2動物細(xì)胞融合與單克隆抗體同步導(dǎo)學(xué)案及答案

1、2. 2.2動物細(xì)胞融合與單克隆抗體課標(biāo)要求1能力要求列表比較動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的異同2、內(nèi)容要求理解和掌握動物細(xì)胞融合的原理、過程和意義。 理解和掌握單克隆抗體制備的過程的步驟和應(yīng)用知識網(wǎng)絡(luò)體系動物細(xì)胞融合誘導(dǎo)劑：、主要應(yīng)用:PEG、滅活病毒制備：免疫后的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后，再培養(yǎng)單克隆抗體一.特點：特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性非常明顯應(yīng)用：理論研究；疾病的診斷和治療比較項目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用途植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動性用纖維素酶、果 膠酶去除細(xì)胞壁 后誘導(dǎo)原生質(zhì)體 融合離心、電刺激、 振動、聚乙二醇（PEG）誘導(dǎo)克服遠(yuǎn)源雜交不 親和，獲得雜種 植株動

2、物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動性用胰蛋白酶使細(xì) 胞分散后誘導(dǎo)細(xì) 胞融合除應(yīng)用植物細(xì)胞 雜交手段外，還 有用滅活病毒誘 導(dǎo)制備單克隆抗體重難熱點歸納1、動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的異同2、單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體可以作為診斷試劑，準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)，與抗原的特異性結(jié)合具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的特點。單克隆抗體還可以用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療 癌癥。單克隆抗體作為載體，運載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”，準(zhǔn)確殺傷癌變細(xì)胞。經(jīng)典例題剖析1科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗 體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是A. 經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B. 不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞

3、C. 經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞D. 不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞解析此題考查對細(xì)胞工程的了解。單克隆抗體的產(chǎn)生是利用了細(xì)胞工程中的細(xì)胞融合技術(shù)。小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞融合成雜交瘤 細(xì)胞，在體外培養(yǎng)的條件下無限繁殖，產(chǎn)生特異性的單一抗體。答案A2動物細(xì)胞融合的目的中最重要的是A. 克服遠(yuǎn)源雜交不親和B. 制備單克隆抗體C. 培育新物種D. 生產(chǎn)雜種細(xì)胞解析考查動物細(xì)胞融合的目的。 動物細(xì)胞融合就是指不同動物細(xì)胞的原生質(zhì)融合，形成雜種細(xì)胞的過程。動物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的用途是制備單克隆抗體。答案B3下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是A. 用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B

4、. 將所取的組織先用胰蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單個細(xì)胞C. 在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D. 動物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳 50代左右，所培養(yǎng)的細(xì)胞就會衰老死亡解析動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程是：先制備培養(yǎng)液，然后取動物細(xì)胞，用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都來自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織。將組織取出后，用胰蛋白酶等處理使組織分散成單個細(xì)胞，將單個細(xì)胞配制成一定濃度的細(xì)胞懸浮液，再將懸浮液放入培養(yǎng)瓶中在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長，細(xì)胞的數(shù)目越來越多， 需定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來，再配制成懸浮液，分到兩個瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。動物細(xì)胞培養(yǎng)50代可成為細(xì)胞系，50代以前10代以后

5、稱為細(xì)胞株。50代以后生存下來的細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化， 也就是說細(xì)胞發(fā)生了癌變，癌細(xì)胞會無限增殖。答案D4能使動物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是A. 離心B. 滅活的病毒C. 電刺激D. 振動解析在體外培養(yǎng)條件下，動物細(xì)胞會自發(fā)融合，但是頻率很低。因此，一般都需要添加具有誘導(dǎo)細(xì)胞融合效應(yīng)的生物藥劑或化學(xué)藥劑，或者采用電融合技術(shù)， 人為地促進(jìn)細(xì)胞融合。常用的動物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)因子是聚乙二醇和滅活的病毒。其中聚乙二醇既可用于促進(jìn)植物原生質(zhì)體融合，又可用于促進(jìn)動物原生質(zhì)體融合。而滅活的病毒只能用于促進(jìn)動物細(xì)胞的融合，如滅活的仙臺病毒是最常用的誘導(dǎo)因子，其誘導(dǎo)原理是因為病毒具有侵染細(xì)胞的能力，優(yōu)點是融

