實驗室生物安全與個人防護PPT課件

1、.,1,實驗室生物安全與個人防護,.,2,主要內容：,一、實驗室生物安全 二、實驗室工作中面臨的生物危害及防護,.,3,定義,實驗室生物安全：為避免生物危險因子造成實驗室人員暴露、向實驗室外擴散并導致危害，保護實驗室人員及其周圍環(huán)境、人員安全的綜合措施。 實驗室生物危害：指在微生物和生物醫(yī)學實驗室研究過程中對人、環(huán)境、生態(tài)和社會造成的危害和對環(huán)境造成的污染。 實驗室感染：在從事生物危害因子操作時，當實驗室硬件條件缺失，管理制度不完善以及不規(guī)范的操作程序，會導致實驗室人員暴露并出現(xiàn)感染。,.,4,生物危害因子,病毒、細菌、真菌、毒素和寄生蟲等； 組織細胞的培養(yǎng)和某些類型的核酸轉染； 來自感染的人

2、和動物的血液、體液和各種組織等。,.,5,病原微生物分類,我國在病原微生物實驗室生物安全管理條例中，按危害程度將病原微生物分為四類：第一類危害程度最高，第一、二類病院微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物，那些“我國尚未發(fā)現(xiàn)或已經(jīng)宣布消滅的微生物”被列為一類病原微生物，第四類危害程度最低，即由第一類至第四類微生物的危害程度是遞減的。,.,6,病原微生物分類,第一類病原微生物：能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。如天花病毒、黃熱病毒等。 第二類病原微生物：能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。如結核

3、分枝桿菌、斑疹傷寒立克次體、布氏桿菌等。 第三類病原微生物：能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。如鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌、致病性大腸埃希菌等。 第四類病原微生物：在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。,.,7,生物安全實驗室,生物安全實驗室（biosafety laboratory, BSL）是指通過規(guī)范的實驗室設計、實驗設備的配置、個人防護裝備的使用等建設的實驗室。 按生物安全防護水平將生物安全實驗室分為四級（biosafety level 14,BSL 14）,一級為最

4、低，四級為最高。一級、二級實驗室不得從事高致病性病原微生物的實驗活動，三級、四級實驗室從事高致病性病原微生物的實驗活動。 安全設備是生物安全實驗室的一級防護屏障，主要包括生物安全柜、高壓滅菌器、離心機安全罩等；實驗室設施是生物安全實驗室的二級防護屏障。,.,8,生物安全柜,生物安全柜(biosafety cabinet,BSC)是直接操作危險性微生物時所用的負壓過濾排風柜。 其防護原理是：從安全柜排除的空氣經(jīng)過高效過濾器（HEPA過濾器）過濾釋放，以保護外環(huán)境；安全柜內形成的負壓和氣幕可以防止氣溶膠外泄，以保護操作者；送入安全柜工作區(qū)的空氣經(jīng)過HEPA過濾器過濾，在安全柜內形成百級清潔度的環(huán)境

5、，以保護操作對象。,.,9,生物安全柜的使用,參考國家標準和相關文獻，對所有可能的使用者介紹生物安全柜的使用方法和局限性。發(fā)給工作人員書面的規(guī)章、安全手冊或操作手冊。特別需要明確的是，當出現(xiàn)溢出、破損或不良操作時，安全柜就不再能保護操作者。 生物安全柜運行正常時才能使用。 生物安全柜在使用中不能打開玻璃觀察擋板。,.,10,生物安全柜的使用,安全柜內應盡量少放置器材或標本，不能影響后部壓力排風系統(tǒng)的氣流循環(huán)。 安全柜內不能使用本生燈，否則燃燒產生的熱量會干擾氣流并可能損壞過濾器。允許使用微型電加熱器，但最好使用一次性無菌接種環(huán)。 所有工作必須在工作臺面的中后部進行，并能夠通過玻璃觀察擋板看到。

6、 盡量減少操作者身后的人員活動。 操作者不應反復移出和伸進手臂以免干擾氣流。,.,11,生物安全柜的使用,不要使實驗記錄本、移液管以及其他物品阻擋空氣格柵，因為這將干擾氣體流動， 引起物品的潛在污染和操作者的暴露。 工作完成后以及每天下班前，使用消毒液對生物安全柜的表面進行擦拭。 在安全柜內的工作開始前和結束后，安全柜的風機應至少運行5min。 在生物安全柜內操作時，不能進行文字工作。,.,12,離心機的使用,在使用實驗室離心機時，儀器良好的機械性能是保障微生物安全的前提條件。 按照操作手冊來操作離心機。 離心機必須放置在地面上，使小個子工作人員也能夠看到離心機內部，以正確放置十字軸和離心桶。

