BJS201708食用植物油中乙基麥芽酚的測(cè)定.doc

1、附件食用植物油中乙基麥芽酚的測(cè)定（BJS 201708）1范圍本方法規(guī)定了食用植物油中乙基麥芽酚的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜定性確證和定量測(cè)定方法。本方法適用于芝麻油、芝麻調(diào)和油、菜籽油等食用植物油中乙基麥芽酚的確證及測(cè)定。2原理用甲醇提取試樣中的乙基麥芽酚后，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測(cè)，外標(biāo)峰面積法定量。3試劑和材料除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為 GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水。3.1 試劑3.1.1 甲醇（CH3OH）:色譜純。3.1.2 甲酸（HCOOH）:色譜純。3.2 乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品的分子式、相對(duì)分子量、CAS登錄號(hào)見表1,純度 99%。表1乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品

2、的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號(hào)、分子式、相對(duì)分子量中文名稱英文名稱CAS登錄號(hào)分子式相對(duì)分子量乙基麥芽酚Ethyl maltol4940-11-8C7H 8。3140.143.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制3.3.1 乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱取乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品（3.2） 100.0mg （精確至0.000 1 g）,用甲醇溶解并定容至 100 mL,此溶液濃度為1 mg/mL。貯存于4 c冰箱中，有效期 3個(gè)月。3.3.2 乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液：將乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（3.3.1）用甲醇逐級(jí)稀釋成1.25 g/mL、2.5 g/mL、5閔/mL、25（_g/mL、50聞/mL標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，

3、準(zhǔn)確稱取與試樣基質(zhì)相 應(yīng)的陰性試樣10g （精確至0.01g）,分別加入標(biāo)準(zhǔn)系列溶液 200A，與試樣同時(shí)進(jìn)行提取，制 成最終濃度為 12.5ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、250ng/mL、500ng/mL標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液。臨 用時(shí)配制。3.4 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1mL用水稀釋至1000mL,用濾膜（0.22甲，水相）過濾后備用。3.5 0.1%甲酸甲醇溶液：取甲酸1mL用甲醇稀釋至1000mL,用濾膜（0.22 rp,有機(jī)相）過濾后備用o 4儀器和設(shè)備4.1 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源。4.2 渦旋振蕩器。4.3 分析天平：感量為 0. 1 mg和0.01

4、go4.4 離心機(jī)：可冷卻至 4C,轉(zhuǎn)速9000 r/min以上。4.5 具塞刻度試管：20 mL。4.6 聚丙烯離心管：50 mLo4.7 移液器：10 mL和250比。5分析步驟5.1 試樣制備準(zhǔn)確稱取10g試樣（精確至0.01g）置于50 mL聚丙烯離心管中，用移液器準(zhǔn)確加入 10mL甲醇（3.1.1）,渦旋振搖2min, 4c條件下9000 r/min離心10min,將上清液移入 20mL具塞刻度試管中，下層油液再用 10mL甲醇重復(fù)提取一次，合并上清液，用甲醇定容至20mL ,經(jīng)微孔濾膜（0.22 m,有機(jī)相）過濾，供液相色譜 -串聯(lián)質(zhì)譜分析。5.2 儀器參考條件5.2.1 液相色譜

5、條件a）色譜柱：C18色譜柱，100mmXZlmm （id），7科或性能相當(dāng)者。b）流動(dòng)相：A為0.1%甲酸水溶液（3.4）, B為0.1%甲酸甲醇溶液（3.5）,梯度洗脫程序見表2。c）流速：0.3 mL/min。d）柱溫：40 Coe）進(jìn)樣量：2Lo表2梯度洗脫程序時(shí)間/min流動(dòng)相比例/ （%）流動(dòng)相A流動(dòng)相B050500.550501.51585215854595559552.2質(zhì)譜條件 a）電離方式：電噴霧正離子模式；b）監(jiān)測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（ MRM ）;c）氣簾氣：40 psi;d）碰撞氣：7 psi;e）離子噴霧電壓：5500V ;f）離子源溫度：60

6、0 C；g）定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、去簇電壓和碰撞能見表3。表3乙基麥芽酚的定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、去簇電壓和碰撞能中文名稱定性離子對(duì)/（m/z）（母離子/子離子）定量離子對(duì)/（m/z）（母離子/子離子）去簇電壓/V碰撞能/V乙基麥芽酚141.1/126.1141.1/126.113027141.1/71.0130375.3定性確證按照儀器參考條件（5.2）測(cè)定試樣溶液和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，如果試樣中的乙基麥芽酚質(zhì)量色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液一致（變化范圍在2.5%之內(nèi)）；且試樣中乙基麥芽酚的兩個(gè)子離子的相對(duì)豐度比（k）與濃度相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中乙基麥芽酚的兩個(gè)子離子的相對(duì)豐度比相 比，其允許偏差不

7、超過表 4規(guī)定的范圍，則可判定為試樣中存在乙基麥芽酚。表4定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差相對(duì)離子豐度（%）k5050k2020k10k10允許的最大偏差（%）+ 20+25+30+ 50乙基麥芽酚的參考保留時(shí)間約為1.35 min,質(zhì)量色譜圖參見附錄A中圖A.1-圖A.2。5.4定量測(cè)定5.4.1 工作曲線的制作將乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液（3.3.2）按儀器參考條件（5.2）進(jìn)行測(cè)定，得到相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液的質(zhì)量色譜峰面積。以標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以質(zhì)量色譜峰 的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線。5.4.2 試樣溶液的測(cè)定將試樣溶液（5.1）按儀器參考條件（5.2）進(jìn)行測(cè)定，

8、得到相應(yīng)的試樣溶液的質(zhì)量色譜峰 面積。根據(jù)工作曲線得到試樣溶液中乙基麥芽酚的濃度。6結(jié)果計(jì)算試樣中乙基麥芽酚含量按式（1）計(jì)算：X= （1）mKiOOO式中:X一試樣中乙基麥芽酚的含量，單位為微克每千克（ 聞/kg）;c 由工作曲線得出的試樣溶液中乙基麥芽酚的濃度，單位為納克每毫升（ng/mL ） ；V 試樣溶液定容體積，單位為毫升（mL） ；m 試樣質(zhì)量，單位為克（g） ；計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。7 回收率及精密度芝麻油、芝麻調(diào)和油、菜籽油中乙基麥芽酚加標(biāo)濃度為25 g/kg 50g/kg和250 d g/kg時(shí),乙基麥芽酚的回收率在80.5% 109.3%之間，精密度在0.7%6.2%之間。8 檢出限當(dāng)取樣量為10.00g,定容體積為20mL時(shí)，本方法中乙基麥芽酚的檢出限為25.0科g/kg附錄A乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)溶液多反應(yīng)監(jiān)測(cè)質(zhì)量色譜圖A.1乙基麥芽酚定量離子對(duì)質(zhì)量色譜圖(m/z 141.1/126.1)S3 -SU 我三Sa口圖 A.2 乙基麥芽酚定性離子對(duì)質(zhì)量色譜圖( m/z 14