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1、實(shí)驗(yàn)十一家兔呼吸運(yùn)動的調(diào)節(jié)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 學(xué)習(xí)記錄家兔呼吸運(yùn)動的方法。2. 觀察多種因素對呼吸運(yùn)動的影響。二、實(shí)驗(yàn)原理人體及高等動物的呼吸運(yùn)動所以能持續(xù)地、有節(jié)律地進(jìn)行,是由于體內(nèi)調(diào)節(jié)機(jī)制的存在。體內(nèi)、外的各種刺激,可以直接作用于中樞或不同部位的感受器、反射地影響呼吸運(yùn)動,以適應(yīng)機(jī)體代謝的需要。肺的牽張反射參與呼吸節(jié)律的調(diào)節(jié)。三、動物與器材1實(shí)驗(yàn)動物:家兔2實(shí)驗(yàn)器材:兔體手術(shù)臺、手術(shù)器械、張力傳感器、PowerLab信號采集系統(tǒng)、Y型氣管插管、20ml與1ml注射器、橡皮管(長1.5m,內(nèi)徑1cm)。3. 實(shí)驗(yàn)試劑:生理鹽水、2%戊巴比妥鈉、尼可剎米、1%乳酸。四、實(shí)驗(yàn)方法與步驟1. 家兔麻
2、醉稱重一麻醉(2%戊巴比妥鈉,2ml/kg,耳緣靜脈注射)一固定(仰臥位固定)2. 手術(shù)分離頸部氣管和神經(jīng)頸部皮膚切口6-7cm鈍性分離頸部肌肉層一一做“T”形切口插入氣管插管一一分離雙側(cè)迷走神經(jīng)3. 分離劍突軟骨切開皮膚,分離表面組織使劍突軟骨和骨柄暴露,金冠剪剪去一段劍突軟骨的骨柄,使劍突軟骨與胸骨完全分離,但保留下方的膈肌片。4. 打開Powerlab信息采集系統(tǒng),用金屬鉤鉤住游離的劍突軟骨,連接各裝置。(1)記錄正常的呼吸曲線,并識別吸氣與呼氣運(yùn)動與曲線方向的關(guān)系。(2)增加無效腔對呼吸的影響:插管一側(cè)加上1.5米橡皮管,另一側(cè)用止血鉗夾閉。(3)增加氣道阻力對呼吸的影響:記錄一段正常
3、呼吸曲線后,同時(shí)夾閉氣管插管兩側(cè)管。(4)肺牽張反射對呼吸的影響:插管上連接20ml注射器,在吸氣末打氣,呼氣末抽氣。(5)結(jié)扎雙側(cè)迷走神經(jīng),重復(fù)第4步。(6)雙節(jié)扎一側(cè)迷走神經(jīng),剪斷雙側(cè)迷走神經(jīng),分別刺激中樞端和外周端。(7)靜脈注射尼可剎米,0.5ml/只兔子。(8)靜脈注射1%乳酸,0.51ml/只兔子。(9)氣胸對呼吸的影響:剪斷右側(cè)肋骨,使兔子氣胸。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1家兔正常呼吸家兔正常呼吸時(shí),呼吸肌有節(jié)律地收縮和舒張,其中上升支為吸氣期,下降支為呼氣。文件12增加無效腔對呼吸的影響增加無效腔后,發(fā)現(xiàn)家兔的呼吸加大加深,呼吸頻率明顯加快。圖2增加無效腔后家兔呼吸運(yùn)動曲線圖3增加氣道阻力對
