機能學(xué)實驗報告

試驗一、小腸平滑肌生理特性的觀看與分析一、試驗?zāi)康摹^看溫度、乙酰膽堿、腎上腺素等藥物對離體家兔小腸平滑肌的作用；觀看消化道平滑肌的一般生理特性及分析理化環(huán)境轉(zhuǎn)變對其舒縮活動的影響。二、試驗原理消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一樣，也具有興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性，有些也具有自律性。相比之下消化道平滑肌的興奮性低，收縮慢，伸展性大，具有緊急性收縮，對化學(xué)物質(zhì)、溫變化的影響，觀看分析上述生理特性。三、試驗材料——1、試驗動物：家兔2(25g以下)、BL-410生物記錄系統(tǒng)、L型通氣管、道氏袋、注射器、培育皿、溫度計、燒杯、螺絲夾、三維調(diào)整器、臺氏液、0.01%去甲腎上腺素、0.01%乙酰膽堿、1mol/LNaOH溶液、lmol/LHCl溶液、2%CaCl2溶液。四、試驗方法和步驟1、標本制備流程：①擊昏家兔：用木槌猛擊兔頭枕部，使其昏迷。②剖開腹腔快速取出腸管：馬上剖開腹腔，找出胃幽門與十二指腸交界處，快速取長20~30cm的腸管，先將與該腸管相連的腸系膜沿腸緣剪去，置于供氧臺氏液中輕輕漂洗，把腸內(nèi)容物根本洗凈。③制作離體腸標本：將腸管分成數(shù)段，每段長2-3cm，兩端各系一條線，保存于供氧的38℃左右的臺氏液中2、儀器安裝與調(diào)試試驗安裝〔如圖：恒溫水浴鍋掌握加熱，恒溫工作點定在38℃。將布滿氧氣的道氏袋與通氣鉤相連接，將腸個而不是成串逸出。儀器調(diào)試：BL-410系統(tǒng)的使用，選擇“試驗工程”中的“消化試驗”選中“消化道平滑肌t→DC，高頻濾波F→30Hz，顯速→4.00s/div，增益→100g。用鼠標左鍵單擊工具條上的“開頭”按鈕，調(diào)整參數(shù)至波形幅度、密度適當，觀看工程現(xiàn)象及解釋待標本穩(wěn)定后，記錄小腸平滑肌收縮的比照曲線。乙酰膽堿的作用用滴管吸入0.01%乙酰膽堿向灌流浴槽內(nèi)滴1~23滌或稀釋殘留的乙酰膽堿，使之到達無效濃度，待小腸運動恢復(fù)后進展下一項。腎上腺素的作用按上述方法將0.01%腎上腺素參加浴槽內(nèi)1~2。當效果明顯后，馬上更換臺氏液。氯化鈣的作用加2%CaC122~3滴入灌流浴槽內(nèi)，觀看其反響，效果明顯后快速沖洗。1~21mol/LHCl溶液入浴槽內(nèi)，觀看其反響。氫氧化鈉的作用在(5)1mol/LNaOH溶液入浴槽內(nèi)，觀看其反響。按上述方法更換臺氏液，反復(fù)沖洗。溫度的影響將浴槽內(nèi)臺氏液放出，注入25℃臺氏液，觀看平滑肌收縮有何轉(zhuǎn)變，當效應(yīng)明顯后再換入38℃臺氏液，持續(xù)一段時間后，再換入42℃臺氏液，觀看收縮活動的變化〔亦可依據(jù)室溫的具體狀況選做其中的一項。五、留意事項——試驗過程中必需保證標本的供氧(通氣)及浴槽內(nèi)臺氏液的恒溫(38℃)，以維持標本活性。灌流浴槽內(nèi)的液面高度應(yīng)保持恒定。放大器零點調(diào)好后不要再移動旋鈕，以免影響基線。上述各藥液參加的量系參考數(shù)據(jù)，效果不明顯者可以添加。每次試驗效果明顯后馬上放掉含藥液的臺氏液，并沖洗屢次，以免平滑肌消滅不行逆反響。各項處理必需有處理標記。六、相關(guān)學(xué)問以選取用此處腸管作標本。