3功能食品的功能學評價.ppt

1、1,第三節(jié) 功能食品的功能學評價,對功能食品進行功能學評價是功能食品科學研究的核心內(nèi)容，主要針對功能食品所宣稱的生理功效進行動物學甚至是人體試驗。,2,一、功能學評價的基本要求,（一）對受試樣品的要求 1.化學性質(zhì)（包括化學結(jié)構(gòu)、純度、穩(wěn)定性等）有關(guān)資料。 2.受試樣品必須是規(guī)格化的定型產(chǎn)品，即符合既定的配方、生產(chǎn)工藝及質(zhì)量標準。 3.提供受試樣品的安全性毒理學評價的資料以及衛(wèi)生學檢驗報告，受試樣品必須是已經(jīng)過食品安全性毒理學評價確認為安全的食品。功能學評價的樣品與安全性毒理學評價、衛(wèi)生學檢驗的樣品必須為同一批次（安全性毒理學評價和功能學評價實驗周期超過受試樣品保質(zhì)期的除外）。 4.應提供功效

2、成分或特征成分、營養(yǎng)成分的名稱及含量。 5.如需提供受試樣品違禁藥物檢測報告時，應提交與功能學評價同一批次樣品的違禁藥物檢測報告。,3,（二）對實驗動物的要求,1.根據(jù)各項實驗的具體要求，合理選擇實驗動物。常用大鼠和小鼠，品系不限，推薦使用近交系動物。 2.動物的性別、年齡依實驗需要進行選擇。實驗動物的數(shù)量要求為小鼠每組1015只（單一性別），大鼠每組812只（單一性別）。 3. 動物應符合國家對實驗動物的有關(guān)規(guī)定。,4,（三）對給受試樣品劑量及時間的要求,1.各種動物實驗至少應設3組，必要時可設陽性對照組或空白對照組。劑量選擇應合理，盡可能找出最低有效劑量。在3個劑量組中，其中一個劑量應相當

3、于人體推薦攝入量（折算為每公斤體重的劑量）的5倍（大鼠）或10倍（小鼠），且最高劑量不得超過人體推薦攝入量的30 倍（特殊情況除外），受試樣品的功能實驗劑量必須在毒理學評價確定的安全劑量范圍之內(nèi)。 2.給受試樣品的時間應根據(jù)具體實驗而定，一般為30天。當給予受試樣品的時間已達30天而實驗結(jié)果仍為陰性時，則可終止實驗。,5,（四）對受試樣品處理的要求,1. 受試樣品推薦量較大，超過實驗動物的灌胃量、摻入飼料的承受量等情況時，可適當減少受試樣品的非功效成分的含量。 2.對于含乙醇的受試樣品，原則上應使用其定型的產(chǎn)品進行功能實驗，其三個劑量組的乙醇含量與定型產(chǎn)品相同。如受試樣品的推薦量較大，超過動物

4、最大灌胃量時，允許將其進行濃縮，但最終的濃縮液體應恢復原乙醇含量，如乙醇含量超過15，允許將其含量降至15。調(diào)整受試樣品乙醇含量應使用原產(chǎn)品的酒基。,6,3.液體受試樣品需要濃縮時，應盡可能選擇不破壞其功效成分的方法。一般可選擇6070減壓進行濃縮。濃縮的倍數(shù)依具體實驗要求而定。 4.對于以沖泡形式飲用的受試樣品（如袋泡劑），可使用該受試樣品的水提取物進行功能實驗，提取的方式應與產(chǎn)品推薦飲用的方式相同。如產(chǎn)品無特殊推薦飲用方式，則采用下述提取的條件：常壓，溫度8090，時間3060分鐘，水量為受試樣品體積的10倍以上，提取2次，將其合并濃縮至所需濃度。,7,（五）對給受試樣品方式的要求 必須經(jīng)

5、口給予受試樣品，首選灌胃。如無法灌胃則加入飲水或摻入飼料中，計算受試樣品的給予量。 （六）對合理設置對照組的要求 以載體和功效成分（或原料）組成的受試樣品，當載體本身可能具有相同功能時，應將該載體作為對照。,8,（七）人體試食試驗規(guī)程,評價食品保健作用時要考慮的因素 1.人的可能攝入量 除一般人群的攝入量外，還應考慮特殊的和敏感的人群(如兒童、孕婦及高攝入量人群)。 2.人體資料 由于存在動物與人之間的種屬差異、在將動物試驗結(jié)果外推到人時，應盡可能收集人群服用受試物的效應資料，若體外或體內(nèi)動物試驗未觀察到或不易觀察到食品的保健效應或觀察到不同效應，而有關(guān)資料提示對人有保健作用時，在保證安全的前

