1.3顯微鏡的使用.ppt

1、實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡的構(gòu)造和使用一、目的要求1、了解顯微鏡的構(gòu)造及其維護(hù)2、初步掌握顯微鏡的使用方法3、了解植物細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)4、認(rèn)識(shí)紋孔和胞間連絲的形狀，并理解其功能5、學(xué)習(xí)臨時(shí)裝片技術(shù)和方法,二、實(shí)驗(yàn)用品和材料用品（以后各次實(shí)驗(yàn)基本相同）：顯微鏡、擴(kuò)大鏡、鑷子、實(shí)驗(yàn)剪、解剖針、載玻片、蓋玻片、紗布、吸水紙、單面刀片、雙面刀片、蒸餾水、番紅、碘液、70%酒精、醋酸洋紅、蘇丹等。,實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙及繪圖工具自備。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法（一）顯微鏡的構(gòu)造一般光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造包括兩大部分，即保證成象的光學(xué)系統(tǒng)和用以裝置光學(xué)系統(tǒng)的機(jī)械部分。,1、機(jī)械部分（1）鏡座：是顯微鏡的底座，支持整個(gè)鏡體，使顯微鏡放置穩(wěn)固。（

2、2）鏡柱：鏡座上面直立的短柱，支持鏡體上部的各部分。（3）鏡臂：彎曲如臂，下連鏡柱，上連鏡筒，這取放鏡體時(shí)手握的部位。鏡臂的下端與鏡柱連接處有一活動(dòng)關(guān)節(jié)，可使鏡體在一定范圍內(nèi)后傾，便于觀察。,（4）鏡筒：為顯微鏡上部圓形中空的長(zhǎng)筒，其上端放置目鏡，下端與物鏡轉(zhuǎn)換器相連，并使目鏡和物鏡的配合保持一定的距離，其作用是保護(hù)成象的光路與亮度。（5）物鏡轉(zhuǎn)換器：接于鏡筒下端的圓盤，可自由轉(zhuǎn)動(dòng)，盤上有3-4個(gè)螺旋圓孔，為安裝物鏡的部位，當(dāng)旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器時(shí)，物鏡即可固定在使用的位置上，保證物鏡與目鏡的光線合軸。（6）載物臺(tái)：為放置玻片標(biāo)本的平臺(tái)，中央有一圓孔，以通過光線。兩旁裝有壓片夾或移動(dòng)器，可固定玻片標(biāo)本和

3、移動(dòng)玻片。,（7）調(diào)焦裝置：為了得到清晰的物像，必須調(diào)節(jié)物鏡與標(biāo)本之間的距離，使它與物鏡的工作距離相等。這種操作叫調(diào)焦。在鏡臂兩側(cè)有粗、細(xì)調(diào)焦螺旋各一對(duì)，旋轉(zhuǎn)時(shí)可使鏡筒上升或下降。大的一對(duì)是粗調(diào)焦螺旋，調(diào)動(dòng)鏡筒升降距離大，旋轉(zhuǎn)一周可使鏡筒移動(dòng)2毫米左右。小的一對(duì)是細(xì)焦螺旋，調(diào)動(dòng)鏡筒的升降距離很小，旋轉(zhuǎn)一周可使鏡筒移動(dòng)約0.1毫米。在用低倍物鏡觀察時(shí)，使用粗調(diào)焦螺旋；用高倍物鏡觀察時(shí)，用細(xì)調(diào)焦螺旋。（8）聚光器調(diào)節(jié)螺旋：在鏡柱的左側(cè)或右側(cè)，旋轉(zhuǎn)它時(shí)使聚光器上下移動(dòng)，以調(diào)節(jié)光線。,2、光學(xué)部分由成像系統(tǒng)和照明系統(tǒng)組成，成像系統(tǒng)包括物鏡和目鏡，照明系統(tǒng)包括反光鏡和聚光器。（1）物鏡：這是決定顯微鏡質(zhì)

