高效液相色譜法測定食品添加劑環(huán)已基氨基磺酸鈉中氨基磺酸的

高效液相色譜法測定食品添加劑環(huán)已基氨基磺酸鈉中氨基磺酸的殘留量陳妙蘭、蔡佳梓、李燕華(廣東省江門市質(zhì)量計量監(jiān)督檢測所郵編：529000)[摘要]目的：建立高效液相色譜法定量測定食品添加劑環(huán)已基氨基磺酸鈉中氨基磺酸的殘留量的方法。方法:采用C18色譜柱，流動相為5%乙腈：95%磷酸二氫銨(20mmol/L)，流速為0.5mL/min，檢測波長為210nm，進樣容積為10"L，柱溫為25°C。結(jié)果：氨基磺酸在0.02g/L?0.30g/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.9998(n=6)；氨基磺酸平均回收率為90.20%~94.00%。結(jié)論:高效液相色譜法準(zhǔn)確、可靠、重復(fù)性好，檢測方便。可用于食品添加劑環(huán)已基氨基磺酸鈉中氨基磺酸的殘留量定量測定。[關(guān)鍵詞]環(huán)已基氨基磺酸鈉；氨基磺酸；高效液相色譜法[Abstract]Objective:Toestablishamethodtoquantitativedeterminetheaminosulfonicacidresiduesfromsodiumcyclohexylaminosulfonicoffoodadditivesbyhighperformanceliquidchromatographymethod.Method:C18chromatographycolumn,flowphaseis5%acetonitrile:95%ammoniumdihydrogenphosphate(20mmol/L),flowrateis0.5mL/min,detectionwavelengthis210nm,samplingvolumeis10/L,columntemperatureis25C.Result:Aminosulfonicacidkeepslinearrelationshipin0.02g/L?0.30g/Lrange,r=0.9998(n=6);Averagerecoveryrateofaminosulfonicacidis90.20%?94.00%.Conclusions:high-performanceliquidchromatographicmethodisaccurate,reliable,andrepeatability,easyformeasurement,andcanbeusedforquantitativedeterminationofaminosulfonicacidresiduesinfoodadditivessodiumcyclohexylaminosulfonic.[Keywords]sodiumcyclohexylaminosulfonic;aminosulfonicacid;highperformanceliquidchromatography氨基磺酸的分子式為NH2S03H。市售商品為白色粉末，在常溫下，比較穩(wěn)定。氨基磺酸的水溶液具有與鹽酸、硫酸等同等的強酸性，故別名又叫固體硫酸，它具有不揮發(fā)、無臭味的特性。氨基磺酸主要用于工業(yè)鍋爐和民用鍋爐的除垢劑等；而食品級(高純度)的氨基磺酸也是生產(chǎn)食品添加劑環(huán)已基氨基磺酸鈉的重要原料之一［1］，主要以環(huán)己胺為原料，氨基磺酸化合成環(huán)己基氨基磺酸后與氫氧化鈉作用而制得的環(huán)己基氨基磺酸鈉(甜蜜素)，作食品甜味劑使用。由于氨基磺酸對上呼吸道有刺激性；受熱分解，放出氮、硫的氧化物等毒性氣體，已有一些實驗室監(jiān)測方法。但目前國內(nèi)文獻中極少有關(guān)食品添加劑環(huán)已基氨基磺酸鈉中氨基磺酸的殘留量方面的資料，也沒有使用精密儀器進行微量分析的經(jīng)驗。只在GB12488-2008中7.13中有氨基磺酸殘留量的檢測方法，該方法主要是采用薄層色譜法定性試驗［2］。該方法的試劑前處理繁瑣，試驗結(jié)果效果不顯著。本文采用高效液相色譜法測定對食品添加劑環(huán)已基氨基磺酸鈉中氨基磺酸的殘留量，該方法準(zhǔn)確、可靠、重復(fù)性好，檢測方便。儀器與試劑儀器BSA224S-CW型電子天平：Sartorius公司；Agilent1200高效液相色譜儀

(美國安捷倫公司)，配G1315D紫外檢測器；色譜柱(Kinetex,C18,100x4.