6、提下，應進行必要的人體試食試驗。 3. 結(jié)果的重復性和劑量反應關(guān)系 在將評價程序所列試驗的陽性結(jié)果用于評價食品的保健作用時，應考慮結(jié)果的重復性和劑量反應關(guān)系，并由此找出其最小有作用劑量。,9,功能試驗參考時限,10,按功能學分類產(chǎn)品的試驗時限,11,按功能學分類產(chǎn)品的試驗時限,12,按功能學分類產(chǎn)品的試驗時限,13,二、試驗項目、試驗原則及結(jié)果判定,(一) 免疫調(diào)節(jié)作用 1.動物試驗項目: 臟器/體重比值:a.胸腺/體重比值；b.脾臟/體重比值 細胞免疫功能測定 a.小鼠脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗；b.遲發(fā)型變態(tài)反應 體液免疫功能測定 a.抗體生成細胞檢測；b.血清溶血素測定 單核巨噬細胞功能測定：

7、a.小鼠碳廓清試驗；b.小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗 NK細胞活性測定,14,2.試驗原則,要求選擇一組能夠全面反映免疫系統(tǒng)各方面功能的試驗，其中細胞免疫、體液免疫和單核巨噬細胞功能三個方面至少各選擇1種試驗，在確保安全的前提下盡可能進行人體試食試驗。,15,3.結(jié)果判定,在一組試驗中，受試物對免疫系統(tǒng)某方面的試驗具有增強作用而對其他試驗無抑制作用，可以判定該受試物具有該方面的免疫調(diào)節(jié)效應；對任何一項免疫試驗具有抑制作用可判定該受試物具有免疫抑制效應。 在細胞免疫功能、體液免疫功能、單核巨噬細胞功能及NK細胞功能檢測中，如有兩個以上(含兩個)功能檢測結(jié)果陽性，即可判定該受試物具有免疫調(diào)節(jié)作

8、用。,16,（二）抗氧化的功能評價,1.試驗項目(包括動物實驗和試食實驗) （1）過氧化脂質(zhì)含量的測定 丙二醛法 shiff堿法 （2）抗氧化酶活性 SOD GSH-Px,17,2.結(jié)果判定,動物試驗：兩項均為陽性。 人體試食試驗：丙二醛、SOD、GSH-Px中任一項結(jié)果陽性，則可認為該受試物具有抗氧化作用。,18,（三）改善記憶作用,1.試驗項目 動物試驗 跳臺試驗 避暗試驗 穿梭箱試驗 水迷宮試驗 （2）人體試食試驗 韋氏記憶量表 臨床記憶量表,19,2.試驗原則,（1）試驗應通過訓練前、訓練后及重測驗前3種不同的給予受試物方法觀察其對記憶全過程的影響。 （2）應采用一組(2個以上)行為學

9、試驗方法，以保證實驗結(jié)果的可靠性。 （3）人體試食試驗為必做項目，并應在動物試驗有效的前提下進行。 （4）除上述試驗項目外，還可以選用嗅覺厭惡試驗、味覺厭惡試驗、操作式條件反射試驗，連續(xù)強化程序試驗、比率程序試驗、間隔程序試驗。,20,3.結(jié)果判定,動物試驗2項或2項以上的指標為陽性，且2次或2次以上的重復測試結(jié)果一致，可以認為該受試物具有改善該類動物記憶作用； 人體試食試驗結(jié)果陽性，則可認為該受試物具有改善人體記憶作用。,21,（四）改善生長發(fā)育作用,1.試驗項目 本功能試驗研究是以動物學試驗為研究基礎 （1）體重及食物利用率 記錄出生時及生后14、28、42、56d幼鼠的體重，計算每周食物

10、利用率和總食物利用率。 （2）生理發(fā)育指標 記錄耳廓分離、門齒萌出、開眼、長毛時間、陰道開放、睪丸下降時間。 （3）神經(jīng)反射指標 平面翻正、前肢抓力、懸崖回避、嗅覺定位、聽覺警戒、負趨地性、回旋運動、視覺發(fā)育、空中翻正、游泳發(fā)育。,22,2.試驗原則,（1）給受試物的時間可根據(jù)具體情況選擇在母鼠孕期或哺乳期至成年期。 （2）在神經(jīng)反射指標中應選擇一組(5個以上)的行為學試驗方法，以保證結(jié)果的可靠性。,23,3.結(jié)果判定,動物實驗：體重、身長增加明顯高于對照組，食物利用率不顯著低于對照組，可判定動物實驗為陽性。 人體試食實驗：試食組身高陽性，體重、胸圍、上臀圍中任一項為陽性，體內(nèi)脂肪含量在正常范

