狨猴文檔2課件

實驗動物的管理

郭中敏

中山大學實驗動物中心

ZHONGMINGUO@YAHOO.COM.CN

2013.05.28

實驗動物的管理

清潔與消毒

動物疫病監(jiān)測

廢棄物及動物尸體的無害化處理實驗動物按實驗動物病原微生物分級根據(jù)2010版國家標準，按微生物及寄生蟲的控制程度，將實驗動物分為普通級、清潔級、無特定病原體動物和無菌級四個級別。普通級：是指不攜帶所規(guī)定的人獸共患病原和烈性傳染病的動物；如流行性出血熱、鼠痘、弓形蟲等；清潔動物：是指除普通動物應該排除的病原外，還應不攜帶對動物健康危害和對科學研究干擾較大的病原的動物；SPF動物:(specificpathogenfreeamimal）是指除清潔動物應該排除的病原外，還應不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學實驗干擾大的病原動物；如綠膿桿菌等；無菌動物:(germfreeanimal,GF)指動物體內(nèi)不可檢出一切致病病原體的動物實驗動物管理實驗動物管理悉生動物凈化：其凈化方法與清潔級動物相似，只是應該將引進或購買的無菌動物種群或剖腹產(chǎn)凈化后的動物保持在隔離環(huán)境而進行無菌化生產(chǎn)管理里。由于無菌動物飼養(yǎng)管理困難、生活能力較差實施起來較困難。科研人員常將對機體有益的1-3種已知微生物如大腸埃希氏桿菌、表皮葡萄球菌、乳桿菌等喂給無菌動物，使之在腸道內(nèi)定居，從而獲得悉生動物，其在多種研究試驗種可以代替無菌動物。在日常管理中除注意飼養(yǎng)條件的無菌化和飼養(yǎng)管理的標準化外，更要定期對動物呼吸道、糞便、飼料、飲水和墊料等進行微生物和寄生蟲檢測，以檢查是否被污染和接種的微生物是否定居，對未能定居的菌種還應進行補充接種。2實驗過程中動物的管理實驗過程中動物的質(zhì)量控制：注意保持設(shè)施內(nèi)環(huán)境條件的合格和飼養(yǎng)管理標準化：對動物的采購、運輸、傳遞、檢疫、實驗操作等過程進行微生物學控制，對長期實驗的動物及其環(huán)境進行跟蹤監(jiān)測。生產(chǎn)室或從事科研實驗的人員應根據(jù)所開實驗的需要，確定所要購置動物的種類和數(shù)量，并由專人登記，不準謊報、隱瞞。實驗動物必須由專門的合法單位培育，并達到醫(yī)學實驗的要求，不許捕獲野生動物來替代實驗動物，嚴禁經(jīng)不明、不正當?shù)耐緩劫徶?。所購置的實驗動物必須從實驗要求出發(fā)，經(jīng)過有關(guān)部門的檢疫，合格后方可購置，禁止因貪圖小利而購置不合格的動物。實驗動物在運輸中應嚴格遵守運輸規(guī)定，由專人負責運輸全程，需要長途運輸時，要處理好動物的飲食、糞便的排放等問題。實

驗

動

物

的

購

置新購實驗動物從事實驗的人員根據(jù)實驗需要從有生產(chǎn)資質(zhì)的單位購買動物或引種動物。動物到達后，首先檢查外包裝箱的密封情況，若有破損應及時跟供應商聯(lián)系，采取相應處理措施。檢查供應單位提供的材料，應包括：品種、品系及亞系的確切名稱；遺傳背景或其來源；

微生物檢測狀況；生產(chǎn)許可證；合格證書(設(shè)施、實驗動物等合格證)；引種證明；供應單位負責人簽名及日期。實

驗

動

物

的

購

置

動物進入屏障系統(tǒng)的程序?qū)徍蓑炇蘸?，將包裝箱表面先用0.1％過氧乙酸(或75％酒精等)消毒液徹底擦拭消毒1次后，放進傳遞窗，最后用2％過氧乙酸等消毒液進行噴霧消毒，同時開紫外燈，照射消毒30分鐘。關(guān)紫外燈，在檢疫接收室打開包裝箱，將動物分籠，并在每籠上面掛上標簽，標簽內(nèi)容如下所示：動物名稱、品系、周齡(體重)、購進日期、動物數(shù)量、性別、操作者、籠號。實

