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文檔簡介

1、班級植物細(xì)胞工程姓名學(xué)號用時:45分鐘 滿分:100分一. 學(xué)習(xí)目標(biāo):1.簡述植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)。3.嘗試進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。二. 學(xué)習(xí)重點和難點1. 教學(xué)重點(1)植物組織培養(yǎng)的原理和過程。(3)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的實例。2. 教學(xué)難點植物組織培養(yǎng)的實驗。三. 基礎(chǔ)知識梳理(一).植物組織培養(yǎng) 1、 原理二步驟是:2、條件是思考:生物體內(nèi)細(xì)胞全能性的大小一樣嗎?2.列舉植物細(xì)胞工程的實際應(yīng)用。(2)植物體細(xì)胞雜交的原理。細(xì)胞分化的過程遺傳物質(zhì)有丟失嗎?(二).植物體細(xì)胞雜交技術(shù)1. 植物體細(xì)胞雜交的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是2. 植物細(xì)胞去壁用的酶是 3. 誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法思考:為什么番茄一

2、一馬鈴薯超級雜種植株沒有如科學(xué)家所想象的那樣,地上長番茄, 地下結(jié)馬鈴薯?(三).植物細(xì)胞工程應(yīng)用的實例1. 植物繁殖的新途徑2. 物新品種的培育四、重難點突破、例題解析 考點一 細(xì)胞的全能性分化的細(xì)胞具有全能性,可以從理論上分析細(xì)胞的來源一一有絲分裂,形成的子細(xì)胞核應(yīng)與受精卵的完全相同:含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì),都有發(fā)育成為完整個 體必需的全部基因,應(yīng)該具有全能性。實際上在體內(nèi)分化的細(xì)胞沒有表達(dá)出全能性,原 因是基因的選擇性表達(dá)。但離體培養(yǎng)時,脫離母體的限制,在一定條件下就能表達(dá)??键c二植物組織培養(yǎng)中的脫分化及再分化植物組織中使用的外植體一般是高度分化了的細(xì)胞,在植物體中是不會再分裂繁

3、殖 的,只是執(zhí)行某種功能直至死亡。這些細(xì)胞在培養(yǎng)基上時會由原來的分化狀態(tài)變成分生 狀態(tài)的細(xì)胞,分裂產(chǎn)生愈傷組織,這個過程稱為脫分化過程。這種轉(zhuǎn)變在細(xì)胞的形態(tài)結(jié) 構(gòu)和生理生化上都會產(chǎn)生一系列變化。組織培養(yǎng)的研究表明分化細(xì)胞的脫分化需要兩個 條件。即創(chuàng)傷和外源激素。當(dāng)細(xì)胞脫分化形成愈傷組織后,經(jīng)過一段時期的分裂,細(xì)胞群體變成不是一種細(xì)胞 類型的均一群,又會產(chǎn)生分化,形成分化細(xì)胞或分生細(xì)胞團(tuán),由此再生成植物有兩條途 徑:一是形成體細(xì)胞胚,通過體細(xì)胞胚形成再生植株;二是走器官發(fā)生的途徑,分生組 織在一定的誘導(dǎo)條件下重建芽的分生組織,分化出芽后再生根,成為完整的植株??键c三.植物體細(xì)胞雜交過程中篩選雜種

4、細(xì)胞細(xì)胞的原因番茄和馬鈴薯 的原生質(zhì)體融合后,將原生質(zhì)體轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上培養(yǎng),使原生質(zhì)體 再生出細(xì)胞壁。這時,在細(xì)胞混合物中不僅有番茄一一馬鈴薯雜種細(xì)胞,還有番茄細(xì)胞、 馬鈴薯、番茄一一番茄細(xì)胞、馬鈴薯一一馬鈴薯細(xì)胞,而只有番茄一一馬鈴薯雜種細(xì)胞 才有同時具有雙親的遺傳物質(zhì)。例題:現(xiàn)有甲、乙兩個煙草品種(2N=48),其基因型分別為aaBB和Aabb,這兩對基因們 于非同源染色體上,且在光照強(qiáng)度大于800勒克斯時都不能生長,這是由于它們中的一對隱性純合基因(aa或bb)作用的結(jié)果。取甲、乙兩品種的花粉分別培養(yǎng)成植株,將它 們的葉肉細(xì)胞制成原生質(zhì)體,并將兩者相混,使之融合,誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞團(tuán)。然

