非發(fā)酵菌wmy課件

不發(fā)酵革蘭陰性桿菌

定義

不發(fā)酵革蘭陰性桿菌，指一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厭氧、無芽胞的革蘭陰性桿菌；多為條件致病菌。O-F試驗(yàn)發(fā)酵型（F）氧化型(O)產(chǎn)堿型(-)不發(fā)酵革蘭陰性桿菌包括假單胞菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬、無色桿菌屬、不動桿菌屬、莫拉菌屬、金氏桿菌屬、黃桿菌屬、艾肯菌屬、土壤桿菌屬、黃單胞菌屬、叢毛單胞菌屬等。分類分群依據(jù)氧化酶試驗(yàn)葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(yàn)動力試驗(yàn)常見不發(fā)酵革蘭陰性桿菌的初步分群鑒定試驗(yàn)假單胞菌屬無色桿菌屬黃桿菌屬不動桿菌屬產(chǎn)堿桿菌屬叢毛菌屬莫拉菌屬氧化酶+++/--+++/-O/F試驗(yàn)O/-OOO/----動力+/-+/-+/--++-注：+：90%以上陽性；-10%以下的陽性；+/-：約70%為陽性；O：為氧化。不發(fā)酵革蘭陰性桿菌假單胞菌屬分布廣泛，土壤、水和空氣中均有存在，人類非發(fā)酵菌感染中，假單胞菌占70％～80％，主要為銅綠假單胞菌，其他較為常見的菌種有嗜麥芽窄食單胞菌、熒光假單胞菌、惡臭假單胞菌、產(chǎn)堿假單胞菌等。這些菌種也是醫(yī)院感染的主要病原菌。臨床意義微生物特性

共性:G-桿菌，無芽孢，有莢膜，多數(shù)菌有鞭毛，專性需氧菌，生長溫度范圍廣，最適35度，普通培養(yǎng)基上可以生長，可產(chǎn)各種水溶性色素。抵抗力強(qiáng)，多種抗生素耐藥微生物檢驗(yàn)2.鑒定：氧化分解葡萄糖、產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，觸酶氧化酶陽性，吲哚、甲基紅、VP陰性。

42℃生長明膠液化鞭毛++單鞭毛···銅綠假單胞菌-+叢鞭毛···熒光假單胞菌--叢鞭毛···惡臭假單胞菌OF試驗(yàn)：O氧化酶：+精氨酸水解：+葡萄糖酸氧化：+氮?dú)猓?醫(yī)院環(huán)境及用品、臨床標(biāo)本分離培養(yǎng)基涂片檢查肉湯培養(yǎng)基血瓊脂平板SS、麥康凱瓊脂平板挑選可疑菌落（37℃培養(yǎng)18－24h觀察有無色素產(chǎn)生，色素鑒別接種金氏A、B培養(yǎng)基）無色素菌株42℃+綠膿素+綠膿菌熒光素銅綠假單胞菌假單胞菌鑒定程序