6、合率高，對各種動物細(xì)胞都適用。答案B基礎(chǔ)試題訓(xùn)練、選擇題養(yǎng)基HAT培養(yǎng)基經(jīng)過數(shù)代培養(yǎng)，最終可在HAT培養(yǎng)基上存 （B 脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞D .脾細(xì)胞1. 單克隆抗體制備過程中使用的骨髓瘤細(xì)胞是一種缺陷型細(xì)胞，在含有次黃嘌呤、氨基喋 呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基（HAT）中無法生長；而小鼠脾細(xì)胞是正常細(xì)胞，在 上可正常存活。用聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合后， 活并能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是A骨髓瘤細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞C.骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞2. （2006，廣雅中學(xué)考題）研究單克隆抗體治療癌癥的思路是A利用單克隆抗體特異性地對抗癌細(xì)胞B .以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細(xì)胞C.抗癌物質(zhì)在克

7、隆細(xì)胞中大量合成3. ( 2001，天津、山西理綜卷)科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞， 經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是( )B淋巴細(xì)胞B .不經(jīng)過免疫的 T淋巴細(xì)胞T淋巴細(xì)胞D .不經(jīng)過免疫的 B淋巴細(xì)胞用動物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是 (B淋巴細(xì)胞D 單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細(xì)胞結(jié)合A. 經(jīng)過免疫的C.經(jīng)過免疫的4. (2004年，全國)A .將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B .用纖維素酶處理 B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C.用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D .篩選雜交資金積累細(xì)

8、胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆 抗體5. 只能使動物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法是()A . PEGB .滅活的病毒C .電刺激 D .離心 6.單克隆抗體是由下列哪種細(xì)胞產(chǎn)生的A.B淋巴細(xì)胞 B .7 用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組 主要原因是這樣的組織細(xì)胞()T淋巴細(xì)胞 C .骨髓瘤細(xì)胞 D .雜交瘤細(xì)胞()B 具有更強(qiáng)的全能性D 分裂增殖的能力強(qiáng)織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其A.容易產(chǎn)生各種變異C.取材十分方便8動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是()所用的技術(shù)手段不相同所采用的原理完全相同誘導(dǎo)融合的方法完全相同都能形成雜種細(xì)胞B.D.A.C.

9、9. 動物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)融合決定于A.細(xì)胞膜的流動性B .細(xì)胞膜的選擇透過性C.細(xì)胞質(zhì)的流動性 D .細(xì)胞質(zhì)酶的活性10. 從母羊甲的體細(xì)胞中取出細(xì)胞核，注入到母羊乙去掉核的卵細(xì)胞中，融合后的細(xì)胞經(jīng)卵 裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宮內(nèi)，出生小羊的大多數(shù)性狀()A. 難以預(yù)測B. 像甲C. 像乙D. 像丙11. 生物導(dǎo)彈”是指A.單克隆抗體B.雜交瘤細(xì)胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞D.在單抗上連接抗癌藥物12動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是（）A.動物細(xì)胞融合B.單克隆抗體C.胚胎移植D.動物細(xì)胞培養(yǎng)13. 下列哪一項屬于克?。ǎ?A .將雞的某個 DNA片段整合到小鼠的 DNA分子中

10、B .將抗藥菌的某基因引入草履蟲的細(xì)胞內(nèi)C .將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞D .將某腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個細(xì)胞系14. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選 出雜交瘤細(xì)胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活.增殖的細(xì)胞是B淋巴細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞A .B .C.D.15. （2005年，廣東）關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是（）A.可以制成診斷盒.用于疾病的診斷B .可以與藥物結(jié)合，用于病變細(xì)胞的定向治療C.可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)D .可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)16. （多選）

11、下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中，正確的是（）A. B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合，一般不需要滅活的仙臺病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)B .融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體C.體外培養(yǎng)時，一個效應(yīng) B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖D .單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性明顯17. （多選）1975年米爾斯坦和柯勒成功地獲得了單克隆抗體。下列細(xì)胞中與單克隆抗體的制備有關(guān)的是（）A.效應(yīng)B細(xì)胞 B . T淋巴細(xì)胞C.骨髓瘤細(xì)胞D .雜交瘤細(xì)胞 二、非選擇題圖回答:1下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，據(jù)骨篩瘤細(xì)胞小鼠丄雜交瘤細(xì)胞0B小鼠抗體體外培養(yǎng)5細(xì)胞培希（1）