7、 用于離心的試管和標本容器應當始終牢固蓋緊（最好使用螺旋蓋）。 離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內進行。 離心桶和十字軸應按重量配對，并在裝載離心管后正確平衡。,.,13,離心機的使用,空離心桶用蒸餾水或乙醇（異丙醇，70）來平衡。鹽溶液或次氯酸鹽溶液對金屬具有腐蝕作用，因此不能使用。 當使用固定角離心轉子時，必須小心不能將離心管裝得過滿，否則會導致漏液。 每天檢查離心機內轉子部位的腔壁是否被污染或弄臟。如污染明顯，應重新評估離心操作規(guī)范。 每天檢查離心轉子和離心桶是否有腐蝕或細微裂痕。 每次使用后，要清除離心桶、轉子和離心機腔的污染。 使用后將離心桶倒置存放使平衡液流干。,.,

8、14,BSL-1實驗室的設施和設備要求,BSL-1實驗室的適應操作對象是具有明確生物學特征的，已知在健康成人中不引起疾病的、對實驗室工作人員和環(huán)境危害性最小的生物因子（對應我國第四類危害的微生物），如大腸埃希菌。 BSL-1實驗室的安全設備個人防護：對高壓滅菌器、離心機安全罩沒有要求，必要時可配備生物安全柜；實驗室工作人員應穿著工作服、戴防護眼鏡；皮膚有破損或皮疹時應戴手套。,.,15,BSL-1實驗室的設施和設備要求,BSL-1實驗室設計建造特殊要求：應該設有洗手池；實驗室墻壁、天花板和地板易于清潔；地面防滑，不得鋪地毯；實驗室臺面不透水，耐腐蝕、耐熱；實驗室的櫥柜和實驗臺面應牢固；實驗室如

9、有可開啟的窗戶，應設置紗窗；實驗室應保證工作照明，避免不必要的反光和強光；應有適當?shù)南驹O備。,.,16,BSL-2實驗室的設備和設施要求,BSL-2實驗室安全設備和設施適用于操作我國危害程度第三類（少量二類）的致病性生物，適用于未知病原的血液、體液和組織檢驗。 在BSL-2實驗室的工作人員可能暴露于感染性物質的主要途徑是皮膚或黏膜破損、污染的利器或針頭的傷害、呼吸道或粘膜暴露于感染性氣溶膠或飛濺物等。,.,17,BSL-2實驗室的設備和設施要求,BSL-2實驗室的安全設備個人防護：需級生物安全柜；應設洗眼設施，必要時應有應急噴淋裝置，洗眼設施應安裝在BSL-2實驗室出口處的洗手池附近。個人防

10、護設備包括：工作服外穿防護服，戴帽子、口罩；當操作的感染性材料不可能在生物安全柜內進行而必須在生物安全柜外操作時，為防止材料濺出或霧化產生氣溶膠的危害，必須使用面部防護裝置（如護目鏡、面罩、個體呼吸防護品）。,.,18,BSL-2實驗室的設備和設施要求,BSL-2實驗室設計建造特殊要求：在BSL-1實驗室的基礎上增加以下內容：實驗室門應帶鎖并可自動關閉，實驗室的門應有可視窗；應有足夠的存儲空間擺放物品；門上具有符合要求的BSL-2實驗室生物危險警示標志；應通風，如果使用窗戶自然通風，應有防蟲紗窗；有可靠的電力供應和應急照明。,.,19,二、實驗室人員工作中所面臨的生物危害及個人防護,實驗室人員

11、的防護裝備 檢驗人員職業(yè)危害與防護注意事項,.,20,生物安全實驗室個人防護裝備,所涉及的防護部位： 1、眼睛 2、頭面部、呼吸道 3、軀體 4、手 5、足 6、耳（聽力）,裝備包括: 1、眼鏡（安全鏡、護目鏡） 2、帽子、口罩、面罩、防毒面具 3、防護衣（實驗服、隔離衣、連體衣及圍裙） 4、手套 5、鞋套 6、聽力保護器等,.,21,手部防護裝備手套,1、在實驗室整個工作過程中都應使用手套進行操作。 2、在接觸感染性物質（血液、體液、分泌液、滲出液以及接觸粘膜和非完整皮膚時），必須使用合適的手套以保護工作人員避免受到污染物濺出或生物污染的事故所造成的損害。 3、手套被污染，應該盡可能早的脫下