6mm,2.6”);酸度計(METTLERTOLEDO);超純水機(Miniporesynergy)試劑本方法所有試劑均為市售，未作進一步純化處理，其中氨基磺酸，磷酸二氫銨和磷酸為分析純，乙腈為色譜純，試驗用水為超純水。20mmol/L磷酸二氫銨溶液。1.2.2磷酸溶液(1mol/L):在500mL水中加入53.5mL磷酸，混勻后加水定容至1000mL。1.2.3標(biāo)準(zhǔn)儲備液：稱取氨基磺酸0.10g，用超純水溶解后，定容至50mL。標(biāo)準(zhǔn)使用液:取20.00mL標(biāo)準(zhǔn)儲備液于100mL容量瓶中，用超純水稀釋到刻度,濃度為0.4g/L。精密吸取標(biāo)準(zhǔn)使用液(0.4g/L)0.5,1.020,5.0,7.5mL分別置于5個10mL棕色容量瓶中,用超純水稀釋至刻度,混勻，濃度分別為0.02g/L、0.04g/L、0.08g/L、0.20g/L、0.30g/L。方法與結(jié)果樣品配制樣品溶液制備：稱取樣品5.00g，超純水溶解后，用1mol/L磷酸調(diào)至pH=2.10，再定容至100mL，搖勻待測。色譜條件:C18色譜柱：Kinetex,100x4.6mm,2.6p;流動相：乙腈：20mmol/L磷酸二氫銨(用1mol/L磷酸調(diào)至pH=2.10)=5:95;流速：0.5mL/min；柱溫:25°C;檢測波長：210nm；結(jié)果2.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：濃度分別為0.02g/L、0.04g/L、0.08g/L、0.20g/L、0.30g/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液依次進樣10pL,按2.2的色譜條件,以峰面積為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)進行線性回歸,得回歸方程為：A=13211.26c+21.55(n=6),r=0.99984。標(biāo)準(zhǔn)物氨基磺酸(0.04g/L)的圖譜如下(圖1):對照標(biāo)準(zhǔn)溶液HPLC圖譜在0.02g/L~0.30g/L濃度范圍內(nèi)，氨基磺酸的濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系。2.3.2檢出限：檢出限按下式進行計算:檢出限二S二3Nbb式中:S---最底相應(yīng)值;b---標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程中的斜率，響應(yīng)值/pg或響應(yīng)值/ng;N---為儀器噪音的3倍，即儀器能辨認(rèn)的最小的物質(zhì)信號。在采用高效液相色譜法測定食品添加劑環(huán)已基氨基磺酸鈉中氨基磺酸殘留量的方法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制色譜中得回歸方程為:A=13211.26c+21.55(n=6),r=0.99984由上述可得b=0.99950,S=0.002g/L為最底響應(yīng)值其檢出限為2ppm。

氨基磺酸(0.002g/L)圖譜如下(圖3):從色譜圖可以發(fā)現(xiàn)，用液相檢測氨基磺酸的峰形比較理想。加標(biāo)回收:通過對樣品環(huán)已基氨基磺酸鈉的加標(biāo)實驗來驗證該處理方案的可行性，加標(biāo)濃度分別為0.05g/L、0.10g/L、0.20g/L，獲得了較理想的回收率，結(jié)果詳見表1。表1:加標(biāo)實驗數(shù)據(jù)樣品本底值(g/L)加入量(g/L)測得量(g/L)回收率(％)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD%)0.020.05000.066092.000.6100.065691.200.065190.200.050.10000.142392.310.5950.143193.100.144094.000.050.20000.233592.750.8230.231790.850.233091.50由表1中看其回收率在90.20%~94.00%的范圍，通過以上試驗表明，用高效液相色譜法定量測定食品添加劑環(huán)已基氨基磺酸鈉中氨基