4、量的最主要部件，安裝在鏡筒下端的物鏡轉(zhuǎn)換器上，一般有三個(gè)放大倍數(shù)不同的物鏡，即低倍（10）、高倍（40）、油鏡（100）。使用油鏡時(shí)，必須在蓋玻片上和聚光器上滴加一滴香柏油（鏡油），然后才能使用。,（2）目鏡：安裝在鏡筒上端，它的作用是將物鏡所成的像進(jìn)一步放大，使之便于觀察。其上刻有5、10、16等，表示不同放大倍數(shù)，可根據(jù)當(dāng)時(shí)需要選擇使用。目鏡內(nèi)的光欄上可裝一段頭發(fā)，在視野中則為一黑線，叫指針，可以用它指示要觀察的部分。,（3）反光鏡（反射鏡）：是個(gè)圓形的兩面鏡。一面是平面鏡，能反光；另一面是凹面鏡，兼有反光和匯集光線的作用，可選擇使用，反光鏡具有能轉(zhuǎn)動(dòng)的關(guān)節(jié)，可作各種方向的翻轉(zhuǎn)，面向光源，

5、能將光線反射在聚光器上。,（4）聚光器（或鏡）：裝在載物臺(tái)下，由聚光鏡（幾個(gè)凸透鏡）和虹彩光圈（可變光欄）等組成。它可將平行的光線匯集成束，集中在一點(diǎn)，以增強(qiáng)被檢物件。聚光器可以上下調(diào)節(jié)，如用高倍鏡時(shí)，視野范圍小，則需上升聚光器，用低倍物鏡時(shí)，視野范圍大，可下降聚光器。（5）虹彩光圈：裝在聚光器內(nèi)，位于載物臺(tái)下方，撥動(dòng)操縱桿，可使光圈擴(kuò)大或縮小，借以調(diào)節(jié)通光量。,二、使用顯微鏡的主要步驟和方法1、取鏡和放置：按固定編號(hào)從柜中提取顯微鏡木箱，用鑰匙打開箱門，從中取出顯微鏡，取鏡時(shí)應(yīng)右手握住鏡臂，左手平托鏡座，保持鏡體直立，不可歪斜。放置桌面時(shí)，動(dòng)作要輕。一般就放在座位左側(cè)，距桌邊緣約5-6厘米的

6、地方，以便觀察和防止掉落。特別要禁止用單手提著顯微鏡走，防止目鏡從鏡筒中滑出。,2、對(duì)光：一般情況下可用由窗口進(jìn)入室內(nèi)的散射光（應(yīng)避用直射陽(yáng)光），或用日光燈作光源。對(duì)光時(shí)，先把低倍物鏡轉(zhuǎn)到中央，對(duì)準(zhǔn)載物臺(tái)上的通光孔，然后用左眼從目鏡下注視（左眼不要緊閉）同時(shí)，用手轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡，使鏡面向著光源。一般用平面鏡即可，光弱時(shí)可用凹面鏡，當(dāng)光線從反光鏡面向上反射入鏡筒時(shí)，在鏡筒內(nèi)就可以看一個(gè)圓形的、明亮的視野，此時(shí)再利用聚光鏡或虹彩光圈調(diào)節(jié)光的強(qiáng)度，使視野內(nèi)的內(nèi)線既均勻、明亮、又不刺眼。在對(duì)光的過程中，要體會(huì)反光鏡、聚光鏡和虹彩光圈在調(diào)節(jié)光線中的不同作用。,3、低倍鏡的使用觀察任何標(biāo)本，都必須先用低倍鏡，