12、，消毒后丟棄。 4、手套應按所從事操作的性質，符合舒適、靈活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并應對所涉及的危險提供足夠的防護。 5、對實驗室工作人員進行手套選擇、使用前的配戴及使用后的摘除等培訓。 6、一次性手套不得重復使用，使用后必須先消毒后丟棄。,.,22,手部防護裝備手套,規(guī)范使用手套的幾個要點： 1、手套的選擇：生物安全實驗室一般使用乳膠橡膠或聚腈類或聚氯乙烯手套用于對強酸、強堿、有機溶劑和生物危害物質的防護； 2、手套的檢查：在使用手套前應該檢查手套是否褪色、穿孔（漏損）或有裂縫?？梢酝ㄟ^充氣試驗，將其進入水中觀察是否有氣泡來檢查手套的質量。,.,23,手部防護裝備手套,手套的使用：

13、 一般情況下，佩戴一副手套即可（BSL-1和BSL-2實驗室）。 若在生物安全柜中操作感染性物質（BSL-3實驗室）應佩戴兩幅手套。 在操作過程中，外層手套被污染，立即用消毒劑噴灑手套并脫下后丟棄在生物安全柜中的高壓滅菌袋中并立即戴上新手套繼續(xù)試驗。 戴好手套后應完全遮住手及腕部，如必要可覆蓋實驗服衣袖。,.,24,手部防護裝備手套,手套的清洗和更換： 使用一次性手套，不可重復使用。用后立即進行高壓滅菌消毒然后丟棄。 不得戴著手套離開實驗室區(qū)域。 工作人員在完成感染性物質試驗，離開生物安全柜之前，應該脫去外層手套丟入生物安全柜內的高壓滅菌袋中。然后用消毒液噴洗內層手套，以避免污染門捏收、電燈開

14、關、電話等（BSL-2和BSL-3實驗室）,.,25,手部防護裝備手套,避免手套“觸摸污染” 戴手套的手避免觸摸鼻子、面部和避免觸摸或調整其他個人防護裝備（如眼鏡等） 避免觸摸不必要的物體表面，如燈開關、門捏手等 如果手套被撕破應該脫去，在換戴新手套前應清洗手部 注意盡量不去觸摸工作臺面和其他物品,.,26,手部防護裝備手套,戴手套注意要點： 在實驗室工作中要一直保持戴手套狀態(tài)并選擇正確類型和尺寸的手套。 手插入手套后，將手套遮蓋實驗服袖口；戴手套的手要遠離面部。,.,27,手部防護裝備手套,脫手套過程及注意要點： 用一手捏起另一手近手腕部處的手套外緣，將手套從手上脫下來并將手套外表面翻轉入內

15、；用戴著手套的手拿住該手套；用脫去手套的手指插入另一手套腕部處內面；脫下該手套使其內面向外形成一個由兩個手套組成的袋狀；丟棄在高壓消毒袋中并進行消毒處理。,.,28,洗手,應該安裝洗手裝置，該裝置可以是腳控或紅外控制的洗手池，或者配置一個酒精擦手器。 洗手是一種減少有害物質暴露的有效措施，要經(jīng)常洗手： 在處理活體病原材料或動物等生物危害物質后 在脫去手套之后和離開實驗室之前； 在脫卸個人防護裝備時，若發(fā)生手部可見的污染，應洗手后再繼續(xù)脫卸其他個人防護設備之前。 洗手一般用肥皂和水或使用酒精擦手器。,.,29,口罩和防護眼鏡,當處理血液、體液、分泌物、排泄物等，有可能濺出時應戴口罩和防護眼鏡。

16、護目鏡 安全鏡,.,30,防護服,（實驗服、隔離衣、連體衣、圍裙以及正壓防護服） 1、在實驗室中工作人員應該一直或持續(xù)穿上防護服 2、清潔的防護服應放置在專用存放處 3、污染的防護服應放置在有標志的防漏消毒袋中 4、每隔適當?shù)臅r間應更換防護服以確保清潔 5、當防護服被危險材料污染應立即更換 6、離開實驗室區(qū)域之前應脫去防護服。,.,31,鞋套,在實驗室中存在物理、化學和生物危險因子的情況下，穿合適的鞋子和鞋套或靴套，可以避免實驗人員足部（鞋襪）受到損傷。 BSL-2和BSL-3實驗室要堅持穿鞋套或靴套。 禁止在生物安全實驗室穿涼鞋、拖鞋，露趾鞋和機織鞋面的鞋。 足部防護裝置不得離開實驗室。,.

