21 生物化學(xué)習(xí)題與解析--常用分子生物學(xué)技術(shù)的原理及其應(yīng)用

1、常見(jiàn)分子生物學(xué)技術(shù)的原理及應(yīng)用首先，選擇題(一)甲類(lèi)問(wèn)題1.分子雜交實(shí)驗(yàn)不能用于A.單鏈脫氧核糖核酸和核糖核酸分子之間的雜交C.單鏈核糖核酸分子之間的雜交E.抗原和抗體分子之間的雜交2.關(guān)于探針的錯(cuò)誤說(shuō)法是A.帶有特殊標(biāo)記的核酸片段必須是雙鏈的基因組DNA片段抗體3.下列哪種物質(zhì)不能用作探針A.基因片段、cdna、蛋白質(zhì)、氨基酸、核糖核酸片段4.壓印技術(shù)可分為A.蛋白質(zhì)印跡蛋白質(zhì)印跡蛋白質(zhì)印跡蛋白質(zhì)印跡斑點(diǎn)印跡所有上述都是正確的5.聚合酶鏈反應(yīng)實(shí)驗(yàn)的延伸溫度一般為a .90 B . 72 C . 80 D . 95 E . 60 6.蛋白質(zhì)印跡中的探針是A.單鏈脫氧核糖核酸抗體雙鏈脫氧核糖核酸

2、7.北方印跡與南方印跡的不同之處在于A.不同的基本原則。沒(méi)有限制酶消化。探針必須是核糖核酸D.探針必須是通過(guò)毛細(xì)管作用轉(zhuǎn)移的8.您可以將樣品直接點(diǎn)在NC膜上進(jìn)行雜交分析，無(wú)需電泳分離A.斑點(diǎn)雜交原位雜交技術(shù)E.蛋白質(zhì)印跡9.下列哪種物質(zhì)不能用作聚合酶鏈反應(yīng)的模板A.核糖核酸單鏈脫氧核糖核酸cdna蛋白質(zhì)雙鏈脫氧核糖核酸10.逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)不涉及的是A.探針B. cdna C .逆轉(zhuǎn)錄酶d .核糖核酸e .脫氧核糖核酸11.關(guān)于聚合酶鏈反應(yīng)的基本成分?jǐn)⑹鲥e(cuò)誤是A.特異性引物b .熱穩(wěn)定的脫氧核糖核酸聚合酶c .脫氧核糖核酸聚合酶D.含有鋅模板的緩沖液12.不需要脫氧核糖核酸鏈末端合成終止方法

3、A.脫氧核糖核酸聚合酶模板13.cdna文庫(kù)的構(gòu)建是不必要的A.提取基因b .用限制性內(nèi)切酶切割基因c .反轉(zhuǎn)錄合成基因?qū)DNA克隆到質(zhì)?；蚴删w中，用重組載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞14.標(biāo)簽蛋白沉淀是A.基于親和層析原理的蛋白質(zhì)相互作用研究技術(shù)C.常用的標(biāo)簽是谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶。它也可以是6組氨酸標(biāo)簽。以上都是正確的15.染色質(zhì)環(huán)境中蛋白質(zhì)與DNA相互作用的研究技術(shù)A.標(biāo)記蛋白沉淀b .酵母雙雜交c .凝膠遷移和變化實(shí)驗(yàn)d .染色質(zhì)免疫沉淀e .噬菌體展示篩選系統(tǒng)16.整個(gè)動(dòng)物克隆技術(shù)也被稱為A.轉(zhuǎn)基因技術(shù)基因滅活技術(shù)核轉(zhuǎn)移技術(shù)基因敲除技術(shù)E.基因轉(zhuǎn)移技術(shù)17.目前，主要克隆的致病基因有A.糖尿病致病