12、圖中 A過程是從小鼠的脾臟中取得 細(xì)胞，該細(xì)胞能夠產(chǎn)生 。從小鼠體內(nèi)提取分離該細(xì)胞之前，應(yīng)給小鼠注射 類物質(zhì)。（2） B過程是一個 過程，該過程的進(jìn)行需要滅活的或1匸F ft f JJ *TTi i綢胞融色后在婆孔 靜養(yǎng)後中生秩瞞逼贏細(xì)聃電融合儀內(nèi)進(jìn)鞋fife臺雜交瘤蹈粕生按 梵它詼死匸檢 查上漕液中特異抗棒大呈制備單克隆抗伸，其特點f f rt i “T 000 0塞克隆抗體單克隆抗休培養(yǎng)基特殊成分主要作用次黃嘌呤骨髓瘤細(xì)胞不能利用氨基蝶嘌呤阻斷DNA合成胸腺嘧啶核苷脾細(xì)胞用于合成 DNA的誘導(dǎo)。(3) 單克隆抗體在疾病的診斷、治療和預(yù)防方面，與常規(guī)抗體相比，其特點是。2. (06佛山一模)

13、兩場籌備了10年的“太空結(jié)合”首次在神舟八號飛船上舉行了，“新人”之一是小白鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，新人在“產(chǎn)房” 電融合儀內(nèi)孕育新生命。160min 后沖國首批“太空娃娃”終于順利誕生?！疤胀尥蕖闭Q生和地面實驗如圖所示。請回答下列問題：(1) 小白鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞能融合在一起,體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有 的特點。(2) 若用于SARS的預(yù)防上,則宜采用 細(xì)胞?？茖W(xué)工作者正在研究治療癌癥使用的生物導(dǎo)彈是。B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞都是由細(xì)胞形成的。這種相同細(xì)胞的后代 ,在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上產(chǎn)生穩(wěn)定差異的過程,叫做。(4) 鼠的淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后,在培養(yǎng)時通過 (有絲/減數(shù))分裂方式大

14、量繁殖。細(xì)胞中染色體數(shù)目與淋巴細(xì)胞相比有何特點？；要觀察融合后的細(xì)胞中的染色體形態(tài)、數(shù)目，可用一定濃度的處理。融合的細(xì)胞具有兩種細(xì)胞的特性 ,即和。3. 1975年科學(xué)家首次利用 B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備出單克隆抗體。請觀察下圖，回答問題：(1) 單克隆抗體是指 是(2) 1984年以來，科學(xué)家針對如右圖所示的單克隆抗體來自 ，應(yīng)用于人體，會作為產(chǎn)生，加速排斥反應(yīng)，以及完整的抗體分子的相對分子質(zhì)量過大，難以穿透腫瘤組織，達(dá)不到有效治療的濃度等問題，制備出可用于腫 瘤治療的相對分子質(zhì)量小的單克隆抗體。(3) 制備單克隆抗體的B淋巴細(xì)胞一般從(器官)中采集。從下表看，用于篩選雜交瘤細(xì)胞的是特定 的

15、培養(yǎng)基。(4) 大量制備單克隆抗體的方法主要有兩種：體外培養(yǎng)法，可獲得 10剛mL的抗體；動物體內(nèi)誘生法可獲得 520mg/mL的抗體。你選擇的方法及原因是創(chuàng)新應(yīng)用訓(xùn)練2 右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計的生產(chǎn)破傷 風(fēng)桿菌抗體的實驗方案。據(jù)圖回答：（1）該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？ 。原因（2）圖中為 過程，常用作為誘導(dǎo)劑。該細(xì)胞繼承了 ，因此不僅能分泌 ，還有本領(lǐng)。（3 ）該方案的目的是。參考答案：一、選擇題腔內(nèi)培養(yǎng)硯濟(jì)參考答案：一、選擇題CDABB DDCAB DDDAD （BCD）（ABCD）二、非選擇題聚乙二醇（3）特異性強(qiáng)、1. （ 1）效應(yīng)B抗體 抗原（2 ）細(xì)胞融合 仙臺病毒靈敏度高2. （ 1）一定的流動性（2）SARS病毒感染后產(chǎn)生的效應(yīng) B細(xì)胞，單克隆抗體+抗癌藥物（3）造血干細(xì)胞 細(xì)胞分化（4）有絲，加倍,龍膽紫