5、后,放到 大于800勒克斯光照下培養(yǎng),結(jié)果有的細(xì)胞團(tuán)不能分化,有的能分化發(fā)育成植株。請回 答下列問題:(1) 甲、乙兩煙草品種花粉的基因型分別是去除細(xì)胞壁;O種細(xì)胞團(tuán)不能分化;能分化的細(xì)2個原生質(zhì)體的相互融合)。(2) 將葉肉細(xì)胞制成原生質(zhì)體時,使用(3) 在細(xì)胞融合技術(shù)中,常用的促融劑是(4) 在大于800勒克斯光照下培養(yǎng),有胞團(tuán)是由 的原生質(zhì)體融合來的(這里只考慮800勒克斯光照下出現(xiàn)不能生長的植株由于該細(xì)胞團(tuán)發(fā)育成的植株自交后代中,在大于 的概率是O五、鞏固練習(xí)1、進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交,首先需要除去細(xì)胞壁?,F(xiàn)提供以下材料和用具:白色洋蔥鱗 片葉、紫色洋蔥鱗片葉、適宜濃度的鹽酸、適宜濃度的蔗

6、糖液、纖維素酶、果膠酶、蒸 餾水和鑷子,顯微鏡、載玻片、蓋玻片等。請你從中選取合適的材料配制成合理的細(xì)胞 壁分解液,并設(shè)計出檢驗它除去細(xì)胞壁的方法和步驟,預(yù)測和解釋實驗的結(jié)果。實驗步驟:配制成細(xì)胞壁分解液。這樣選取的理 配制細(xì)胞壁分解液:選取由是O 檢驗細(xì)胞壁分解液除去細(xì)胞壁的方法:第一步:第二步:第三步:(2) 實驗結(jié)果的預(yù)測和解釋: 2、下圖是植物細(xì)胞雜交過程示意圖,請據(jù)圖回答:(1) 植物體細(xì)胞雜交的第步是去掉細(xì)胞壁,分離出有活力的原生質(zhì)體。 目前此步聚最常 A等分解植物的細(xì)胞用的方法是酶解法,也就是在溫和的條件下用 壁。(2) 過程的發(fā)生,必須進(jìn)行人工誘導(dǎo)。人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的物理方

7、法是:利用_等(至少寫出兩種)促使原質(zhì)體融合;化學(xué)方法是:用 等試劑作為誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)融合。(3) 表示融合后的原生質(zhì)體再產(chǎn)生樣的細(xì)胞壁,新細(xì)胞壁的產(chǎn)生與細(xì)胞內(nèi) 胞器)有密切關(guān)系。(4) 在過程中,細(xì)胞分裂的主要方式是有絲分裂,此種分裂方式的重要意義(或稱特征) 是o(5)植物體細(xì)胞雜交在育種工作中具有廣泛的應(yīng)用價值,其突出的優(yōu)點是可以 o3、下圖表示水稻(體細(xì)胞有 24條染色體)的花藥通過無菌操作, 接入試管后,在一定條件下形成試管苗的培養(yǎng)過程,已知水稻的 基因型為AaBb o(1)愈傷組織是花粉細(xì)胞不斷分裂后形成的不規(guī)則的細(xì)胞團(tuán),在愈傷組織形成過程中,必須從培養(yǎng)基中獲得 和小分子有機(jī)物等營養(yǎng)物

8、質(zhì)(2) 要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂和生長,培養(yǎng)基中應(yīng)有 和(3)愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根,再發(fā)育成具根、莖和葉的植物體。這一過程必須給予光照,其原因是 利用光能制造有機(jī)物,供試管苗生長發(fā)育。試管苗的細(xì)胞中含有條脫氧核苷酸鏈。培育出的試管苗可能出現(xiàn)的基因型有 這種利用花藥離體培養(yǎng)成的試管苗屬于(細(xì)JWYUWLU:棗寸茂*N Ett Sbi >兩類激素。(4)(5)(6)是_o體飛使它繁殖后代必須采取的措施(7)從細(xì)胞工程角度看這種育種方法叫 o4、美國科學(xué)家將分離得到的成熟的胡蘿卜根的韌皮部細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),由單個細(xì)胞發(fā)育成 了完整的新植株。過程圖解如下,回答與之有關(guān)的問題:刁根的韌皮部細(xì)

9、胞一愈佚組織胡蘿卜的恒物體試管幼苗 胚狀體(1) 科學(xué)家所用的這種生物技術(shù)叫做 。依據(jù)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞具有 性。B過程稱為 ,C過程稱為 (2)通過B過程產(chǎn)生的愈傷組織的細(xì)胞與根的韌皮部細(xì)胞在染色體的數(shù)目上是否相同? ;染色體上所含的遺傳物質(zhì)是否相同? ;細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)是否相同? 5、下圖是有關(guān)細(xì)胞工程的圖解。請據(jù)圖回答:(1)下圖是用蘿卜根進(jìn)行組織培養(yǎng)的某些過程示意圖, 請把組織培養(yǎng)的過程按正常順序排列(以字母表示) 圖D上的細(xì)胞團(tuán)是 ,它的特點是 B3-rt.<= 圖C的培養(yǎng)物的變化是o 從原理上講,植物細(xì)胞有形成再生植株的可能性,這是(2 )下圖表示細(xì)胞融合技術(shù)的一些過程。 從