銅綠假單胞菌

銅綠假單胞菌廣泛存在環(huán)境中，加之多種傳播途徑和污染，因此易感染,特別是免疫力低下的患者。引起:1.皮膚感染、呼吸道感染、泌尿道感染、燒傷感染2.菌血癥、心內(nèi)膜炎、囊性纖維變性3.感染眼部的銅綠假單胞菌，可以合成膠原酶，以致引起角膜穿孔而失明。臨床意義生物學(xué)性狀形態(tài)與染色：G-桿菌，多形性，有鞭毛、菌毛、莢膜，無芽孢,產(chǎn)熒光素和綠膿素2.生物學(xué)特性培養(yǎng)特性：專性需氧，4℃不生長42℃生長，在血平板上經(jīng)35—37℃，18—24h培養(yǎng)可表現(xiàn)為：菌落大而扁平、濕潤、邊緣不齊,有金屬光澤,有生姜樣芳香氣味,菌落周圍有寬大的蘭綠色透明溶血環(huán)。2.生物學(xué)特性血平板，麥康凱平板上五種菌落1.典型型-灰綠色，大小不一，扁平濕潤，金屬光澤2.大腸菌樣型-灰白色半透明3.黏液型-光滑突起，成粘液狀4.侏儒型-細(xì)小，無光澤，半透明5.粗糙型-中央凸起，邊緣扁平，表面粗糙銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)綠膿素生物學(xué)性狀普通瓊脂培養(yǎng)基上能產(chǎn)生水溶性綠色素，使整個培養(yǎng)基變?yōu)榫G色。MAC培養(yǎng)基上，18-24h可形成微小無光澤半透明的菌落。SS平板上可行成類似沙門菌的菌落。(中心黑色菌落）生物學(xué)性狀生化反應(yīng)：氧化酶陽性，觸酶陽性，O/F氧化型，精雙（+）還原硝酸鹽?？乖瓨?gòu)造和分型：菌體O,鞭毛H,粘液S和菌毛抗原。抵抗力:耐潮濕、干燥、紫外線，不耐熱和消毒劑，臨床分離的菌株多耐藥。1.肉浸湯2.胰化酪蛋白大豆肉湯37℃培養(yǎng)18－24h挑選菌落鑒定分型血清學(xué)噬菌體綠膿素初步鑒定菌落特征、色素、綠膿素：+涂片、革蘭染色、氧化酶：+最后鑒定生化反應(yīng)腦脊液、胸（腹）水、膿液、分泌物、痰、尿液、十二指腸引流液血液、環(huán)境用品分離培養(yǎng)：直接涂片革蘭染色糞便血瓊脂平板SS、麥康凱分離培養(yǎng)：37℃如生長銅綠假單胞菌檢驗(yàn)程序檢驗(yàn)方法直接鏡檢：G-桿菌分離培養(yǎng)：在普通培養(yǎng)基生長良好，經(jīng)18—24h形成圓形、扁平隆起、濕潤菌落。瓊脂被染成綠色或黃綠色，約80％-90％產(chǎn)生綠膿素或熒光素。在血平板上表現(xiàn)為：菌落大而扁平、濕潤、邊緣不齊；有金屬光澤；有生姜樣芳香氣味；菌落周圍有寬大的蘭綠色透明溶血環(huán)。檢驗(yàn)結(jié)果分析與報(bào)告1.結(jié)合感染癥狀，在血、尿及無菌體液中檢出特別是重復(fù)檢出即可確定為病原菌。2.若無感染癥狀，特別是兒童，檢出的革蘭陰性桿菌可視為正常菌群。3.注意銅綠假單胞菌的耐藥性。馬勒伯克霍爾德菌與偽馬勒伯克霍爾德菌屬于rRNA第II群鼻疽病與類鼻疽病的病原體2004年NCCLs稱為可能成為生物恐怖的細(xì)菌（炭疽桿菌（Bacillusanthraci）屬于需氧芽胞桿菌屬，能引起羊、牛、馬等動物及人類的炭疽病。炭疽桿菌曾被帝國主義作為致死戰(zhàn)劑之一。平時，牧民、農(nóng)民、皮毛和屠宰工作者易受感染。馬勒伯克霍爾德菌與偽馬勒伯克霍爾德菌兩菌均人獸共患病原菌人類感染是經(jīng)傷口、粘膜、呼吸道急性患者可有高熱、衰竭等全身癥狀肺鼻疽病、皮膚鼻疽病、內(nèi)臟膿腫、菌血癥、膿毒血癥臨床意義（鼠疫耶爾森菌,炭疽芽胞桿菌,布魯菌屬,巴斯德菌屬和弗朗西斯菌屬等）生物學(xué)特性

革蘭陰性桿菌無芽胞、無莢膜偽馬勒鼻伯克霍爾德菌一端有叢鞭毛(1~4根)，4℃不能生長馬勒鼻伯克霍爾德菌無鞭毛無動力，42℃不生長微生物檢驗(yàn)分離培養(yǎng)與鑒定需氧菌生長溫度35℃普通培養(yǎng)基、血瓊脂、麥康凱生化鑒定熒光直接法染色鏡檢，可快速診斷