4、基因b .惡性腫瘤致病基因c .單基因致病基因D.多基因致病基因18.基因疫苗主要指A.核酸疫苗核酸疫苗反義核酸核酶小干擾核酸19.目前，基因治療中最廣泛使用的基因載體有A.噬菌體b .脂質(zhì)體c .逆轉(zhuǎn)錄病毒d .腺病毒相關(guān)病毒e .腺病毒20.目前，基因治療中使用的方法有A.基因補(bǔ)充；基因替換；基因糾正；基因滅活；基因疫苗(二)乙類(lèi)問(wèn)題a .南方印跡c .蛋白質(zhì)印跡原位雜交1.不需要電泳、薄膜轉(zhuǎn)移和其他程序2.電泳前不需要限制性酶消化3.通過(guò)電轉(zhuǎn)移完成生物大分子的轉(zhuǎn)移4.直接在組織切片或細(xì)胞涂片上雜交A.反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)原位聚合酶鏈反應(yīng)實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)D.多重聚合酶鏈反應(yīng)RFLP大腸桿菌5

5、.結(jié)合目標(biāo)基因的擴(kuò)增和定位6.它可以動(dòng)態(tài)檢測(cè)反應(yīng)過(guò)程中的產(chǎn)物數(shù)量7.一種結(jié)合了核糖核酸反轉(zhuǎn)錄和聚合酶鏈反應(yīng)的技術(shù)8.在同一反應(yīng)中采用多對(duì)引物A.功能性克隆；定位克隆；轉(zhuǎn)基因技術(shù)D.核轉(zhuǎn)移技術(shù)9.也稱為基因靶向失活10.在這項(xiàng)技術(shù)中，引入的目標(biāo)基因被稱為轉(zhuǎn)基因11.從基因編碼產(chǎn)物的功能認(rèn)識(shí)克隆致病基因A.基因疫苗基因矯正基因替換D.基因補(bǔ)充e .基因失活12.目前，最廣泛使用的基因治療方法有13.一種糾正致病基因異常堿基的基因治療方法14.通過(guò)體內(nèi)正?；虻耐粗亟M原位替換致病基因的基因治療方法15.一種利用特異性反義核酸阻斷變異基因異常表達(dá)的基因治療方法A.酵母雙雜交技術(shù)b .標(biāo)簽蛋白沉淀c

6、.電泳遷移率變化的測(cè)定D.染色質(zhì)免疫沉淀熒光共振能量轉(zhuǎn)換效應(yīng)分析16.凝膠塊實(shí)驗(yàn)17.需要設(shè)計(jì)誘餌基因18.近年來(lái)，這種技術(shù)與芯片技術(shù)相結(jié)合，已經(jīng)成為一種新的技術(shù)，用于鑒定特定核蛋白質(zhì)的DNA結(jié)合靶標(biāo)(3) X型問(wèn)題1.核酸探針可以是A.合成寡核苷酸片段乙。基因組脫氧核糖核酸片段丙。核糖核酸片段D.全長(zhǎng)或部分cdna片段2.可通過(guò)核酸分子雜交形成的雜交雙鏈?zhǔn)茿.脫氧核糖核酸/核糖核酸寡核苷酸/核糖核酸E.寡核苷酸/基因3.聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)主要用于A.目的基因克隆、基因體外突變、基因微區(qū)分析、基因測(cè)序、基因突變分析4.分子雜交技術(shù)的原理包括A.分子雜交特征；基因文庫(kù)；印跡技術(shù)；生物芯片；探針技術(shù)

7、5.終止脫氧核糖核酸鏈末端合成的正確方法是A.鏈終止子ddntp B. dntp需要標(biāo)記c .引物也需要標(biāo)記d .也稱為桑格法e. ddntp缺少5-羥基6.建立基因組文庫(kù)的必要性A.基因組的限制性內(nèi)切酶消化。將DNA片段克隆到相應(yīng)的載體中。通過(guò)重組質(zhì)粒感染宿主細(xì)菌。靶基因的篩選可通過(guò)核酸分子雜交進(jìn)行。以噬菌體為載體的人類(lèi)基因組DNA文庫(kù)的克隆數(shù)應(yīng)至少為10 6。7.用于構(gòu)建基因組文庫(kù)的載體如下A.酵母人工染色體粘粒噬菌體腺病毒脂質(zhì)體8.與常規(guī)診斷相比，遺傳診斷具有以下特點(diǎn)A.屬于病原學(xué)診斷。特異性強(qiáng)。適用范圍窄。靈敏度高。擴(kuò)增效果好9.基因失活的常用技術(shù)包括A.基因疫苗核酶小干擾核糖核酸反義