17、,32,BSL-1實驗室個人防護要求,工作人員在實驗室應穿工作服，戴手套 必要時佩戴防護眼鏡 完成實驗，工作服必須脫下留在實驗室并定期消毒洗滌,.,33,BSL-2實驗室個人防護要求,除符合BSL-1實驗室的要求外，還應該符合系列條件： 在工作服外加罩衫或穿防護服； 戴帽子和口罩； 如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩幅手套。工作完全結束后方可除去手套。 當微生物的操作不可能在生物安全柜內進行，而必須采取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護裝置（護目鏡、面罩、個體呼吸用品或其他防濺出保護設備）,.,34,個人防護裝備的安全脫卸,生物安全實驗室個人防護裝備不得帶離實驗

18、室，脫卸順序是：外層手套；面罩或護目鏡；隔離衣；口罩或防毒面具或防護罩；鞋套；內層手套。 如在脫卸個人防護裝備時發(fā)現(xiàn)裝備可能受到潛在的污染或已經(jīng)受到明顯污染，必須先戴一副潔凈的手套后再卸去其余的裝備。,.,35,個人防護裝備的消毒,凡在生物安全實驗室中使用過的個人防護裝備均應被視為污染物，應消毒處理。 一次性個人防護用品，如手套、鞋套等，使用后放入醫(yī)療廢物袋，高壓蒸汽滅菌后，歸入醫(yī)療廢物統(tǒng)一處理。 可重復利用的棉織制品，如工作服、帽子、口罩等，可用121、15min壓力蒸汽滅菌后使用。,.,36,檢驗人員職業(yè)危害與防護注意事項,血源性傳播疾病危害：目前已確定的20多種可經(jīng)血液傳播的疾病。被污染

19、的器械等刺傷、割傷是醫(yī)院檢驗人員感染血源性乙型肝炎（HBV）、丙型肝炎（HCV）、艾滋?。ˋIDS）的主要途徑。檢驗人員被針刺傷占第二位。,.,37,血源性傳播疾病危害,乙型肝炎（HBV）我國是HBV高發(fā)地區(qū)，HBV表面抗原的攜帶率為8%20%，約有1.3億人。HBV是檢驗人員面臨傳播危險性最大的血源性疾??； 丙型肝炎（HCV）檢驗人員在工作中有被HCV感染的可能。據(jù)統(tǒng)計，護士和檢驗人員HCV感染率較高，抗-HCV陽性率分別為5.3%（17/318）和4.9%（3/61），而且有76.7%的HCV感染者為經(jīng)常接觸病人血液標本的護士和檢驗人員；,.,38,血源性傳播疾病危害,艾滋?。ˋIDS）A

20、IDS的流行對檢驗人員造成了職業(yè)性感染的威脅。HIV在血液中的濃度通常在100104拷貝/ml，被HIV污染的銳器刺傷而感染的比率為0.3%。美國疾病控制中心最新資料顯示，截止到2000年底美國醫(yī)護人員中已有57人被確診感染了艾滋病毒，其中實驗室技術人員19人。有報道說，廣東去年一年醫(yī)護人員在治療護理艾滋病人的過程中就發(fā)生了15起職業(yè)暴露。 根據(jù)美國疾病控制中心1988年對HIV職業(yè)暴露的建議，以下幾個方面將增加暴露后感染的危險性：器械上有明顯血跡；器械直接接觸患者的靜脈或動脈血管；傷口較深；無保護接觸患者血液時間較長；晚期患者或患者病毒載量較高。,.,39,血源性傳播疾病的防護措施,血源性傳

21、播疾病是檢驗人員的主要職業(yè)危害。我國有學者報道：皮膚損傷是檢驗人員職業(yè)接觸HBV、HCV、HIV等疾病的主要途徑。 在調查北醫(yī)大一院和三院28名醫(yī)護人員發(fā)生意外損傷的種類構成中，針刺損傷占首位，占調查人數(shù)的71.6%，與國外調查結果一致。 綜合不同國家或地區(qū)的研究資料，檢驗人員因針刺或損傷接觸受污染的血，感染HBV的危險性為2%40%，感染HCV為3%10%，感染HIV為0.2%0.5%。血源性HBV、HCV、HIV感染在檢驗人員中占絕大多數(shù)。,.,40,血源性傳播疾病的防護措施,無論病人是否已被診斷有傳染病，都應視為傳染病人。1987年6月，美國醫(yī)院聯(lián)合咨詢委員會對于醫(yī)院的傳染性疾病發(fā)布了“