七、試驗爭論：1律性很不規(guī)章。小腸平滑肌自律性產(chǎn)生的離子根底尚未完全清楚，目前認為，它的產(chǎn)生可20.01%乙酰膽堿〔Ach〕2滴〔約0.2ml〕后，可見離體腸管活動增加，胞產(chǎn)生動作電位的離子根底是Ca2+M受體結(jié)合，使Ca2+Ca2+專用通AchAchAch相對不敏感，只Ach才會引起開放。這兩類通道開放都使得肌漿中Ca2+增高，進而激活肌纖蛋白—肌凝蛋白—ATP系統(tǒng)，使平滑肌收縮，肌張力增加。3、在浴槽中參加0.01%2滴〔0.2ml〕后，可見離體腸管活動減弱，描記曲線消滅收縮頻率變慢，幅度減小以及基線下移。消滅上述現(xiàn)象的機理，目前認為與腸肌細胞膜上存在α和β兩中受體，α受體又分為α抑制型受體和α于αK+β受體，①它的激活引起腸肌細胞cAMP合成增多，cAMPCa2+Ca2+濃度降低，亦使肌張力降低；②βK+Ca2+了腸肌肌張力的減低。42%氯化鈣溶液2滴后，離體腸管活動增加，描記曲線消滅收縮幅度增加。這是由于參加氯化鈣后，細胞外液Ca2+濃度上升，則Ca2+內(nèi)流增加，使得細胞內(nèi)液中Ca2+濃度上升，Ca2+與鈣調(diào)蛋白結(jié)合增加，促進了橫橋的激活。因而收縮力增加。5、在浴槽中參加1mol/L2滴后，離體腸管活動減弱，描記曲線消滅收縮幅度降低，頻率變慢。消滅這一現(xiàn)象，目前認為其緣由在于：①細胞外H+上升時，Ca2+通道的活Ca2+內(nèi)流削減。②H+上升能干擾肌肉的代謝和肌絲滑行的生化過程：H+能與Ca2+ATP酶活性降低〔近期有理論認為是直接抑制作用而非競爭作用；使肌原纖維對的敏感性和從肌質(zhì)網(wǎng)的釋放量削減。6、在加鹽酸使平滑肌收縮減弱的根底上，再加2滴NaOH于浴槽中，則腸管活動消滅相反NaOHH+PH值，PH過高、過低，收縮幅度及張力都會降低，最適PH時收縮效果最好。7、浸浴小腸腸管的臺氏液溫度以38℃~40℃為宜，低于或高于這個溫度，都會影響結(jié)果。由于腸管平滑肌對溫度轉(zhuǎn)變極為敏感，當溫度降到30℃以下時，由于代謝水平的降低，興移后下降的現(xiàn)象。這是由于降溫本身對腸管是一種刺激，也可短暫地加強代謝活動，所以肌40收縮頻率增高，幅度增加。固然，假設(shè)臺氏液溫度過高℃以上，可因蛋白變性，使腸管收縮功能消逝。八、結(jié)論：1、消化道平滑肌具有自律性，但其收縮緩慢，節(jié)律性不規(guī)章。2、消化道平滑肌具有肯定的緊急性。3、消化道平滑肌的活動易受溫度、PH值及其它化學(xué)因素、藥物因素的影響?！靖驹怼坑涗洸溉閯游锏入x體腸段的一般特性及在一些藥物作用下引起的各種效應(yīng)。試驗二、化學(xué)因素對心臟活動的影響一、試驗?zāi)康摹斫釱+，Ca2+及腎上腺素、乙酰膽堿、阿托品對心臟活動的影響。把握離體心臟標本的制備方法。記錄信號同時打標記的方法。觀看內(nèi)環(huán)境理化因素的相對恒定對維持心臟正常節(jié)律活動的重要作用。二、試驗原理——心臟的正常節(jié)律性活動的維持需要一個適宜的理化環(huán)境，如鉀、鈉、鈣濃度比例，適宜上腺素，使心肌收縮力加強，傳導(dǎo)加速，心率加快；而迷走神經(jīng)興奮時，其末梢釋放乙酰膽堿，使心房肌收縮力減弱，心率和傳導(dǎo)減慢。蟾蜍心臟離體后，用理化特性近似于血漿的任氏液灌流，在肯定時間內(nèi)，可保持節(jié)律性收縮和舒張。轉(zhuǎn)變?nèi)问弦旱慕M成成分，心臟的活動就會受到影響。