8、核酸基因替換10.克隆羊多莉的生產(chǎn)屬于A.同種異體細(xì)胞移植技術(shù)D.無(wú)性繁殖即異基因細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因技術(shù)11.疾病的動(dòng)物模型可用于A.探索疾病b .克隆致病基因c .篩選系統(tǒng)新的治療方法D.新藥篩選系統(tǒng)12.蛋白質(zhì)芯片主要用于A.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究；蛋白質(zhì)表達(dá)譜研究；蛋白質(zhì)功能研究D.蛋白質(zhì)間相互作用的研究疾病診斷和新藥篩選13.研究蛋白質(zhì)相互作用的技術(shù)包括A.標(biāo)簽蛋白沉淀酵母雙雜交凝膠塊實(shí)驗(yàn)D.噬菌體展示篩選系統(tǒng)14.基因治療的基本程序包括A.治療基因選擇；基因載體的選擇；靶細(xì)胞的選擇；基因轉(zhuǎn)移E.回到身體里15.目前可用于基因治療的基因載體包括A.腺病毒相關(guān)病毒b .噬菌體c .腺病毒d .逆轉(zhuǎn)錄病

9、毒e .粘粒二、對(duì)與錯(cuò)的問(wèn)題1.southern印跡主要用于核糖核酸的定性和定量分析。2.蛋白質(zhì)在蛋白質(zhì)印跡分析中的轉(zhuǎn)移可以通過(guò)電或毛細(xì)管作用進(jìn)行。3.與普通聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)相比，實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)可以動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)反應(yīng)過(guò)程中的產(chǎn)物數(shù)量。4.用桑格法測(cè)定核酸序列時(shí)，只能標(biāo)記反應(yīng)管中添加的一個(gè)脫氧核糖核酸。5.生物芯片可以是基因芯片、基因芯片或蛋白質(zhì)芯片。6.酵母雙雜交技術(shù)是分析脫氧核糖核酸蛋白質(zhì)相互作用的重要技術(shù)。7.核移植技術(shù)是指將動(dòng)物體細(xì)胞的所有細(xì)胞核引入另一個(gè)身體的卵子中，并從中去除細(xì)胞核，使其發(fā)育成個(gè)體。8.基因矯正是通過(guò)體內(nèi)同源重組將致病基因替換為正?；颍赃_(dá)到治療目的。9.目前，基因

10、治療大多采用基因補(bǔ)充。10.在northern印跡技術(shù)中，RNA分子在轉(zhuǎn)移前需要被限制性酶切割。11.聚合酶鏈反應(yīng)中的變性主要是將模板基因完全變性為單鏈。12.在實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)中，標(biāo)簽脫氧核糖核酸聚合酶在鏈延伸過(guò)程中遇到熒光探針，可以發(fā)揮3 5核酸外切酶活性。13.酵母雙雜交系統(tǒng)可以用來(lái)證明具有已知基因序列的兩種蛋白質(zhì)可以相互作用。14.轉(zhuǎn)基因技術(shù)，即動(dòng)物克隆技術(shù)，是無(wú)性繁殖。15.生殖細(xì)胞內(nèi)源性基因結(jié)構(gòu)的突變可導(dǎo)致惡性腫瘤。16.基因轉(zhuǎn)移和基因敲除技術(shù)在醫(yī)學(xué)上最重要的應(yīng)用是建立疾病的動(dòng)物模型。17.定位克隆是指從了解基因編碼產(chǎn)物的功能來(lái)克隆致病基因。18.目前，DNA序列分析是發(fā)現(xiàn)患者