4、呼吸的影響增加氣道阻力(兩側(cè)管同時(shí)閉氣)后,發(fā)現(xiàn)家兔呼吸迅速加強(qiáng),速率減慢。圖3增加氣道阻力后家兔呼吸運(yùn)動曲線圖4肺牽張反射對呼吸的影響(1)吸氣末往肺部打氣,發(fā)現(xiàn)家兔的吸氣和呼氣都加長加深。圖4肺牽張反射(向肺部通氣)家兔呼吸運(yùn)動曲線圖(2)呼氣末從肺部抽氣,發(fā)現(xiàn)家兔的呼吸加深。圖5肺牽張反射(從肺部抽氣)家兔呼吸運(yùn)動曲線圖5雙節(jié)扎一側(cè)迷走神經(jīng),剪斷兩側(cè)迷走神經(jīng)后,肺牽張反射對呼吸的影響剪斷迷走神經(jīng)后,向肺部通氣或從肺部抽氣,發(fā)現(xiàn)家兔的呼吸均出現(xiàn)輕微的加深變慢,但不明顯。圖6(剪斷迷走神經(jīng))通氣時(shí)家兔的呼吸運(yùn)動曲線圖7(剪斷迷走神經(jīng))抽氣時(shí)家兔的呼吸運(yùn)動曲線圖6.刺激迷走神經(jīng)對家兔呼吸運(yùn)動的
5、影響(1)剪斷迷走神經(jīng)后,刺激迷走神經(jīng)中樞端,呼吸強(qiáng)度加大,頻率加快。圖8刺激迷走神經(jīng)中樞段家兔呼吸運(yùn)動曲線圖(200脈沖,振幅2V,波寬ImS,頻率40Hz)(2)刺激迷走神經(jīng)外周端,家兔的呼吸速率提高,但呼吸強(qiáng)度稍微減弱。圖9刺激迷走神經(jīng)外周端家兔呼吸運(yùn)動曲線圖(200脈沖,振幅2V,波寬ImS,頻率40Hz)7靜脈注射尼可剎米對家兔呼吸運(yùn)動的影響注射尼可剎米,發(fā)現(xiàn)家兔的呼吸運(yùn)動曲線迅速上升,反射性呼吸明顯加快加深。圖10注射尼可剎米后家兔呼吸運(yùn)動曲線圖8靜脈注射乳酸對家兔呼吸運(yùn)動的影響注射乳酸后,發(fā)現(xiàn)家兔的呼吸運(yùn)動曲線迅速加快加強(qiáng)。圖11注射乳酸后家兔呼吸運(yùn)動曲線圖9氣胸對呼吸的影響剪斷
6、肋骨后,家兔在短暫的呼吸加快后迅速減弱。圖12剪斷肋骨后家兔呼吸曲線圖六、分析與討論1家兔正常呼吸呼吸中樞產(chǎn)生的節(jié)律性電活動,通過脊髓發(fā)出的膈神經(jīng)和肋間神經(jīng)傳導(dǎo)到膈肌和肋間外肌,使之收縮和舒張產(chǎn)生規(guī)律的呼吸運(yùn)動。膈肌位于胸腔與腹腔之間,構(gòu)成胸腔的底。膈肌為主要的呼吸肌,收縮時(shí),膈肌下降,胸腔容積增大,產(chǎn)生吸氣;舒張時(shí),膈肌上升恢復(fù)原位,胸腔容積減小,表現(xiàn)為呼氣。膈神經(jīng)或膈肌的放電情況能反映延髓呼吸中樞活動的強(qiáng)弱以及呼吸運(yùn)動的強(qiáng)弱。所以膈肌放電的節(jié)律性應(yīng)與呼吸的節(jié)律性是一致的,實(shí)驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證了這一點(diǎn)。膈肌的收縮活動受來自中樞的傳出神經(jīng)支配,傳出沖動的節(jié)律與頻率,影響膈肌的收縮節(jié)律、頻率與強(qiáng)度。圖1
