實(shí)驗(yàn)1MS培養(yǎng)基貯備液的配制及不同外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)基配制

實(shí)驗(yàn)1MS培養(yǎng)基貯備液的配制及不同外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)基配制

要求掌握：1、培養(yǎng)基各種母液的配制方法2、培養(yǎng)基配制技術(shù)3、高壓滅菌鍋、pH計(jì)、電子天平等儀器的使用一、母液配制1、10×大量母液1升1組2、100×微量母液1升2組3、100×鐵鹽母液0.5升3組4、100×有機(jī)母液0.5升4組5、6-BA母液0.5mg/ml50ml1MNaOH5組6、KT母液0.2mg/ml50ml1MHCl6組7、NAA母液0.2mg/ml50ml7組8、2,4-D母液0.2mg/ml50ml8組MS培養(yǎng)基母液的配制母液名稱成分培養(yǎng)基配方（mg/l）每升母液用量（mg）母液擴(kuò)大倍數(shù)每升培養(yǎng)基用量（ml）大量元素KNO319001900010100NH4NO3165016500MgSO4.7H2O3703700KH2PO41701700CaCl2.2H2O4404400微量元素MnSO4.4H2O22.3223010010ZnSO4.7H2O8.6860H3BO36.2620KI0.8383Na2MoO4.2H2O0.2525CuSO4.5H2O0.0252.5CoCl2.6H200.0252.5鐵鹽FeSO4.7H2O27.85278510010Na2EDTA.2H2O37.253725

有機(jī)成分甘氨酸220010010鹽酸硫胺素0.440鹽酸吡哆素0.550煙酸0.550肌醇10010000

注意事項(xiàng)：

1.用蒸餾水、重蒸餾水、分析純或化學(xué)純試劑2.注意防止沉淀3.激素溶解方法：NAA2,4-D先溶95%酒精再加水定容；KT、BA先溶于少量1MHCl再加水。

（二）培養(yǎng)基配制移母液調(diào)PH值培養(yǎng)基熬制滅菌稱蔗糖扎口定容分裝接種確定配方稱瓊脂胡蘿卜愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方(H)MS+2,4-D1.0+KT0.2+30g蔗糖+5g瓊脂pH5.8非洲紫羅蘭芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方（F）MS+BA0.1+NAA0.1+30g蔗糖+5g瓊脂pH5.8

分

8組，每組配制0.5L，分裝28瓶。前4組配H培養(yǎng)基，后4組配F培養(yǎng)基。

大量元素母液

微量元素母液

鐵鹽母液

有機(jī)物母液取100ml取10ml取10ml取10ml注：MSo培養(yǎng)基配制移母液配１升培養(yǎng)基培養(yǎng)基熬制：將定容好的培養(yǎng)液倒入鍋中，加入瓊脂，邊煮邊攪拌，防止糊底。調(diào)PH值：用0.1MNaOH或HCl調(diào)PH值為5.8。分裝：趁熱分裝，100ml的三角瓶約裝入30－40ml,30瓶/L。扎口與滅菌:要求封口松緊適宜，系活扣，便于接種操作培養(yǎng)基應(yīng)及時(shí)滅菌，防止變質(zhì)。思考題

1、如何使用高壓蒸汽鍋，應(yīng)注意哪些事項(xiàng)?2、配制大量元素母液如何防止沉淀？3、培養(yǎng)基不凝固原因？4、現(xiàn)有20×大量元素母液；100×微量元素母液；50×鐵鹽母液；50×有機(jī)物母液；2mg/ml6-BA、1mg/mlNAA激素母液。如何配制2升下列配方的培養(yǎng)基?①M(fèi)S+6-BA