11、圍，并排除膳食因素和運動對結(jié)果的影響，看判定樣品有改善生長發(fā)育功能。,24,（五）緩解疲勞作用,本功能試驗研究是以動物學試驗為研究基礎 1.試驗項目 （1）運動試驗：負重游泳試驗 （2）生物化學指標測定 a.血乳酸含量 b.血清尿素氮含量 c.肝/肌糖原比值測定,25,2.試驗原則 運動試驗與生化指標檢測相結(jié)合。在進行游泳試驗前，動物應進行初篩。除以上生化指標外，還可檢測血糖、乳酸脫氫酶、血紅蛋白以及磷酸肌酸等指標。 3.結(jié)果判定 若1項以上(含1項)運動試驗和2項以上(含2 項)生化指標為陽性，即可以判斷該受試物具有抗疲勞作用。,26,（六）減肥作用,1.減肥原則 （1）減除體現(xiàn)人多余的脂肪

12、，不單純以減輕體重為標準。 （2）每日營養(yǎng)素的攝入量應基本保證機體正常生命活動的要求。 （3）對機體健康無明顯損害。,27,2.試驗項目,（1）動物試驗（首先建立動物肥胖模型） 體重測定 體內(nèi)脂肪重量測定 （2）人體試食試驗 主要測定指標：體重、體重指數(shù)、腰圍、腹圍、臀圍、體內(nèi)脂肪含量。,28,3.試驗原則,在進行減肥試驗時，除上述指標必測外，還應進行機體營養(yǎng)狀況檢測，運動耐力測試以及與健康有關(guān)的其它指標的觀察。該功能的人體試食試驗為必做項目，動物試驗與人體試食試驗相結(jié)合，綜合進行評價。,29,4.結(jié)果判定,在動物試驗中，體重及體內(nèi)脂肪重量2個指標均陽性，并且對機體健康無明顯損害，即可初步判定

13、該受試物具有減肥作用。 在人體試食試驗中，體內(nèi)脂肪量顯著減少，且對機體健康無明顯損害，可判定該受試物具有減肥作用。,30,（七）輔助降血脂,1.試驗項目 （1）動物實驗 體重 血清總膽固醇 甘油三酯 高密度脂蛋白膽固醇 （2）人體試食試驗 血清總膽固醇 甘油三酯 高密度脂蛋白膽固醇,31,2.試驗原則,（1）動物實驗和人體試食試驗所列指標均為必測項目。 （2）動物實驗選用脂代謝紊亂模型法，預防性或治療性任選一種。用高膽固醇和脂類飼料喂養(yǎng)動物可形成酯代謝紊亂動物模型，再給予動物受試樣品或同時給予受試樣品，可檢測受試樣品對高脂血癥的影響，并可判定受試樣品對脂質(zhì)的吸收、脂蛋白的形成、脂質(zhì)的降解或排泄

14、產(chǎn)生的影響。,32,（3）在進行人體試食試驗時，應對受試樣品的食用安全性作進一步的觀察后進行。選擇單純血脂異常的人群，保持平常飲食，半年內(nèi)采血2次，如兩次血清總膽固醇（TC）均為5.26.24mmol/L或血清甘油三酯（TG）1.652.2mmol/L，均可作為備選對象，受試者最好為非住院的高血脂癥患者，自愿參加試驗。 受試期間保持平日的生活和飲食習慣，空腹取血測定各項指標。但年齡在18歲以下或65歲以上者、妊娠或哺乳期婦女、對功能食品過敏者、合并有心、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴重疾病、精神病患者、短期內(nèi)服用與受試功能有關(guān)的物品，影響到對結(jié)果的判斷者、未按規(guī)定食用受試樣品，無法判定功效或資料不全影響

