E花環(huán)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、 E花環(huán)實(shí)驗(yàn)一.實(shí)驗(yàn)原理 人外周血T淋巴細(xì)胞表面具有綿羊紅細(xì)胞(SRBC)受體，能夠與SRBC結(jié)合形成花環(huán)樣細(xì)胞團(tuán)(即E花環(huán))。已證實(shí)E 受體是人類T 細(xì)胞所特有的表面標(biāo)志。當(dāng)T 細(xì)胞與SRBC 混合后，SRBC 便粘附于T 細(xì)胞表面，呈現(xiàn)花環(huán)狀。通過(guò)花環(huán)形成檢查T(mén) 細(xì)胞的方法，稱為 E 花環(huán)形成試驗(yàn)。根據(jù) 花環(huán)形成的多少，可測(cè)知 T 細(xì)胞的數(shù)目，從而間接了解機(jī)體細(xì)胞免疫功能狀態(tài)，判斷疾病的預(yù)后，考核藥物療效等。由于T細(xì)胞的異質(zhì)性，其對(duì)SRBC的親和力亦不同，因而T細(xì)胞可形成不同類型的E花環(huán)，其中在4放置1 h以上，所形成的花環(huán)數(shù)代表T細(xì)胞總數(shù)，稱為總花環(huán)(Et花環(huán))，而淋巴細(xì)胞與SRBC混合

2、后不經(jīng)4作用立即反應(yīng)形成的花環(huán)稱為活性花環(huán)(Ea花環(huán))。二.實(shí)驗(yàn)結(jié)果（用圖示法表示）三.討論 .有的細(xì)胞能形成玫瑰花環(huán)的原因：人T細(xì)胞膜上具有CD2分子，能夠與SRBC上的LFA-3結(jié)合，從而形成以人T細(xì)胞為中心，SRBC環(huán)繞四周，形狀如玫瑰花環(huán)的細(xì)胞集團(tuán)，即E玫瑰花環(huán)。此外，NK細(xì)胞膜上也有CD2分子，也能形成玫瑰花環(huán)，但是NK細(xì)胞的量非常少，形成玫瑰花環(huán)的數(shù)量也少。 . 有的細(xì)胞不能形成玫瑰花環(huán)的原因：a.人血液中含有單核巨噬細(xì)胞，其表面沒(méi)有CD2分子，不能與SRBC表面的LFA-3結(jié)合，因此不能形成玫瑰花環(huán)。b.實(shí)驗(yàn)中所用血液不夠新鮮，也可能導(dǎo)致不能夠形成玫瑰花環(huán)。c. 時(shí)間不夠長(zhǎng)，導(dǎo)致

3、T細(xì)胞表面的CD2分子不能夠與SRBC上的LFA-3充分結(jié)合，因此只有一部分SRBC與人T細(xì)胞結(jié)合，其余SRBC沒(méi)能夠與人T細(xì)胞結(jié)合形成玫瑰花環(huán)。2.SRBC與淋巴細(xì)胞混合后離心速度不能過(guò)高，在Et花環(huán)試驗(yàn)中，置4應(yīng)至少1h以上或過(guò)夜。3.綿羊紅細(xì)胞以保存1周內(nèi)最好，超過(guò)2周則與淋巴細(xì)胞結(jié)合力下降，超過(guò)56周則不能再用。實(shí)驗(yàn)室的綿羊紅細(xì)胞保存的時(shí)間太長(zhǎng)，導(dǎo)致其與淋巴細(xì)胞的結(jié)合能力下降，所以有的細(xì)胞可以形成E花環(huán)，而有的細(xì)胞不可以形成E花環(huán)。4.Et花環(huán)試驗(yàn)SRBC與淋巴細(xì)胞混合比例以10012001為宜，Ea花環(huán)試驗(yàn)中以101201為宜；淋巴細(xì)胞離體后不能超過(guò)6h，否則會(huì)影響花環(huán)形成率。5.溫度對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較大，故實(shí)驗(yàn)溫度條件應(yīng)保持一致，從4取出后應(yīng)立即計(jì)數(shù)