嗜麥芽窄食單胞菌分類

分類曾經(jīng)過兩次反復(fù)，最終定為假單胞菌屬。臨床意義分布廣泛，為條件致病菌，可引起抵抗力低下患者呼吸道、泌尿道、傷口等部位的感染，嚴(yán)重者可出現(xiàn)菌血癥和心內(nèi)膜炎。假單胞菌的感染中居第二位，非發(fā)酵菌所致的感染中居第三位。微生物特性G-桿菌，具有端鞭毛1-8根，有動力，無芽孢無莢膜。微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集：血液標(biāo)本先增菌后分離培養(yǎng)，其他標(biāo)本直接接種。分離培養(yǎng)：營養(yǎng)需求不高，在血平板和普通瓊脂平板上生長良好，經(jīng)35℃培養(yǎng)18-24h后可形成中等大小、圓形、光滑、濕潤、不溶血的菌落，并可產(chǎn)黃色色素。4℃不生長，42℃近半數(shù)生長。并在MAC平板上生長良好。微生物檢驗(yàn)鑒定：氧化酶（-），明膠液化試驗(yàn)（+），七葉苷（+），賴氨酸脫羧酶（+），氧化分解葡萄糖。藥敏試驗(yàn)含內(nèi)酰胺酶。臨床治療首選磺胺類和奎諾酮類抗生素（磺胺嘧啶，環(huán)丙沙星）。對亞胺培南天然耐藥鑒定實(shí)驗(yàn)不用K-b法做藥敏試驗(yàn)。嗜麥芽窄食單胞菌初步鑒定要點(diǎn)在血平板和MAC上生長良好氧化酶（-）OF試驗(yàn)氧化型賴氨酸脫羧酶陰性可產(chǎn)黃色色素抗生素的敏感方式

不動桿菌屬分類定義：為一群不發(fā)酵糖類、氧化酶陰性、不能運(yùn)動的G-桿菌。屬奈瑟菌科17個雜交群臨床分離最多的為鮑曼不動桿菌，排在非發(fā)酵菌的第二位，僅次于銅綠假單胞菌。臨床意義分布廣泛條件致病菌醫(yī)院感染的常見病原菌微生物特性G-球桿菌，常成對排列，也可單個存在。無芽孢，無鞭毛，粘液型菌株有莢膜。奈瑟菌科。營養(yǎng)要求一般，在普通瓊脂平板和MAC平板上均能生長。SS平板上部分菌株可生長。膿汁、分泌物、尿液腦脊液、血液直接涂片革蘭染色分離培養(yǎng)血液瓊脂平板麥康凱瓊脂平板增菌培養(yǎng)挑選可疑菌落最后鑒定生化反應(yīng)初步鑒定KIA：底層、斜面不變氧化酶硝酸鹽還原動力35℃－37℃18h-24h不動桿菌屬檢驗(yàn)程序微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集：對于含菌量較多的標(biāo)本采取直接接種血平板和麥康凱平板，含菌量較少的標(biāo)本需增菌后再培養(yǎng)。直接鏡檢：標(biāo)本經(jīng)革蘭染色后鏡檢可見G-球桿菌常成雙排列，并可見白細(xì)胞吞噬現(xiàn)象?？乖瓩z測和分型：微生物檢驗(yàn)分離培養(yǎng)：血平板形成圓形、灰白色、光滑、邊緣整齊、直徑2-3mm的菌落。洛菲不動桿菌菌落小，1-1.5mm。溶血不動桿菌可出現(xiàn)溶血。MAC平板生長良好，鮑曼不動桿菌可呈輕微紅色。鑒定：氧化酶（-）、動力（-）、硝還（-）藥敏試驗(yàn)和結(jié)果解釋

可采用K-B法藥敏試驗(yàn)鮑曼不動桿菌對全部氨基青霉素、一代二代頭孢菌素和一代奎諾酮類抗生素天然耐藥。鮑曼不動桿菌初步鑒定要點(diǎn)OF試驗(yàn)：O/-MAC上生長良好，菌落呈輕微粉紅色氧化酶（-）快速分解葡萄糖和乳糖無動力對青霉素耐藥產(chǎn)堿桿菌屬1.與臨床有關(guān)的有糞產(chǎn)堿桿菌及亞型、皮喬特產(chǎn)堿桿菌、木糖氧化產(chǎn)堿桿菌及亞種，DNAG+Cmol%為56～70，典型菌種為糞產(chǎn)堿桿菌。2.人體的正常菌群，是醫(yī)院感染的病原菌，可引起抵抗力低下患者發(fā)生敗血癥，并可從患者呼吸道、尿液、血液及腦脊液中分離出來。

產(chǎn)堿桿菌屬3.為G-桿菌，呈鏈狀、周鞭毛、有動力，無莢膜。4.在普通培養(yǎng)基上18～24h形成無色透明菌落。氧化酶及觸酶均陽性，不分解任何糖類，O-F試驗(yàn)堿性，脲酶陰性，不液化明膠。