7、因?yàn)榈捅剁R的視野范圍大，容易發(fā)現(xiàn)目標(biāo)和確定觀察的部位。（1）放置切片：升高鏡筒，把玻片標(biāo)本放在載物臺(tái)中央，使材料正對(duì)通光孔的中心，然后用壓片夾壓住載玻片的兩端。,（2）調(diào)整焦點(diǎn)：兩眼從側(cè)面注視物鏡，并慢慢按順時(shí)針方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)焦螺旋，使鏡筒徐徐下必至物鏡玻片約5毫米處，接著用左眼注視鏡筒內(nèi)，同是按反時(shí)針方向，向右、向內(nèi)轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)焦螺旋使鏡筒緩慢上升，直到看見清晰的物像為止（注意不可在調(diào)焦點(diǎn)時(shí)邊觀察邊下必鏡筒，否則會(huì)使物鏡和玻片觸碰，壓碎破片，損壞物鏡）。如一次調(diào)節(jié)看不到物像，應(yīng)重新檢查材料是否在光軸線上，重新移正材料，再重復(fù)上述操作過程直至物像出現(xiàn)和清晰為止。,為了使物像更加清晰，此時(shí)可使用細(xì)調(diào)焦

8、螺旋，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)到使物像最清楚時(shí)為止，但切忌連續(xù)轉(zhuǎn)動(dòng)多圈，以免損傷儀器的精確度。當(dāng)細(xì)調(diào)焦螺旋向上或向下轉(zhuǎn)不動(dòng)時(shí)，就是轉(zhuǎn)到了極限，千萬(wàn)不能再硬擰，而應(yīng)重新調(diào)粗調(diào)焦螺旋，把物鏡與標(biāo)本的距離稍稍拉開后，再反擰細(xì)焦螺旋，約10圈左右（因一般可動(dòng)范圍為20圈）。,（3）低倍物鏡的觀察：焦點(diǎn)調(diào)好后，可根據(jù)需要，移動(dòng)玻片，把要觀察的部分移到最有利的位置上。找到物像后還可根據(jù)材料的厚薄、顏色、成像的反差強(qiáng)弱等是否合適再進(jìn)行調(diào)節(jié)，如果太亮，可降低聚光器或縮小虹彩光圈，反之則升高聚光器或開大光圈。,4、高倍物鏡的使用在觀察較小的物體或細(xì)微結(jié)構(gòu)時(shí)使用。（1）選好目標(biāo)：由于高倍鏡只能把低倍鏡視野中心的一小部分加以放大，

9、因此，使用高倍鏡前，應(yīng)先在低倍鏡中選好目標(biāo)，再將其移到視野中央，然后再轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器換成高倍鏡進(jìn)行觀察。,（2）在換用高倍鏡觀察時(shí)，視野變小變暗，所以要重新調(diào)節(jié)視野的亮度，此時(shí)或升高聚光器或放大虹彩光圈。,（3）調(diào)下焦點(diǎn)：在正常情況下，當(dāng)高倍物鏡轉(zhuǎn)正之后，在視野中即可見到模糊的物像，只要略微調(diào)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，就可獲得最清晰的物像。注意：使用高倍鏡觀察時(shí)，只能用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié)物象至清晰。,5、顯微鏡使用后的整理觀察完畢，應(yīng)先將鏡頭轉(zhuǎn)為低倍鏡，再水平取下切片，取下時(shí)要注意勿使切片觸及鏡頭，切片取下后，再轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器，使物鏡鏡頭與通光孔錯(cuò)開，再下降鏡筒，使兩個(gè)物鏡位于載物臺(tái)上通光孔的兩側(cè)，并將反光鏡還原成與桌面垂直，擦凈鏡體，仍用右手握住鏡臂，左手平托顯微鏡，送回鏡箱中。,三、使用顯微鏡時(shí)的注意事項(xiàng)1、顯微鏡是精密儀器，使用時(shí)一定要嚴(yán)格地按規(guī)程進(jìn)行操作。同時(shí)，顯微鏡的幾個(gè)主要部件都是配套的，并已編號(hào)，不能互換，特別注意不要斢錯(cuò)鏡頭。2、要注意保持顯微鏡清潔，特別是光學(xué)部分，如有灰塵，要用擦鏡紙輕輕擦去。若使用過油鏡頭，需用二甲苯擦拭干凈鏡頭與聚光器上的油。,3、用顯微鏡觀察時(shí)，切忌睜一眼閉一眼，要左眼窺鏡，右眼作圖。4、標(biāo)本必須加蓋玻片，制作帶水或藥液的玻片標(biāo)本時(shí)，必須兩邊擦凈再觀察