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觀察洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂阿壩師范高等專科學(xué)?;瘜W(xué)化工與生命科學(xué)系劉莉娟(3307)觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂專家講座第1頁(yè)
1.學(xué)會(huì)制作洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂裝片一、試驗(yàn)?zāi)繕?biāo):2.學(xué)會(huì)識(shí)別有絲分裂不一樣時(shí)期,并比較各時(shí)期特點(diǎn)二、試驗(yàn)器材洋蔥、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿、剪刀、鑷子、清水、吸水紙、滴管、解離液、0.01g/ml龍膽紫溶液觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂專家講座第2頁(yè)二、試驗(yàn)步驟:成熟區(qū)沒(méi)有細(xì)胞分裂。伸長(zhǎng)區(qū)有少許細(xì)胞分裂。分生區(qū)有大量細(xì)胞分裂。1.選材:切取洋蔥根尖2~3mm觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂專家講座第3頁(yè)2.解離:根尖解離液解離液=15%鹽酸+95%酒精(1:1混合)3~5分鐘問(wèn):解離時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或者過(guò)短分別會(huì)有什么影響?答:解離時(shí)間過(guò)短造成細(xì)胞不分散,易重合;時(shí)間太長(zhǎng)會(huì)解離過(guò)分使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞。均不利于觀察。問(wèn):解離后細(xì)胞是死還是活?答:已被鹽酸殺死,不具備活性。觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂專家講座第4頁(yè)3.漂洗:解離液清水根尖10分鐘漂洗目標(biāo)是洗去多出鹽酸,預(yù)防解離過(guò)分和影響染色。(染色劑是堿性)觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂專家講座第5頁(yè)4.染色:清水龍膽紫染液根尖3~5分鐘利用堿性染液可將細(xì)胞不一樣結(jié)構(gòu)染成深淺不一顏色,方便于觀察。0.01g/mL龍膽紫染液也能夠用0.02g/mL醋酸洋紅代替。觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂專家講座第6頁(yè)5.制片注意:1.蓋蓋玻片時(shí)盡可能不要產(chǎn)生氣泡。2.壓片時(shí)力度適中,過(guò)重易壓碎根尖、玻片;過(guò)輕則不易使細(xì)胞分散,不能錯(cuò)動(dòng)。用鑷子將根尖取出放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎,蓋上蓋玻片,再加一個(gè)載玻片,輕輕擠壓兩個(gè)載玻片,使細(xì)胞分散。觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂專家講座第7頁(yè)
用顯微鏡觀察細(xì)胞有絲分裂各個(gè)時(shí)期注意:
先低倍鏡,后高倍鏡愛(ài)護(hù)顯微鏡,尤其是物鏡保護(hù)我們目標(biāo)是分生區(qū)細(xì)胞
6.觀察觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂專家講座第8頁(yè)顯微鏡下細(xì)胞有絲分裂末期后期中期低倍鏡觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂專家講座第9頁(yè)間期末期中期后期前期高倍鏡觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂專家講座第10頁(yè)想一想、議一議:?jiǎn)枺耗芊裼^察到某一個(gè)細(xì)胞有絲分裂全部過(guò)程?為何?答:不能,解離時(shí)細(xì)胞已被殺死,不能再進(jìn)行分裂。問(wèn):怎樣經(jīng)過(guò)觀察裝片來(lái)確定一個(gè)細(xì)胞周期中各個(gè)分裂時(shí)期長(zhǎng)短?答:看裝片中觀察到該時(shí)期細(xì)胞數(shù)目多少。處于某一時(shí)期細(xì)胞越多,該時(shí)期時(shí)間越長(zhǎng)。反之越短。觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂專家講座第11頁(yè)試驗(yàn)成功關(guān)鍵:1、解離充分是試驗(yàn)成功必要條件。2、染色是試驗(yàn)成功關(guān)鍵步驟。3、制片是試驗(yàn)成功主要保障。注意:三種濃度:鹽酸是質(zhì)量分?jǐn)?shù)濃度(15%)、酒精是體積分?jǐn)?shù)(95%)、染液是質(zhì)量濃度(0.01g/mL龍膽紫或0.02g/mL醋酸洋紅)。
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