7、為張力傳感器連于劍突出測得的張力變化曲線,反映的主要的是膈肌的變化,上升為收縮,下降為舒張。2.增加無效腔對呼吸的影響增加無效腔后,發(fā)現(xiàn)家兔的呼吸加大加深,呼吸頻率明顯加快(如圖2所示)。無效腔包括解剖無效腔、生理無效腔。即不能進(jìn)行氣體交換的呼吸道。解剖無效腔包括從口、鼻至細(xì)支氣管的整個(gè)呼吸道,既無呼吸上皮,又無肺循環(huán)血液供應(yīng),不能參與肺泡與血液之間的交換。每次吸氣時(shí),首先進(jìn)入肺泡的是上次呼氣之末存在呼吸道內(nèi)的肺泡氣,然后才是新吸入的空氣;每次呼氣時(shí),首先呼出的是上次呼氣之末充盈于呼吸道內(nèi)的吸入氣,然后才是肺泡氣。因此,每次呼吸中最后吸入的充盈于呼吸道的這部分氣體,恰是最先呼出的、未與肺泡氣混
8、合、未參與氣體交換的氣體,其量為解剖無效腔的容量。實(shí)驗(yàn)中通過插管的方式增大無效腔,也就是減小了進(jìn)入肺泡的潮氣量,即每次的有效氣體更新變小。效果促使02分壓下降,C02分壓上升;使其反射性的調(diào)節(jié)使呼吸加深加快。所以膈肌放電的變化幅度加大,頻率有微量增大。反映到膈肌的收縮曲線,由于收縮頻率的增大,為了維持正常的肺部通氣量,所以收縮強(qiáng)度減弱。3增加氣道阻力對呼吸的影響增加氣道阻力(兩側(cè)管同時(shí)閉氣)后,發(fā)現(xiàn)家兔呼吸迅速加強(qiáng),速率減慢(如圖3所示)。其原因分析如下:用夾閉雙側(cè)側(cè)管的方式增大氣道阻力實(shí)際上是在正常的呼吸中忽然阻斷整個(gè)呼吸系統(tǒng)和外界的聯(lián)系,使其無法吸入02,此時(shí)02無法供應(yīng)且在不斷的消耗,C
9、02不斷產(chǎn)生并占據(jù)肺內(nèi)環(huán)境,導(dǎo)致呼吸系統(tǒng)中02分壓下降,C02分壓上升。C02濃度的上升會降低內(nèi)環(huán)境的PH值,刺激呼吸中樞和外周化學(xué)感受器,使其反射性的調(diào)節(jié),從而呼吸加深,所以膈肌放電的變化幅度加大。另一方面,如在吸氣時(shí)增加呼吸道阻力,因吸氣肌收縮阻力增大,肌梭受到較強(qiáng)的刺激,可反射性使吸氣肌加強(qiáng),以克服阻力增加吸入氣量,如在呼氣時(shí)增加呼吸道阻力,呼氣肌也將產(chǎn)生相同的反應(yīng)。所以呼吸運(yùn)動強(qiáng)度加大,速率減慢。4肺牽張反射對呼吸運(yùn)動的影響吸氣末往肺部打氣,發(fā)現(xiàn)家兔的吸氣和呼氣都加長加深(如圖4);呼氣末從肺部抽氣,發(fā)現(xiàn)家兔的呼吸加深(如圖5)。出現(xiàn)這兩種現(xiàn)象的原因是:肺牽張感受器位于支氣管和細(xì)支氣管
10、壁的平滑肌中,對牽張刺激敏感。當(dāng)向肺內(nèi)注入20ml空氣,同時(shí)夾閉氣管插管的另一側(cè)管,持續(xù)充氣會擴(kuò)張家兔的肺,當(dāng)支氣管和細(xì)支氣管擴(kuò)張時(shí),感受器興奮,沖動經(jīng)迷走神經(jīng)上行傳入延髓,抑制吸氣中樞,引起呼氣。這一反射作用在于阻止吸氣過長過深,引起被動呼氣,從而加速了吸氣和呼氣活動的交替,所以吸氣呼氣都會加深。反之,從肺部抽氣,造成了肺部的縮小,信號通過迷走神經(jīng)傳入呼吸中樞的程度減弱,對于吸氣神經(jīng)元的抑制程度減小,引起吸氣神經(jīng)元發(fā)生興奮,增加呼吸的強(qiáng)度。5雙節(jié)扎一側(cè)迷走神經(jīng),剪斷兩側(cè)迷走神經(jīng)后,肺牽張反射對呼吸的影響剪斷迷走神經(jīng)后,向肺部通氣或從肺部抽氣,發(fā)現(xiàn)家兔的呼吸均出現(xiàn)輕微的加深變慢,但不明顯(如圖