驗

動

物

的

購

置實驗動物的傳遞和檢疫普通級動物：從運輸器具中取出后，先進行外觀檢查，看動物優(yōu)良的標準：精神狀態(tài)好，運動活潑，肢體勻稱，四肢無殘缺、畸形和外傷，被毛光亮、整齊，皮膚彈性好，天然孔無異常分泌物等，如果發(fā)現(xiàn)異常，退貨或換貨。如果正常，將動物裝入檢疫間進行檢疫。檢疫周期：本地購進兔、豚鼠為3-7天，犬、猴為7-14天；國內(nèi)異地引進動物檢疫期延長7-14天；國外引進動物不少于30天動物質(zhì)量和設(shè)施內(nèi)環(huán)境的跟蹤監(jiān)測:在實驗過程中，尤其是長期實驗的動物，獸醫(yī)通過監(jiān)測的質(zhì)量和設(shè)施內(nèi)環(huán)境指標的變化，及時發(fā)現(xiàn)和解決設(shè)施內(nèi)管理中存在的問題，從而保證試驗中動物質(zhì)量的穩(wěn)定性、清潔區(qū)的清掃與消毒每天飼喂工作結(jié)束后，首先清掃地上的垃圾裝包，移入污物走廊，等離開時帶至垃圾存放處。每天將換下的飼養(yǎng)籠移入污物走廊，等離開時帶至清洗間。每天用消毒液依次對飼養(yǎng)架、實驗操作臺、墻面和地面進行擦拭。每周一次用消毒液對屏障系統(tǒng)進行空氣噴霧消毒。一批動物清除后對房間進行熏蒸消毒方可進入新一批動物。清潔與消毒動物疫病監(jiān)測動物疫病監(jiān)測樣品采集、運送、保存應注意以下幾方面的問題：樣品采集要有代表性、合理性開展疫病監(jiān)測工作采樣時，要根據(jù)監(jiān)測方案的整體要求、目的、方法和措施，結(jié)合當?shù)貐^(qū)域分布，選擇具有代表性的點或養(yǎng)殖場（戶），做到采樣布局合理，應盡可能全面、充分地反映總體的特征。監(jiān)測抗體一般采集免疫后10～15d的動物靜脈血液，靜置后析出血清；監(jiān)測病原采集樣品，活體動物采集其血液、口鼻分泌物、乳汁、膿汁或局部滲出液、生殖道分泌物等。對死亡動物尸體，應剝?nèi)テつw，打開胸腹腔，有選擇的采集相應含菌（毒）量最多的臟器或內(nèi)容物。如口蹄疫監(jiān)測中應當采集發(fā)病動物（羊、豬）未破裂的舌面或蹄部、鼻鏡、乳頭等部位的水泡皮和水泡液，屠宰后采集淋巴結(jié)、脊髓、肌肉等；結(jié)核病細菌性檢查時，死尸可采淋巴結(jié)及其它組織，活體可采其痰、乳、精液、子宮分秘物、尿和糞便等。樣品采集要有時效性、適量性由于監(jiān)測對象和監(jiān)測項目的不同，樣品采集是有時間要求的，應嚴格按監(jiān)測對象和項目所要求的時間及時采樣。目前疫病監(jiān)測主要通過檢測抗體和病原兩種方法。但是，疫苗免疫或病原感染后，機體內(nèi)的抗體或病原濃度在不同時期是不同的，往往監(jiān)測到的數(shù)值是不一樣的。所以要根據(jù)監(jiān)測的目的選取不同的時間采取樣品。動物疫病監(jiān)測樣品采集要有典型性、針對性動物疫病監(jiān)測采集樣品時，要根據(jù)檢測的目的，以及實驗室監(jiān)測方法的不同，進行有針對性的采集樣品。同時應根據(jù)發(fā)病動物典型臨床癥狀、病變、是否治療和有無并發(fā)癥等情況，選擇未治療、病變明顯、兼顧并發(fā)癥等準確采樣、采集典型樣品。動物疫病監(jiān)測樣品采集要有無菌性、安全性對于準備進行病原學及血清學監(jiān)測的樣品，所用包裝工具、容器和采集器械必須經(jīng)過高壓滅菌處理，容器必須完整無損，密封不漏出液體，采樣必須按無菌常規(guī)操作，同時要注意樣品和環(huán)境的污染。采樣時要做好個人防護，穿工作服、戴手套、口罩等，防止病原感染和外來病的擴散，避免事故發(fā)生。動物疫病監(jiān)測樣品保存要有妥善性、低溫性樣品采集后要及時送檢，不能及時監(jiān)測的，要妥善低溫保存。但保存時間過長，樣品由于血液或組織中的酶、微生物的影響，蛋白質(zhì)分解代謝，甚至腐敗、變質(zhì)，加之病原自身分解和死亡，導致監(jiān)測濃度偏低，或者監(jiān)測不到，疫病監(jiān)測也就失去了預警意義。動物疫病監(jiān)測動物尸體包括各種已經(jīng)死亡動物的軀體(完整或部分)。廢棄物,指在實驗過程中產(chǎn)生的具有直接或者間接的感染性、毒性以及其他危害性的動物組織和體液。主要包括實驗動物解剖后的內(nèi)臟、血液、組織液及擦拭的污物和病理切片后廢棄的動物組織、病理蠟塊等。廢

