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文檔簡介
2.斷裂基因(splitgene):真核細胞的結構基因,其核苷酸序列中含有與氨基3.重疊基因(overlappinggenes):不同基因的核苷酸序列有時為相鄰兩個基因。TADNA(cDNA)與某種載體相接,而后轉入大腸桿菌,建立克隆株,即cDNA文庫genelibrary)。的DNA,進12.轉染:病毒(含噬菌體)DNA及其重組子DNA導入宿主細胞(或細菌)的過14.啟動子:是位于結構基因上游,轉錄起始調控所必需的一段DNA序列,是17.粘性末端:是指DNA分子在限制酶切割后產(chǎn)生一條鏈多出幾個堿基的互補18、終止密碼子:有三個密碼子(UAA,UAG,UGA),是使蛋白質合成終止的基酸。和兩個組氨酸殘基通過位于中心的鋅離子結20.載體(vector):可以插入核酸片段、能攜帶外源核酸進入宿主細胞,并在21.PCR.:聚合酶鏈反應,是依據(jù)細胞內DNA半保留復制的機理,以及體外適的緩沖液系統(tǒng)和DNA變性、復性及延伸的溫度與時間等,使加入的4種24、Intron:即間隔子(內含子),在轉錄后的加工中,從最初的轉錄產(chǎn)物除去的內部的核苷酸序列。也指編碼相應RNA內含子的DNA中的區(qū)域。內含子對翻成過程中被表達為蛋白質。外顯子是最后出現(xiàn)在成熟RNA中的基因序列,又稱27.轉錄(transcription):生物體以DNA為模板在mRNA聚合酶的作用下,合NA29.順式作用元件:順式作用元件為一些能與DBP結合的特定序列DNA片段,效應。按功能可分為啟動子、增強子、沉默子、衰減子、終止子等因進入宿主細胞后,不整合到受體細胞染色體而獨立于其但復制量不宜太多,否則會引起細胞死亡,也不能。來自同一個或不同多肽鏈的兩個兩用性的α-螺旋的疏水面(常常含有亮氨酸殘基)相互作用形成一個圈對圈的二聚體結構時就形成了亮氨酸拉鏈常它只涉及基因中部分序列的變化),并引起個體表型的改變,而使生物體發(fā)生突變:是指由于某個堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止。一些毒性作用,將原基因中的非功區(qū)段是等同的。這樣形成的重組體DNA性標記基因,使它與一個細工程多肽疫苗:使微生物對人體具保護作用的抗原基因經(jīng)體外重組表達t。的表達腹懷孕法寄養(yǎng)在雌性動物的子宮內,使之發(fā)育成具表達目的基因的胚胎動物,過核移植過程進行無性繁殖的技術。取發(fā)育早期的動物植生產(chǎn)遺傳結構與細胞核供體相同動物個體的技某個突變基因位點而選擇性地使某特定基本遺傳單位,是遺傳變異的主要物質,支持著生實驗技術的發(fā)展從分子水平上研究基因的。組中的基因常有內含子存在,能否在原核細胞中表達?能,為全部基因組的DNA片斷。(3)構建基因組文庫載體(4)DNA片段與載體的連接包裝(5)導入細胞,可用質?;蛘呤删w后除去原來的引物,然后以上一輪PCR的四大里程碑和三大技PCRPCR。衍生物(COS、M13)、動物病毒;共同特征:化③有非必需區(qū)④有單一酶切位點⑤有選擇標記調控元件答:作為理想的質粒載體應具備以下幾個條件1、能自主復制,即本身是復制不影響本身的復制功能(3)在基因組中有1-2個篩選標記為寄主細胞提供易于檢測的表型特征(4)分子量要小,多拷貝,易于操作。有兩個抗性基因的載體中,如果目的基因DNA片段插入其中一個抗性基因,就糖甘酶。(2)根據(jù)插入基因的遺傳性狀進行篩選:如亮氨酸(Leu)為Leu營養(yǎng)鑒別篩選:攜帶外源目的基因和防止自我環(huán)化和提高連接用元件和反式作用因子有哪些?其作用特點是什。操縱子,轉錄產(chǎn)物為多順反子8、真核生物基因為多拷貝。而原核生物中除了,表達水平低,長期表達效果難,整合隨機性倫理道德,安全性,技術復雜,要求條件高,所用細應用:1、遺傳性疾病的基因治療2、腫瘤的基因治療(1)抑癌基因轉移的基因治療(2)反義寡核苷酸的原癌基因失活療法(3)藥物自殺基因在腫瘤基因治療中的應用(4)癌抗原基因轉移的腫瘤基因治療(5)多重耐藥性基因轉移的腫瘤基因治療3、病毒的基因治療(1)阻止病毒復制策略(2)使感染HIV細胞死亡的方法(3)降解策略A轉A植生產(chǎn)遺傳結構與細胞核供體相同動物個體的技DNA序列兩端增速、簡便且敏感性極高的檢測RNA的方法,可用于分析基因的轉錄產(chǎn)物、克隆25.試述腫瘤的發(fā)生與細胞周期調控的相關性.cdk抑制物如P21、P27等基因在惡性腫瘤發(fā)生中也都有異常表達(突變,缺陷胞異常增殖,形成腫瘤。而且這種突變或缺失會遺傳給子代,形成遺傳性源基因組合到特定載體(病毒、質粒、噬菌體等),并將之
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