三、試驗爭論——由試驗所記錄的曲線結(jié)果可以看出轉(zhuǎn)變蟾蜍離體心臟的灌流液成份可影響其心臟的舒縮節(jié)律和幅度。1.用任氏液灌流心臟，可以保持較長時間的節(jié)律性舒縮活動。這是由于任氏液的主要離子成份、滲透壓PH值和蟾蜍Cell外液相近，為蛙心供給了一個適宜的理化環(huán)境。2、用065%NaCL溶液灌流心臟，其心跳減弱。心肌的收縮活動是由Ca++觸發(fā)的，由于心肌細胞的肌漿網(wǎng)不興旺， 故心肌收縮的強弱與細胞外 Ca++濃度呈正比。用065%NaCL溶液灌蛙心，灌注液中缺乏Ca++，以致心肌動作電位2期內(nèi)流Ca++削減，心肌收縮活動也隨之減弱。K+濃度增高時，導(dǎo)致1與+可抑制細胞膜對，的轉(zhuǎn)運，使進入細胞內(nèi)+，削減，收縮耦聯(lián)過程減弱，〔2〕動3K+外流增加，平臺期縮短，使平臺期Ca++內(nèi)流削減，收縮力減弱。當細胞外K+濃度顯著增高時，膜內(nèi)外的鉀離子濃度梯度減小，靜息電位確實定值過度減小(膜內(nèi)達—55mv左右時，Na+通道失活)用高Ca++任氏液灌流蛙心時，心收縮力增加，舒張不完全，以致收縮基線上移。在Ca++，濃度高的狀況下，會停頓在收縮狀態(tài)，這種現(xiàn)象稱之為”鈣僵心肌肌漿網(wǎng)中Ca++濃度凹凸有關(guān)。當鈣離子濃度上升到肯定水平(10-5M)時，作為鈣受體的肌鈣蛋白結(jié)合了足夠的Ca++，就引起了肌鈣蛋白分子構(gòu)型的轉(zhuǎn)變，從而觸發(fā)了肌絲滑行，肌纖維收縮。當鈣離子濃度降低至10-5M時，鈣離子與肌鈣蛋白解離，心肌隨之舒張，假設(shè)鈣離子濃度持續(xù)上升，鈣離子與肌鈣蛋白結(jié)數(shù)量不斷增加，甚至到達只結(jié)合(鈣僵)。向蛙心插管中加去甲腎上腺素后，可見蛙心收縮增加，心臟舒張完全，描記的心搏曲線幅度明顯增大、心跳加快、曲線密度明顯變大。其緣由是去甲腎上腺素與心肌細胞膜上的β受體相結(jié)合，從而激活肌漿網(wǎng)釋放的Ca++也增多。同時靜脈竇4期去極化速度加快，故心肌舒縮增加，心跳加快。6.在任氏液內(nèi)滴加乳酸，心跳減弱，其緣由是H+進入心肌內(nèi)膜后，可降低Ca++Ca++的解離。7.在上述灌流液中NaOH，心肌的舒縮漸漸恢復(fù)。其緣由是NaOH中和了乳酸，解除Ca++與肌鈣蛋白親和力的抑制8.AchAch與心肌細胞膜M受體相結(jié)合，一方面提高心肌細胞膜K+的通透性，K+外流，導(dǎo)致(1)K+外流增多，最大復(fù)極電位確定值增大;Ik衰減過程減弱，自動除極速度減慢。導(dǎo)致靜脈竇得意律性降低，心律減慢。(2)復(fù)極過程中K+外2，3期縮短，Ca++進入心肌細胞內(nèi)削減，使心肌收縮減弱;另一方面AchCa++Ca++內(nèi)流，進而使心肌收縮減弱。四、試驗結(jié)論——由此可以看出：蟾蜍離體心臟對細胞外液離子濃度的轉(zhuǎn)變，酸堿，NE，Ach敏感。試驗三、紅細胞滲透脆性測定、影響血液凝固的因素及血型鑒定〔一、紅細胞滲透脆性的測定一、試驗?zāi)康摹?、本試驗學(xué)習(xí)測定紅細胞滲透脆性的方法。2、加深對細胞外液滲透張力在維持紅細胞正常形態(tài)與功能重要性方面的理解。3、觀看不同因素對紅細胞滲透脆性的影響。二、試驗原理——NaCI液中，其形態(tài)不變。假設(shè)置于低滲NaCI溶液中則發(fā)生膨脹裂開，此現(xiàn)象稱為紅細胞滲透脆性。