22、工作人員對血液傳染疾病保護聲明”，建議醫(yī)院把所有病人的血液和體液都視為具有危險性。 所有標本、試劑、使用中能造成傷害的所有銳器、接觸過標本的儀器設備，都應視為傳染源，在實驗時或是在維護時都要十分小心，應徹底消毒處理，避免對人造成感染。,.,41,血源性傳播疾病的防護措施,嚴格物品分類，檢驗后的廢棄物分別裝入不同污染袋中。檢驗人員接觸污物時，必須戴手套、戴口罩和洗手，減少皮膚粘膜接觸，嚴格消毒隔離程序，避免意外損傷，必要時戴防護眼鏡。,.,42,血源性傳播疾病的防護措施,洗手是控制感染的重要步驟，也是預防感染最簡單、最有效、最重要的措施，檢驗人員應特別重視，并認真堅持。在高危區(qū)域，如ICU、隔離

23、間，以及做侵入性操作之前，需用酒精或0.5%洗必泰進行手消毒。 臨床實驗室標準化協(xié)會（NCCLS）建議在下列情況下必須洗手：(1)當手上沾有肉眼可見的血跡時。(2)工作完成后及離開實驗室前。(3)脫手套后。(4)在飲食、吸煙、化妝、換隱形眼鏡及上廁所前。(5)在任何需要手與粘膜、眼睛或破損皮膚接觸前。,.,43,血源性傳播疾病的防護措施,戴手套：戴醫(yī)用乳膠手套可以為檢驗人員提供很好的保護。乳膠手套盡管不能避免針頭造成的機械損傷，但是可以在很大程度上減少皮膚與血液的接觸。而且，當針頭造成意外損傷后，乳膠手套還可以起到一種阻擋、封閉作用，減少進入傷口的血量，從而降低感染可能。 乳膠手套應為一次性醫(yī)

24、用產品，不可反復使用，應從質量過關的廠商購買，使用前后應檢查是否有肉眼可見的破損。使用中如手套沾上血或因理化因素出現(xiàn)破損時，應及時更換。因為HBV可以通過間接接觸傳染，使用實驗室中的電話或電腦時，應摘手套。,.,44,血源性傳播疾病的防護措施,如不慎皮膚損傷，應讓血盡量流出，再用肥皂、水沖洗，3%碘酒及75%酒精消毒，并盡快注射疫苗。 對一些經(jīng)免疫注射可降低傳染的疾病，應推行預防接種。 檢驗人員被帶有艾滋病病毒的針頭刺傷后，應由專門醫(yī)生進行檢查，盡量在接觸后幾小時內開始預防工作，并注意監(jiān)測受傷人員的血清學變化和應用抗病毒藥物。,.,45,血源性傳播疾病的防護措施,檢驗人員必須懂得常見血源性傳播

25、疾病知識，了解其危害因素、傳播方式與途徑，消除恐懼心理。如HIV對理化因素的抵抗力很弱，常用的消毒劑都可以將其滅活。,.,46,血源性傳播疾病的防護措施,實驗室的常規(guī)管理：實驗室應寬敞、整潔，實驗室內應禁止飲食、吸煙等活動，外人未經(jīng)許可，不得進入實驗室。 實驗室負責人應對本室人員進行實驗室安全教育，制定書面安全規(guī)定，并監(jiān)督實施。 嚴格按照醫(yī)院有關規(guī)定棄置實驗室廢物。,.,47,化學試劑的危害,酸、堿氣體：如鹽酸、硝酸、硫化氫、二氧化硫、氰氫酸、氨等氣體，對人的呼吸系統(tǒng)和眼有強烈的刺激性，大量吸入會引起呼吸麻痹。 化學消毒劑 ：大多數(shù)化學消毒劑對皮膚有刺激作用，長期接觸或吸入含有較高濃度的戊二醛

26、、84消毒液或含氯的空氣、二甲苯，可引起結膜炎、皮炎、頭暈、頭痛、胸悶、咽喉干癢、中毒、皮膚色素沉著等癥狀。,.,48,化學試劑的危害,有毒的化學物質：苯類能刺激眼睛、皮膚和呼吸系統(tǒng)，破壞皮膚自然油脂，引起粘膜紅腫、干燥，影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)和紅細胞的生成。長期接觸會引起癌癥。高濃度或反復接觸能引起肝、腎損害和血液病，還可擴散到實驗室空氣中，牢固粘附在物體的表面，對實驗人員增大了接觸的危害性。 反復接觸甲醛，可能引起過敏和癌癥，能使過敏個體引起哮喘，接觸性皮炎；不過敏的人，長期吸入低濃度甲醛可能引起慢性肺損傷。人類接觸甲醛，將導致白血病、腎、口腔、喉、肺、腦腫瘤的危害性增加。,.,49,化學試劑的防護,化學試劑對實驗室工作人員造成的危害也是