第三講糖蛋白質(zhì)鑒定

1、具有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵具有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的化合物在堿性條件下與的化合物在堿性條件下與Cu2反應(yīng)生成絡(luò)合物反應(yīng)生成絡(luò)合物含醛基的可溶性還原糖含醛基的可溶性還原糖將將Cu(OH)2還原為還原為Cu2O沉淀沉淀反應(yīng)原理反應(yīng)原理0.01 g/mL CuSO4溶液溶液0.1 g/mL NaOH溶液溶液0.05 g/mL CuSO4溶液溶液0.1 g/mL NaOH溶液溶液B液液A液液乙液乙液甲液甲液成分成分雙縮脲試劑雙縮脲試劑斐林試劑斐林試劑比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目都含有都含有NaOH、CuSO4兩種成分，且所用兩種成分，且所用NaOH溶溶液濃度都是液濃度都是0.1 g/mL相同點(diǎn)相同點(diǎn)樣液變紫色樣液變紫色

2、樣液淺藍(lán)色樣液淺藍(lán)色棕色棕色磚紅色磚紅色反應(yīng)現(xiàn)象反應(yīng)現(xiàn)象不需加熱不需加熱5065水浴加熱水浴加熱反應(yīng)條件反應(yīng)條件先加入先加入A液液2 mL搖勻，再搖勻，再加加34滴滴B液搖勻液搖勻甲、乙兩液等量混勻甲、乙兩液等量混勻后立即使用后立即使用添加順序添加順序第第10 d有可溶性糖，不排除有還原糖的可能，故加入斐林有可溶性糖，不排除有還原糖的可能，故加入斐林試劑，水浴加熱后可能出現(xiàn)磚紅色沉淀；試劑，水浴加熱后可能出現(xiàn)磚紅色沉淀；種子中一定有蛋白質(zhì)，加入雙縮脲試劑后會(huì)出現(xiàn)紫色反應(yīng)；種子中一定有蛋白質(zhì)，加入雙縮脲試劑后會(huì)出現(xiàn)紫色反應(yīng)；第第30 d種子中有脂肪，與蘇丹種子中有脂肪，與蘇丹染液發(fā)生反應(yīng)，呈染液

3、發(fā)生反應(yīng)，呈現(xiàn)橘黃色；現(xiàn)橘黃色；第第40 d種子中無(wú)淀粉，加入碘液后不會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。種子中無(wú)淀粉，加入碘液后不會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。發(fā)芽的小麥種子勻漿中含有淀粉酶，發(fā)芽的小麥種子勻漿中含有淀粉酶，淀粉酶能使小麥種子中的淀粉水解產(chǎn)淀粉酶能使小麥種子中的淀粉水解產(chǎn)生麥芽糖等還原糖。生麥芽糖等還原糖。 14號(hào)試管中加入斐林試劑后，因號(hào)試管中加入斐林試劑后，因1、3號(hào)試管號(hào)試管中是蒸餾水而無(wú)還原糖，故顯示斐林試劑本身中是蒸餾水而無(wú)還原糖，故顯示斐林試劑本身的藍(lán)色，的藍(lán)色，2號(hào)試管中雖含還原糖，但未水浴加號(hào)試管中雖含還原糖，但未水浴加熱，故仍呈藍(lán)色，熱，故仍呈藍(lán)色，4號(hào)試管進(jìn)行水浴加熱后出號(hào)試管進(jìn)行水浴加熱后出現(xiàn)磚

4、紅色沉淀?，F(xiàn)磚紅色沉淀。 用于鑒定還原糖的斐林試劑甲液和乙液，必須混合均勻用于鑒定還原糖的斐林試劑甲液和乙液，必須混合均勻后再使用，而鑒定蛋白質(zhì)時(shí)需先加后再使用，而鑒定蛋白質(zhì)時(shí)需先加A液，再加液，再加B液，且兩液，且兩者者CuSO4溶液濃度也不同；溶液濃度也不同；用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)時(shí)，不需要加熱。用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)時(shí)，不需要加熱。 根據(jù)溶液甲中的顏色變化可知其含有蛋白質(zhì)；根據(jù)溶液甲中的顏色變化可知其含有蛋白質(zhì)；根據(jù)乙溶液中的顏色變化可根據(jù)乙溶液中的顏色變化可知其含有淀粉；知其含有淀粉；甲、乙混合后，兩溶液中的物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生了還原糖，甲、乙混合后，兩溶液中的物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生了還原糖，由此可知，甲溶液中含有淀粉酶，乙溶液中含有淀粉。由此可知，甲溶液中含有淀粉酶，乙溶液中含有淀粉。20和和30培養(yǎng)條件下相比較，培養(yǎng)條件下相比較，30時(shí)淀粉酶的活性時(shí)淀粉酶的活性相對(duì)較高，淀粉酶催淀粉水解成麥芽糖的速率更快，相對(duì)較高，淀粉酶催淀粉水解成麥芽糖的速率更快，相同條件下產(chǎn)生的麥芽糖更多。相同條件下產(chǎn)生的麥芽糖更多。麥芽糖屬于還原糖，與斐林試劑反應(yīng)生成磚紅色沉淀，麥芽糖屬于還原糖，與斐林試劑反應(yīng)生成磚紅色沉淀，麥芽糖越多顯色越明顯，斐林試劑本身為藍(lán)色，可得出麥芽糖越多顯色越