉默對CSC的增殖、凋亡含有調(diào)控作用，靶向作用于這些基因，變化其體現(xiàn)，能夠克制CSC生長或誘導(dǎo)其凋亡。（3）針對表面標(biāo)志物的靶向治療：針對CSC表面存在某些特異性的標(biāo)志物如CD34、CD133等，以這些標(biāo)志物為靶點對其進(jìn)行殺傷，此為CSC的靶向治療又提供了一種切實可行的途徑。（4）針對CSC微環(huán)境的治療：CSC微環(huán)境在CSC的生長增殖過程中起著重要作用，首先它為CSC提供充足的營養(yǎng)和調(diào)控生長分化的多個因子，另首先它也為CSC抵抗外界損害提供了有利的屏障。微環(huán)境對維持CSC自我更新及異質(zhì)性含有重要調(diào)節(jié)功效,在正常干細(xì)胞中,微環(huán)境通過提供克制信號、克制增殖和分化來保持干細(xì)胞的本身穩(wěn)態(tài)、克制腫瘤的形成，同時提供短暫的信號增進(jìn)干細(xì)胞的增殖、支持受損組織的再生。一旦克制增殖和分化的信號與短暫增進(jìn)增殖的信號之間的平衡被打破，干細(xì)胞就會轉(zhuǎn)化為CSC增進(jìn)腫瘤的形成。干擾微環(huán)境和破壞其賴以生存的物質(zhì)基礎(chǔ)，能夠有效地克制CSC，還能夠提高他治療辦法的療效。（5）誘導(dǎo)CSC分化的治療：,因CSC含有較強的自我更新和分化的潛能，可通過人為誘導(dǎo)CSC分化，使之轉(zhuǎn)化為腫瘤終末細(xì)胞，即正常的或不分裂的細(xì)胞從而克制腫瘤的生長，既能避免進(jìn)一步增殖，同時又增加了放化療敏感性?，F(xiàn)在雖只處在構(gòu)想階段，但也不失為一種可能的腫瘤治療途徑。如全反式維甲酸作為分化誘導(dǎo)劑治療急性早幼粒細(xì)胞白血病是一種成功的范例。。4、試述異常體現(xiàn)的共刺激分子在本身免疫病發(fā)生機制中可能的作用？如何通過共刺激分子對本身免疫疾病進(jìn)行輔助診療和治療？答：共刺激分子可大致分為“正性協(xié)同刺激分子”和“負(fù)性協(xié)同刺激分子”，兩者的異常體現(xiàn)與本身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展親密有關(guān)。其中“正性協(xié)同刺激分子”的異常增高體現(xiàn)可造成機體免疫功效平衡的失調(diào)，打破本身耐受，造成本身免疫性疾病?！柏?fù)性協(xié)同刺激分子”介導(dǎo)的克制信號在維持免疫耐受中發(fā)揮著核心性作用，其缺失造成本身耐受性的變化是也是本身免疫病的致機制之一。另外協(xié)同刺激分子體現(xiàn)異常，造成免疫系統(tǒng)紊亂可至T、B細(xì)胞的異?；罨?，也是影響本身免疫病發(fā)生的重要因素。共刺激分子有助于本身免疫性疾病的輔助診療：如可通過檢測共刺激分子的體現(xiàn)狀況（如檢測CD4+CD28-T細(xì)胞比例、CD4+T細(xì)胞上OX40和ICOS體現(xiàn)）來輔助診療何種本身免疫性疾病。另首先通過檢測共刺激分子體現(xiàn)水平，還能夠用于判斷疾病嚴(yán)重程度，從而指導(dǎo)臨床用藥等。另外檢測治療前后共刺激分子體現(xiàn)率變化可提示治療效果及復(fù)發(fā)幾率。共刺激分子還可有助于本身免疫性疾病的治療，如共刺激分子“OX40”分子只體現(xiàn)在炎癥部位的抗原特異性T細(xì)胞上，若只針對OX40/OX40L進(jìn)行的治療，則治療效應(yīng)只會作用于這群T細(xì)胞，而不會影響其它外周T細(xì)胞的功效，從而大大減少了治療所引發(fā)的副作用。5、試述維持造血干細(xì)胞增殖及分化的辦法？答：維持造血干細(xì)胞增殖及分化普通需滿足以下條件。（1）基質(zhì)細(xì)胞：造血干細(xì)胞的長久維持與造血微環(huán)境的基質(zhì)細(xì)胞是分不開的，體外擴(kuò)增會使造血細(xì)胞分化，造成HSPC造血重建能力削弱，基質(zhì)細(xì)胞支持下的擴(kuò)增體系可減輕這一副作用?；|(zhì)細(xì)胞的作用：①造血干細(xì)胞的長久維持與造血微環(huán)境②增強擴(kuò)增后細(xì)胞的歸巢與植入能力。③減少分化、抗凋亡。（2）培養(yǎng)基：血清是良好的天然培養(yǎng)液，但血清成分復(fù)雜、變異大，增加了實驗的不擬定因素，特別動物血的基質(zhì)細(xì)胞是分不開的，在培養(yǎng)體系中加入基質(zhì)細(xì)胞能夠發(fā)揮三個方面的重要作用：支持HSPC的體外擴(kuò)增。清存在動物攜帶病原體傳染人類的隱患以及異種蛋白免疫原性，現(xiàn)多主張使用無血清培養(yǎng)基，研究表明無血清、無基質(zhì)的培養(yǎng)體系配合多個細(xì)胞因子也能支持臍血HSPC的體外擴(kuò)增，擴(kuò)增后的細(xì)胞能成功地植入到亞致死量照射的NOD/SCID鼠內(nèi)并維持了長久造血的能力。（3）造血細(xì)胞因子組合：至今最佳的細(xì)胞因子組合尚未擬定，抱負(fù)的HSPC移植物應(yīng)當(dāng)是由HSC及定向HPC共同構(gòu)成的混合體，擴(kuò)增應(yīng)關(guān)注維持HSC質(zhì)與量的最佳