棄

物

及

動

物

尸

體

的

無

害

化

處

理

實驗動物在飼養(yǎng)、實驗過程中會產(chǎn)生大量固體、液體和氣體廢棄物,其中有些對人和動物有微生物性、化學性或放射性的危害,如不妥善處理,不但會影響動物實驗的準確性也極易污染環(huán)境,直接或間接地影響工作人員或周圍群眾的生活和健康安全。無害化處理即用物理化學方法,使帶菌、帶毒、帶蟲的患病動物及其副產(chǎn)品和尸體失去傳染性與毒性而達到無害的處理。無害化處理的必要性

墊料墊料是數(shù)量最大的廢棄物,其數(shù)量涉及處理費用的高低。減少廢棄物的量是解決廢棄物污染問題的最佳途徑。不同污染程度的廢棄墊料,應以不同方式處理。一般性無害廢棄墊料,指單純動物實驗所清理出來的墊料,可直接進行最終處理,常用方法包括堆肥和苗圃處理、焚燒、經(jīng)下水道排放或視作一般廢棄物掩埋。焚燒方式處理墊料符合環(huán)保要求,但費用高(需建造專用的焚燒爐);經(jīng)下水道排放,每年應定期處理窨井中沉淀下的污泥;掩埋處理,應注意的是有傳染性或放射性物質(zhì)污染的墊料、感染性廢棄墊料需經(jīng)滅菌后方可當無害化廢棄墊料予以掩埋。固

體

廢

棄

物

的

處

理

方

法

每天清洗籠、舍、器械及地板,有大量污水從動物室、洗籠機、洗滌間經(jīng)下水道排放。這些廢水主要含有動物排泄的糞尿,如符合排放標準,可直接排入廢水處理系統(tǒng)。實驗動物設(shè)施需定期清潔消毒,所使用的消毒劑一般含有抗菌物質(zhì)、清潔劑、pH緩沖劑、去毛劑和除臭劑等,要按指示稀釋濃度使用,避免過量使用造成污水增加,使用后要徹底清洗,避免殘留物形成不溶性化合物,對動物有害。液