15、功效或安全性判斷者不可作為人體試食試驗對象。,33,3.結(jié)果判定,（1）動物實驗 輔助降血脂結(jié)果判定 檢測中血清總膽固醇和甘油三酯二項指標陽性，可判定該受試樣品輔助降血脂動物實驗結(jié)果陽性。 輔助降低甘油三酯結(jié)果判定 甘油三酯二個劑量組結(jié)果陽性；甘油三酯一個劑量組結(jié)果陽性，同時高密度脂蛋白膽固醇結(jié)果陽性，可判定該受試樣品輔助降低甘油三酯動物實驗結(jié)果陽性。 輔助降低血清總膽固醇結(jié)果判定 血清總膽固醇二個劑量組結(jié)果陽性；血清總膽固醇一個劑量組結(jié)果陽性，同時高密度脂蛋白膽固醇結(jié)果陽性，可判定該受試樣品輔助降低血清總膽固醇動物實驗結(jié)果陽性。,34,（2）人體試食試驗,血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白

16、膽固醇三項指標檢測中，血清總膽固醇和甘油三酯二項指標陽性，可判定該受試樣品具有輔助降血脂作用； 血清總膽固醇、甘油三酯兩項指標中任一項指標陽性，同時高密度脂蛋白膽固醇結(jié)果陽性，可判定該受試樣品具有輔助降低血清總膽固醇或輔助降低甘油三酯作用。,35,（八）調(diào)節(jié)血糖,1.試驗項目 （1）動物實驗 高血糖模型動物的空腹血糖值、糖耐量試驗。 正常動物的降糖試驗。 （2）人體試食試驗 空腹血糖值、糖耐量試驗、胰島素測定、尿糖測定。,36,2.試驗原則,（1）建立高血糖動物模型，常用四氧嘧啶作為建模藥物。 （2）人體試食試驗是必須項目，在動物學試驗有效基礎上并對受試樣品的食用安全性作進一步的觀察后進行。試

17、驗人群為型糖尿病患者，除測定規(guī)定的指標外，應加測一般健康指標。,37,3.結(jié)果判定,（1）動物實驗 動物學試驗有一項指標陽性； （2）人體試食試驗的空腹血糖值、糖耐量試驗兩項指標中有一項陽性，胰島素又未升高，可判定受試樣品有降血糖作用。,38,（九）改善腸道菌群功能,（1）試驗項目（腸道菌群以cfu/g糞便計） 動物試驗 雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。 人體實驗 雙歧桿菌、乳桿菌、腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。 （2）試驗原則 動物與人體所列檢驗項目均為必測項目。 人體試驗為必做項目，還可以加測一般健康指標。 動物可用正常動物或腸道菌群紊亂動物模型。,39,（3）結(jié)果判定,動物試驗

18、A雙歧桿菌、乳桿菌明顯增加，腸球菌、腸桿菌增加但幅度小于雙歧桿菌、乳桿菌的增幅，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或無變化；B雙歧桿菌、乳桿菌明顯增加而產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或無變化、腸球菌、腸桿菌無變化。上兩項中一項符合可判定為陽性。 人體試食試驗 A雙歧桿菌、乳桿菌明顯增加，腸球菌、腸桿菌增加但幅度小于雙歧桿菌、乳桿菌的增幅，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或無變化；B雙歧桿菌、乳桿菌明顯增加而產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或無變化、腸球菌、腸桿菌無變化。上兩項中一項符合可判定有改善胃腸道菌群,40,（十）改善睡眠作用,1.試驗項目 直接睡眠實驗。 延長戊巴比妥鈉睡眠時間。 戊巴比妥鈉（或巴比妥鈉）閾下劑量催眠實驗。 戊巴比妥鈉睡眠潛伏期實驗

19、。 觀察指標:給被檢樣品在閾上劑量有催眠作用下是否延長睡眠時間;在閾下劑量作用下是否加快入睡時間。,41,3.結(jié)果判定 延長戊巴比妥鈉睡眠時間、戊巴比妥鈉（或巴比妥鈉）閾下劑量催眠實驗、戊巴比妥鈉睡眠潛伏期實驗三項中兩項為陽性，檢測結(jié)果判定為有改善睡眠功能。,42,（十一）改善營養(yǎng)性貧血,1.試驗項目 （1）動物試驗（所列項目均為必測項目） 血紅蛋白 紅細胞游離原卟啉 （2）人體試驗 血紅蛋白 紅細胞游離原卟啉 血清鐵蛋白,43,2.試驗原則 (1)所列項目均為必測項目。 (2)人體可加測一般健康指標。 (3)貧血:按現(xiàn)行臨床標準診斷。 3.結(jié)果判定 （1）動物實驗 2項陽性均為陽性，檢測結(jié)果判定為陽性。 （2）人體實驗 幼兒：前兩