11、相關(guān)基因變異所在的最直接、最準(zhǔn)確的遺傳診斷方法。第三，填空1.分子雜交是利用脫氧核糖核酸和這一基本特性對(duì)脫氧核糖核酸或核糖核酸進(jìn)行定性和定量分析。2.在印跡技術(shù)中，通過(guò)將凝膠中的生物大分子轉(zhuǎn)移到膜上，將DNA片段制成固體分子。3.壓印技術(shù)的基本流程是、和。4.Southern印跡主要用于定性和定量分析，也可用于總和分析。5.Northern印跡法主要用于檢測(cè)聚合酶鏈反應(yīng)的表達(dá)水平，其靈敏度高于聚合酶鏈反應(yīng)，但具有總和的優(yōu)點(diǎn)。6.蛋白質(zhì)印跡主要用于檢測(cè)樣品中的存在，研究細(xì)胞與其他細(xì)胞之間的相互作用。7.聚合酶鏈反應(yīng)的基本反應(yīng)步驟包括、8.基因芯片適用于分析不同的組織和細(xì)胞或同一細(xì)胞的不同狀態(tài)，其

12、原理是基于。9.在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，引入的目標(biāo)基因稱為，目標(biāo)基因的受體動(dòng)物稱為。10.標(biāo)簽融合蛋白的結(jié)合實(shí)驗(yàn)主要用于證明是否存在直接的物理結(jié)合，分析結(jié)合情況，篩選融合蛋白在細(xì)胞中的結(jié)合情況。11.染色質(zhì)免疫沉淀是研究和相互作用的主要方法。12.目前，克隆致病基因主要有兩種策略。13.根據(jù)受體細(xì)胞的不同類(lèi)型，基因治療可分為兩類(lèi)：基因治療和新基因治療。14.目前，有兩種類(lèi)型的基因載體：和。15.在人類(lèi)基因治療的實(shí)施中，有兩種方法可以引入基因。四.名詞解釋1 .調(diào)查2 .印跡技術(shù)3 .基因圖書(shū)館4.核轉(zhuǎn)移技術(shù)5 .基因芯片6 .基因治療7 .基因診斷8.基因疫苗9 .基因失活10 .基因替換11 .基因

13、擴(kuò)增12 .聚合酶鏈反應(yīng)13 .離體V.問(wèn)答問(wèn)題1.簡(jiǎn)述壓印技術(shù)的分類(lèi)和應(yīng)用。2.簡(jiǎn)述聚合酶鏈反應(yīng)系統(tǒng)的基本組成、基本反應(yīng)步驟和聚合酶鏈反應(yīng)的主要用途。3.簡(jiǎn)述聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)的基本原理。4.簡(jiǎn)述逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)、原位聚合酶鏈反應(yīng)和實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)的基本原理和主要區(qū)別。5.簡(jiǎn)述DNA鏈末端合成終止(Sanger法)測(cè)序的基本原理。6.簡(jiǎn)述基因轉(zhuǎn)移和基因敲除技術(shù)在醫(yī)學(xué)發(fā)展中的作用。7.簡(jiǎn)述酵母雙雜交技術(shù)的基本原理和應(yīng)用。8.解釋染色質(zhì)免疫沉淀的基本原理和應(yīng)用。9.簡(jiǎn)述基因診斷的概念和特點(diǎn)。10.什么是基因治療，目前基因治療的基本策略是什么？11.試著描述基因治療的基本程序。12.為了生產(chǎn)一種藥用多肽，科學(xué)家們將這種多肽的基因與真核表達(dá)質(zhì)粒進(jìn)行了重組。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，通過(guò)聚合酶鏈反應(yīng)鑒定重組表達(dá)質(zhì)粒是否含有該多肽的基因。13.請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，通過(guò)酵母雙雜交系統(tǒng)檢測(cè)從腫瘤組織中提取和純化的未知蛋白X與兩種已知蛋白A和B之間是