體

廢

棄

物

的

處

理

方

法嚙齒類動物設(shè)施一般不設(shè)排水口,必須有排水口的動物房,其排水口的位置、口徑大小、排水溝及地板斜度必須符合標準,避免排水困難造成積水,并能做到有效密封。排水管與主干道間應直接連接,不宜彎曲太多。感染性動物實驗設(shè)施所產(chǎn)生的廢水或許含有致病微生物,最好能先集中在貯水池中消毒,需經(jīng)化學處理消毒(如次氯酸鈉和臭氧等)或加熱高壓蒸汽滅菌處理后方可排入市政污水管網(wǎng)。液

體

廢

棄

物

的

處

理

方

法氨、氯、硫化氫和硫醇等具特殊氣味的有害氣體,由動物糞尿發(fā)酵分解產(chǎn)生。對嚙齒類動物,降低飼養(yǎng)密度、增加墊料更換次數(shù)、增加動物室的通風換氣次數(shù)、使用通風換氣的IVC飼養(yǎng)盒、使用隔離器及層流架等都可減少廢氣的產(chǎn)生和擴散。大型動物可通過增加清洗排泄物次數(shù)、保持室內(nèi)干燥、定期藥浴控制體外寄生蟲感染來減少臭氣的產(chǎn)生。廢氣需經(jīng)高效過濾方可向大氣中排放,各種過濾器應定期清洗、消毒或者更換,排風口不能設(shè)置成垂直向上。氣

體

廢

棄

物

的

處

理

方

法化學廢棄物（ChemicalWaste）包括固體、液體或者氣體含有有害化學物質(zhì)，或者被有害化學物質(zhì)污染。其中，有害化學物質(zhì)通常指：易燃溶劑，如丙酮、乙醇、乙腈；濾液毒性物質(zhì)，如重金屬、殺蟲劑；腐蝕性物質(zhì)，如鹽酸、氫氧化鉀；反應劑，包括氧化劑、氰化劑、硫化物、炸藥、易和水反應的不穩(wěn)定物質(zhì)，如金屬鉀、苯甲?；^氧化物；毒性物質(zhì)包括誘變劑、致癌物、急性或慢性毒性物質(zhì)，如氯仿、溴化乙錠；多氯化聯(lián)苯（PCB）；不可重復使用的氣瓶?；?/p>

學

廢

棄

物

的

處

理

方

法包裝：不能將不相容的或者會發(fā)生反應的化學物質(zhì)混合。應當用相適合的容器裝載不同的化學物質(zhì)。應當使用安全溶劑罐收集和臨時貯藏大量的廢棄易燃有機溶劑。同時，不能將沉淀物、固體或者其他非液體廢棄物裝入安全罐中。鹵化物和非鹵化物應當分別封裝。請勿將固體化學廢棄物裝入生物廢棄物袋中。標記：應將化學廢棄物標簽直接貼于廢棄物容器。標簽上的所有信息應準確完整填寫。應當列出化學廢棄物的種類和通用名，不允許使用縮寫，簡寫或者商品名?；?/p>

學

廢

棄

物

的

處

理

方

法貯藏：化學廢棄物應當統(tǒng)一貯藏于實驗樓的廢棄物貯藏中心。對于沒有廢棄物貯藏中心的，化學廢棄物應當臨時貯藏在其產(chǎn)生的實驗室中。處理和貯藏化學廢棄物必須要有切實的安全預防措施?；瘜W廢棄物的貯藏應當按照其特性進行分類，如易燃性、氧化性以及水反應性。及時處理過期的廢棄物容器。處理：化學廢棄物的處理必須嚴格按照國家有關(guān)標準進行除毒去污進行，達到對環(huán)境及人類的無害化后才能排放?；?/p>

學

廢

棄

物

的

處

理

方

法廢棄物的處理應嚴格遵守國家有關(guān)法令規(guī)定,以不造成污染源,避免交叉感染為原則。實行專人領(lǐng)導、專人負責,制定相應的規(guī)章制度和相關(guān)管理責任制是開展實驗動物廢棄物無害化處理工作的前提和關(guān)鍵。應嚴格按實驗動物的操作規(guī)程進行管理,控制廢棄物產(chǎn)量。廢棄物應分類收集,實驗動