生物學(xué)特性革蘭陰性桿菌周鞭毛、有動力最適生長溫度為25~35℃普通培養(yǎng)基生長分離培養(yǎng)與鑒定pH至8.6為本菌特點(diǎn)氧化酶陽性觸酶陽性不分解任何糖類O-F基礎(chǔ)培養(yǎng)呈堿性脲素酶陰性不液化明膠黃桿菌屬1.為一群無動力和無芽胞、氧化酶陽性的G-桿菌。與臨床相關(guān)菌種有短黃桿菌、腦膜炎敗血性黃桿菌、芳香黃桿菌、水田黃桿菌、嗜糖黃桿菌、嗜醇黃桿菌、嗜溫黃桿菌。模式菌種為水田黃桿菌。2.本菌有兩個特點(diǎn)：產(chǎn)生黃色素,菌落多數(shù)呈黃色；分解碳水化合物產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。DNAG+Cmol%含量31～42。

3.存在于水、土壤和蔬菜中，還可從口腔、上呼吸道、皮膚中檢出，是條件致病菌，也是引起醫(yī)院感染的常見菌?？梢鹦g(shù)后感染、菌血癥、在新生兒及嬰幼兒的化膿性腦膜炎中分離出腦膜敗血性黃桿菌比例較高。黃桿菌屬4.Ｇ-桿菌，需氧代謝，血瓊脂培養(yǎng)基生長良好，典型菌落為淡黃色，氧化酶、觸酶、磷酸酶陽性。脂溶性色素

黃桿菌屬5.臨床上常見的腦膜炎敗血性黃桿菌及芳香黃桿菌對廣譜抗菌藥(如氨基糖甙類、β-內(nèi)酰胺酶類、四環(huán)素類、氯霉素)有耐藥性，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)選擇用藥。黃桿菌屬

藥物敏感試驗(yàn)及結(jié)果解釋

臨床經(jīng)驗(yàn)用藥可選磺胺及大環(huán)內(nèi)脂類的紅霉素。臨床上常見的腦膜炎敗血黃桿菌及芳香黃桿菌等對廣譜抗菌藥有耐藥性，所以最好根據(jù)藥敏試驗(yàn)選擇用藥。第五節(jié)莫拉菌屬

分類莫拉菌屬(Moraxella)屬莫拉菌科（Moraxellaceae）醫(yī)學(xué)上重要的莫拉菌有：腔隙莫拉菌（M.lacunata）卡他莫拉菌（M.catarrhalis）非液化莫拉菌(M.nonliquefaciens)奧斯陸莫拉菌(M.osloensis)亞特蘭大莫拉菌(M.atlantae)狗莫拉菌(M.canis)林肯莫拉菌(M.lincolnii)臨床意義引起眼結(jié)膜炎、氣管炎、肺炎、腦膜炎、腦膿腫、心包炎、心內(nèi)膜炎及泌尿生殖系統(tǒng)炎癥微生物特性革蘭陰性球桿菌呈雙短鏈狀排列，具有多形性微生物檢驗(yàn)

分離培養(yǎng)：營養(yǎng)要求較高生長溫度32~35℃血瓊脂平板上生長良好針尖大小的圓形凸起、光滑、半透明、邊緣整齊不溶血的菌落。微生物檢驗(yàn)鑒定：氧化酶陽性觸酶陽性無動力不分解任何糖類吲哚試驗(yàn)陰性藥物敏感試驗(yàn)及結(jié)果解釋對青霉素類敏感對頭孢類、四環(huán)素類、喹諾酮類、氨基糖甙類藥物均為敏感腦炎或腦膜炎、腦膿腫應(yīng)注意藥物通過血腦屏障的問題第六節(jié)軍團(tuán)菌屬

分類軍團(tuán)菌屬(Legionella)屬于軍團(tuán)菌科（Legionellaceae）常見的與人類疾病有關(guān)的軍團(tuán)菌：嗜肺軍團(tuán)菌（Legionellapneumophila）米克戴德軍團(tuán)菌（L.micdadei）長灘軍團(tuán)菌（L.longbeachae）杜莫夫軍團(tuán)菌（L.dumoffii）波茲曼軍團(tuán)菌（L.bozemanii）臨床意義引起肺炎型和非肺炎型(龐蒂亞克熱Pontiacfever)感染肺炎型：多器官損害，肺部、消化道及神經(jīng)系統(tǒng)癥狀及體征，致死率高醫(yī)院感染可高達(dá)23%慢性心、肺、腎病變、艾滋病或接受免疫抑制劑者易發(fā)本病，且死亡率高達(dá)45%臨床意義空氣－乳膠微粒傳播發(fā)病機(jī)制：①內(nèi)毒素和細(xì)胞產(chǎn)生的多種酶