11、6,7)。其原因如下:肺牽張反射的肺擴(kuò)張反射的作用在于阻抑吸氣過長過深,促使吸氣及時(shí)轉(zhuǎn)入呼氣,從而加速了吸氣和呼氣活動的交替,調(diào)節(jié)呼吸的頻率和深度。當(dāng)阻斷迷走神經(jīng)后,中斷了肺牽張反射的傳入通路,使肺牽張反射的生理作用被取消。最終導(dǎo)致呼吸運(yùn)動的加深變慢。6剪斷迷走神經(jīng)后,刺激迷走神經(jīng)對家兔呼吸運(yùn)動的影響(1)剪斷迷走神經(jīng)后,刺激迷走神經(jīng)中樞端,頻率加快,呼吸強(qiáng)度加大(如圖8所示)。其原因分析如下:剪斷迷走神經(jīng)后,神經(jīng)沖動傳不到中樞。但當(dāng)刺激迷走神經(jīng)中樞端時(shí),相當(dāng)于恢復(fù)了迷走神經(jīng)的功能,而迷走神經(jīng)中含有肺牽張反射傳入纖維,肺牽張反射傳入神經(jīng)纖維經(jīng)由迷走神經(jīng)傳入中樞,調(diào)節(jié)呼吸運(yùn)動。電刺激迷走神經(jīng)中樞
12、端,引起這兩種纖維成分都同時(shí)持續(xù)興奮,故家兔的呼吸運(yùn)動變得淺快,呼吸頻率顯著加快。(2)刺激迷走神經(jīng)外周端,家兔的呼吸速率提高,但呼吸強(qiáng)度稍微減弱(如圜所示)。其原因分析如下:剪斷迷走神經(jīng),失去了中樞的抑制,呼吸加深變慢,對迷走神經(jīng)外周端進(jìn)行刺激,沖動傳入延髓,抑制了吸氣神經(jīng)元的活動,使得吸氣程度部分被抑制,一定程度上引起了被動的呼氣,由此呼吸的速率提高,呼吸強(qiáng)度減弱。7靜脈注射尼可剎米對家兔呼吸運(yùn)動的影響注射尼可剎米,發(fā)現(xiàn)家兔的呼吸運(yùn)動曲線迅速上升,反射性呼吸明顯加快加深(如圖10所示)。其原因分析如下:尼可剎米具有直接興奮延髓呼吸中樞與刺激頸總動脈化學(xué)感受器的作用,它主要通過興奮呼吸中樞,增加呼吸中樞對C02的敏感性影響呼吸運(yùn)動。因此,當(dāng)靜脈注射尼可剎米時(shí),可以看到呼吸運(yùn)動出現(xiàn)明顯的興奮過程。8靜脈注射乳酸對家兔呼吸運(yùn)動的影響注射乳酸后,家兔的呼吸運(yùn)動曲線迅速加快加強(qiáng)(如圖11)。其原因分析如下:注射乳酸,使家兔血液中的H+濃度升高,刺激外周化學(xué)感受器和中樞化學(xué)感受器,中樞化學(xué)感受器對H+的敏感較外周的高,但H+不易通過血-腦屏障,因而此時(shí)H+的效應(yīng)主要是刺激外周化學(xué)感受器,使膈肌、肋間外肌收縮,肺通氣量增加,呼吸加深加快。9氣胸對呼吸運(yùn)動的影響剪斷右
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