10、A細(xì)胞和B細(xì)胞到C細(xì)胞的過程中,必須用 若A B細(xì)胞為植物細(xì)胞,那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解脫掉的表現(xiàn)。處理。這種酶可Qa能是酶,由此生成的 A和B細(xì)胞稱為6、請回答下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的幾個問題(1) 離體植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)常用的一種培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基,其主要成分中的大量礦質(zhì)元素有 ,培養(yǎng)中常用的兩種植物激素是 和兩者使用時的 、等,都會影響實驗的結(jié)果;MS固體培養(yǎng)基、外植體消毒、培(2)植物組織培養(yǎng)的一般步驟為制備 養(yǎng)、移栽、栽培.(3)圖示植物組織培養(yǎng)的部分過程:植物體過程是離體的器官、 組織或細(xì)胞,過程是, A是(4)組織培養(yǎng)過程中還需要維持一定的外界條件,一是要有適宜的,二是O7.紫草

11、素是紫草細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,可作為生產(chǎn)治療燙傷藥物的原料。用組織培養(yǎng)技術(shù)可以在生物反應(yīng)器中通過培養(yǎng)紫草細(xì)胞生產(chǎn)紫草素。圖2- 1記錄了生物反應(yīng)器中紫草細(xì)胞產(chǎn)量、紫草素產(chǎn)量隨培養(yǎng)時間發(fā)生的變化。(1) 在生產(chǎn)前,需先加入紫草細(xì)胞作為反應(yīng)器中的“種子”。這些“種子”是應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù),將紫草葉肉細(xì)胞經(jīng)過 而獲得的。這項技術(shù)的理論基礎(chǔ)是 O(2) 從圖中可以看出:反應(yīng)器中紫草細(xì)胞的生長呈現(xiàn) 規(guī)律;影響紫草素產(chǎn)量的因素是和 O(3)在培養(yǎng)過程中,要不斷通入無菌空氣并進(jìn)行攪拌的目的是XL L 瞥二嚥切犖答案與提示思考:生物基因的表達(dá)不是孤立的,它們之間是相互調(diào)控、相互影響的,所以馬鈴薯 番茄雜交植株的細(xì)胞中

12、雖然具備兩個物種的遺傳物質(zhì),但這些遺傳物質(zhì)的表達(dá)受 到相互干擾,不能再像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有序表達(dá),雜交植株不能地 上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯就是很自然的了。例題、( 1) aB Ab ( 2)纖維素酶和果膠酶乙兩品種 7/16鞏固練習(xí)1、(1)適宜濃度的蔗糖液,加入適量的纖維素酶和果膠酶 纖維素酶和果膠酶能高效、專一地水解細(xì)胞壁,適宜濃度的蔗糖液不會使原生質(zhì)體過 度吸水而脹破第一步:滴適量的細(xì)胞壁分解液在載玻片水中央,用鑷子撕取一小塊紫色洋蔥鱗片 葉表皮浸泡在其中。一段時間后,制得實驗組裝片 第二步:用適宜濃度的蔗糖液替代細(xì)胞壁分解液,其他操作與制作實驗組裝片相同, 制得對照組裝片

13、第三步:在顯微鏡下觀察比較實驗組裝片和對照組裝片(2) 實驗組裝片的洋蔥細(xì)胞呈分散的紫色球形, 表明細(xì)胞壁已被分解掉。 對照組裝片的 洋蔥細(xì)胞呈相互連接的紫色多邊形,表明細(xì)胞壁未被分解2、( 8 分)( 1)纖維素酶、果膠酶(答出二者之一便可得分)( 2)( 3)( 4)( 5)(3)聚乙二醇(4) 2甲、離心、振動、電刺激(要求至少答出兩種) 高爾基體 將親代細(xì)胞的染色體經(jīng)過復(fù)制后,精確地平均分配到兩個子細(xì)胞中去 克服遠(yuǎn)緣雜交不親合的障礙 無機(jī)鹽3、(10 分)(1)水聚乙二醇2)生長素細(xì)胞分裂素用秋水仙素處理幼苗3)葉綠體 (4)24(5)AB、 Ab、 aB、 ab ( 6)單倍體( 7)植物的組織培養(yǎng)4、( 6 分)( 1)植物組織培養(yǎng)5、( 1).BDCA( 2分)愈傷組織,未分化且較均一(致器官形成 細(xì)胞全能性(2)促融

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