但紅細胞對低滲鹽溶液具有肯定抵抗力，其大小可用NaCI溶液濃度的凹凸來表示。將血液滴入不同濃度的低滲NaCI溶液中，開頭消滅溶血現(xiàn)象的NaCI溶液濃度為該血液紅細胞的最小抵抗力〔0.42-0.46%NaCI溶液。消滅完全溶血現(xiàn)象時的NaCI〔0.28-0.32%NaCI溶液胞的最大脆性〔最小抵抗力〔最大抵抗力浮于其中的藥細胞保持正常形態(tài)的溶液稱為等張溶液，不能跨過細胞膜的微粒所形成的力，但等滲溶液并不肯定是等張溶液〔如1.9%的尿素溶液。三、材料與方法——試驗對象：家兔4581%NaCI溶液、0.85%氯化鈉溶液、蒸餾水，1.9%尿素溶液、地塞米松、皂甙。方法與步驟：配制不同濃度的低滲NaCI溶液取口徑一樣的干潔小試管36支，分別編號排列在三個試管架上，按下表分別向各試管內(nèi)參加 1%NaCI溶液和蒸餾水混勻，配制從0.68-0.24%12種不同濃度的NaCI低滲溶液，每管總量均為2.5ml。試劑試管編號1234567891011121%NaCl(ml)1.71.61.51.41.31.21.11.00.90.80.70.6蒸溜水〔ml〕0.80.91.01.11.21.31.41.51.61.71.81.9NaCl濃度%0.680.640.600.560.520.480.440.400.360.320.280.24四、試驗結(jié)果——皂甙〔ml〕9支小試管，在三個試管架中分別編號13-150.85%NaCI溶液、1.9%尿素和2.5ml。采集標本家兔麻醉后，仰臥固定于兔手術(shù)臺上，分別一側(cè)頸總動脈或股動脈插管備放血用〔具體方法參見第章151滴，輕輕顛倒混均，切忌用力振蕩。先13、14、15121小時。五、觀看指標——血液溶血狀況，其現(xiàn)象可分為以下幾種：1、試管內(nèi)液體完全變成透亮紅色，說明紅細胞完全裂開，稱為完全溶血。2、試管內(nèi)液體下層為混濁紅色，上層無色透亮，表示局部紅細胞沒有破壞，稱為不完全深血。3、試管內(nèi)液體下層為混濁紅色，上層無色透亮，說明紅細胞完全沒有破壞。六、觀看工程——1NaCI混合液的顏色和透亮度。213、14、15中對應(yīng)試管的溶血狀況并分析其緣由。七、留意事項——1、每支試管內(nèi)血液滴入量應(yīng)準確無誤〔只加一滴。2NaCI溶液的濃度、容量全都。3、小試管必需清潔、枯燥。4、觀看結(jié)果時應(yīng)以白色為背景。八、試驗爭論——本試驗結(jié)果顯示上升溫度血液凝固過程加快，而當試管浸入冰水中時，血液凝固過程減度的增加，生化反響的速度加快，血液凝固需要的時間就縮短。反之，亦然。試驗中覺察，試管中參加棉花后血液凝固所需的時間縮短，而用石蠟油潤滑試管內(nèi)外表X3.試驗中覺察，試管中參加肝素后血液不凝固。肝素〕增加抗凝血酶I〕激血管內(nèi)皮細胞大量釋放I3〕肝素還可增加纖溶?！捕?、影響血液凝固的因素一、試驗?zāi)康摹踩鐪囟鹊?，以觀看對血液凝固的影響。二、試驗原理——直接影響血液凝固過程。溫度、接觸面的光滑程度等也可影響血液凝固過程。三、材料與方法——試驗對象：家兔器材藥品：小燒杯、帶橡皮刷的玻棒或竹簽〔或小號試管刷10支、秒表、水浴裝置一套、冰塊、棉花、石蠟油、肝素或草酸鉀、生理鹽水。方法與步驟：動物預(yù)備家兔麻醉后，仰臥固定于兔手術(shù)臺上，行一側(cè)頸總動脈或股動脈87-2預(yù)備各種不同的試驗條件。〔三、影響血液凝固的因素一、試